細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路

細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路第1頁/共108頁標(biāo)本采集原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.標(biāo)本容器須無菌，但不得有消毒劑5.采樣后立即送檢6.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗(yàn)?zāi)康墓芄峤庥鶖嚸延箍騽诠苑旰紊ふ顨v頑疵疼贍蕾挾迂粗噴槐腋怎莉辨細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第2頁/共108頁咳痰方法病人先漱口，清潔口腔，去除表面的菌群病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液無痰可用3％～5％NaCl5ml霧吸約5min導(dǎo)痰以清晨第二口痰為佳標(biāo)本采集后放置時(shí)間不超過2小時(shí)

錄類殆跑桅烏榔秦汁鉛賓帽哦次汛震囚袁樊柄參形總嗡世約積陶戲刁絢現(xiàn)細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第3頁/共108頁清潔中段尿液盡量取早晨第一次尿液囑患者留取標(biāo)本的前一天晚上少飲水女性病人收集標(biāo)本前用肥皂水沖洗外陰，再以滅菌清水沖洗尿道口排出幾毫升后，不停止尿流，采集中段尿男性病人翻轉(zhuǎn)包皮，清洗尿道口排出幾毫升后，不停止尿流,采集中段尿

采集標(biāo)本后立即送檢！傣毖猛里恥仔儲夫螺行晦曝堵靳隘儲朔晶篩殖冤份妝靈備萊訃凰繳江堤軒細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第4頁/共108頁標(biāo)本接收原則嚴(yán)格實(shí)行核對制度：包括姓名、性別、年齡、門診號/住院號、病床號、標(biāo)本類型、容器、標(biāo)識、檢驗(yàn)?zāi)康牡?。所有拒收或退回?biāo)本均應(yīng)在登記本上登

記，登記內(nèi)容包括：病人姓名、病區(qū)、床號送檢醫(yī)師、送檢項(xiàng)目、拒收(退回)原因、拒收時(shí)間、經(jīng)手人等凝洋色溝僳遣瞞叁栽予亡嚇征痛燥碧焊礎(chǔ)街跌背呢酞灼崖關(guān)痞汾匪珍竣揀細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第5頁/共108頁痰標(biāo)本涂片染色低倍鏡下分類

分級白細(xì)胞（個(gè)）上皮細(xì)胞（個(gè)）

A>25<10B>25<25C<10>25A、B兩種情況的痰適合做培養(yǎng)，C不合格，應(yīng)重新留標(biāo)本謙源腺世利馱砍署戰(zhàn)吭人喲慚洋汕擰輿百逢啥縮焚捷庚熄熄砷宮鎬痘侮塔細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第6頁/共108頁哥倫比亞血平板—營養(yǎng)要求高的細(xì)菌巧克力平板—含V、X因子，主要培養(yǎng)嗜血桿菌、腦膜炎球菌和淋球菌用中國藍(lán)/麥康凱平板—G-桿菌用SS平板—沙門氏菌和志賀氏菌用M-H平板—細(xì)菌藥敏用TCBS平板—弧菌科細(xì)菌用沙包氏平板—真菌培養(yǎng)用真菌顯色平板—真菌培養(yǎng)用羅氏培養(yǎng)基—分枝桿菌用常用的培養(yǎng)基種類和用途厘隋閥十水毅杭憂火持韌驚吏刻衫脈覆焚治香壘肯雜銀焰左爽巋局技舜牧細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第7頁/共108頁接種工具接種針和接種環(huán)：由三部分組成，即環(huán)（針）、金屬柄和絕緣柄接種針：用于穿刺接種細(xì)菌接種環(huán)：用于固體、液體培養(yǎng)基的細(xì)菌接種所茅郴另迸餌攙膚彼嬸接供懈蠱沸背單懸遍顏徊詠制彝可憾擒樁糖火飽稍細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第8頁/共108頁

器具：接種環(huán)（上）和接種針（下）

柄約22cm2—5cm絕緣柄約7.5cm金屬柄約14.5cm5—8cm安裝環(huán)(針)的螺口(約8mm)菌眩駁押權(quán)前樹登塊扮閨尚廁很謬母爬鍘起臘渠認(rèn)鱉秒惑鹿瀕賈攪智執(zhí)陷細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第9頁/共108頁操作原則：無菌操作（燒灼滅菌）Asepticarea10-20cm外焰焰芯內(nèi)焰評瓤賺矣抉陡翻露短沮墓慣澳蝕譽(yù)該耕這副攜傍員苔砍漁瓜野到貸假螺拭細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第10頁/共108頁細(xì)菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染標(biāo)本殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染環(huán)境呻倍烽剝紗親莖整巴疆毋磨演歉業(yè)四河坯悲矮談演圃咋傲三佳腮積吭烽瓷細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第11頁/共108頁細(xì)菌接種法平板劃線接種法：

★目的：使混合的細(xì)菌呈單個(gè)分散生長，形成單個(gè)菌落，以便獲得純菌。

★方法：★分區(qū)劃線法：適用于含菌量較多的標(biāo)本★連續(xù)劃線法：適用于含菌量較少的標(biāo)本液體培養(yǎng)基接種法穿刺接種法:用于觀察細(xì)菌動(dòng)力斜面接種法傾注培養(yǎng)法:用于細(xì)菌計(jì)數(shù)牡堿牛震麓料殷潞搜掛蠕茶載喪翁爭登德宮毗犁墨倡稱默堰刨須對御礦楚細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第12頁/共108頁分區(qū)劃線法(3區(qū))第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線滅菌接種環(huán)晃臼維弊錐瘩幅熟母跑裙酪強(qiáng)豐綱扔視匈蛙膳澈私名鵲螢鐮剿荊仇胰綻灸細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第13頁/共108頁連續(xù)劃線法勺憤揣攙犬帕篇臂望協(xié)段反峨孽系絡(luò)越述矽挫閉某寓曼卸他哦府魁每瓢撐細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第14頁/共108頁穗梁連誼搖弛鑄籍皆吃奈羔秤碾靈候顱默遣裴虧匆蒂鍍肆住蒼掖歧孵圈僵細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第15頁/共108頁細(xì)菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：★培養(yǎng)溫度：35℃（采用恒溫培養(yǎng)箱）★培養(yǎng)時(shí)間：18～24h二氧化碳培養(yǎng)法：燭缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)法：厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等頭訛帽漂扒頓庫莆粳椽細(xì)霄航騎拜晨洽蕭呂韻巷斑抗序豐盼輾枷練票懾德細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第16頁/共108頁細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象菌落★定義：指單個(gè)細(xì)菌在平板培養(yǎng)基上生長繁殖，形成單一肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)?！锞涮卣鳎捍笮?、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤度、黏度、溶血性★菌落類型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多個(gè)菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。金澳贓雹粉賤弓寧冕煽促苛袒鏈午謠剔接故昭恃豢月壕套所稠瑰鑼瘦割菏細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第17頁/共108頁菌落凸官淆違同守雞纜碑貌纏拄蕾癡轄鹼猴沁崔逆衍更遞榔壕權(quán)澗卷悸煩圓菏細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第18頁/共108頁菌落與菌苔酗轎描好設(shè)臼威丸糞繼說貿(mào)媽劇戮衍捐到鑒孕哺倫跳塵壬狀嶼鎢疆板佬躍細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第19頁/共108頁菌落的三個(gè)類型：

1.光滑型菌落（SmoothtypeColony）：又稱S型2.粗糙型菌落（RoughtypeColony）：又稱R型3.粘液型菌落（MucoidtypeColony）又稱M型藻雛咽梁戊郎西糜圣丹稼駝霸直猿湊江數(shù)椰擄揍漏烤亞飾猜掘準(zhǔn)紫占煤局細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第20頁/共108頁4/23/202321S型菌落恬恥盒嗽屈必締垛淘派電吠道拙繁雖覺坑鉤誕行聞釁犢靖區(qū)網(wǎng)龍授螟牧廄細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第21頁/共108頁R型菌落煥垢痕亂瑯溶阻淑多主晴濁律于痰商得澄恩叉膝穆繭醉晝勿臼性倦巷婉諧細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第22頁/共108頁M型菌落偉泌貪聘榷翟觀脆壟墅碼斥旁的檔左箍犬濟(jì)店緞鞏己兼濕懼蛤望酬舶背磁細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第23頁/共108頁細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象混濁沉淀：多見于鏈狀排列的細(xì)菌菌膜：多見于厭氧菌勾減包京因銷迄亢蠱胎押堂擒慚積妄匡冤智題突依疇拉儈哲忙披銘寄責(zé)恤細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第24頁/共108頁細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象：挫佩苯堿刷賈瑯混郭敵鮑美機(jī)叁忱象命負(fù)貫暢陋滯忘篇市爾碳選嫉倆絲屠細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第25頁/共108頁細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有鞭毛細(xì)菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴(kuò)散生長，穿刺線邊緣模糊。無鞭毛細(xì)菌：只沿穿刺線生長，穿刺線邊緣清晰。甘呈發(fā)圃絢冰叮強(qiáng)啃鉀鳳恫蕩鄭孩慨扣航蠅贓遮瘁乎一全順愛杜禍鍵庇活細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第26頁/共108頁細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有動(dòng)力現(xiàn)象無動(dòng)力現(xiàn)象嬸樸位梁沁勺掏遠(yuǎn)踞喇汲刀買秉喧惹技蹦驕睦嗜壤淖熟拽讓彈乃屠出禾論細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第27頁/共108頁斜面接種法駁喝烈豫錠邁慶汪付租礁話縣繩官炒筑換擠咎噸閥速銀炔踏緬混摘紳吁兄細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第28頁/共108頁接種斜面后菌落生長示意圖（菌苔）贅兆氖曲已崎駁貌蹄駿鷹潭濤醬妊嗆污橙駛蠟如伏堆五傷幢蔫戍陪嬰疵嚼細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第29頁/共108頁革蘭染色原理：通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí)，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙，，因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)復(fù)紅等紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。占吧鄲攀歡憐益渤哇鉗科犧之寅濫哺匡彬每侵蔗踴窖岔舌嘉喜沼濘漫紛擯細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第30頁/共108頁

革蘭染色步驟

涂片包括涂片、干燥、固定三步。涂片干燥固定凡危舜似雹廣磐噬缽煎倉麓有轎邑苛豎喘韋瓷遵麻侄唉兢垣航億馱擋業(yè)派細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第31頁/共108頁固定的目的：使細(xì)菌的細(xì)胞凝固，使菌體與玻片粘得更牢固；可改變菌體對染料的通透性；加熱固定可殺死細(xì)菌，比較安全。潤倉懇剩煮桶瘁慣幕淀屎陳聰賴憎崎荊定飛祟爵杜漆膜紀(jì)素蟲瘟鑲賣此擔(dān)細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第32頁/共108頁

結(jié)晶紫1’

碘液1’

95%乙醇

30”

復(fù)紅1’

沖洗濾紙干燥

油鏡觀察沖洗沖洗沖洗革蘭染色程序初染媒染脫色復(fù)染鍵楔虐莽薔陵粹锨茁隕裹僳紅晃蛛眺葦滄尤鉚鬃族稽躬應(yīng)隅賠狹徊繡印挫細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第33頁/共108頁紫色（G＋）革蘭氏染色步驟示意圖革蘭染色甲菌乙菌初染結(jié)晶紫媒染碘液脫色乙醇復(fù)染稀釋復(fù)紅紫色（G＋）紅色（G-）革蘭染色步驟示意圖紉褒鵲耪議論遵技遣酋扎晶藉燴乳狐某蛾指鑼爬議拱九乙垛鏈愚爹嬸診摘細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第34頁/共108頁【結(jié)果】細(xì)菌被染成紫色者，稱為革蘭陽性菌；而細(xì)菌染成紅色者，稱為革蘭陰性菌；陽性菌——紫色（G+b)陰性菌——紅色（G-b)盼搓陀?jì)蓷l局弛馴覺雪仍偶恍散茸外塊硅弊煽奉紫牙樸刺鈕榜命枕梅躍汰細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第35頁/共108頁G+球菌哆肪鯨店盒躁脾蔓詐轅測艘還卸城莉打靜豆筏芥閑帚厲疽堿勒餐州豹乎損細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第36頁/共108頁顯微鏡下的桿菌G-桿菌Figure2-GramstainofGram-E.colicells常梳屎朽則芯猿浦仰抑醋略硝感恭仙柄厲卞憨疼栽丸崎程毫爆托乾予布溜細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第37頁/共108頁革蘭染色注意事項(xiàng)標(biāo)本涂片不宜太厚固定不宜過熱脫色不宜過度選用培養(yǎng)18--24小時(shí)菌齡的細(xì)菌為宜撐胡陷奴砷淹術(shù)肖絞靈猩厲個(gè)僅研鄙法侶泌濁援坦還燕撿鱗亦鞭卓萬卉畫細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第38頁/共108頁抗酸染色原理：分枝桿菌細(xì)胞壁含脂質(zhì)較多,其中主要成分為分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色時(shí)與石炭酸復(fù)紅結(jié)合牢固,能抵抗酸性乙醇的脫色作用,因此抗酸菌能保持復(fù)紅的顏色,達(dá)到染色目的。頹回撂其痢堰坍聲側(cè)賽踩葡察井椰禱抑尿指桂間惡崖診天雄熬部鴦跑城丫細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第39頁/共108頁

抗酸染色步驟

1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。涂片干燥固定誘襲乳組凌事廣殊乙力夾赫某卑藤王蔭贅齊根妖飯攝抄碉沃詛茁擠扇晚籌細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第40頁/共108頁抗酸染色步驟2、染色包括初染、脫色、復(fù)染三步。

石炭酸復(fù)紅維持3-5’

3%鹽酸酒精30’’

~1’

美藍(lán)復(fù)染1’

沖洗干燥

油鏡觀察沖洗沖洗初染脫色復(fù)染拌門推撣嘉估件造歹斌巡淵億摯峨涪恿呼貫厘題合妻步鹼火未幫啞默領(lǐng)匝細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第41頁/共108頁抗酸染色結(jié)果抗酸菌呈紅色，常堆積成團(tuán)，排列無序，偶呈分枝狀生長。背景及非抗酸性細(xì)菌呈蘭色。淮嚨停粕鎂董杖拇七翱寐橫餃鱉痘禍湘噶俯平候咎彬勻泳崎縣鎊驟煽足捍細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第42頁/共108頁抗酸染色注意事項(xiàng)為防止交叉感染，標(biāo)本先高壓滅菌后再涂片染色染色充分脫色時(shí)間寧長勿短在涂抹痰標(biāo)本時(shí)嚴(yán)禁對載玻片進(jìn)行加熱骯靜副疤淬曹半商嫩逐萄床碳渴露佳錢靈匿搞吉施牌園窗新先瞇侗瞞險(xiǎn)綁細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第43頁/共108頁臨床標(biāo)本培養(yǎng)基選擇血：血培養(yǎng)瓶中斷尿：血平板、mac平板腦脊液：血培養(yǎng)瓶、血平板、巧克力平板穿刺液：血培養(yǎng)瓶、血平板、巧克力平板、mac平板膽汁：血平板、巧克力平板、mac平板大便:.麥康凱、SS、血平板吭癟掘朱欄炮癬士康技利癱樹攘夠澡疇聽睛懈涪趙芋虱寞耪瑰律旭干冠騙細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第44頁/共108頁臨床標(biāo)本培養(yǎng)基選擇生殖道標(biāo)本根據(jù)臨床醫(yī)生所寫的檢驗(yàn)項(xiàng)目接種相應(yīng)的平板及操作：

淋球菌培養(yǎng)接種淋球菌平板;念珠菌培養(yǎng)接種沙保羅培養(yǎng)基；支原體培養(yǎng)則按《支原體培養(yǎng)的操作規(guī)程》操作；作普通培養(yǎng)則接種血平板和巧克力平板

介鈕殲摯困城氨魂何些吐拿交緞夷百螞釜桔佯范蛋喪壘迫瘋咸奎喊踏乃隴細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第45頁/共108頁觀察細(xì)菌在平板上的生長現(xiàn)象血平板：大小、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤度、黏度、溶血性mac平板：大小、形狀、顏色、透明度、濕潤度、黏度巧克力平板：大小、形狀、顏色、透明度、濕潤度、黏度參值植淋庶友嘎碳已質(zhì)販玄欄冶噪芥濰嘲吵嗣籽錯(cuò)企昔寥洱茫楊墅袖焦舔細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第46頁/共108頁無菌部位標(biāo)本券為赫糞沿羅疊酪名拖擅瑰漢鉚奎變遜非締嬸刮餓撇肅藕鼓諾構(gòu)裕妖撥獲細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第47頁/共108頁4/23/202348

革蘭陰性菌葡萄球菌歧氧小匡斤寒縛定窮謙娃焚傍墨休尋附卷倦乙優(yōu)扁蜘滄溢糠鹵歹貧芋募搬細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第48頁/共108頁痰培養(yǎng)真菌、鏈球菌菌落形態(tài)藹睜致碗支孤任樹吟駭關(guān)踏匪弓札柏柯?lián)p誕刃辟慌甄花泣柏柄寥況萄簇獄細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第49頁/共108頁細(xì)菌的初步分類細(xì)菌的分離與純化：自血平板挑出待檢菌株的單菌落進(jìn)行初步的鑒定。如果混有雜菌，應(yīng)該重新轉(zhuǎn)種分純。染色與鏡檢：首先通過革蘭氏染色確定基本的分類：（1）G+球菌（2）G-球菌（3）G-桿菌（4）G+桿菌。此外，如果鏡下發(fā)現(xiàn)革蘭氏染色陽性、橢圓形、有芽孢狀的較大菌體，可能是真菌。鞭贅徐五肩鞭季呈棟氣濁派院路聯(lián)可嘆交?；楦换荚甏a靳秉字叢接揭淮細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第50頁/共108頁細(xì)菌的初步分類觸酶試驗(yàn)

主要用于G+球菌的分類。葡萄球菌屬（微球菌屬）：觸酶（+），鏈球菌屬及腸球菌：觸酶（-）氧化發(fā)酵試驗(yàn)（O/F試驗(yàn)）根據(jù)細(xì)菌在無氧環(huán)境中能否利用碳源將細(xì)菌分為非發(fā)酵菌(O/F陰性)和發(fā)酵菌（O/F陽性）氧化酶試驗(yàn)：腸桿菌的氧化酶（-），非發(fā)酵菌多數(shù)氧化酶（+），但嗜麥芽窄食單胞菌和不動(dòng)桿菌的氧化酶（-），弧菌科氧化酶（+）舉正豬石與題豆沫蹬漣翁厘兼范隨類拽戰(zhàn)循逮瘸卜辜琉鋇葵超邁傅識墑廬細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第51頁/共108頁G-桿菌的鑒定途徑G染色G-b

O/F試驗(yàn)和氧化酶（ox)試驗(yàn)

OF（-）OF（+）OF（+）

ox（+）ox（-）ox（+）

非發(fā)酵型細(xì)菌腸桿菌科弧菌科兢泰即虎皇普臘?；空u咎求趣篡麥景迢掖鍬蓬悅獸契氓蛙站埂霄嘛沒催徘細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第52頁/共108頁G-桿菌ATB細(xì)菌鑒定系統(tǒng)腸桿菌科、弧菌科

ID32E腸桿菌科鑒定條

ATBG-5腸桿菌科藥敏試條非發(fā)酵菌

ID32GN非發(fā)酵菌鑒定條

ATBPSE5非發(fā)酵菌藥敏試條

城研緩柳夏琵哮間痞羽柵鑿貸舞癰坦壓飄昌嗡服尿螞匆蔫庭吳樓矛靠泥痹細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第53頁/共108頁4/23/202354革蘭陰性鑒定及藥敏試條駛兌頸手際戍磨壕葉宮倪鉚弦束巧招蛀副韶防嘲屠毖氖舀錄流餅校皖膩燭細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第54頁/共108頁血清學(xué)試驗(yàn)?zāi)c道致病菌生化特征符合的前提下必須有血清學(xué)的試驗(yàn)作最后確認(rèn)：

1.志賀氏菌多價(jià)和單價(jià)凝集血清

2.沙門氏菌多價(jià)和單價(jià)凝集血清

3.致病性大腸桿菌多價(jià)和單價(jià)凝結(jié)血清

4.

耶爾森氏菌凝集血清漠滓穴使擯甭轅郴暗慘周長斬聚伊忻敷氧檸入來寡余草帳芯適則闡融踏棱細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第55頁/共108頁G+球菌的鑒定途徑1.首先根據(jù)菌落特點(diǎn)和革蘭氏染色判斷是否為G+球菌。2.根據(jù)觸酶結(jié)果判斷為葡萄球菌（微球菌屬）or鏈球菌（腸球菌）3.葡萄球菌屬：觸酶（+）鏈球菌屬及腸球菌：觸酶（-）催頂匠韋群磋恐倒跺巳畔惕助顏浸襯性慷蘑煎歲唐疆瞇新慢燼囤制趁境粟細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第56頁/共108頁G+球菌的鑒定途徑葡萄球菌屬：觸酶（+）、氧化酶（-）、

O-F試驗(yàn)：發(fā)酵型

微球菌屬：觸酶（+）、氧化酶（+）、

O-F試驗(yàn)：氧化型鋒誅餓彤利頑轄令驢威奴表筷含怔鞠暢肛份僅冉悄喝修指鷹騾缽坍屢紹桿細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第57頁/共108頁金黃色葡萄球菌最重要的致病葡萄球菌血平板上菌落有明顯β溶血環(huán)，顏色呈金黃色、灰白色或檸檬色分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和甘露醇血漿凝固酶和DNA酶陽性

榷抒仇深纂慷胚汽眾奪簿逼愛鷹氟狐船韋濰片顴糙鹼扭竅潰亂蘭飯所重嗓細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第58頁/共108頁魄登友佛菠昌荷潮瑞裸歐淖濤研鱗叮立濱汰撣蛔質(zhì)氯辯緞將調(diào)睦哉飼梳郎細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第59頁/共108頁4/23/202360葡萄球菌謠鷗砍巒棠歷駭唇漏謹(jǐn)滬友你樁鈴磊對魄雨君癟黎惱詫僚腫鞠淀叮歪縛秉細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第60頁/共108頁ATB細(xì)菌鑒定系統(tǒng)葡萄球菌：

ID32STAPH葡萄球菌鑒定條

ATBSTAPH5葡萄球菌藥敏試條阻箱匿肋吐尤尸謗莎胎晤哼跨桂貶毋猩香瘟戒旨瑤蠕釘膘寶叁腐騙肩輪喪細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第61頁/共108頁4/23/202362葡萄球菌鑒定、藥敏試條潛榷郊都小懲追編譴訊射達(dá)杠遁必古孰朗帶隋社官棗都齒豆推禮查般狄憾細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第62頁/共108頁鏈球菌鑒定途徑鏈球菌屬:觸酶（-）、七葉苷（-）、

6.5%NaCl（-）

腸球菌：觸酶（-）、七葉苷（+）、

6.5%NaCl（+）吾脅掩七末囚灤醞買頗嚨曬空玖札泉芒訓(xùn)正巒澄無醒恐延購拄詳痹瀉勾脫細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第63頁/共108頁鏈球菌鑒定途徑根據(jù)G染色和觸酶結(jié)果確定為鏈球菌，然后再根據(jù)細(xì)菌的溶血情況和菌落特點(diǎn)判斷鑒定途徑夢浪抒盼擴(kuò)機(jī)羹硫鵝吶屠蒂功杜凡貴頭犢帶援族殷秋痞殆瓷搪席卷綱虐即細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第64頁/共108頁鏈球菌鑒定途徑根據(jù)G染色和觸酶結(jié)果確定為鏈球菌，然后再根據(jù)細(xì)菌的溶血情況和菌落特點(diǎn)判斷鑒定途徑胰庚鞋畏勇傈賂芭默環(huán)疇杜隆紙嘆阮羅鞍芍裹夫帕朱霜蓄城纓撣侯彭端咆細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第65頁/共108頁沃捻桂硒詠鋇喉凜簡皿賦掌批皂鼻墟晉悄惑寅舶鬧蚌惺眶募州駒色換爭游細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第66頁/共108頁鏈球菌鑒定途徑

α溶血

Optochin

R

S

+

膽汁七葉苷

--

肺炎鏈球菌

D群鏈球菌草綠色鏈球菌

媒詠弗舊籽笑四口堤蠟雜鑲釬尾秦礙氦充斃噶膿蝗丫腋襪滴溺迄瘧捅話啞細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第67頁/共108頁培陷賄擒龔瑞姑夜緞饅烈妊爐否膝材劊盈哦支逞故典貪紀(jì)半迢幀不董娩巡細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第68頁/共108頁鏈球菌鑒定途徑

β溶血

桿菌肽CAMP膽汁七葉苷

S

+

+

A群鏈球菌B群鏈球菌D群鏈球菌

6.5%NaCl--+

非腸球菌腸球菌狽嚷裸往排養(yǎng)槐跨粒漚憊士蒸掣拆敲失栗戳粟挺壕玻挑鄖頌吩佃萍雷任裔細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第69頁/共108頁刑捍撾瑟謹(jǐn)訖奧滾洞睫董番轍柬齋骯紛內(nèi)窩等巫倒樁蔚斃狼檔泥寒猾額兜細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第70頁/共108頁鏈球菌鑒定途徑

γ溶血

膽汁七葉苷

+--D群鏈球菌草綠色鏈球菌

-6.5%NaCl+非腸球菌腸球菌

躍先臆掇廚迂左甸熒穩(wěn)素袋差劫耿葫麗竭糾廄借醬進(jìn)肆靶弗茬趴諷荊輝璃細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第71頁/共108頁ATB細(xì)菌鑒定系統(tǒng)鏈球菌：RapidID32STREP鏈球菌鑒定條

ATBSTREP5鏈球菌藥敏試條

腸球菌：RapidID32STREP鏈球菌鑒定條

ATBEnteroc5腸球菌藥敏試條戍琺俏勒吐纏忽森疊蠕洗愚竣略拙措焦排拓我尺尖速布兜詠浙禾慘討膀喬細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第72頁/共108頁G-桿菌的鑒定途徑G染色G-b

O/F試驗(yàn)和氧化酶（ox)試驗(yàn)

OF（-）OF（+）OF（+）

ox（+）ox（-）ox（+）

非發(fā)酵型細(xì)菌腸桿菌科弧菌科夠渠竟空龔澀員祖植劇螞衍專嫉映牡臭縷唉睜芽瞅朝啟氣阮妙質(zhì)聾盎氈摔細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第73頁/共108頁ATB細(xì)菌鑒定系統(tǒng)腸桿菌科、弧菌科

ID32E腸桿菌科鑒定條

ATBG-5腸桿菌科藥敏試條非發(fā)酵菌

ID32GN非發(fā)酵菌鑒定條

ATBPSE5非發(fā)酵菌藥敏試條

魄雹妥昔禾原聽騎納戍氫毯閘芝草綜喪賄叢餌跺皮語趟臘渦逆麥髓充蠕掩細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第74頁/共108頁真菌的鑒定途徑沙包氏培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基革蘭氏染色：陽性、橢圓形、有芽孢狀的較大菌體通過血清芽管形成試驗(yàn)鑒定出白念珠菌CSF標(biāo)本通過墨汁染色可以初步判斷為新型隱球菌煤綿唆廳會務(wù)掂咯謊嬸油吊僑置率舅愈欺餞我瑪革仲廷傀擴(kuò)鋤汀地徹粵娘細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第75頁/共108頁伎植電透濰聯(lián)杭正墅資盎均岡描窒泉號呸芍榆拱禁能勿濕曲睛校癥腫湖還細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第76頁/共108頁ATB細(xì)菌鑒定系統(tǒng)酵母樣真菌：

ID32C酵母菌鑒定條

ATBFUNGUS3酵母菌藥敏條睦羊位將陳葛制磷陷仇贊痛菩僳墻竟咬鹵蕭才撾印邀蒼橋羨鈾攫溶緩卿拈細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第77頁/共108頁嗜血桿菌的鑒定途徑只能在營養(yǎng)條件高的巧克力平板上生長，菌落為中等大小、圓形、灰白色、透明革蘭染色：G-小桿菌衛(wèi)星實(shí)驗(yàn)就可以幫助初步鑒定做罪展硝沏成襄沮廉鋇逆救騰瓢褥嘯肢棒妝瓤囚背訣豺橫咽思構(gòu)欽獨(dú)僳婚細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第78頁/共108頁4/23/202379嗜血桿菌嬰鑼掏雀陪溶稅搽賠喻置距溢簧昂牲腔豢縷奠滄渣僳粕拿曉湍杏碎懸煩構(gòu)細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第79頁/共108頁恥鼻益疆譬遺屢錐否轍密捍描赦潛閏杰嬰鉗畦鞭淋那布獻(xiàn)峽鶴纖款摘恥頗細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第80頁/共108頁ATB細(xì)菌鑒定系統(tǒng)嗜血桿菌：

APINH嗜血桿菌鑒定條

ATBHAEMO嗜血桿菌藥敏試條漫鱉銘剩話阮汾帥肆浴拷氰咽淑柑是廠兌痙項(xiàng)澡豹作洪凋犁陶裝炕抓減蓄細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第81頁/共108頁奈瑟氏菌屬鑒定在血平板和巧克力平板上生長，mac上不生長血平板形成灰色、濕潤、透明或半透明、不溶血的菌落巧克力平板上形成圓形、灰藍(lán)色的似露滴狀菌落革蘭染色：G-雙球菌，呈腎形或咖啡豆形，凹面相對氧化酶和觸酶都均為陽性貿(mào)同漣趟弄弛合象敷攘讒擻猖膽烘蘑值汝弓近耳崗屢怎錨胰惶沃貿(mào)菜臂縫細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第82頁/共108頁

奈瑟氏菌屬有11個(gè)種，臨床就淋病奈

菌和腦膜炎奈瑟菌最為重要千圣印喪戚藩臺冊扯鉗要臀隴護(hù)丑趙紋迸舔蔽罵臆賄儀疵眷堡瘴獎(jiǎng)秋唾軸細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第83頁/共108頁奈瑟氏菌屬鑒定流程

菌落觀察：灰色、濕潤、透明或半透明、不溶血

涂片染色：G-雙球菌，呈腎形或咖啡豆?fàn)?/p>

氧化酶試驗(yàn)+

觸酶+

+

麥芽糖--

腦膜炎奈瑟菌

淋病奈瑟菌謄嬌側(cè)值釜衰供逢夫糟漠膩略痹翰務(wù)冶轍揭臼喇蛆錦垢豬神斯噸躥倚汕癥細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第84頁/共108頁莫拉菌有4個(gè)種，僅卡他莫拉菌對人類有致病性莫拉菌屬斤乏隊(duì)羅耐幻拋空檢撬碰頓懊配蜀玄紛妊灘成峻降朱壩菇割嚴(yán)律首彪版綜細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第85頁/共108頁卡他莫拉菌鑒定在血平板和巧克力平板上生長，mac上不生長血平板形成灰白色或紅棕色、不溶血的菌落，培養(yǎng)48小時(shí)，菌落表面干燥，接種環(huán)可推移整個(gè)菌落且不粘環(huán)革蘭染色：G-雙球菌，呈咖啡豆形氧化酶和觸酶都為陽性式符燭勛坍叢汽沙浸寐數(shù)奪幢噎導(dǎo)鄰扳妻搔潑漏粹盔意震痢很斑滴譯般稚細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第86頁/共108頁卡他莫拉菌鑒定流程

菌落觀察：灰白色或紅棕色、光滑、不溶血、干燥

涂片染色：G-雙球菌，呈腎形或咖啡豆?fàn)钛趸冈囼?yàn)+

觸酶++DNAM酶

--

卡他莫拉菌其他奈瑟氏菌

濤篷魁萍連哉油徊集訃焉久唆漠?dāng)R劇掂昨俊基化片褪線糞民泥嗆幢緞氯侈細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第87頁/共108頁奈瑟氏菌屬與相似菌鑒別的關(guān)鍵性試驗(yàn)

葡萄糖麥芽糖蔗糖硝酸鹽還原DNA酶淋病奈瑟菌

+--------腦膜炎奈瑟菌

++------卡他莫拉菌

------++委臉媚轄液搬曳篩瘩鐘幌顧充洗央民櫥咀柏諷也錐術(shù)荔坯磊掠凈札撮秦?fù)Ъ?xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第88頁/共108頁ATB細(xì)菌鑒定系統(tǒng)

奈瑟氏菌屬和莫拉菌鑒定和藥敏試條同

嗜血桿菌

習(xí)腮應(yīng)寡十濕謾銑禍樹框坑僻勝萌富網(wǎng)列煌姿唆綻庸霄扶鑼雜索惜寬砍憊細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第89頁/共108頁需氧G+b的鑒定途徑根據(jù)抗酸染色（A）將其分為：

A+：分枝桿菌、奴卡氏菌

A-

：李斯特菌屬，芽胞桿菌屬、棒狀桿菌屬、乳酸桿菌屬、丹毒絲菌屬等閱局蘋灶粘瓜榨式葷炎趙境掛潭嘲澄亦老喲決稗彎徊租括泡舅寄氨激凄惕細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第90頁/共108頁需氧G+b的鑒定途徑屬間鑒定，通過觸酶和動(dòng)力試驗(yàn)加以初步確定觸酶（+）

+

動(dòng)力

-

李斯特菌屬棒狀桿菌屬芽胞桿菌屬

磋曬砂括勵(lì)萍限馭毗孝墑辭兢娩涌嚼政怯棋掣適股堯鍬汗彌雁瘁傻淤殊法細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第91頁/共108頁需氧G+b的鑒定途徑屬間鑒定，通過觸酶和動(dòng)力試驗(yàn)加以初步確定觸酶（-）動(dòng)力（-）

乳酸桿菌屬丹毒絲菌屬欠眷裁攆幼境封帕顱鱗虛玫遇永嚴(yán)汽汞衍申貨吳撕僅鳴嗽隊(duì)鶴喉委轅鹵制細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件細(xì)菌的培養(yǎng)及鑒定思路ppt課件第92頁/共108頁棒狀桿菌屬臨床上以白喉棒狀桿菌