安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)

TORCH-IgG抗體親和力檢測(cè)鄭州安圖生物工程股份有限企業(yè)安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第1頁(yè)提要抗體親和力定義TORCH抗體親和力檢測(cè)意義TORCH抗體親和力檢測(cè)現(xiàn)實(shí)狀況安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)試劑盒安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第2頁(yè)抗體親和力是整個(gè)抗體分子與抗原表位之間結(jié)合強(qiáng)度，即抗體結(jié)合部位與對(duì)應(yīng)抗原決定簇之間非共價(jià)引力與斥力之和?？贵w親和力（Avidity）定義安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第3頁(yè)抗體親和力成熟理論首次感染產(chǎn)生抗體為低親和力抗體，伴隨時(shí)間推移，體內(nèi)抗體逐步成熟為高親和力抗體，普通需要3-6個(gè)月時(shí)間?！裟０鍖W(xué)說(shuō)（Templatetheory）◆克隆選擇學(xué)說(shuō)（Clonalselectiontheory）安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第4頁(yè)模板學(xué)說(shuō)（Templatetheory）免疫系統(tǒng)在按照抗原（模版）來(lái)制造更高親和力抗體安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第5頁(yè)B體細(xì)胞高頻突變BBBBYYYYYYYYYYBYYYYYYYYYY原發(fā)感染3~6個(gè)月克隆選擇學(xué)說(shuō)（Clonalselectiontheory）免疫系統(tǒng)對(duì)高親和力抗體篩選過(guò)程安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第6頁(yè)TORCH抗體親和力檢測(cè)意義胎兒出生缺點(diǎn)風(fēng)險(xiǎn)與原發(fā)感染/復(fù)發(fā)感染、感染發(fā)生時(shí)間、孕周親密相關(guān)判斷原發(fā)感染或復(fù)發(fā)感染判斷原發(fā)感染發(fā)生時(shí)間TORCH規(guī)范化檢測(cè)流程主要步驟安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第7頁(yè)安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第8頁(yè)對(duì)于巨細(xì)胞病毒IgM抗體陽(yáng)性樣本，需要結(jié)合IgG抗體親和力結(jié)果進(jìn)行分析。IgM抗體陽(yáng)性，同時(shí)IgG抗體低親和力，有較高風(fēng)險(xiǎn)。安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第9頁(yè)美國(guó)帕洛艾爾托醫(yī)療基金會(huì)弓形蟲(chóng)確認(rèn)試驗(yàn)室，將弓形蟲(chóng)IgG親和力抗體檢測(cè)列為確認(rèn)方法之一，用于排除假陽(yáng)性及非急性感染。安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第10頁(yè)對(duì)IgM抗體陽(yáng)性或可疑樣本，進(jìn)行IgG抗體親和力檢測(cè)很有價(jià)值，假如IgG抗體為低親和力，再進(jìn)行羊水穿刺PCR檢測(cè)是適當(dāng)選擇。對(duì)生殖器皰疹患者單純皰疹病毒IgG抗體親和力檢測(cè)能夠區(qū)分原發(fā)和復(fù)發(fā)感染。安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第11頁(yè)使用敏感方法檢測(cè)TORCHIgG/IgMIgG-IgM-IgG+IgM-IgG+IgM+IgG-IgM+孕期衛(wèi)生教育無(wú)需深入檢測(cè)讓患者3周后再檢測(cè)孕期≤20周孕期＞20周IgG親和力檢測(cè)IgG親和力檢測(cè)高親和力低親和力高親和力無(wú)需深入檢測(cè)高度傳染性回顧性檢測(cè)前三個(gè)月樣本IgG-IgM-和IgG-IgM+IgG+IgM-IgG+IgM+低親和力IgGIgG+IgM+高親和力IgG高度傳染性復(fù)發(fā)低傳染性高度傳染性無(wú)需深入檢測(cè)可深入檢測(cè)母體病毒血癥評(píng)定：尿液PCR、血液PCR胎兒健康度評(píng)定：超聲、MRI侵入性檢測(cè)：羊膜穿刺、定量PCR超聲、MRI案例分析1MunroSC,etal.JClinmicrobiol,,43:4713-4718安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第12頁(yè)使用敏感方法檢測(cè)TORCHIgG/IgMIgG-IgM-IgG+IgM-IgG+IgM+IgG-IgM+孕期衛(wèi)生教育無(wú)需深入檢測(cè)讓患者3周后再檢測(cè)孕期≤20周孕期＞20周IgG親和力檢測(cè)IgG親和力檢測(cè)高親和力低親和力高親和力無(wú)需深入檢測(cè)高度傳染性回顧性檢測(cè)前三個(gè)月樣本IgG-IgM-和IgG-IgM+IgG+IgM-IgG+IgM+低親和力IgGIgG+IgM+高親和力IgG高度傳染性復(fù)發(fā)低傳染性高度傳染性無(wú)需深入檢測(cè)可深入檢測(cè)母體病毒血癥評(píng)定：尿液PCR、血液PCR胎兒健康度評(píng)定：超聲、MRI侵入性檢測(cè)：羊膜穿刺、定量PCR超聲、MRI案例分析2MunroSC,etal.JClinmicrobiol,,43:4713-4718安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第13頁(yè)TORCH抗體親和力檢測(cè)現(xiàn)實(shí)狀況試劑盒檢測(cè)原理：解離劑法和抗原中和法，解離劑法是主流方法。試劑盒檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫法、自動(dòng)化化學(xué)發(fā)光法，酶聯(lián)免疫法較多。國(guó)內(nèi)，對(duì)TORCH親和力研究較少，僅有少許文件報(bào)道了IgG親和力檢測(cè)臨床意義，在臨床上還沒(méi)有得以真正利用。國(guó)外，對(duì)TORCHIgG親和力強(qiáng)弱與感染時(shí)間關(guān)系做了許多研究工作，雅培，索林和梅里埃等很多廠(chǎng)家抗體親和力試劑盒都取得了FDA或CE認(rèn)證，用于TORCH感染輔助診療。巨細(xì)胞病毒和弓形蟲(chóng)抗體親和力檢測(cè)應(yīng)用普遍。各廠(chǎng)家試劑盒檢測(cè)結(jié)果存在差異。安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第14頁(yè)抗體親和力檢測(cè)方法經(jīng)過(guò)解離劑將低親和力抗體解離掉。經(jīng)過(guò)中和抗原將高親和力抗體中和掉。安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第15頁(yè)國(guó)內(nèi)取得同意文號(hào)產(chǎn)品及方法廠(chǎng)家及項(xiàng)目名稱(chēng)安圖DiaSorinRocheAbbottBiomerieuxCMV-IgGAVIELISA化學(xué)發(fā)光電化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光ELISA熒光RV-IgGAVIELISA////TOX-IgGAVIELISA化學(xué)發(fā)光電化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光ELISA熒光HSV-1IgGELISA////HSV-2IgGELISA//以后同意上市安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第16頁(yè)國(guó)外同意上市主要廠(chǎng)家及方法安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第17頁(yè)巨細(xì)胞病毒親和力試劑盒檢測(cè)結(jié)果比較安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第18頁(yè)安圖標(biāo)桿Radim、Euroimmun與臨床符合率優(yōu)于其它廠(chǎng)家，安圖產(chǎn)品研發(fā)以Radim為參比試劑盒。安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第19頁(yè)弓形蟲(chóng)親和力試劑盒檢測(cè)結(jié)果比較各廠(chǎng)家檢測(cè)結(jié)果差異不大低親和力結(jié)果可能不是急性感染高親和力結(jié)果能夠排除急性感染安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第20頁(yè)第一個(gè)國(guó)產(chǎn)TORCH五項(xiàng)抗體親和力檢測(cè)試劑盒（取得同意文號(hào)）國(guó)家十二五規(guī)劃863課題項(xiàng)目之一產(chǎn)品設(shè)計(jì)兼顧IgG檢測(cè)靈敏度和高值樣本OD值不超限產(chǎn)品原理：解離劑法產(chǎn)品方法：ELISA樣本稀釋?zhuān)?/100孔外稀釋反應(yīng)模式：30分鐘-10分鐘-30分鐘-10分鐘加樣量：稀釋后樣本、對(duì)照緩沖液、解離緩沖液、酶結(jié)合物均100ul/孔。波長(zhǎng)設(shè)置：450/620nm雙波長(zhǎng)讀數(shù)，假如樣本OD值>3.0，用405/620nm雙波長(zhǎng)讀數(shù)。結(jié)果計(jì)算：親和力指數(shù)=解離緩沖液孔OD值/對(duì)照緩沖液孔OD值×100%安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)試劑盒安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第21頁(yè)123456789101112

A○QL○S3○S7

AB○QL○S3○S7

BC○QH○S4

CD○QH○S4

DE○S1○S5

EF○S1○S5

FG○S2○S6

GH○S2○S6

H加樣模式安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第22頁(yè)BIOMEX血清轉(zhuǎn)化盤(pán)48份樣本親和力與感染時(shí)間關(guān)系BIOMEX48份血清轉(zhuǎn)化盤(pán)感染時(shí)間小于80天，其中33份樣本為IgG陽(yáng)性，均為低親和力，靈敏度為100%。RV

血

清

轉(zhuǎn)

化

盤(pán)安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第23頁(yè)圖1：安圖試劑盒CMV-IgG抗體親和力水平隨感染時(shí)間改變圖2：AbbottATCHIT試劑盒CMV-IgG抗體親和力水平隨感染時(shí)間改變CMV血

清

轉(zhuǎn)

化

盤(pán)安圖試劑盒在感染100天后檢測(cè)基本為高親和力AbbottATCHIT試劑盒在感染后120天仍為低親和力。安圖TORCH抗體親和力檢測(cè)第24頁(yè)IgG+IgM-既往感染樣本評(píng)價(jià)項(xiàng)目名稱(chēng)總樣本數(shù)量高親和力灰區(qū)低親和力特異性CMV