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文檔簡介

微量鐵的測定

可見分光光度法1OBJECTIVE掌握分光光度法的基本原理2學會光度法測定物質(zhì)的含量3學習可見分光光度計的使用方法2PRINCIPLE有色物質(zhì)對光的吸收具有選擇性，溶液的不同顏色是由于溶液中有色物質(zhì)選擇地吸收各種顏色的光引起的。有色溶液的顏色實質(zhì)上是它所選擇吸收的光的互補色：當一束白光通過鐵黃色絡離子溶液時，蘭色光大部分被吸收，其它色光透過.3Beer-Lamber：物質(zhì)對單色光吸收的強弱與吸光物質(zhì)濃度和厚度關(guān)系的定律Beer：吸光與濃度的關(guān)系Lamber：吸光與厚度間的關(guān)系II0透光率(transmitance,T)A=-lgT吸光度(absorbance)E吸光系數(shù)(absorptivity)5吸收光譜(吸收曲線)6標準曲線A=ELCA=K’C71顯色反應及其條件因素：試劑與溶劑、酸堿度、時間、溫度及其它故操作時，必須在平行原則的條件下進行2測定方法：標準曲線法(空白溶液作對照)：消除溶劑或其它物質(zhì)對入射光吸收等因素

溶劑空白：顯色劑及制備試液的其它試劑均無色；可用溶劑作空白溶液

試劑空白：顯色劑有色；按顯色反應相同條件下加入各種試劑和溶劑(不加試樣溶液)

試樣空白：試樣基體有色，顯色劑無色；不加顯色劑但按顯色反應相同條件進行操作9顯色劑：磺基水楊酸

pH1.8~2.5淡紫色

4.0~8.0橙紅色8.0~11.5黃色

12沉淀吸收波長：380~480nm范圍內(nèi)，選擇最大吸收波長λmax(425nm)實驗條件：10112標準曲線的制作波長425nm下，以空白溶液為參比溶液，分別由稀至濃測定一系列標準溶液的吸光度．以Fe3+含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線．編號空白123456Fe3+含量(mg/ml)吸光度(A)波長425nm133試樣注入比色皿，插入試樣槽調(diào)節(jié)波長蓋上試樣蓋，將空白試樣移入光路MODEA明亮COARSESET-REF鈕，使A值在0.000~－0.176內(nèi)任一數(shù)值SET-REF使A值為0.000(即置空白試樣為0.000)推或拉SAMPLE依次測試標準系列溶液1POWER鍵，接通電源，預熱15min2開啟試樣室蓋，調(diào)ZEROT鈕,使T0.000可見分光光度計操作：140ACC樣品A樣品相同條件下，測定未知溶液的吸光度，然后從標準曲線上查出Fe3+的含量.3未知鐵鹽溶液中F

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