婦科感染常見(jiàn)病原菌及檢測(cè)方法

婦科感染常見(jiàn)病原菌及檢測(cè)方法目前一頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)婦科感染常見(jiàn)疾病陰道病/陰道炎尿道炎子宮頸炎盆腔感染子宮內(nèi)膜炎輸卵管－卵巢膿腫輸卵管炎癥目前二頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)婦科感染實(shí)驗(yàn)室檢查的意義很多婦科感染癥狀、體征有很多相似之處。臨床診斷本身既不敏感，也不特異。

實(shí)驗(yàn)室診斷可以：明確病原微生物，使治療更具針對(duì)性；提高患者治療依從性；使患者更有可能遵從性伴侶告知。目前三頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)病例一患者，女性，24歲，已婚，孕25周。外陰瘙癢一周來(lái)就診。婦檢：宮高與妊娠月份相符,外陰潮紅、充血，見(jiàn)大量黃色膿性分泌物?？紤]什么病？進(jìn)一步做什么檢查？目前四頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)陰道炎正常情況下陰道內(nèi)寄居有大量需氧菌及厭氧菌，形成正常的陰道菌群。任何原因?qū)㈥幍谰荷鷳B(tài)平衡打破，可形成條件致病菌，引起陰道炎。陰道粘膜生態(tài)系統(tǒng)目前五頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)陰道炎臨床常見(jiàn)有：細(xì)菌性陰道病、念珠菌性陰道炎、滴蟲(chóng)性陰道炎。吳文湘,廖秦平.陰道炎的診治進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2009(12):949-952.目前六頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)陰道炎相關(guān)病原實(shí)驗(yàn)室檢查常見(jiàn)病原因子診斷方法最優(yōu)標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)要求及最佳時(shí)間酵母菌（pH<4.5）鹽水濕片和10％KOH

陰道分泌物拭子置于0.5mL生理鹽水或轉(zhuǎn)運(yùn)拭子，室溫，2h培養(yǎng)陰道分泌物拭子轉(zhuǎn)運(yùn)拭子送檢，室溫，12hDNA雜交探針

陰道分泌物拭子室溫，7d細(xì)菌性陰道?。╬H>4.5）鹽水濕片和

10％KOH

陰道分泌物拭子置于0.5mL生理鹽水或轉(zhuǎn)運(yùn)拭子，室溫，2h定量革蘭染色

陰道分泌物拭子轉(zhuǎn)運(yùn)拭子送檢，室溫，12hDNA雜交探針

陰道分泌物拭子室溫，7d毛滴蟲(chóng)（pH>4.5）鹽水濕片

陰道分泌物拭子置于鹽水送檢，室溫，30min（最佳）－2h快速抗原檢查陰道上皮/分泌物拭子轉(zhuǎn)運(yùn)拭子或鹽水送檢，室溫，24hDNA雜交探針陰道分泌物拭子室溫，7d培養(yǎng)陰道分泌物拭子直接放入InPouchTV培養(yǎng)系統(tǒng)送檢室溫，

48h核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)陰道拭子、宮頸拭子、尿液、液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本、尿道拭子、直腸拭子、咽拭子室溫，7d目前七頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)病例1患者，女性，24歲，已婚，孕25周。外陰瘙癢一周來(lái)就診。婦檢：宮高與妊娠月份相符,外陰潮紅、充血，見(jiàn)大量黃色膿性分泌物。醫(yī)生：根據(jù)病史及臨床表現(xiàn)可初步診斷為陰道炎。取陰道分泌物拭子，囑病人立即送檢，以明確病原學(xué)診斷。目前八頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)念珠菌性陰道炎主要病原菌為：

白色假絲酵母菌約占80%-90%

光滑假絲酵母菌

熱帶假絲酵母菌

近平滑假絲酵母菌約占10%-20%目前九頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)念珠菌性陰道炎的實(shí)驗(yàn)室診斷1.pH<4.52.鹽水濕片+10%KOH3.培養(yǎng)4.DNA雜交探針目前十頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)鹽水濕片和10％KOH檢出孢子及假菌絲即可確診。目前十一頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)培養(yǎng)復(fù)發(fā)病例或有癥狀，但鹽水/KOH鏡檢陰性時(shí)考慮培養(yǎng)。目前十二頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)

DNA雜交探針不需要活的微生物需要特殊轉(zhuǎn)運(yùn)管僅針對(duì)白色假絲酵母菌FDA批準(zhǔn)僅用于有癥狀女性陰道分泌物

目前十三頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)細(xì)菌性陰道病(BV)陰道正常菌群（乳酸桿菌）減少，而其他條件致病菌大量繁殖。主要致病菌有：陰道加德納菌、動(dòng)彎桿菌、普雷沃菌等厭氧菌和支原體等。FredricksDN,FiedlerTL,MarrazzoJM.Molecularidentificationofbacteriaassociatedwithbacterialvaginosis.[J].NewEnglandJournalofMedicine,2005,353(353):1899-911.目前十四頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)陰道加德納菌為革蘭陰性或染色不定的球桿菌，有細(xì)胞壁，無(wú)鞭毛，不形成莢膜和芽孢。兼性厭氧最適溫度：時(shí)35℃-37℃最適PH：目前十五頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)陰道加德納菌革蘭染色：大?。?.5μm×1.5-2.5μm形態(tài)：具有多形性，呈小桿狀或球狀排列：呈單個(gè)或成雙排列目前十六頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)動(dòng)彎桿菌為厭氧菌革蘭陰性弧菌形態(tài)：呈弧形，兩端尖細(xì)排列：呈單個(gè)或呈雙排列目前十七頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)細(xì)菌性陰道病的實(shí)驗(yàn)室診斷1.pH>4.52.鹽水濕片+10%KOH3.定量革蘭染色——Nugent評(píng)分4.DNA雜交探針線(xiàn)索細(xì)胞KOH氫氧化鉀目前十八頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)鹽水濕片線(xiàn)索細(xì)胞是診斷BV的最敏感特異的指標(biāo)。目前十九頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)胺試驗(yàn)將一滴陰道分泌物滴于玻片上，再加一滴10％KOH，可聞到氨味或魚(yú)腥樣氣味，即胺試驗(yàn)陽(yáng)性。10%KOH氫氧化鉀目前二十頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分定量革蘭染色是BV診斷最特異的檢查。形態(tài)類(lèi)別每個(gè)油鏡視野菌體數(shù)/分值得分0≤11-55-30>30加德納菌/普雷沃菌(革蘭染色不定、球桿菌)01234動(dòng)彎桿菌01234乳酸桿菌43210目前二十一頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分乳酸桿菌革蘭染色目前二十二頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分陰道加德納菌革蘭染色目前二十三頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分動(dòng)彎桿菌革蘭染色目前二十四頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分線(xiàn)索細(xì)胞革蘭染色目前二十五頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分分?jǐn)?shù)解釋標(biāo)準(zhǔn)：0-3分正常4-7分中介

7-10分細(xì)菌性陰道炎目前二十六頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分乳酸桿菌0分，上皮細(xì)胞周?chē)浅Ｇ宄?。評(píng)分：0分目前二十七頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分乳酸桿菌0分，少量雜菌，見(jiàn)白細(xì)胞和菌絲。評(píng)分：1分診斷：BV陰性，但診斷為VVC目前二十八頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分乳酸桿菌2分，加德納菌/普雷沃菌等3分，動(dòng)彎桿菌1分。評(píng)分：6分診斷：BV中間型目前二十九頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)定量革蘭染色——Nugent評(píng)分乳酸桿菌3分，加德納菌/普雷沃菌等3分，動(dòng)彎桿菌4分。評(píng)分：10分診斷：BV目前三十頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)陰道毛滴蟲(chóng)陰道的致病性厭氧寄生原蟲(chóng)，蟲(chóng)體為8-45μm，呈梨形或橢圓形，無(wú)色透明，大小為白細(xì)胞的2-3倍。目前三十一頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)毛滴蟲(chóng)性陰道炎的實(shí)驗(yàn)室診斷1.pH>4.52.鹽水濕片3.快速抗原檢查4.DNA雜交探針5.培養(yǎng)6.核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)?zāi)壳叭?yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)鹽水濕片目前三十三頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)革蘭染色目前三十四頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)快速抗原檢查檢測(cè)陰道毛滴蟲(chóng)特定的抗原已有商品化試劑最優(yōu)試驗(yàn)條件并不需要活的微生物目前三十五頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)培養(yǎng)目前三十六頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)核酸擴(kuò)增試驗(yàn)APTIMATrichomonasvaginalis(ATV)test（Gen-Probe,Inc.SanDiego,CA）是近期FDA批準(zhǔn)的檢查，既可用于女性TV的篩檢，也可用于診斷?？梢允褂枚喾N標(biāo)本類(lèi)型。一些實(shí)驗(yàn)室也可通過(guò)比對(duì)，驗(yàn)證自己的PCR方法。目前三十七頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)病例二患者，女性，40歲，已婚，陰道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血2年。檢查外陰正常，宮頸肥大，Ⅲ度糜爛，接觸性出血?？紤]什么病？進(jìn)一步做什么檢查？目前三十八頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)子宮頸炎子宮頸可因各種致病因素的侵襲而發(fā)生炎癥，有急性和慢性?xún)煞N。疾病致病菌急性宮頸炎沙眼衣原體、淋病奈瑟菌慢性宮頸炎性傳播病原體：沙眼衣原體、淋病奈瑟菌、單純皰疹病毒內(nèi)源性病原體：葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌等；部分與引起陰道炎的病原菌相同目前三十九頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)尿道炎是指尿道黏膜的炎癥。多為致病菌逆行侵入尿道引起。疾病致病菌淋病性尿道炎淋病奈瑟菌非淋病性尿道炎沙眼衣原體、解脲支原體、陰道毛滴蟲(chóng)、嗜血短桿菌、單純皰疹病毒最常見(jiàn)非特異性尿道炎大腸埃希桿菌、鏈球菌屬及葡萄球菌屬目前四十頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)尿道炎/宮頸炎相關(guān)病原實(shí)驗(yàn)室檢查常見(jiàn)病原因子診斷方法最優(yōu)標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)要求及最佳時(shí)間沙眼衣原體

核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)?zāi)蛞?、宮頸內(nèi)、陰道和/或尿道拭子（直腸、咽部、結(jié)膜、液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本）實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置，室溫，2d

雜交探針宮頸內(nèi)或尿道拭子實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置，室溫，2d

培養(yǎng)宮頸內(nèi)、尿道、結(jié)膜、NP、咽、直腸拭子實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置，4℃冷藏；<

2h

直接免疫熒光染色結(jié)膜拭子轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基，室溫，2h淋病奈瑟菌

革蘭染色

尿道分泌物直接涂片或?qū)⑹米又糜谵D(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基，室溫，立即核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)?zāi)蛞?、宮頸內(nèi)、陰道和/或尿道拭子（直腸、咽部、結(jié)膜、液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本）實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置，室溫，2d

雜交探針宮頸內(nèi)或尿道拭子實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置，室溫，2d

培養(yǎng)宮頸內(nèi)、尿道、結(jié)膜、NP、咽、直腸拭子轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基，室溫，≤

1h，不要冷藏標(biāo)本目前四十一頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)尿道炎/宮頸炎相關(guān)病原實(shí)驗(yàn)室檢查常見(jiàn)病原因子診斷實(shí)驗(yàn)最優(yōu)標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)要求及最佳時(shí)間陰道毛滴蟲(chóng)鹽水濕片

宮頸內(nèi)或尿道拭子置于0.5mL鹽水，30min-2h

快速抗原檢查宮頸內(nèi)拭子實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置，室溫，24h

雜交探針宮頸內(nèi)或陰道拭子實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置，室溫，7d

培養(yǎng)宮頸內(nèi)或尿道拭子直接接種在InPouchTV培養(yǎng)系統(tǒng)，2-5d核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)陰道、宮頸內(nèi)拭子，尿，液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本，尿道、直腸、咽部拭子實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置，室溫，2d

HSV直接免疫熒光染色病變基底部刮取床邊制片，室溫，24h培養(yǎng)病變基底部刮取置于VTM/UTM，室溫或置于冰上，2h核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)病變基底部刮取或分泌物拭子實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置目前四十二頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)病例二患者，女性，40歲，已婚，陰道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血2年。檢查外陰正常，宮頸肥大，Ⅲ度糜爛，接觸性出血。醫(yī)生：根據(jù)臨床表現(xiàn)初步診斷為宮頸炎。取宮頸內(nèi)拭子，囑病人立即送檢（注意保溫），以明確感染病原體。目前四十三頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)淋病奈瑟菌革蘭染色

為革蘭陰性雙球菌，似腎形或咖啡豆?fàn)睿３呻p排列，凹面相對(duì)。

急性淋病患者的淋球菌常被吞噬于中性粒細(xì)胞內(nèi)；慢性淋病患者的淋球菌多分布在細(xì)胞外。

簡(jiǎn)便、快速，可做出初步診斷。僅對(duì)男性患者進(jìn)行涂片革蘭染色。

目前四十四頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)淋病奈瑟菌細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌——對(duì)GC特異性達(dá)95％細(xì)胞外革蘭陰性雙球菌——對(duì)GC特異性達(dá)10-29％目前四十五頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)培養(yǎng)診斷淋病的重要手段接種到選擇培養(yǎng)基，置于36℃、含5-10%CO2

，濕潤(rùn)環(huán)境中培養(yǎng)。如果床邊直接接種標(biāo)本到選擇培養(yǎng)基，加CO2

藥片形成氣體環(huán)境，培養(yǎng)敏感性會(huì)更好。目前四十六頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)培養(yǎng)初代培養(yǎng)生長(zhǎng)緩慢，24小時(shí)后可形成灰色/濕潤(rùn)、半透明的小菌落（直徑0.5-1mm）。氧化酶陽(yáng)性、觸酶陽(yáng)性、葡萄糖產(chǎn)酸試驗(yàn)陽(yáng)性且僅分解利用葡萄糖。圖片by陳東科目前四十七頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)核酸擴(kuò)增試驗(yàn)已有商品化試劑盒。優(yōu)點(diǎn)是快速、準(zhǔn)確，缺點(diǎn)是試驗(yàn)設(shè)備要求高。淋病奈瑟菌DNA在感染成功治療后，在標(biāo)本中仍可保留3周之久，所以不能作為治療評(píng)估指標(biāo)。目前四十八頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)雜交探針目前FDA已有批準(zhǔn)的GC的雜交試驗(yàn)試劑盒。不可針對(duì)尿標(biāo)本。目前四十九頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)病例三病人，女，24歲，主訴為持續(xù)3天的輕度排尿困難，化膿性陰道分泌物，發(fā)熱，并伴有中度的雙側(cè)下腹痛。查體：子宮和附件壓痛，化膿性宮頸分泌物?？紤]什么?。窟M(jìn)一步做什么檢查？目前五十頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)盆腔炎盆腔炎癥性疾病是女性上生殖道一系列疾病的總稱(chēng)。包括：

子宮內(nèi)膜炎

輸卵管－卵巢膿腫

輸卵管炎癥

盆腔腹膜炎

目前五十一頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)盆腔炎致病菌盆腔炎外源性病原體內(nèi)源性病原體主要為性傳播疾病病原體：淋病奈瑟菌、沙眼衣原體、支原體等來(lái)自于原寄生于陰道的正常菌群，包括：需氧菌和厭氧菌目前五十二頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)內(nèi)源性病原體需氧菌及兼性厭氧菌：

金黃色葡萄球菌、鏈球菌、大腸埃希菌、

陰道加德納菌等厭氧菌：

脆弱擬桿菌、消化鏈球菌、普雷沃菌、真桿菌等感染特點(diǎn)：容易形成盆腔膿腫、感染性血栓靜脈炎，膿液有糞臭并有氣泡目前五十三頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)盆腔炎相關(guān)病原實(shí)驗(yàn)室檢查常見(jiàn)病原因子診斷方法最優(yōu)標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)要求及最佳時(shí)間混合厭氧菌陰道菌從腸桿菌科、鏈球菌、支原體血培養(yǎng)和AST來(lái)評(píng)估少見(jiàn)病原血，20mL注入2瓶，靜脈穿刺采集床邊注入血培養(yǎng)瓶，室溫，1h革蘭染色需氧和厭氧培養(yǎng)子宮內(nèi)膜，輸卵管-卵巢膿腫和/或輸卵管內(nèi)容物置入或注入無(wú)菌厭氧容器，室溫，30min子宮內(nèi)膜炎組織學(xué)證據(jù)子宮內(nèi)膜活檢無(wú)菌容器，室溫，30min福爾馬林容器，室溫，30min-4h淋病奈瑟菌沙眼衣原體陰道毛滴蟲(chóng)核酸擴(kuò)增試驗(yàn)?zāi)蛞?，宮頸內(nèi)拭子實(shí)驗(yàn)室提供轉(zhuǎn)運(yùn)裝置，室溫，2dHIVHIVEIA抗體血清促凝管，室溫，2h目前五十四頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)病例三病人，女，24歲，主訴為持續(xù)3天的輕度排尿困難，化膿性陰道分泌物，發(fā)熱，并伴有中度的雙側(cè)下腹痛。查體：子宮和附件壓痛，化膿性宮頸分泌物。醫(yī)生：根據(jù)臨床表現(xiàn)初步診斷為急性盆腔炎。進(jìn)一步送檢至少一套血培養(yǎng)，抽取膿腫置于厭氧容器盡快送檢，并取宮頸內(nèi)拭子送檢，必要時(shí)取子宮內(nèi)膜活檢，以明確感染病原體。目前五十五頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)盆腔炎相關(guān)厭氧菌培養(yǎng)流程分離培養(yǎng)挑取菌落需氧培養(yǎng)厭氧培養(yǎng)厭氧培養(yǎng)生長(zhǎng)不生長(zhǎng)生長(zhǎng)專(zhuān)性厭氧菌：做第二次耐氧試驗(yàn)形態(tài)染色菌落特征生化反應(yīng)藥敏鑒定氣相色譜厭氧（+）需氧（-）兼性厭氧菌標(biāo)本肉眼觀察染色鏡檢目前五十六頁(yè)\總數(shù)六十八頁(yè)\編于十點(diǎn)直接涂片染色鏡檢在接種時(shí)做涂片，革蘭染色并鏡檢：觀察膿細(xì)胞的有無(wú)及特殊情況，細(xì)菌與細(xì)