細胞工程專家講座

體外受精和早期胚胎培養(yǎng)卵母細胞搜集和培養(yǎng)對不一樣動物,采取卵母細胞方法不一樣細胞工程專家講座第1頁

精子搜集和獲能

1)搜集方法:假陰道法,手握法和電刺激等2)獲能處理:培養(yǎng)法：嚙齒動物、家兔和豬化學法：牛、羊細胞工程專家講座第2頁受精在獲能溶液或?qū)Ｓ檬芫芤褐型瓿墒芫^程細胞工程專家講座第3頁胚胎早期培養(yǎng)培養(yǎng)液:

水、無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動物血清等.細胞工程專家講座第4頁采集良種母牛卵母細胞卵母細胞體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場采集卵巢中卵母細胞“試管?！惫S化生產(chǎn)技術(shù)流程圖細胞工程專家講座第5頁胚胎移植現(xiàn)實狀況和意義1)加速育種工作和品種改良；2)大量節(jié)約購置種畜費用；3)一胎多產(chǎn)；4)保留品種資源和瀕危物種；5)可充分發(fā)揮優(yōu)異個體繁殖潛能縮短繁殖周期,增加一生繁殖后代數(shù)量。細胞工程專家講座第6頁試管嬰兒技術(shù)第一代試管嬰兒（invitrofertilization,IVF體外受精）第二代試管嬰兒(intracytoplasmicsperminjection,ICSI單精子卵細胞漿內(nèi)注射)第三代試管嬰兒（pre-implantationgeneticdiagnosis,PGD胚胎植入前診療)細胞工程專家講座第7頁單精子卵細胞漿內(nèi)注射（ICSI）示意圖以下：細胞工程專家講座第8頁試管嬰兒與分子生物學聯(lián)絡(luò)

植入前遺傳診療即PGD:指對配子或移入到子宮腔之前胚胎進行遺傳學分析，去除有遺傳缺點配子或胚胎。1989年，英國Handyside成功地用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)分析卵裂球性別組成，完成了世界上第一例PGD診療,我國首例1998年在中山醫(yī)科大學生殖醫(yī)學中心誕生。PGD是輔助生育技術(shù)與分子生物學技術(shù)相結(jié)合而發(fā)展產(chǎn)前診療技術(shù)細胞工程專家講座第9頁第三代試管嬰兒與分子生物學聯(lián)絡(luò)

植入前遺傳診療即PGD:指對配子或移入到子宮腔之前胚胎進行遺傳學分析，去除有遺傳缺點配子或胚胎。1989年，英國Handyside成功地用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)分析卵裂球性別組成，完成了世界上第一例PGD診療,我國首例1998年在中山醫(yī)科大學生殖醫(yī)學中心誕生。PGD是輔助生育技術(shù)與分子生物學技術(shù)相結(jié)合而發(fā)展產(chǎn)前診療技術(shù)細胞工程專家講座第10頁PGD取材極體細胞卵裂球細胞囊胚期細胞細胞工程專家講座第11頁PGD:

Genetictestingperformedpriortoembryotransfer細胞工程專家講座第12頁PGD應(yīng)用前景遺傳病診療（優(yōu)生）疾病治療（干細胞）拯救瀕危珍稀動物研究人類基因在發(fā)育早期表示（人類腫瘤易感綜合征易感性分析）細胞工程專家講座第13頁PGD展望多重突變分析多重PCR，間期核轉(zhuǎn)換，全基因組擴增（wholegenomeamplificatio，WGA），基因芯片，微流控診療標準化倫理學研究相關(guān)領(lǐng)域研究：1、人類胚胎體外有效培養(yǎng)和定向誘導分化

2、人體基因在胚胎早期特異表示細胞工程專家講座第14頁PCR和FISH不足盡管PCR在PGD中起了主要作用，但PCR對單個細胞擴增失敗率高。因為取得細胞數(shù)目極少，而致使對單個細胞只能作一次分析，不能重復試驗結(jié)果。等位基因脫失對45XO或YO，18單體核型胚胎細胞，F(xiàn)ISH診療可能存在錯誤，出現(xiàn)這一結(jié)果時有兩種可能，一是被檢測單個細胞就是單體核型細胞；也能夠是技術(shù)方法問題未能顯示另一個雜交信號，F(xiàn)ISH信號尚缺乏統(tǒng)一標準細胞工程專家講座第15頁實時熒光PCR檢測單個地貧基因突變分離已知基因型外周血標本單個淋巴細胞，用巢式PCR外引物進行第一輪擴增，第二輪用TaqMan探針進行對應(yīng)基因型實時PCR檢測，其中不一樣熒光匯報基團標識探針分別與正常、異常等位基因特異雜交，結(jié)合各熒光終點改變及其實時動力學曲線判斷對應(yīng)等位基因存在是否。使單個堿基突變更敏感地干擾不匹配探針與等位基因間退火，更有效地檢測出匹配探針與等位基因間結(jié)合優(yōu)點：快速、有效防污染、靈敏性高細胞工程專家講座第16頁試管嬰兒開始世界上第一個試管嬰兒于1978年7月25日在英國奧爾德姆市醫(yī)院誕生，她名字叫路易絲.布朗。1988年北京醫(yī)科大學第三醫(yī)院誕生了我國內(nèi)地第一位試管嬰兒培養(yǎng)在恒溫器中受精卵。恒溫器溫度保持在與人體溫度相同攝氏37度

4歲8個月大路易絲和她妹妹、一樣是試管嬰