肝臟毒理學(xué)北京肝病專科醫(yī)院演示文稿

肝臟毒理學(xué)北京肝病?？漆t(yī)院演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有46頁\編輯于星期四（優(yōu)選）肝臟毒理學(xué)北京肝病專科醫(yī)院現(xiàn)在是2頁\一共有46頁\編輯于星期四以往脂肪肝、酒精肝常見于發(fā)達(dá)國家，此病在我國的患病率迅速攀升，與近些年我國人民生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)中高脂、高糖的大量攝入有極大關(guān)系。肝病是一種幾乎肆虐了大半個(gè)地球的人類公敵。我國和大多數(shù)亞洲國家一樣是個(gè)肝臟病多發(fā)國，有超過1億人患肝病。目前，全球仍以每年新增肝炎病患者約5000萬人的速度遞增。其中我國一年約有2000萬人新感染上各類肝病，全國一年所花費(fèi)的防治經(jīng)費(fèi)高達(dá)1千億元以上。

現(xiàn)在是3頁\一共有46頁\編輯于星期四概述肝臟毒理學(xué)：利用毒理學(xué)的基本原理和方法，研究外源化學(xué)物對(duì)肝臟的損害作用及其機(jī)制的學(xué)科?；瘜W(xué)性肝損害：化學(xué)物引起的各種急性和慢性肝損害。

短期暴露：肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積肝細(xì)胞壞死肝膽功能障礙長期暴露：肝硬化瘤樣改變現(xiàn)在是4頁\一共有46頁\編輯于星期四第一節(jié)肝臟作為毒作用靶器官肝臟作為毒作用靶器官的原因特殊的解剖位置組織結(jié)構(gòu)生理生化特性現(xiàn)在是5頁\一共有46頁\編輯于星期四肝的基本單位：肝小葉：肝腺泡：帶氧濃度、膽鹽、酶分布及活性不同

Ⅰ帶Ⅱ帶Ⅲ帶現(xiàn)在是6頁\一共有46頁\編輯于星期四肝腺泡氧濃度較高富含線粒體谷胱甘肽氧濃度較低細(xì)胞色素P450含量高Ⅰ帶Ⅱ帶Ⅲ帶處于中間狀態(tài)現(xiàn)在是7頁\一共有46頁\編輯于星期四（二）肝臟細(xì)胞（三）肝臟生理生化功能

1.分泌膽汁，促進(jìn)脂肪和脂質(zhì)的消化和吸收

2.具有內(nèi)分泌作用，合成清蛋白、纖維蛋白原、凝血酶原等蛋白3.物質(zhì)和能量的代謝4.解毒和吞噬防御功能5.造血功能

現(xiàn)在是8頁\一共有46頁\編輯于星期四二、常見的肝毒物1.體質(zhì)依賴性肝毒物

主要為藥物

特點(diǎn)：特異體質(zhì)，無劑量依賴性，不能復(fù)制動(dòng)物模型2.真性肝毒物

特點(diǎn)：劑量-反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系，能復(fù)制動(dòng)物模型直接肝毒物：CCl4、氯仿間接肝毒物：黃曲霉毒素、乙醇現(xiàn)在是9頁\一共有46頁\編輯于星期四人類肝臟蛋白質(zhì)組學(xué)（HLPP）DNARNA蛋白質(zhì)基因組轉(zhuǎn)錄組蛋白質(zhì)組遺傳信息載體功能執(zhí)行體生物體所擁有的全套染色體上全部基因一種細(xì)胞、組織或生物體所對(duì)的全套蛋白質(zhì)一種細(xì)胞、組織或生物體所對(duì)的全套mRNA現(xiàn)在是10頁\一共有46頁\編輯于星期四第二節(jié)肝對(duì)外源化學(xué)物的毒性反應(yīng)與機(jī)制1急性肝損害：肝細(xì)胞壞死、脂肪變性、膽汁淤積2慢性肝損害：肝纖維化、肝硬化、癌變根據(jù)損傷發(fā)生的快慢現(xiàn)在是11頁\一共有46頁\編輯于星期四一、肝細(xì)胞死亡細(xì)胞壞死：細(xì)胞腫脹，滲漏，核崩潰，細(xì)胞膜破裂，炎癥,僅涉及分散的單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞死亡細(xì)胞凋亡：細(xì)胞收縮，核片段化，凋亡小體形成，無炎癥.，壞死影響肝小葉的大部分區(qū)域現(xiàn)在是12頁\一共有46頁\編輯于星期四圖5中毒組海馬中期凋亡神經(jīng)元（×10000）：神經(jīng)元固縮，細(xì)胞核染色質(zhì)濃聚，電子密度明顯增高，胞漿細(xì)胞器濃聚。病理改變程度與治療組基本相同。圖7中毒組大鼠海馬脹亡神經(jīng)元（×10000）：胞體明顯腫脹，線粒體腫脹，嵴模糊，胞漿明顯空泡化。CompanyLogo現(xiàn)在是13頁\一共有46頁\編輯于星期四一、肝細(xì)胞死亡毒性機(jī)制：①毒物產(chǎn)生自由基肝細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化通透性增加細(xì)胞死亡②毒物/代謝產(chǎn)物與生物大分子共價(jià)結(jié)合③毒物損傷線粒體影響細(xì)胞呼吸鏈中酶蛋白的合成，細(xì)胞內(nèi)呼吸停止細(xì)胞死亡④毒物致使細(xì)胞骨架損傷細(xì)胞膜通透性改變鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)肝細(xì)胞死亡CompanyLogo現(xiàn)在是14頁\一共有46頁\編輯于星期四二、脂肪變性脂肪肝脂滴CompanyLogo現(xiàn)在是15頁\一共有46頁\編輯于星期四二、脂肪變性毒性機(jī)制：①脂肪酸氧化減少②甘油三酯合成增加③運(yùn)脂蛋白合成減少④肝外游離脂肪酸入肝過多CompanyLogo現(xiàn)在是16頁\一共有46頁\編輯于星期四三、膽汁淤積表現(xiàn)：膽汁形成減少，膽汁分泌與排泄受阻膽小管腫脹，膽栓形成，肝細(xì)胞腫脹、死亡和炎癥血清中膽鹽和膽紅素含量增加膽紅素在膽道排泄受阻時(shí)，可在皮膚和眼睛沉積，產(chǎn)生黃疸膽紅素從尿液排出，尿液黃色或深褐色評(píng)價(jià)膽道排泄功能：磺溴酞鈉CompanyLogo現(xiàn)在是17頁\一共有46頁\編輯于星期四三、膽汁淤積毒性機(jī)制：①損傷肝細(xì)胞膜的功能②膽管壁上皮細(xì)胞通透性降低，使膽汁流降低，發(fā)生膽汁淤積③化學(xué)物在膽管內(nèi)沉淀，膽栓形成，阻塞膽管，膽汁排泄障礙，膽汁淤積。CompanyLogo現(xiàn)在是18頁\一共有46頁\編輯于星期四四、肝竇狀隙損害毒性機(jī)制：①毒物導(dǎo)致肝竇擴(kuò)張，竇狀隙阻塞，導(dǎo)致肝臟充血②毒物對(duì)竇狀隙上皮細(xì)胞壁進(jìn)行性損害，導(dǎo)致其屏障功能喪失，肝竇間隙充血，出現(xiàn)紫癜性肝炎。CompanyLogo現(xiàn)在是19頁\一共有46頁\編輯于星期四五、肝纖維化與肝硬化表現(xiàn)：廣泛的纖維組織蓄積特點(diǎn)：致命性和不可逆性毒性機(jī)制：①肝細(xì)胞壞死后，細(xì)胞被分解、吸收，成纖維細(xì)胞增生，合成膠原增多，膠原沉積形成纖維化②激活I(lǐng)to細(xì)胞，膠原合成增多③肝星形細(xì)胞被活化，導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)合成增多，收縮力增強(qiáng)，纖維化介質(zhì)分泌。CompanyLogo現(xiàn)在是20頁\一共有46頁\編輯于星期四六、肝癌變毒性機(jī)制：①毒物及其代謝產(chǎn)物對(duì)生物大分子（DNA）造成損害②與生物大分子共價(jià)結(jié)合③活化肝細(xì)胞癌基因④抑制肝細(xì)胞抑癌基因CompanyLogo現(xiàn)在是21頁\一共有46頁\編輯于星期四第三節(jié)肝損害所致的生物功能障礙一、物質(zhì)代謝障礙（一）營養(yǎng)物質(zhì)代謝功能障礙1.肝糖原貯備量明顯減少，肝糖原分解為葡萄糖的功能發(fā)生障礙，機(jī)體血糖降低，機(jī)體供能不足。2.脂肪代謝障礙3.清蛋白合成障礙4.氨基酸代謝障礙（二）化學(xué)毒物解毒功能障礙CompanyLogo現(xiàn)在是22頁\一共有46頁\編輯于星期四二、凝血功能障礙1.凝血因子合成減少2.清除纖溶酶能力降低，纖溶亢進(jìn)3.抗纖溶酶活性減少CompanyLogo現(xiàn)在是23頁\一共有46頁\編輯于星期四三、免疫功能障礙（一）病原微生物感染庫普弗細(xì)胞吞噬能力下降（二）腸源性內(nèi)毒素侵害

腸源性內(nèi)毒素血癥CompanyLogo現(xiàn)在是24頁\一共有46頁\編輯于星期四第四節(jié)化學(xué)性肝損傷的檢測與評(píng)價(jià)體內(nèi)試驗(yàn)（整體動(dòng)物試驗(yàn)）體外試驗(yàn)CompanyLogo現(xiàn)在是25頁\一共有46頁\編輯于星期四一、體內(nèi)試驗(yàn)評(píng)價(jià)第一組第二組第三組第四組活性升高反映膽汁淤積型肝損傷：堿性磷酸酶5’-核苷酸酶γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活性升高反映細(xì)胞毒性肝損傷:谷草轉(zhuǎn)氨酶乳酸脫氫酶蘋果酸脫氫酶谷丙轉(zhuǎn)氨酶谷氨酸脫氫酶對(duì)肝損傷不敏感，對(duì)肝外細(xì)胞損傷敏感：肌酐磷酸激酶活性降低反映肝細(xì)胞損傷：膽堿酯酶（一）血清酶學(xué)檢測CompanyLogo現(xiàn)在是26頁\一共有46頁\編輯于星期四（二）肝臟排泄功能檢測1.血清磺溴酚鈉（BSP）排泄試驗(yàn)2.靛青綠（ICG）試驗(yàn)CompanyLogo現(xiàn)在是27頁\一共有46頁\編輯于星期四（三）肝臟化學(xué)組成成分改變的檢測1.甘油三酯：肝臟脂肪變性的常規(guī)指標(biāo)2.葡萄糖6磷酸酶（G-6-P）：與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)完整性有關(guān)3.肝膠原（羥脯氨酸）：肝臟纖維化的指標(biāo)4.脂質(zhì)過氧化物（丙二醛）：肝臟被氧化損傷的程度5.DNA加成物：CompanyLogo現(xiàn)在是28頁\一共有46頁\編輯于星期四（四）肝臟組織病理學(xué)檢查1.一般檢查2.光鏡檢查：3.電鏡檢查：超微結(jié)構(gòu)CompanyLogo現(xiàn)在是29頁\一共有46頁\編輯于星期四二、肝損傷的體外試驗(yàn)評(píng)價(jià)1.離體灌流肝試驗(yàn)2.肝勻漿試驗(yàn)3.肝薄片孵育試驗(yàn)4.源代肝細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)5.肝細(xì)胞（株）試驗(yàn)CompanyLogo現(xiàn)在是30頁\一共有46頁\編輯于星期四腎臟毒理學(xué)現(xiàn)在是31頁\一共有46頁\編輯于星期四背景資料世界腎臟日：每年3月份的第二個(gè)星期四

據(jù)ISN和IFKF的估計(jì)，慢性腎臟病患者占世界人口的十分一，即超過5億人。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球因慢性腎功能衰竭進(jìn)行透析人數(shù)不斷增加：1990年為42.6萬，2000年為106.5萬，預(yù)計(jì)2010年將達(dá)到200余萬人

2006年～2007年在廣州市區(qū)以及斗門縣進(jìn)行了慢性腎病流行病學(xué)調(diào)查及早期干預(yù)研究，初步結(jié)果顯示：在抽取的6311名18歲以上普通人群中，腎病發(fā)病率高達(dá)10.9%，而對(duì)于腎病的知曉率則只有9.4%。

CompanyLogo現(xiàn)在是32頁\一共有46頁\編輯于星期四第一節(jié)概述一、腎臟是毒物的重要靶器官二、引起腎毒性的化學(xué)物

1.金屬和類金屬：鎘、鎳、鋰

2.有機(jī)溶劑：氯仿、甲苯、汽油、潤滑油

3.農(nóng)藥：五氯苯酚、百草枯

4.生物毒素：黃曲霉毒素、內(nèi)毒素、蛇毒

5.藥物：慶大霉素、絲裂霉素、頭孢

6.其他毒物：苯酚、乙醛、亞硝胺CompanyLogo現(xiàn)在是33頁\一共有46頁\編輯于星期四三、腎臟對(duì)毒物的易感性（略講）CompanyLogo現(xiàn)在是34頁\一共有46頁\編輯于星期四第二節(jié)腎臟結(jié)構(gòu)與功能的生物學(xué)基礎(chǔ)一、腎小球的濾過功能二、腎臟吸收和分泌CompanyLogo現(xiàn)在是35頁\一共有46頁\編輯于星期四三、逆流放大系統(tǒng)和尿液濃縮機(jī)制四、腎臟中外源化學(xué)物的生物轉(zhuǎn)化CompanyLogo現(xiàn)在是36頁\一共有46頁\編輯于星期四第三節(jié)中毒性腎損傷的部位與類型毒物對(duì)腎臟毒作用的選擇性抗生素：腎近曲小管免疫復(fù)合物：腎小球氟：亨利氏襻和集合管解熱鎮(zhèn)痛藥：髓質(zhì)和腎乳頭CompanyLogo現(xiàn)在是37頁\一共有46頁\編輯于星期四一、腎小球損傷

毒性機(jī)制1.毒物改變腎小球的帶電狀態(tài)，影響內(nèi)皮細(xì)胞濾膜的大小和數(shù)目，導(dǎo)致腎小球率過濾減少。2.毒物直接損傷腎小球上皮細(xì)胞和毛細(xì)血管膜。3.毒物可作為半Ag+小球蛋白全Ag刺激抗Ab產(chǎn)生形成免疫復(fù)合物沉積在腎小球CompanyLogo現(xiàn)在是38頁\一共有46頁\編輯于星期四二、腎近曲小管損傷

損傷原因：

上皮細(xì)胞不夠緊密，易于滲入物質(zhì)易在此處轉(zhuǎn)運(yùn)和蓄積酶分布的特殊性（P450、胱氨酸結(jié)合β-溶酶）三、亨利氏襻、遠(yuǎn)曲小管及集合管損傷CompanyLogo現(xiàn)在是39頁\一共有46頁\編輯于星期四四、腎臟疾病的分類（一）免疫介導(dǎo)腎小球疾病

1.抗-GBM-介導(dǎo)的疾病：腎小球基底膜有IgG沉著

2.膜狀腎小球腎炎疾?。侯w粒狀I(lǐng)gG沉著（二）直接腎小球損傷（三）急性腎小管損傷（四）急性間質(zhì)性腎炎：（五）慢性間質(zhì)性腎炎：單核細(xì)胞滲透、間質(zhì)纖維化、小管萎縮CompanyLogo現(xiàn)在是40頁\一共有46頁\編輯于星期四第四節(jié)腎臟的毒性作用機(jī)制一、細(xì)胞死亡二、活性中間代謝產(chǎn)物

1.與生物大分子共價(jià)結(jié)合

2.產(chǎn)生活性氧族，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激三、細(xì)胞容積和離子內(nèi)穩(wěn)態(tài)四、細(xì)胞骨架和細(xì)胞極性五、鈣的內(nèi)穩(wěn)態(tài)CompanyLogo現(xiàn)在是41頁\一共有46頁\編輯于星期四第五節(jié)腎損害的檢測與評(píng)價(jià)一、整體實(shí)驗(yàn)（一）腎臟濃縮-稀釋試驗(yàn)（二）尿成分的改變

1.尿蛋白

⑴大分子蛋白為主或大量蛋白：腎小球選擇性濾過功能障礙或結(jié)構(gòu)不完整⑵小分子為主：近曲小管受損

2.尿糖血糖不高，尿糖升高：腎小管功能障礙

CompanyLogo現(xiàn)在是42頁\一共有46頁\編輯于星期四3.尿酶堿性磷酸酶、γ-谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶：刷狀緣受損乳酸脫氫酶、谷氨酸脫氫酶：廣泛的細(xì)胞損傷CompanyLogo現(xiàn)在是43頁\一共有46頁\編輯于星期四（三）腎小球率過濾1.菊糖清除試驗(yàn)2.內(nèi)生肌酐清除率3.血清肌酐和血尿素氮4.腎對(duì)氨基馬尿酸清除試驗(yàn)：腎血流量