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細(xì)菌一般染色方法演示文稿現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日優(yōu)選細(xì)菌一般染色方法現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日細(xì)菌染色意義由于細(xì)菌個(gè)體微小,基本上無(wú)色透明,故將其用適當(dāng)染料染色觀察,方能顯示它的形態(tài)、大小、構(gòu)造及染色特性等,在細(xì)菌鑒別上有重要意義。革蘭染色是細(xì)菌學(xué)中使用最廣泛的一種染色方法,籍此染色法,可將所有細(xì)菌區(qū)分為兩大類(lèi)?,F(xiàn)在是4頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日細(xì)菌染色方法及原理
常采用美藍(lán),結(jié)晶紫等堿性染料進(jìn)行染色。多數(shù)染料都是中性有機(jī)鹽。據(jù)著色基的不同可分為以下類(lèi)型:
堿性染料(basicdye)—帶正電染料。其陽(yáng)離子部分為發(fā)色基團(tuán),可與細(xì)胞中帶負(fù)電的組分結(jié)合。酸性染料(Aciddye)—帶負(fù)電染料。其陰離子部分為發(fā)色基團(tuán),可與細(xì)胞中帶正電的組分結(jié)合?,F(xiàn)在是5頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日革蘭染色原理細(xì)菌的等電點(diǎn)較低,約在pH2~5之間,故在中性、堿性或弱堿性溶液中,菌體蛋白質(zhì)電離后帶負(fù)電荷,易與帶正電荷的堿性染料如龍膽紫及堿性復(fù)紅等結(jié)合,使細(xì)菌被染成紫色或紅色。現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日一、細(xì)菌染色標(biāo)本片的制備細(xì)菌染色檢查,首先要進(jìn)行細(xì)菌標(biāo)本制備。制備細(xì)菌標(biāo)本一般包括涂片、干燥、固定三步。現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日固定的目的和方法使細(xì)菌的細(xì)胞凝固,使菌體與玻片粘得更牢固可改變菌體對(duì)染料的通透性加熱固定可殺死細(xì)菌,比較安全固定的方法將制成的標(biāo)本勻速通過(guò)火焰三次現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日革蘭染色染色:初染(結(jié)晶紫)媒染
(碘液)脫色(酒精)
復(fù)染(復(fù)紅)濾紙吸干油鏡鏡檢safraninCrystalviolet現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日染色步驟結(jié)晶紫初染盧戈碘液媒染95%乙醇脫色復(fù)紅復(fù)染(2)(3)(1)(4)1分鐘水洗1分鐘水洗30秒水洗30秒水洗吸干現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日Germisstainedvioletorred現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日結(jié)晶紫初染1分鐘水洗
現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日碘液媒染1分鐘
水洗現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日酒精脫色30秒水洗現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日
復(fù)紅復(fù)染30秒水洗現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日濾紙吸干油鏡鏡檢現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日抗酸染色法(acid-faststain)分枝桿菌屬的細(xì)菌(包括結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌等)為抗酸性細(xì)菌,一般染色法不易著色,須用抗酸染色法。注意事項(xiàng)涂片要略厚加溫染色或延長(zhǎng)染色時(shí)間,加溫時(shí)隨時(shí)補(bǔ)加染色液分枝桿菌呈紅色(+)其他細(xì)菌和背景為藍(lán)色(-)?,F(xiàn)在是17頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日操作過(guò)程取痰液→涂片(略厚)→干燥→固定→石炭酸復(fù)紅加溫染色8~10分鐘后→用3%的鹽酸酒精脫色約1~2分鐘,脫色時(shí)輕搖玻片,直到涂片顏色脫去為止水洗后,用堿性美藍(lán)復(fù)染1分鐘→水洗,印干→鏡檢現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日形態(tài):細(xì)長(zhǎng),略彎曲的桿菌,多聚集成團(tuán)。無(wú)鞭毛,芽胞。染色性:不易著色,抗酸染色陽(yáng)性。菌體呈紅色,背景中其他物質(zhì)藍(lán)色。結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis)現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日細(xì)菌基本形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察基本形態(tài)球菌桿菌弧菌特殊結(jié)構(gòu)芽孢枯草桿菌,破傷風(fēng)梭菌莢膜肺炎球菌鞭毛變形桿菌葡萄球菌鏈球菌肺炎球菌腦膜炎球菌革蘭陽(yáng)性革蘭陰性現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有27頁(yè)\編輯于星期日肺炎(雙)球菌莢膜現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有27
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