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第3章基因的本質(zhì)第1節(jié)DNA是主要的遺傳物質(zhì)(2)【教學(xué)目標(biāo)】1、寫出噬菌體的結(jié)構(gòu)、特點(diǎn)及增殖的過程。2、寫出并掌握標(biāo)記噬菌體的方法及原因。3、圖示并分析噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn),掌握放射性分布不同的原因。4、闡述不同生物的遺傳物質(zhì)?!窘虒W(xué)重難點(diǎn)】圖示并分析噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn),掌握放射性分布不同的原因?!窘虒W(xué)過程】一、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)1952年,美國(guó)遺傳學(xué)家赫爾希和他的助手蔡斯T2噬菌體為實(shí)驗(yàn)材料,利用放射性同位素標(biāo)記技術(shù),完成了另一個(gè)有說服力的實(shí)驗(yàn)。1、實(shí)驗(yàn)材料—T2噬菌體(1)結(jié)構(gòu)T2噬菌體是一種專門寄生在大腸桿菌體內(nèi)的病毒,它的頭部和尾部的外殼都是由蛋白質(zhì)構(gòu)成的,頭部含有DNA。(2)侵染過程:T2噬菌體侵染大腸桿菌后,就會(huì)在自身遺傳物質(zhì)的作用下,利用大腸桿菌體內(nèi)的物質(zhì)來合成自身的組成成分,進(jìn)行大量增殖。當(dāng)噬菌體增殖到一定數(shù)量后,大腸桿菌裂解,釋放出大量的噬菌體?!就卣埂渴删w是感染細(xì)菌、真菌、放線菌等微生物的病毒的總稱,作為病毒的一種,噬菌體具有病毒的一些特性:個(gè)體微??;不具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu);含有一種核酸。(3)噬菌體的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中不能直接用含有放射性同位素的培養(yǎng)基來培養(yǎng)噬菌體。噬菌體是營(yíng)寄生生活的,不能直接用普通培養(yǎng)基培養(yǎng),因此必須先用含有放射性物質(zhì)的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌,再讓噬菌體去侵染細(xì)菌。2、實(shí)驗(yàn)方法:放射性同位素標(biāo)記法借助同位素原子具有的放射性來追蹤某種物質(zhì)運(yùn)行和變化的過程。用35S標(biāo)記一部分噬菌體的蛋白質(zhì),用32P標(biāo)記另一部分噬菌體的DNA。3、實(shí)驗(yàn)過程第一步:標(biāo)記大腸桿菌(1)大腸桿菌+含35S的培養(yǎng)基→含35S的大腸桿菌(2)大腸桿菌+含32P的培養(yǎng)基→含32P的大腸桿菌第二步:標(biāo)記T2噬菌體(1)T2噬菌體+含35S的大腸桿菌→含35S的T2噬菌體(2)T2噬菌體+含32P的大腸桿菌→含32P的T2噬菌體第三步:用被標(biāo)記的噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌(1)含35S的T2噬菌體+未標(biāo)記的大腸桿菌→短時(shí)間保溫、攪拌、離心→檢測(cè)上清液和沉淀的放射性。攪拌的目的:使吸附在細(xì)菌上的噬菌體與細(xì)菌分離;離心的目的;讓上清液中析出重量較輕的噬菌體顆粒,離心管的沉淀物中留下被侵染的大腸桿菌。結(jié)果:放射性主要分布在上清液中。(2)含32P的T2噬菌體+未標(biāo)記的大腸桿菌→短時(shí)間保溫、攪拌、離心→檢測(cè)上清液和沉淀的放射性。結(jié)果:放射性主要分布在離心管的沉淀物中。第四步:進(jìn)一步觀察發(fā)現(xiàn),在細(xì)菌裂解釋放出的噬菌體中,可以檢測(cè)到32P標(biāo)記的DNA,但不能檢測(cè)到35S標(biāo)記的蛋白質(zhì)。4、實(shí)驗(yàn)結(jié)論:赫爾希和蔡斯的實(shí)驗(yàn)表明:噬菌體侵染細(xì)菌時(shí),DNA進(jìn)人細(xì)菌的細(xì)胞中,而蛋白質(zhì)外殼仍留在細(xì)胞外。因此,子代噬菌體的各種性狀,是通過親代的DNA遺傳的。DNA才是噬菌體的遺傳物質(zhì)。5、實(shí)驗(yàn)誤差分析(1)用32P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌,理論上上清液應(yīng)該無放射性,但是實(shí)際情況是上清液中有少量放射性。其原因可能是:①保溫時(shí)間過短,部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi),經(jīng)離心后分布于上清液中,使上清液出現(xiàn)放射性;②保溫時(shí)間過長(zhǎng),噬菌體在大腸桿菌內(nèi)增殖導(dǎo)致大腸桿菌裂解后釋放子代噬菌體,經(jīng)離心后分布于上清液中,使上清液的放射性含量升高。③攪拌劇烈,使大腸桿菌破解,釋放子代噬菌體。(2)用35S標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌,理論上沉淀中應(yīng)該無放射性,實(shí)際上沉淀物中有少量放射性。其原因是:由于攪拌不充分,有少量35S的噬菌體蛋白質(zhì)外殼吸附在細(xì)菌表面,隨細(xì)菌離心到沉淀物中,使沉淀物中出現(xiàn)少量的放射性。二、RNA某些病毒的遺傳物質(zhì)1、研究證明,遺傳物質(zhì)除DNA外,還有RNA。如:RNA病毒(不含有DNA,只含有蛋白質(zhì)和RNA)實(shí)例:從煙草花葉病毒(RNA病毒)中提取的蛋白質(zhì),不能使煙草感染病毒,但是,從這些病毒中提取的RNA,卻能使煙草感染病毒。因此,在這些病毒中,RNA是遺傳物質(zhì)。2、因?yàn)榻^大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)是DNA,所以說DNA是主要的遺傳物質(zhì)。生物類型所含核酸遺傳物質(zhì)舉例細(xì)胞生物真核生物DNA和RNADNA酵母菌、玉米、人原核生物細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌非細(xì)胞生物大多數(shù)病毒僅有DNADNAT2噬菌體極少數(shù)病毒僅有RNARNA艾滋病病毒、SARS病毒【科學(xué)方法】自變量控制中的“加法原理”和“減法原理”在對(duì)照實(shí)驗(yàn)中,控制自變量可以采用“加法原理”或“減法原理”。(1)與常態(tài)比較,人為增加某種影響因素的稱為“加法原理”。例如,在“比較過氧化氫在不同條件下的分解”的實(shí)驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組分別作加溫、滴加FeCl,溶液、滴加肝臟研磨液的處理,就利
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