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文檔簡(jiǎn)介
第五章遺傳信息的表達(dá)第一部分轉(zhuǎn)錄(tramscription)轉(zhuǎn)錄(
transcription
)——生物體以DNA為模板合成RNA的過(guò)程轉(zhuǎn)錄RNADNA
參
與
轉(zhuǎn)
錄
的
物
質(zhì):原料:4種NTP
(ATP,
UTP,
GTP,CTP)
模板:DNA
酶:RNA聚合酶其他蛋白質(zhì)因子一模板
5335模板鏈編碼鏈(codingstrand)結(jié)構(gòu)基因(structuralgene)編碼鏈模板鏈(templatestrand)
不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄
(asymmetrictranscription)*在DNA分子雙鏈上某一區(qū)段,一股鏈可轉(zhuǎn)錄,另一股鏈不轉(zhuǎn)錄;*模板鏈并非永遠(yuǎn)在同一單鏈上。36512決定哪些基因被轉(zhuǎn)錄150618催化功能
155613結(jié)合DNA模板
70263辨認(rèn)起始點(diǎn)亞基分子量功能二RNA聚合酶1原核生物的RNA聚合酶:2真核生物的RNA聚合酶種類
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
對(duì)鵝膏蕈堿的反應(yīng)45S-rRNAhnRNA5S-rRNAtRNA、snRNA耐受極敏感中度敏感轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物三模板和酶的辨認(rèn)、結(jié)合一個(gè)轉(zhuǎn)錄區(qū)段可視為一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位,稱為操縱子(operon,包括若干個(gè)結(jié)構(gòu)基因及其上游的調(diào)控序列。
5335結(jié)構(gòu)基因調(diào)控序列RNA-pol——啟動(dòng)子(promoter)RNA聚合酶結(jié)合模板DNA的部位,稱為啟動(dòng)子的研究:
(RNA聚合酶保護(hù)法)55RNA聚合酶保護(hù)區(qū)結(jié)構(gòu)基因第二節(jié)
轉(zhuǎn)錄過(guò)程一轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄起始需解決兩個(gè)問(wèn)題:
1、RNA聚合酶必須準(zhǔn)確地結(jié)合在轉(zhuǎn)錄模板的起始區(qū)域2、DNA雙鏈解開,使其中的一條鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板(一)原核生物的轉(zhuǎn)錄起始2DNA雙鏈解開,形成轉(zhuǎn)錄空泡1RNA聚合酶全酶(2)與模板結(jié)合
3在RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應(yīng)–
5’-pppGpN–OH+ppiRNApol-DNA-pppGpN-OH
pppGNTPpppGpN-OHppi起始復(fù)合物:5’-pppG-OH+NTP-GCGC---CAAT---TATA轉(zhuǎn)錄起始TATA盒CAAT盒GC盒結(jié)構(gòu)基因增強(qiáng)子順式作用元件DTATAABDNATATAFE反式作用因子------
直接或間接辨認(rèn)、結(jié)合順式作用元件并影響其功能的蛋白質(zhì)。
RNA聚合酶與模板DNA的結(jié)合需一系列轉(zhuǎn)錄因子(TF)的參與。RNA聚合酶二轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)1、
亞基脫落,RNA–pol聚合酶核心酶變構(gòu),與模板結(jié)合松弛,沿著DNA模板前移;
2
、在核心酶作用下,NTP不斷聚合,RNA鏈不斷延長(zhǎng)。(NMP)n
+
NTP(NMP)n+1
+PPi三轉(zhuǎn)錄終止------RNA聚合酶在DNA模板上停止前進(jìn),轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA鏈從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物上脫落下來(lái)(一)原核生物的轉(zhuǎn)錄終止1、依賴ρ因子(Rho)的轉(zhuǎn)錄終止2、不依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止DNA模板上靠近終止處,有些特殊的堿基序列,轉(zhuǎn)錄出RNA后,RNA產(chǎn)物形成特殊的結(jié)構(gòu)來(lái)終止轉(zhuǎn)錄。TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTTDNA或UUUU˙˙˙˙˙˙UUUU˙˙˙˙˙˙莖環(huán)結(jié)構(gòu)RNA5’pppG5335莖環(huán)結(jié)構(gòu)使轉(zhuǎn)錄終止:1,使RNA聚合酶變構(gòu)2,使轉(zhuǎn)錄復(fù)合物趨于解離,RNA產(chǎn)物釋放RNA-pol
第三節(jié)
轉(zhuǎn)錄后修飾
(真核生物)幾種主要的修飾方式:1、剪接(splice)2、剪切(clavage)3、堿基修飾4、添加2、斷裂基因、外顯子和內(nèi)含子真核生物的結(jié)構(gòu)基因,由若干個(gè)編碼區(qū)和非編碼區(qū)
互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成。斷裂基因(splitegene)
CABD編碼區(qū)A、B、C、D非編碼區(qū)外顯子(exon)內(nèi)含子(intron)真核生物的結(jié)構(gòu)基因上,能夠?yàn)樘囟ǖ牡鞍踪|(zhì)編碼的DNA序列。真核生物的結(jié)構(gòu)基因上,不能為特定的蛋白質(zhì)編碼的DNA序列。3、mRNA的剪接——除去hnRNA中的內(nèi)含子,將外顯子連接
(ppG,pppG)
pGoHU-OHGpUpAG-OHpAUpU第一次轉(zhuǎn)酯反應(yīng)第二次轉(zhuǎn)酯反應(yīng)UpAGpU外顯子內(nèi)含子外顯子(三)內(nèi)含子1、按基因的類型分為:Ⅰ主要存在于線粒體、葉綠體及某些低等真核生物的rRNAⅡ
發(fā)現(xiàn)于線粒體、葉綠體的mRNA基因
Ⅲ
常見的形成套索后剪接的內(nèi)含子,見于大多數(shù)的mRNA基因ⅣtRNA的基因及其初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中的內(nèi)含子2、按中斷基因線性表達(dá)的方式分為:a翻譯前刪除內(nèi)含子b翻譯繞過(guò)式內(nèi)含子c翻譯后刪除內(nèi)含子3、內(nèi)含子的功能——物種進(jìn)化
?——基因調(diào)控?二tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工剪切
(a)剪接(b)(c)添加堿基修飾(d)堿基修飾的方式:(2)還原反應(yīng)
如:UDHU(3)核苷內(nèi)的轉(zhuǎn)位反應(yīng)如:Uψ(4)脫氨反應(yīng)如:AIm如:AA(1)甲基化(1)(1)(3)(2)(4)三rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工轉(zhuǎn)錄45S-RNA剪接18S-RNA5.8S,28SRNArDNA28S5.8S18SrRNA的剪接采用自我剪接方式四膜蟲的rRNA二級(jí)
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