實(shí)驗(yàn)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離詳解演示文稿

實(shí)驗(yàn)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有36頁\編輯于星期六優(yōu)選實(shí)驗(yàn)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離現(xiàn)在是2頁\一共有36頁\編輯于星期六什么是培養(yǎng)基？三角瓶培養(yǎng)皿試管液體培養(yǎng)基：擴(kuò)大培養(yǎng)，工業(yè)生產(chǎn)。固體培養(yǎng)基：分離純化，鑒定菌種，計(jì)數(shù)，保藏。凝固劑：瓊脂現(xiàn)在是3頁\一共有36頁\編輯于星期六培養(yǎng)基的配制營養(yǎng)成分功能和來源碳源氮源生長因子水無機(jī)鹽提供碳元素：主要是糖類提供氮元素：蛋白胨、牛肉膏、尿素維生素、氨基酸和含氮堿基H2O，良好的溶劑NaCl：維持一定的滲透壓現(xiàn)在是4頁\一共有36頁\編輯于星期六LB培養(yǎng)基的配制LB固體培養(yǎng)基：蛋白胨0.5g，酵母提取物0.25g，氯化鈉0.5g，加水50mL，瓊脂1g。調(diào)節(jié)pH至7.6。封口膜現(xiàn)在是5頁\一共有36頁\編輯于星期六菌落：單細(xì)菌的克隆菌落：在固體培養(yǎng)基上，由單個細(xì)菌繁殖而來的一個肉眼可見的具有特定形狀的子細(xì)胞群體。霉菌大腸桿菌現(xiàn)在是6頁\一共有36頁\編輯于星期六菌落的作用：鑒定菌種的重要依據(jù)菌落特征：菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等?，F(xiàn)在是7頁\一共有36頁\編輯于星期六大腸桿菌大腸桿菌：革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌?，F(xiàn)在是8頁\一共有36頁\編輯于星期六怎樣無菌操作？高壓蒸汽滅菌：培養(yǎng)皿、試管、三角瓶、槍頭、玻璃三角刮刀、接種環(huán)、鑷子。在121℃下滅菌15min。高壓蒸汽滅菌鍋現(xiàn)在是9頁\一共有36頁\編輯于星期六培養(yǎng)皿三角瓶玻璃三角刮刀接種環(huán)微量移液器槍頭現(xiàn)在是10頁\一共有36頁\編輯于星期六棉花塞、封口膜、牛皮紙或舊報(bào)紙、橡皮筋不能用脫脂棉：易吸水，容易引起污染?，F(xiàn)在是11頁\一共有36頁\編輯于星期六酒精燈和酒精棉球滅菌：殺死所有微生物。消毒：殺死部分微生物（不包括芽孢和孢子）?，F(xiàn)在是12頁\一共有36頁\編輯于星期六超凈工作臺①打開紫外燈和過濾風(fēng)，滅菌30min。②點(diǎn)燃酒精燈→酒精棉擦拭桌面→酒精棉球擦手。酒精燈火焰附近旁進(jìn)行灼燒滅菌防止雜菌污染現(xiàn)在是13頁\一共有36頁\編輯于星期六用細(xì)菌過濾器除菌：尿素加熱會分解，用G6玻璃砂漏斗過濾?，F(xiàn)在是14頁\一共有36頁\編輯于星期六什么是倒平板？將滅菌后的固體培養(yǎng)基倒入已滅菌的培養(yǎng)皿中，冷卻凝固后制成的培養(yǎng)基。現(xiàn)在是15頁\一共有36頁\編輯于星期六Step1：培養(yǎng)基的配制和滅菌①將50mLLB液體培養(yǎng)基、50mLLB固體培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。無菌水培養(yǎng)皿用牛皮紙包扎現(xiàn)在是16頁\一共有36頁\編輯于星期六Step2：倒平板②在酒精燈火焰旁將三角瓶中的固體培養(yǎng)基（冷卻到60℃）倒入滅菌的培養(yǎng)皿中，置于水平放置上，并輕輕晃動，待凝固后形成平面。超凈臺現(xiàn)在是17頁\一共有36頁\編輯于星期六Step3：接種后擴(kuò)大培養(yǎng)③將斜面上培養(yǎng)的大腸桿菌菌種接種到滅菌后的液體培養(yǎng)基中，使其在37℃搖床培養(yǎng)12h。恒溫?fù)u床現(xiàn)在是18頁\一共有36頁\編輯于星期六Step4：平板劃線分離④用接種環(huán)在培養(yǎng)大腸桿菌的三角瓶中蘸取菌液一次，在固體培養(yǎng)基的平板上連續(xù)劃線。將培養(yǎng)皿倒置，放在37℃恒溫箱中培養(yǎng)12～24h?，F(xiàn)在是19頁\一共有36頁\編輯于星期六怎樣在平板上劃線？1次2次3次4次連續(xù)劃線法分區(qū)劃線法現(xiàn)在是20頁\一共有36頁\編輯于星期六原因：隨著劃線次數(shù)的增加，菌數(shù)越來越少，最終在劃線的末端出現(xiàn)由一個細(xì)菌繁殖而來的單個菌落。為什么通過劃線分離可得到單菌落？現(xiàn)在是21頁\一共有36頁\編輯于星期六原因：既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染。恒溫培養(yǎng)時培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)皿倒置皿蓋皿底恒溫培養(yǎng)箱現(xiàn)在是22頁\一共有36頁\編輯于星期六Step5：菌種的斜面保存⑤將接種環(huán)將單菌落取出，用劃線法接種在斜面培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)24h后，置于4℃冰箱中保存。斜面培養(yǎng)基現(xiàn)在是23頁\一共有36頁\編輯于星期六試管斜面培養(yǎng)基的制作方法：將未凝固的含有瓊脂的培養(yǎng)基加入試管中，滅菌后將試管斜放，令其冷卻，固體培養(yǎng)基即成為斜面?，F(xiàn)在是24頁\一共有36頁\編輯于星期六平板劃線分離法①灼燒接種環(huán)外焰先灼燒后冷卻：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種?，F(xiàn)在是25頁\一共有36頁\編輯于星期六②接種環(huán)冷卻后，蘸取帶菌培養(yǎng)物現(xiàn)在是26頁\一共有36頁\編輯于星期六③在近火焰處，讓帶菌接種環(huán)在固體培養(yǎng)

基上劃線現(xiàn)在是27頁\一共有36頁\編輯于星期六④恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)分區(qū)劃線法每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?？偸菑纳弦淮蝿澗€的末端開始劃線。現(xiàn)在是28頁\一共有36頁\編輯于星期六稀釋涂布分離法①用無菌吸管吸取1mL細(xì)菌培養(yǎng)液加入另一個盛有9mL無菌水的試管中，混合均勻，以此制成10-1倍的稀釋液。①梯度稀釋菌液：10-5~10-7倍現(xiàn)在是29頁\一共有36頁\編輯于星期六②滴加菌液②用無菌吸管取0.1mL稀釋度不同的菌液，加在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上。現(xiàn)在是30頁\一共有36頁\編輯于星期六③用玻璃刮刀涂布玻璃涂棒現(xiàn)在是31頁\一共有36頁\編輯于星期六③將玻璃刮刀放在酒精燈火焰上灼燒，待玻璃刮刀冷卻后，在酒精燈旁打開培養(yǎng)皿，將菌液涂布到整個培養(yǎng)基表面?，F(xiàn)在是32頁\一共有36頁\編輯于星期六④將培養(yǎng)皿倒置，在37℃恒溫箱中培養(yǎng)24~48h。④恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)恒溫培養(yǎng)箱現(xiàn)在是33頁\一共有36頁\編輯于星期六結(jié)果：以每個培養(yǎng)皿中有20個以內(nèi)的單菌落最為