結(jié)核分枝桿菌屬

結(jié)核分枝桿菌屬第1頁(yè)/共25頁(yè)分枝桿菌屬第2頁(yè)/共25頁(yè)分枝桿菌屬主要特點(diǎn)是一類直或微彎曲、有分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)的桿菌。細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高，主要為分枝菌酸。具有抗酸性，革蘭染色不易著色，常用抗酸染色。專性需氧營(yíng)養(yǎng)要求特殊，大多數(shù)生長(zhǎng)緩慢。不產(chǎn)內(nèi)、外毒素和侵襲性酶等致病物質(zhì)，所致疾病呈慢性。第3頁(yè)/共25頁(yè)分枝桿菌屬種類結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群結(jié)核分枝桿菌牛分枝桿菌、非洲分枝桿菌田鼠分枝桿菌非典型分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌光產(chǎn)色分枝桿菌暗產(chǎn)色分枝桿菌不產(chǎn)色分枝桿菌迅速生長(zhǎng)分枝桿菌分枝桿菌屬第4頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－形態(tài)染色細(xì)長(zhǎng)略彎，分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)無芽孢，無鞭毛，部分菌株有莢膜革蘭染色陽(yáng)性，不易著色抗酸染色陽(yáng)性第5頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－培養(yǎng)特性生長(zhǎng)條件：專性需氧、細(xì)胞內(nèi)寄生菌、最適pH6.5～6.8、營(yíng)養(yǎng)要求高、培養(yǎng)基含雞蛋、馬鈴薯粉、甘油、孔雀綠等生長(zhǎng)現(xiàn)象：※生長(zhǎng)緩慢※改良羅氏培養(yǎng)基菌落特征：干燥、淡黃色、質(zhì)地較硬的R型菌落※液體培養(yǎng)基：形成菌膜，有毒株呈索狀生長(zhǎng)第6頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－生化反應(yīng)生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類與非結(jié)核分枝桿菌鑒別：

耐熱觸酶試驗(yàn)－；（非結(jié)核分枝桿菌＋）與牛分枝桿菌鑒別煙酸試驗(yàn)＋；（牛分枝桿菌－）第7頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－抵抗力與變異性抵抗力特點(diǎn)：“三耐四敏”※耐干燥、耐酸堿、耐孔雀綠（1：13000）※對(duì)濕熱、70％乙醇、紫外線、常用抗結(jié)核藥物（但長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性）變異性

※典型形態(tài)－→多形性※R型菌落－→S型菌落※有毒－→無毒（用于制備疫苗）※抗結(jié)核藥敏感－→耐藥第8頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－致病物質(zhì)脂質(zhì)索狀因子:與該菌毒力有密切關(guān)系磷脂:分枝菌酸：與抗酸性有關(guān)蠟質(zhì)D:具有佐劑作用硫酸腦苷脂蛋白質(zhì)糖類結(jié)核桿菌不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素，不產(chǎn)生侵襲性酶第9頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－所致疾病與免疫性經(jīng)多途徑感染，引起結(jié)核病，以肺結(jié)核多見類型：原發(fā)感染和繼發(fā)感染免疫性※抗結(jié)核免疫以細(xì)胞免疫為主※抗結(jié)核免疫屬帶菌免疫※抗結(jié)核免疫與Ⅳ型超敏反應(yīng)同時(shí)出現(xiàn)第10頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－結(jié)核菌素試驗(yàn)原理：用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，以檢測(cè)受試者對(duì)結(jié)核桿菌是否有細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏反應(yīng)的試驗(yàn)。結(jié)果：根據(jù)注射部位是否出現(xiàn)紅腫判斷結(jié)果＜5mm為陰性≥＞5mm為陽(yáng)性＞15mm為強(qiáng)陽(yáng)性應(yīng)用：選擇卡介苗接種對(duì)象；判斷卡介苗接種效果；輔助診斷嬰幼兒結(jié)核??；測(cè)定腫瘤患者細(xì)胞免疫狀態(tài)第11頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－檢驗(yàn)程序標(biāo)本核酸檢測(cè)接種固體培養(yǎng)基可疑菌落涂片抗酸染色鏡檢抗體檢測(cè)慢性生長(zhǎng)菌快速生長(zhǎng)菌菌種鑒定標(biāo)本前處理接種液體培養(yǎng)基接種小白鼠豚鼠臟器涂片鏡檢抗酸染色鑒定試驗(yàn)第12頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－涂片檢查直接涂片薄涂片厚涂片集菌涂片沉淀集菌法漂浮集菌法熒光顯微鏡檢查法：金剛胺O染色→熒光顯微鏡下檢查第13頁(yè)/共25頁(yè)抗酸染色－－報(bào)告方式報(bào)告方式鏡檢結(jié)果-仔細(xì)檢查300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌±300個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~2條抗酸菌＋100個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌2＋10個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌3＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌4＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)9條以上抗酸菌第14頁(yè)/共25頁(yè)結(jié)核分枝桿菌－－分離培養(yǎng)標(biāo)本前處理：※目的：殺死雜菌；液化標(biāo)本※方法：4％NaOH法；4％H2SO2法；胰酶-新潔爾滅法等培養(yǎng)基選擇：羅氏培養(yǎng)基、米氏培養(yǎng)基、小川培養(yǎng)基等接種培養(yǎng)第15頁(yè)/共25頁(yè)培養(yǎng)結(jié)果記錄與報(bào)告方法報(bào)告方式培養(yǎng)結(jié)果＋斜面20個(gè)菌落以上，占斜面1/4以下2＋斜面上菌落生長(zhǎng)面積占1/4以上，1/2以下3＋斜面上菌落面積占斜面1/2以上，3/4以下4＋斜面上菌落生長(zhǎng)密集，成菌苔第16頁(yè)/共25頁(yè)非典型分枝桿菌是指結(jié)核分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌。大多為環(huán)境中的腐生菌對(duì)酸堿比較敏感對(duì)常用抗結(jié)核藥耐受為條件致病菌，艾滋病患者易感染鳥復(fù)合分枝桿菌第17頁(yè)/共25頁(yè)麻風(fēng)分枝桿菌－－生物學(xué)性狀為抗酸桿菌細(xì)胞內(nèi)寄生有麻風(fēng)桿菌寄生的細(xì)胞呈泡沫狀，稱為麻風(fēng)細(xì)胞體外人工培養(yǎng)尚未成功犰狳是動(dòng)物感染模型第18頁(yè)/共25頁(yè)麻風(fēng)分枝桿菌－－臨床意義與微檢經(jīng)呼吸道、接觸感染引起麻風(fēng)病瘤型麻風(fēng)（開放型）：傳染性強(qiáng)結(jié)核樣型（閉鎖性）：傳染性弱微檢：標(biāo)本涂片抗酸染色是診斷麻風(fēng)的主要依據(jù)第19頁(yè)/共25頁(yè)麻風(fēng)桿菌第20頁(yè)/共25頁(yè)犰狳第21頁(yè)/共25頁(yè)抗酸染色染液組成：石炭酸復(fù)紅、3％鹽酸酒精、美蘭染色步驟

※石炭酸加溫染5分鐘，水洗

※3％鹽酸酒精脫色致無紅色脫下為止，水洗

※美藍(lán)染1分鐘，水洗，干后鏡檢染色結(jié)果

※抗酸菌：紅色