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祝老師在第26個教師節(jié)里幸??鞓罚。。√穷愔破返姆蛛x及純化
Isolationanddepurationofsugar課題成員顧鋒張冬蔡立超佘彩圓(講解)
糖類廣泛分布于生物體中,可以分為單糖、低聚糖和多糖。目前已發(fā)現(xiàn)不少糖類及其衍生物具有藥用價值,尤其在抗凝、降血脂、提高機體免疫和抗腫瘤、抗輻射方面都具有很廣泛的應(yīng)用。常見單糖有葡萄糖、果糖、半乳糖,雙糖有蔗糖、麥芽糖。制備如下:脫脂→去雜→濃縮→再次去雜→脫色→濃縮→冷卻→結(jié)晶(→進一步純化)多糖是由20個以上的單糖以糖苷鍵相連組成的聚合物,有同多糖、雜多糖之分,可以和其他物質(zhì)結(jié)合成糖復(fù)合物。多糖原料可從動植物器官、菌類及微生物發(fā)酵產(chǎn)物中得到。一般多糖的分離純化工藝:一、分離提取方法(extraction)(1)脫脂由于多糖被脂質(zhì)包圍,通常用醇或醚回流脫脂。(2)提取常用的多糖提取方法:①稀堿提取法②溫水提取法對于易溶于溫水、難溶于冷水和乙醇的多糖采用這種方法。材料需要先用冷水浸過,再用熱水提取,必要時可加熱至80~90℃,攪拌提取,提取液用正丁醇與氯仿混合液除去雜蛋白,離心除去雜蛋白的清液,透析后用乙醇沉淀即得到多糖。(3)除雜方法除雜Seveg法三氟三氯乙烷法三氯乙酸法酶法等電點沉淀法沉淀法原理:由于不同相對分子質(zhì)量的多糖在不同濃度的低級醇或低級酮中溶解性不同,可以逐步提高溶液中醇或酮的濃度以使不同組分的多糖依相對分子質(zhì)量由大到小的順序沉淀,最終達到分離的目的。鹽析法原理:利用不同多糖與金屬離子成鹽后在水溶液中的特異性沉淀作用,用硫酸銨、乙酸鉀、氯化鉀等鹽析劑,將不同的多糖逐步析出。季銨鹽沉淀法原理:長鏈季銨鹽是堿性表面活性劑,酸性多糖在溶液中以聚陰離子形式存在,它就與季銨鹽或其堿形成不溶性配合物沉淀,又由于多糖分子酸性越強、相對分子質(zhì)量越大越易沉淀出來,這樣控制季銨鹽濃度即可以分理出不同的酸性多糖。離子交換層析法原理:多糖分子帶有電荷,可以與離子交換劑中的離子或基團結(jié)合,親和力隨多糖結(jié)構(gòu)與電離性的不同而不同,一般隨分子中酸性基團的增加而增強,支鏈多糖比支鏈的更易吸附,然后用不同濃度的鹽溶液進行洗脫。金屬配合物法原理:利用不同多糖能與金屬離子形成配合物而沉淀下來,使用多種配位劑沉淀多糖。(2)分離:①有機溶劑分離法利用不同濃度的乙醇依次沉淀不同的黏多糖。②季銨化合物沉淀法其含有酸性基團,與表面活性劑形成季銨配合物,然后用不同鹽離子濃度解離。③離子交換層析法用陰離子交換劑交換吸附,再用NaCl溶液進行梯度洗脫。謝謝聽講
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