腫瘤的生物治療惡性腫瘤的免疫和基因治療

EdwardJenner現(xiàn)代免疫學(xué)奠基人牛痘的發(fā)明者(1796)現(xiàn)在是1頁\一共有33頁\編輯于星期二細(xì)胞免疫的基本概念Tumorcell現(xiàn)在是2頁\一共有33頁\編輯于星期二為什么腫瘤細(xì)胞能夠逃避

機(jī)體的免疫監(jiān)控？腫瘤細(xì)胞合成免疫抑制因子癌細(xì)胞表面缺乏MHCII分子腫瘤細(xì)胞低表達(dá)MHCI分子由于缺乏第二信號導(dǎo)致免疫耐受機(jī)體的免疫監(jiān)視功能低下(抗原遞呈效率下降）現(xiàn)在是3頁\一共有33頁\編輯于星期二腫瘤免疫反應(yīng)免疫系統(tǒng)能夠識別腫瘤抗原并產(chǎn)生免疫反應(yīng)。體液免疫在腫瘤病人普遍存在，但不起主要作用。細(xì)胞免疫:殺傷性T細(xì)胞(CD8+)輔助性T細(xì)胞(CD4+)?，F(xiàn)在是4頁\一共有33頁\編輯于星期二免疫治療的主要分類非特異性主動免疫治療

細(xì)胞因子（白介素2，干擾素，腫瘤壞死因子）胞壁佳短小棒狀桿菌卡介苗高聚金葡素單克隆抗體(美羅華、赫賽叮、西妥昔、貝伐）過繼免疫治療(TIL細(xì)胞、CIK細(xì)胞、LAK細(xì)胞)現(xiàn)在是5頁\一共有33頁\編輯于星期二特異性主動免疫治療

核酸疫苗(DNA,RNA)腫瘤細(xì)胞疫苗抗原蛋白疫苗或多肽疫苗（包括基因重組蛋白）樹突狀細(xì)胞疫苗免疫治療的主要分類現(xiàn)在是6頁\一共有33頁\編輯于星期二干擾素用法：300-900萬單位，每周2-3次，連續(xù)使用8周①抑制腫瘤細(xì)胞的增殖；②誘導(dǎo)NK細(xì)胞、CTL，并協(xié)同IL-2增強(qiáng)LAK的活性；③誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞表達(dá)MHC-Ⅰ類抗原，增加對殺傷細(xì)胞的敏感性。適應(yīng)癥：聯(lián)合化療治療毛細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤、腎癌、惡性黑色素瘤和淋巴瘤的治療有效?，F(xiàn)在是7頁\一共有33頁\編輯于星期二白介素-2用法：40-80萬單位，每周2-3次,皮下或局部注射特點(diǎn)：對惡性黑色素瘤、腎癌有效有效率大約在20%左右對其它惡性腫瘤的治療效果不明顯。

局部應(yīng)用比全身應(yīng)用效果好?，F(xiàn)在是8頁\一共有33頁\編輯于星期二腹腔灌注IL-2治療卵巢癌（II期臨床）方法：IL-260萬單位/m21/周共十六周病人：泰素、順鉑抗拒的卵巢癌病人31例副作用：可耐受，無IL-2相關(guān)的3/4級毒性結(jié)果：24可評價(jià)病人中4CR,2PR,7SD,11PD總有效率25.0%R.P.Edwards,etalASCO2003現(xiàn)在是9頁\一共有33頁\編輯于星期二腫瘤壞死因子用法：100-400萬單位，每周2-3次,肌肉或局部注射特點(diǎn)：野生型有嚴(yán)重的毒副作用國內(nèi)改構(gòu)型已上市聯(lián)合化療對肺癌和淋巴瘤可提高療效真正的臨床應(yīng)用價(jià)值還有待進(jìn)一步評價(jià)。現(xiàn)在是10頁\一共有33頁\編輯于星期二單克隆抗體又稱之為生物導(dǎo)彈技術(shù)，通過補(bǔ)體系統(tǒng)和自然殺傷細(xì)胞起抗腫瘤作用。

嵌合型單抗達(dá)到95％以上人源化,減少了免疫原性美羅華－治療惡性淋巴瘤赫賽?。委熑榘?，聯(lián)合化療增強(qiáng)療效現(xiàn)在是11頁\一共有33頁\編輯于星期二單克隆抗體貝伐是針對VEGF的單克隆抗體,除了對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用外,還可以封閉血管內(nèi)皮生長因子。西妥昔是針對EGFR的單克隆抗體，抑制細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路，通過補(bǔ)體和細(xì)胞依賴的免疫反應(yīng)殺傷腫瘤單抗也可以與同位素或毒素耦聯(lián)，通過靶向作用將放射性同位素或細(xì)菌毒素聚集腫瘤組織內(nèi)，達(dá)到抗腫瘤目的?，F(xiàn)在是12頁\一共有33頁\編輯于星期二MAbNameTradeNameUsedtoTreat:Approvedin:RituximabRituxanNon-Hodgkinlymphoma1997TrastuzumabHerceptinBreastcancer1998Gemtuzumabozogamicin*MylotargAcutemyelogenousleukemia(AML)2000AlemtuzumabCampathChroniclymphocyticleukemia(CLL)2001Ibritumomabtiuxetan*ZevalinNon-Hodgkinlymphoma2002Tositumomab*BexxarNon-Hodgkinlymphoma2003CetuximabErbituxColorectalcancer2004BevacizumabAvastinColorectalcancer2004*conjugatedmonoclonalantibodies

美國FDA批準(zhǔn)的單克隆抗體現(xiàn)在是13頁\一共有33頁\編輯于星期二過繼免疫治療Rosenberg八十年代首創(chuàng)了LAK細(xì)胞，TIL取自浸潤淋巴細(xì)胞在LAK細(xì)胞的基礎(chǔ)上得到進(jìn)一步提高迄今為止在臨床上應(yīng)用最為廣泛的過繼免疫治療特點(diǎn)：繁瑣的制備過程和嚴(yán)重的副作用限制了臨床上推廣治療療效有限CD3AK和CIK的問世沒有產(chǎn)生新的局面對惡性黑色素瘤、腎癌、癌性胸腹水的治療效果比較好現(xiàn)在是14頁\一共有33頁\編輯于星期二特異性主動免疫治療－腫瘤疫苗細(xì)胞瘤苗：最常采用轉(zhuǎn)基因腫瘤制備；分子疫苗：單獨(dú)的分子抗原性弱，需要佐劑；多肽疫苗：8-10個氨基酸的多肽是T細(xì)胞識別的基礎(chǔ)；重組蛋白疫苗：與細(xì)胞因子、毒素等重組形成融合蛋；病毒疫苗：用病毒作為載體進(jìn)行蛋白的表達(dá)；樹突狀細(xì)胞疫苗：抗原需要被提呈并致敏原始T-淋巴細(xì)胞，需要樹突狀細(xì)胞，是獲得有效免疫反應(yīng)的關(guān)鍵?，F(xiàn)在是15頁\一共有33頁\編輯于星期二體內(nèi)最強(qiáng)大抗原遞呈細(xì)胞樹突狀細(xì)胞現(xiàn)在是16頁\一共有33頁\編輯于星期二樹突狀細(xì)胞的分離培養(yǎng)激活血細(xì)胞分離細(xì)胞培養(yǎng)抗原沖擊細(xì)胞回輸現(xiàn)在是17頁\一共有33頁\編輯于星期二樹突狀細(xì)胞對抗原的遞呈MHCI途徑激活CD8＋T細(xì)胞MHCII途徑激活CD4＋T細(xì)胞外源性蛋白內(nèi)源性蛋白現(xiàn)在是18頁\一共有33頁\編輯于星期二抗原沖擊DC治療乳腺癌（I/II期臨床）病人：高表達(dá)HER2的轉(zhuǎn)移性乳腺癌病人16例方法：

HER500沖擊的自體APC2108to5109，二周一次，共三次。

副作用：主要為寒戰(zhàn)和發(fā)熱，沒有?級的毒副反應(yīng)結(jié)果：

12個可評價(jià)的病人1例PR結(jié)論：

HER500沖擊的自體DC使用安全，有一定療效，但效率仍不夠高。J.W.Kylstra,etal.ASCO2003現(xiàn)在是19頁\一共有33頁\編輯于星期二CEA病毒感染的DC（I期臨床）方法：表達(dá)CEA禽痘病毒感染的DC（5106），

每周二次，一個月一個療程，1－3療程病例數(shù)：6個病人副作用：沒有明顯的毒副作用結(jié)果：一個病人CEA水平從46降低到6.8，并有鎖骨上淋巴結(jié)的部分退縮。5/6個病人外周血淋巴細(xì)胞對CEA表達(dá)的載體有增殖反應(yīng)。

M.A.Morse,ASCO2003現(xiàn)在是20頁\一共有33頁\編輯于星期二細(xì)胞溶解物沖擊的DC（I/II期臨床）病人：轉(zhuǎn)移性腎癌15例方法：腫瘤細(xì)胞溶解物沖擊的DC3.95106

淋巴結(jié)內(nèi)注射副作用：無明顯的毒副作用結(jié)果：7例進(jìn)展，7例穩(wěn)定，1例部分退縮(14.4106)結(jié)論：腫瘤細(xì)胞溶解物沖擊的DC，即使在有大負(fù)荷腫瘤時(shí)也有效，在大劑量使用時(shí)更有效，無毒副作用。

MartenA,etal.CancerImmunolImmunother.2002;51:637-44現(xiàn)在是21頁\一共有33頁\編輯于星期二蛋白分子靶向疫苗的優(yōu)勢特異性與DC結(jié)合與病毒體外激活具同樣效率。費(fèi)用低廉，可大規(guī)模生產(chǎn)，制作比病毒更簡單。為重組蛋白，不存在安全性問題。皮下給藥，使用方便。可重復(fù)使用?，F(xiàn)在是22頁\一共有33頁\編輯于星期二熱休克蛋白疫苗臨床試驗(yàn)III期：１．腎癌２．惡性黑色素瘤全球有150醫(yī)學(xué)中心在收集病例進(jìn)行腫瘤抗原－熱休克蛋白復(fù)合物疫苗臨床實(shí)驗(yàn)I、II期：１．慢性髓性白血?。玻馨土觯常认侔矗赴⒋竽c癌現(xiàn)在是23頁\一共有33頁\編輯于星期二現(xiàn)在是24頁\一共有33頁\編輯于星期二DCs疫苗對惡性黑色素瘤和腎癌，總有效率大約在30-40％；其它腫瘤方面有效率在10-30％左右；是所有方案中比較理想的疫苗；需要很高的技術(shù)要求，離推廣應(yīng)用還有一段距離；目標(biāo)是預(yù)防術(shù)后復(fù)發(fā)，使40%的病人得到根治。現(xiàn)在是25頁\一共有33頁\編輯于星期二免疫治療的臨床地位免疫治療是最有前途的抗腫瘤手段之一目前尚未起主導(dǎo)作用定位于手術(shù)、放化療后清除殘留病灶目標(biāo)是預(yù)防復(fù)發(fā)關(guān)鍵是抗原在體內(nèi)有效地被遞呈并激活T淋巴細(xì)胞現(xiàn)在是26頁\一共有33頁\編輯于星期二基因治療(Genetherapy)用正?；蛐Ｕ蛑脫Q致病基因過程是將目的基因?qū)氲桨屑?xì)胞內(nèi)并使之表達(dá)目標(biāo)是直接或間接消滅腫瘤細(xì)胞概念的擴(kuò)展：采用分子生物學(xué)的方法和原理，在核酸水平上開展的疾病治療方法都可稱為基因治療?，F(xiàn)在是27頁\一共有33頁\編輯于星期二基因治療策略基因增補(bǔ)（Geneaugmentation）又稱基因修飾，目的基因的表達(dá)產(chǎn)物能修飾或加強(qiáng)缺陷細(xì)胞的功能基因滅活（Geneinactivation）：利用反義核酸技術(shù)或核酶特異地封閉基因表達(dá)或降解轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物前體藥轉(zhuǎn)換（Prodrugacitvation）：采用給予前體藥物的方法減少化療藥物對正常細(xì)胞的損傷?，F(xiàn)在是28頁\一共有33頁\編輯于星期二基因治療的途徑體外途徑：安全，但操作煩瑣，設(shè)備要求比較高體內(nèi)途徑：基因?qū)胨褂玫妮d體的安全性需要進(jìn)行復(fù)雜的論證?，F(xiàn)在是29頁\一共有33頁\編輯于星期二自殺基因治療HSV-TK/GCV系統(tǒng)

tk基因多為單純皰疹病毒（HSV）和水痘皰疹病毒（VZV）中的胸苷激酶基因。毒性效應(yīng)來自于GCV磷酸化其通過抑制DNA聚合酶的活性，阻斷DNA的合成VZV-TK激酶能將6－甲氧嘌呤阿拉伯糖苷（ara-M）轉(zhuǎn)化為6－甲氧嘌呤阿糖苷腺苷三磷酸（ara-MTP）CD-5-FC系統(tǒng)

人及其他哺乳動物中不表達(dá)CD酶可將胞嘧啶脫氨基轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏じ邉┝康?-FC在體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)?-FU從而將細(xì)胞殺傷作用?，F(xiàn)在是30頁\一共有33頁\編輯于星期二自殺基因治療的缺點(diǎn)①只對處于分裂期的腫瘤細(xì)胞有殺傷作用,而瘤體內(nèi)有相當(dāng)數(shù)量的細(xì)胞群體處于非增殖分裂狀態(tài)。②腫瘤細(xì)胞的異質(zhì)性使得有些細(xì)胞克隆對自殺基因系統(tǒng)的敏感性不同。③基因轉(zhuǎn)移的效率還很低，無法使所有的腫瘤細(xì)胞均能被導(dǎo)入相應(yīng)的目的基因。④某些腫瘤特異的表達(dá)元件的活性較低，不足以表達(dá)足夠的自殺基因