轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的運(yùn)用綜述,醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)論文

轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的運(yùn)用綜述,醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)論文轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)〔translationalmedicine〕是指實(shí)驗(yàn)室研究與臨床應(yīng)用之間的雙向轉(zhuǎn)化經(jīng)過(guò)，是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床應(yīng)用之間連接的橋梁。自1996年GeraghtyJ在著名醫(yī)學(xué)雜志(TheLancet〕撰文明確提出轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的概念之后[1],它便逐步遭到世界范圍的廣泛關(guān)注，美、英、法等國(guó)先后制定了轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究計(jì)劃，設(shè)立了轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中心。我們國(guó)家對(duì)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的研究也給予了高度的重視，在的大力支持下陸續(xù)建立了一批轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究所或研究中心。2020年,衛(wèi)生部發(fā)布(健康中國(guó)2020戰(zhàn)略研究報(bào)告〕，更是提出要施行轉(zhuǎn)化整合戰(zhàn)略，打破基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、藥物研發(fā)、健康促進(jìn)之間的人為屏障，建立相互之間的直接聯(lián)絡(luò)，實(shí)現(xiàn)基礎(chǔ)研究成果、臨床診療方式方法、人群預(yù)警方案、藥物創(chuàng)制、健康保障互聯(lián)互通，使患者和公眾健康直接、高效地受益于醫(yī)學(xué)科技的發(fā)展[2].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)作為臨床醫(yī)學(xué)的一個(gè)重要分支，在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究熱潮中也得到了快速的發(fā)展，本文就近年來(lái)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用做一綜述。1實(shí)驗(yàn)室技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的轉(zhuǎn)化應(yīng)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)作為一門(mén)應(yīng)用技術(shù)學(xué)科，它的發(fā)展離不開(kāi)檢驗(yàn)技術(shù)的進(jìn)步。當(dāng)下，隨著電子計(jì)算機(jī)和信息技術(shù)的發(fā)展，各種高精尖的儀器自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)正逐步取代以往手工檢驗(yàn)。與此同時(shí)，基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的深切進(jìn)入和推廣，使一些實(shí)驗(yàn)技術(shù)不斷走向臨床一線，成為新的臨床診斷方式方法和技術(shù)。上世紀(jì)80年代，美國(guó)Cetus公司人類遺傳部的Mullis博士[3]發(fā)明了DNA聚合酶鏈反響〔Poly-meraseChainReaction,PCR〕，隨后該技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中被成功轉(zhuǎn)化應(yīng)用[4,5],成為分子診斷應(yīng)用最廣的技術(shù)之一。并且基于這一技術(shù)發(fā)展起來(lái)的逆轉(zhuǎn)錄PCR〔Reversetranscriptase-polymerasechainre-action,RT-PCR〕[5,6]、實(shí)時(shí)熒光定量PCR〔real-timepolymerasechainreaction,RT-PCR〕[7,8]等技術(shù)也被廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)。而基于分子雜交為基礎(chǔ)的熒光原位雜交技術(shù)〔Fluorescenceinsituhybridiza-tion,FISH〕當(dāng)前則主要集中在產(chǎn)前診斷、血液腫瘤診斷、感染性疾病診斷及實(shí)體瘤診斷等領(lǐng)域[9].DNA序列分析作為分子診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，它對(duì)于遺傳性疾病、多基因疾病的診斷與預(yù)測(cè)意義重大，但由于高昂的儀器設(shè)備及試劑價(jià)格，當(dāng)前還僅能在大型實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行應(yīng)用。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展及人們對(duì)疾病經(jīng)過(guò)的認(rèn)識(shí)加深，以往的檢驗(yàn)技術(shù)已不能完全適應(yīng)微量、快速、準(zhǔn)確、全面的要求，進(jìn)而引入了生物芯片[10],它通過(guò)將大量的分子探針固定于支持物，并與標(biāo)記的樣品雜交或反響，自動(dòng)化儀器檢測(cè)雜交或反響信號(hào)的強(qiáng)度進(jìn)而能夠判定樣品中靶分子的數(shù)量。2生物標(biāo)志物在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的轉(zhuǎn)化應(yīng)用近年來(lái)，由于科研資金的大量投入，細(xì)胞分子生物學(xué)、免疫學(xué)等醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)學(xué)科得到了迅猛的發(fā)展，十分是在后基因組時(shí)代，代謝組學(xué)、功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)[11]等分子生物學(xué)技術(shù)的蓬勃發(fā)展，使一大批在疾病發(fā)生發(fā)展經(jīng)過(guò)中特異性改變的生物標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)并被開(kāi)發(fā)應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作之中。2.1耳聾生物標(biāo)志物耳聾是人類最常見(jiàn)的致殘性疾病之一，我們國(guó)家當(dāng)兵的人總醫(yī)院的戴樸教授[12-17]率領(lǐng)的研究團(tuán)隊(duì)歷時(shí)10年通過(guò)系統(tǒng)的耳聾分子流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，CJB2基因突變是中國(guó)人最常見(jiàn)的致聾因素，SLC26A4基因突變則緊隨其后為第二致聾因素，且SLC26A4的突變熱門(mén)、突變譜、基因型和表型均與西方人群存在明顯差異；而線粒體DNA突變則是藥物性耳聾主因，十分是C1494T和A1555G突變，但是歐美人群常見(jiàn)的CJB6基因突變?cè)谥袊?guó)并不常見(jiàn)。馮永等[18-23]研究發(fā)現(xiàn)中國(guó)人常見(jiàn)的致病基因主要為:PAX3、MITF、SOC10、POU3F4、EYA4、MYO15A、TMC1、COCH、DFNA5.根據(jù)上述基礎(chǔ)研究成果，我們國(guó)家學(xué)者研發(fā)了(線粒體DNAA1555G突變檢測(cè)試劑盒〕和(遺傳性耳聾基因芯片檢測(cè)試劑盒〕等產(chǎn)品用于臨床耳聾基因診斷和產(chǎn)前診斷與遺傳咨詢[24].2.2腫瘤生物標(biāo)志物腫瘤是危害人類生命健康最嚴(yán)重的疾病之一，對(duì)它的早期發(fā)現(xiàn)與診斷是當(dāng)前腫瘤防治工作的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。1978年，Herberman在美國(guó)腫瘤免疫診斷會(huì)上第一次提出了腫瘤標(biāo)志物的概念。此后，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)了大量的腫瘤標(biāo)志物，并積極轉(zhuǎn)化應(yīng)用于腫瘤的早期診斷。最為典型的是血清甲胎蛋白用于肝細(xì)胞肝癌的診斷、血清癌胚抗原用于消化道腫瘤的診斷和血清CA19-9用于胰腺癌的診斷[25-27].2008年，我們國(guó)家上海瑞金醫(yī)院的研究團(tuán)隊(duì)[28]通過(guò)抗體芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)IPO-38蛋白在胃癌患者血清中高表示出，采用ELISA法進(jìn)一步臨床研究發(fā)現(xiàn)IPO-38對(duì)胃癌患者診斷的敏感性為57.4%,特異性為90.2%,具有更好的診斷價(jià)值。(BTAstat試劑盒〕、(BTATRAK試劑盒〕和(NMP22試劑盒〕是近年來(lái)基于膀胱癌基礎(chǔ)研究成果而研發(fā)并經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于臨床膀胱癌診斷的產(chǎn)品。華而不實(shí)BTAstat是基于免疫色譜分析技術(shù)的定性快速檢測(cè)試劑盒，而B(niǎo)TATRAK則是基于ELISA技術(shù)的一種定量檢測(cè)方式方法，兩者均是采用兩個(gè)單克隆抗體檢測(cè)人補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白〔humancomplementfac-torH-relatedprotein,HCFHRP〕，其敏感性在29%~91%之間，特異性在56%~86%之間，但檢測(cè)結(jié)果易受患者血尿情況的影響[29].NMP22試劑盒較BTA有所改良，其檢測(cè)敏感性為56%左右，特異性為86%左右，在肉眼血尿患者中，NMP22試劑盒陰性預(yù)測(cè)值95%,敏感性優(yōu)于尿液細(xì)胞學(xué)檢查，而特異性接近尿液細(xì)胞學(xué)檢查[30].為進(jìn)一步尋求更準(zhǔn)確和特異的檢測(cè)方式方法，針對(duì)前期基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)糖基化癌胚抗原的高分子量成分〔19A211〕和膀胱癌黏蛋白抗原〔M334〕與膀胱癌密切相關(guān)這一成果[31],研究人員采用了單克隆抗體結(jié)合免疫熒光細(xì)胞學(xué)的檢測(cè)方式方法，使臨床對(duì)膀胱癌檢測(cè)的敏感性提高到81%~89.3%,特異性為61%~78%,十分是對(duì)Ta~T1期和低度惡性的膀胱腫瘤尤為敏感[32].2.3類天皰瘡疾病生物標(biāo)志物類天皰瘡疾病是一類罕見(jiàn)的本身免疫性疾病，發(fā)病機(jī)制主要是本身抗體攻擊大皰性類天皰瘡抗原BP180和ⅩⅦ型膠原，其本身抗體包括IgG、IgE和IgA.2018年，CsorbaK等開(kāi)發(fā)了一種ELISA方式方法用于檢測(cè)抗BP180的IgA本身抗體，其診斷靈敏度達(dá)83.3%,特異度達(dá)100%[33].3結(jié)束語(yǔ)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)是近年來(lái)的一個(gè)熱門(mén)話題，固然轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)概念的提出距今還不到20年，但是轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)絕不是一個(gè)新生事物，能夠講當(dāng)前臨床上所用的技術(shù)、方式方法及相關(guān)產(chǎn)品都是醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究向臨床轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物。盡管如此，轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的研究卻仍然任重而道遠(yuǎn)。首先，怎樣找到更為準(zhǔn)確、特異、簡(jiǎn)便的檢測(cè)手段仍然是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人員及相關(guān)研究工作者奮斗的目的。在過(guò)去的研究中，研究者通過(guò)各種技術(shù)手段鑒定出了大量在疾病形式下呈現(xiàn)異常改變的生物標(biāo)志物，但是真正進(jìn)入臨床應(yīng)用于疾病診斷很少。其次，怎樣將成功的臨床研究成果向人群推廣，使更多的患者從中受益仍然需要轉(zhuǎn)化研究工作者的努力。轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究的最終目的是使廣大人群享遭到醫(yī)學(xué)科技發(fā)展的福利，因而當(dāng)基礎(chǔ)研究成果完成了T1、T2階段的轉(zhuǎn)化研究后，還需要繼續(xù)向T3、T4階段轉(zhuǎn)化[34,35],而當(dāng)前的情況是T3、T4階段的轉(zhuǎn)化研究并不是很樂(lè)觀[36].總之，轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的提出和興起為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的更新和發(fā)展帶來(lái)了機(jī)遇和挑戰(zhàn)，相信在國(guó)家政策的引導(dǎo)與鼓勵(lì)及廣大醫(yī)學(xué)科技工作者的共同努力下，轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究的成果將會(huì)使疾病的診斷愈加快速、準(zhǔn)確。以下為參考文獻(xiàn)[1]GeraghtyJ.Adenomatouspolyposiscoliandtranslationalmedicine[J].Lancet,1996,348〔9025〕：422.[2]高淑紅，高勝利，燕子。我們國(guó)家轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)發(fā)展現(xiàn)在狀況的考慮[J].醫(yī)學(xué)與哲學(xué)：人文社會(huì)醫(yī)學(xué)版，2020〔6〕：12-14.[3]MullisKB,FaloonaFA.SpecificsynthesisofDNAinvitroviaapolymerase-catalyzedchainreaction[J].MethodsEnzymol,1987,155:335-350.[4]Johns