微生物的實驗室培養(yǎng)第二課時

微生物的實驗室培養(yǎng)第二課時1第1頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六微生物實驗室培養(yǎng)（知識點總結(jié)）2第2頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六復(fù)習(xí)題1、甲、乙、丙是三種微生物，下表①、②、③是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在③中正常生長繁殖；甲能在①中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在②中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是：粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH）2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCI20.5g①++++-+++②+++-++++③++++++++A、甲乙丙都是異養(yǎng)微生物B、甲乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C、甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物D、甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物3第3頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六復(fù)習(xí)題2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是：①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A、⑤③②①④⑥B、①②③④⑤⑥C、⑥②③④①⑤D、③④②①⑥⑤4第4頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六三、純化大腸桿菌實驗?zāi)康模航臃N大腸桿菌于培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)使其形成由單個細(xì)胞繁殖形成的子細(xì)胞群體，即菌落。實驗過程：(知識網(wǎng)絡(luò)）配制培養(yǎng)基接種大腸桿菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（12—24h）結(jié)果分析與評價計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板調(diào)PH→分裝→包扎菌種保藏平板劃線稀釋涂布平板未接種的培養(yǎng)（對照組）接種的培養(yǎng)（實驗組）培養(yǎng)基配制成功與否？接種操作成功與否？5第5頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六配制培養(yǎng)基①在火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出棉塞；②右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過火焰；③左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上皿蓋。④待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置。倒平板過程總結(jié)：6第6頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六Q1.培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌后，需冷卻到____℃左右時，才能倒平板。用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？_____________________________________________________________Q2.操作時錐形瓶口通過酒精燈火焰的目的是：_____________________________________________Q3.將平板倒置的目的是：_________________________________________________________________________________________________________________________Q4.在倒平板過程中，將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？_____________________________________________________________50感覺錐形瓶的溫度剛剛不燙手，就可以倒平板了防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基既可以使培養(yǎng)基表面冷凝的水分更好的揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染不能，因為空氣中的微生物可能在皿蓋和皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。配制培養(yǎng)基7第7頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六平板劃線接種原理：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。8第8頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六平板劃線接種灼燒接種環(huán)冷卻劃線（第一區(qū)域）蘸取菌液灼燒接種環(huán)冷卻劃線（第二區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第三區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第四區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第五區(qū)域）灼燒接種環(huán)平板倒置放置培養(yǎng)9第9頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六平板劃線接種第一區(qū)域第二區(qū)域第三區(qū)域第四區(qū)域第五區(qū)域10第10頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六Q2：每次劃線前灼燒接種環(huán)的目的：Q3：劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)的目的：平板劃線接種答案：避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基答案：殺死上次劃線結(jié)束后殘留的菌種答案：及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染環(huán)境和操作者。Q1：第一步灼燒接種環(huán)的目的：11第11頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六稀釋涂布平板接種原理：將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，并將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時，即可獲得單個細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。12第12頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六1、梯度稀釋2、涂布平板稀釋涂布平板接種13第13頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六結(jié)果分析與評價1、培養(yǎng)基制備成功的標(biāo)準(zhǔn)2、接種操作成功的標(biāo)準(zhǔn)如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1~2天后無菌落生長，說明培養(yǎng)基配制是成功的，否則實驗失敗，需重新配制。如果培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、性狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點，則說明操作是符合要求的。如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達(dá)到要求，實驗失敗，需分析原因，再次實驗。14第14頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六菌種的保藏（了解）1、臨時保藏：適用于頻繁使用的菌種。將菌種接種到固體斜面培養(yǎng)基，在適宜的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后，將試管置于4℃的冰箱中保藏2、甘油冷凍管保藏：適用于需長期保存的菌種