上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物學(xué)課程級(jí)第三章實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過(guò)人工培育和人工改造,

提供適用于科學(xué)研究,教學(xué),生產(chǎn),檢定以及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。

，對(duì)動(dòng)物攜帶的微生物,及其遺傳質(zhì)量，飼育環(huán)境等實(shí)行嚴(yán)格控制，緒論回顧1目前一頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物三大特點(diǎn)和專(zhuān)門(mén)用途遺傳：背景明確來(lái)源清楚特征顯著微生物和寄生蟲(chóng)：無(wú)特定疾病無(wú)特定病原體環(huán)境控制：物理、化學(xué)、生物、居住環(huán)境達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)緒論回顧2用作科學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)壳岸?yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)生物因素同種生物各種病原體包括病毒，細(xì)菌和寄生蟲(chóng)等

生物異種緒論回顧3目前三頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)第二節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)

和寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)分類(lèi)第三節(jié)合格動(dòng)物群中常見(jiàn)

微生物和寄生蟲(chóng)污染*第五節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)質(zhì)量檢測(cè)第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傳染病流行的基本環(huán)節(jié)及衛(wèi)生防疫*第十章生物安全目前四頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傳染病流行的基本環(huán)節(jié)及衛(wèi)生防疫

目前五頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體表、粘膜和消化道內(nèi)容物中微生物共生微生物叢病原體條件致病烈性傳染病對(duì)宿主有益對(duì)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生不良影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群全部毀滅影響人類(lèi)健康目前六頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)傳染源傳播途徑易感動(dòng)物傳染病流行的基本環(huán)節(jié)目前七頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)一、傳染源（1）人源性（2）動(dòng)物源性引起傳染的條件（1）要有病原性和一定的毒力（2）侵入體內(nèi)的病原體要達(dá)到一定的數(shù)量（3）病原體要有適當(dāng)?shù)那秩腴T(mén)戶(hù)目前八頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)二、傳播途徑

（1）直接傳染：健康動(dòng)物與患病動(dòng)物（包括攜帶病原體動(dòng)物）直接接觸而感染。如狂犬病毒、猴B病毒、艾滋病病毒等。

①水平傳播：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體中互相的傳播。傳播途徑包括消化道、呼吸道或皮膚粘膜創(chuàng)傷等。如沙門(mén)氏菌常經(jīng)消化道感染；仙臺(tái)病毒常經(jīng)呼吸道；布氏桿菌病常由配種直接感染等。②垂直傳播：由母體通過(guò)胎盤(pán)將病原體傳給胎兒，例如支原體、細(xì)小病毒等。目前九頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)（2）間接傳播——非生物性傳播：a、經(jīng)空氣飛沫、塵埃傳播；b、以飼料、墊料傳播；c、經(jīng)飲水和飲水用具傳播；d、經(jīng)籠器具傳播?！镄詡鞑ィ篴、節(jié)肢動(dòng)物：蒼蠅、蚊子、蟑螂、蚤、虱、蜱、螨等。b、野生動(dòng)物：野生嚙齒類(lèi)動(dòng)物，常攜帶各種病原體，例如攜帶流行性出血熱病毒的野鼠污染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的墊料、飼料。c、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：從外部購(gòu)入的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，未經(jīng)嚴(yán)格檢疫和隔離。d、操作人員不注意衛(wèi)生防疫傳染病原體；有些人獸共患病，也可經(jīng)人傳播給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，例如結(jié)核、布氏桿菌病等。目前十頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)——切斷傳播途徑是控制傳染病的主要措施。目前十一頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)三、易感動(dòng)物——與下列因素有關(guān)1）種類(lèi)（品系、品種）

2）年齡

3）營(yíng)養(yǎng)狀況

4）機(jī)體的抵抗力5）機(jī)體防御器官狀況目前十二頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

傳染源、傳播途徑和易感動(dòng)物是傳染病傳播的三個(gè)基本環(huán)節(jié)，缺少任何一個(gè)環(huán)節(jié)，新的傳染病就不可能發(fā)生，也不可能造成傳染病在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中的流行。而當(dāng)傳染病流行已經(jīng)形成時(shí)，切斷任何一個(gè)環(huán)節(jié)，流行即告終止。傳染源傳播途徑易感動(dòng)物目前十三頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

疫苗接種和藥物治療是預(yù)防傳染病的有效手段。

但是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般不采取疫苗接種和藥物治療，主要由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特殊性：

1、應(yīng)用疫苗或治療制劑可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2、經(jīng)過(guò)治療或免疫的動(dòng)物，外表健康，但可能是帶菌或帶毒者，可能成為潛在的傳染源。

3、對(duì)小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，治療措施可能在經(jīng)濟(jì)上不適宜。目前十四頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物衛(wèi)生防疫主要包括以下幾個(gè)方面的內(nèi)容：

1、平時(shí)的預(yù)防措施

消毒措施隔離措施

2、發(fā)生疫病時(shí)的撲滅措施

目前十五頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)消毒滅菌主要方法1.物理滅菌消毒（1）高壓蒸汽滅菌：飼料、墊料、器具等滅菌。

預(yù)真空蒸汽：131℃，4’；

一般蒸汽滅菌：121℃，20-25’。（2）高熱煮沸：器械、籠具、水瓶等消毒：100℃，20’。（3）干烤消毒：180-280℃，15~30’

。（4）火焰消毒：300℃，主要用于不銹鋼籠具、金屬器械、墻壁的消毒。（5）照射消毒滅菌：紫外線(xiàn)、γ-射線(xiàn)等，用于空氣、飼料、墊料和器具的消毒。（6）微波滅菌：工業(yè)微波爐，家用微波爐。小包裝飼料。目前十六頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

2.

化學(xué)消毒

是使用化學(xué)藥物噴灑、浸泡、擦拭、熏蒸等，以達(dá)到消毒滅菌的目的。常用化學(xué)消毒方法包括液體消毒和蒸汽消毒。

（1）液體消毒劑：包括石炭酸、過(guò)氧乙酸、來(lái)蘇水、次氯酸等。（2）熏蒸消毒：包括福爾馬林和三聚甲醛等。目前十七頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)第二節(jié)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)

和寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)分類(lèi)目前十八頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)分類(lèi)1.普通動(dòng)物（conventionalanimal）CV2.清潔動(dòng)物（cleananimal）CL3.無(wú)特定病原體動(dòng)物（specificpathogenfreeanimal)SPF4.無(wú)菌動(dòng)物（germfreeanimal）GF和悉生動(dòng)物（gnotobioticanimal)GN目前十九頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)一、普通動(dòng)物

conventionalanimal(CV)

必須是不攜帶主要人獸共患病原體和動(dòng)物烈性傳染病的病原體。目前二十頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

普通動(dòng)物

——飼育在開(kāi)放環(huán)境里,使用的墊料和飼料,只消毒不滅菌;其飲水須符合城市飲用水標(biāo)準(zhǔn)。

——普通動(dòng)物只能用于教學(xué)實(shí)驗(yàn)和某些科研工作的預(yù)實(shí)驗(yàn)。目前二十一頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

清潔動(dòng)物

cleananimal(CN)

必須是不攜帶主要人獸共患病原體和動(dòng)物烈性傳染病的病原體，

又不攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾大的病原體。

亦稱(chēng)最少疾病動(dòng)物,MinimalDiseaseanimal(MD)。目前二十二頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)清潔動(dòng)物

——生活在屏障環(huán)境中?！玫膲|料，飼料，飲水，手術(shù)器械和用具等均應(yīng)經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌消毒。——工作人員需穿戴無(wú)菌衣帽鞋、口罩、手套才能進(jìn)行飼育或?qū)嶒?yàn)操作。目前二十三頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)無(wú)特定病原體動(dòng)物

SpecificpathogenfreeAnimal(SPF)

又不攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾大的病原體；

還不攜帶主要潛在感染或條件致病菌和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原體的動(dòng)物。

不攜帶主要人獸共患病原體和動(dòng)物烈性傳染病的病原體；目前二十四頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

SPF動(dòng)物通常是:——隔離環(huán)境的無(wú)菌動(dòng)物或悉生動(dòng)物轉(zhuǎn)移到屏障環(huán)境內(nèi)飼養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。目前二十五頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

無(wú)菌動(dòng)物

germfreeanimal(GF)

動(dòng)物體內(nèi)外無(wú)可檢出的一切生命體的動(dòng)物。

此種動(dòng)物在自然界中并不存在,必須用人為的方法培育。目前二十六頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)無(wú)菌動(dòng)物的取得和飼育環(huán)境——子宮摘除術(shù)（剖腹產(chǎn)）——飼育在隔離環(huán)境（隔離器內(nèi)）——一切用品經(jīng)過(guò)嚴(yán)格包裝、嚴(yán)格滅菌后，通過(guò)傳遞倉(cāng)送入隔離器——通過(guò)手套進(jìn)行間接實(shí)驗(yàn)操作目前二十七頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)悉生動(dòng)物gnotobioticanimal(GN)

—?jiǎng)游矬w內(nèi)外所攜帶的生命體是已知的。

——人為的將指定微生物叢植入到無(wú)菌動(dòng)物體內(nèi)外。目前二十八頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)GF、GN和SPF隔離環(huán)境GF動(dòng)物植入GN動(dòng)物污染GF動(dòng)物

植入污染屏障環(huán)境SPF動(dòng)物目前二十九頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)分類(lèi)模擬圖人獸共患病原體、動(dòng)物烈性傳染病病原體動(dòng)物主要傳染病原體、對(duì)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原體條件致病病原體、影響實(shí)驗(yàn)德微生物所有微生物已知微生物普通級(jí)動(dòng)物清潔級(jí)動(dòng)物SPF級(jí)動(dòng)物無(wú)菌動(dòng)物悉生動(dòng)物目前三十頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)不同微生物學(xué)等級(jí)的

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物比較項(xiàng)目GFSPFCV傳染病無(wú)無(wú)有或可能有寄生蟲(chóng)無(wú)很少有或可能有實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確較準(zhǔn)確有疑問(wèn)應(yīng)用動(dòng)物數(shù)少量少量多或大量長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)效果可能好可能好困難死亡率很低低高長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)存活率約100％約90％40％左右實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)可能可能不可能統(tǒng)計(jì)價(jià)值很好較好不準(zhǔn)確實(shí)驗(yàn)結(jié)果的價(jià)值很高高有疑問(wèn)目前三十一頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)國(guó)家或國(guó)際組織動(dòng)物應(yīng)排除病毒項(xiàng)目ICLAS小鼠/大鼠14/9中國(guó)小鼠/大鼠5+6/7芬蘭小鼠/大鼠16/8日本小鼠/大鼠8/9美國(guó)小鼠/大鼠（9）10/8澳大利亞小鼠/大鼠13/8荷蘭小鼠/大鼠11/10目前三十二頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)國(guó)家或國(guó)際組織動(dòng)物細(xì)菌真菌支原體ICLAS小鼠/大鼠13/12中國(guó)小鼠/大鼠8+8/9+7芬蘭小鼠/大鼠11+9/10+9日本小鼠/大鼠10/10美國(guó)小鼠/大鼠（16）13/12澳大利亞小鼠/大鼠12/12荷蘭小鼠/大鼠7/18目前三十三頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)小鼠應(yīng)排除病毒項(xiàng)目

淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒漢坦病毒鼠痘病毒小鼠肝炎病毒仙臺(tái)病毒小鼠肺炎病毒呼腸孤病毒III型小鼠細(xì)小病毒小鼠腦脊髓炎病毒小鼠腺病毒多瘤病毒LymphocyticChoriomeningitisVirusHantavirusEctromeliaVirusMouseHepatitisVirusSendaiVirusPneumoniaVirusofMiceReovirustypeIIIMinuteVirusofmiceTheiler’sMouseEncephalomyelitisVirusMouseAdenovirusPolyomaVirus目前三十四頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)大鼠應(yīng)排除病毒項(xiàng)目

漢坦病毒仙臺(tái)病毒小鼠肺炎病毒呼腸孤病毒III型大鼠細(xì)小病毒RV株大鼠細(xì)小病毒H-1株大鼠冠狀病毒/大鼠延淚腺炎病毒HantavirusSendaiVirusPneumoniaVirusofMiceReovirustypeIIIRatParvovirusRatParvovirusRatCoronavirus/SialodacryoadenitisVirus目前三十五頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群中常見(jiàn)微生物

和寄生蟲(chóng)污染及其控制一.普通級(jí)動(dòng)物中弓形蟲(chóng)污染

二.清潔級(jí)動(dòng)物中的仙臺(tái)病毒和小鼠肝炎病毒的污染三.SPF級(jí)動(dòng)物中綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌細(xì)菌的污染目前三十六頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

弓形蟲(chóng)是一種人畜共患的寄生蟲(chóng)，小鼠，大鼠，地鼠，豚鼠，家兔和非人靈長(zhǎng)類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及貓，牛，羊，豬等都能感染。一.普通級(jí)合格動(dòng)物中弓形蟲(chóng)污染目前三十七頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

弓形蟲(chóng)是細(xì)胞內(nèi)寄生蟲(chóng)，根據(jù)不同發(fā)育階段分為五型：滋養(yǎng)體和包囊出現(xiàn)在中間宿主體內(nèi)，裂殖體，配子體和卵囊只出現(xiàn)在終宿主－－貓?bào)w內(nèi)。目前三十八頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)滋養(yǎng)體排出體外,發(fā)育成熟,具感染性卵囊口,鼻,咽,呼吸道粘膜,眼結(jié)膜和皮膚機(jī)體有免適疫宜

發(fā)育宿主體內(nèi)無(wú)性繁殖,引起發(fā)病急性力條無(wú)件癥下終宿主受精

宿主產(chǎn)生狀免疫力感染腸絨毛上皮細(xì)胞內(nèi)發(fā)育包囊裂殖體合子雌雄配子體滋養(yǎng)體經(jīng)貓消化道侵入腸上皮細(xì)胞發(fā)育繁殖目前三十九頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

危害性：

——弓形蟲(chóng)感染可引起腸粘膜和腸系膜淋巴，心、眼、腎上腺、脾、腦、肺、肝、胎盤(pán)及肌肉組織的壞死和損傷。

——小鼠感染后會(huì)嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

——影響妊娠期胎兒發(fā)育。目前四十頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

在病畜和帶蟲(chóng)者的肉、內(nèi)臟、血液、滲出液和排泄物中均有弓形蟲(chóng)，甚至從乳汁中也能分離出弓形蟲(chóng)，也可引起感染。目前四十一頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)弓形蟲(chóng)污染的預(yù)防

——實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施內(nèi)要保持清潔，定期消毒。——嚴(yán)格阻斷貓及其排泄物對(duì)設(shè)施、飼料、墊料和飲水的污染。——消滅野鼠，驅(qū)走野貓，不飼養(yǎng)一切寵物。目前四十二頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)二.清潔級(jí)合格動(dòng)物中的仙臺(tái)病毒和小鼠肝炎

病毒的污染目前四十三頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

現(xiàn)在認(rèn)為:嚙齒類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是仙臺(tái)病毒唯一自然宿主。

傳播途徑：鼻內(nèi)途徑，其它途徑均不引起小鼠的自然感染。目前四十四頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)不同品系小鼠對(duì)仙臺(tái)病毒感染的易感性和敏感性明顯不同。近交系SJL/j等死亡率接近0；Swiss裸鼠死亡率可接近100％。感染的裸鼠伴有進(jìn)行性消瘦。在較長(zhǎng)的時(shí)間里陸續(xù)死亡。目前四十五頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

普通級(jí)鼠群中仙臺(tái)病毒感染是最難控制的病毒感染之一。

凡新引進(jìn)的動(dòng)物必須經(jīng)8周檢疫(檢查引入動(dòng)物和“哨兵”動(dòng)物的病毒抗體)。"哨兵動(dòng)物"目前四十六頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

一旦在屏障環(huán)境內(nèi)的

鼠群中檢出仙臺(tái)病毒抗體陽(yáng)性，若不及時(shí)清除所有被感染動(dòng)物，將導(dǎo)致屏障設(shè)施的失敗。目前四十七頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)防疫：兩種方法

1.消滅已感染鼠群,重引符合標(biāo)準(zhǔn)的種鼠或用無(wú)菌技術(shù)剖腹取胎。2.暫停繁殖，在相對(duì)靜止條件下保存這種非繁殖群直至感染消除(約2個(gè)月)，然后恢復(fù)繁殖。目前四十八頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)小鼠肝炎病毒

(micehepatitisvirusMHV)

消瘦型肝炎病毒是實(shí)驗(yàn)小鼠最重要的病毒感染之一。

呈世界范圍性分布，無(wú)明顯的季節(jié)性差異。

多數(shù)情況下是亞臨床感染或慢性感染。

臨床表現(xiàn)為肝炎，腦炎和腸炎。目前四十九頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

MHV傳播方式有經(jīng)空氣和接觸兩種。

小鼠是唯一能自然感染MHV;通過(guò)腦內(nèi)接種,可實(shí)驗(yàn)感染棉鼠,大鼠和地鼠,但兔和豚鼠無(wú)反應(yīng)。目前五十頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

MHV是普通級(jí)實(shí)驗(yàn)小鼠難以清除的病毒之一。

唯有對(duì)小鼠進(jìn)行剖腹取胎術(shù),結(jié)合屏障環(huán)境內(nèi)維持飼養(yǎng),才能培育無(wú)MHV感染的清潔級(jí)以上小鼠。

必須注意MHV垂直傳播的可能性。目前五十一頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)防疫通過(guò)定期檢測(cè),有利及時(shí)發(fā)現(xiàn)屏障環(huán)境內(nèi)的鼠群中鼠肝炎病毒感染。及時(shí)消滅被感染的鼠群,

重新引進(jìn)符合標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物。

同步交配代乳方法重新獲得動(dòng)物群。

用無(wú)菌技術(shù)剖腹取胎。目前五十二頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)同步交配----把MHV陽(yáng)性鼠群中懷孕母鼠自然分娩的新生鼠在分娩后的24小時(shí)內(nèi)傳給符合標(biāo)準(zhǔn)的代乳鼠帶乳。然后在代乳鼠3周齡,6周齡和12周齡進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè),可獲MHV陰性小鼠。目前五十三頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)三.SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中的細(xì)菌污染

2.金黃色葡萄球菌

3.肺炎克雷伯氏桿菌

1.綠膿桿菌目前五十四頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

綠膿桿菌是動(dòng)物和人類(lèi)胃腸道的一種常在菌。

傳播途徑：口、咽和胃腸道；

1.綠膿桿菌目前五十五頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

該菌可導(dǎo)致封閉群小鼠(Swiss-Webster)和近交系小鼠(C3H)斜頸和轉(zhuǎn)圈癥狀。

對(duì)免疫環(huán)境遭受損害或抑制的宿主，綠膿桿菌可穿過(guò)局部淋巴環(huán)境和血管環(huán)境，導(dǎo)致致死性敗血癥。目前五十六頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)由工作人員帶入屏障環(huán)境。

在常規(guī)小鼠群的飲水器中能檢到綠膿桿菌。

在溫暖、潮濕的環(huán)境中(如SPF小鼠飼養(yǎng)室的淋浴更衣處)也常檢到這種菌。綠膿桿菌來(lái)源目前五十七頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

要預(yù)防綠膿桿菌,就必須定期對(duì)SPF小鼠進(jìn)行微生物學(xué)監(jiān)測(cè)，及時(shí)淘汰被感染的鼠群。通過(guò)酸化(用鹽酸調(diào)PH2.5)氯化(10ppm)飲水來(lái)預(yù)防飲水器對(duì)SPF小鼠的感染;對(duì)屏障環(huán)境的淋浴、更衣室經(jīng)常進(jìn)行徹底打掃消毒滅菌，并要求進(jìn)入屏障環(huán)境的工作人員嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程和個(gè)人防護(hù)用品的穿戴。目前五十八頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)2.金黃色葡萄球菌

在小鼠皮膚和粘膜上，常檢到致病的金黃色葡萄球菌和一般不致病的表皮葡萄球菌。雖然金黃色葡萄球菌還沒(méi)有被廣泛看作實(shí)驗(yàn)小鼠的原發(fā)性疾病，但有些文獻(xiàn)中報(bào)道了其作為皮膚感染，淋巴感染或粘膜感染病原學(xué)因子。目前五十九頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)小鼠自發(fā)性葡萄球菌感染與

幼鼠比成鼠易感。

無(wú)胸腺裸小鼠因缺少保護(hù)性被毛并缺乏T－細(xì)胞而經(jīng)常發(fā)生皮膚和眼窩的葡萄球菌感染。

屏障環(huán)境的操作管理有關(guān)。營(yíng)養(yǎng)及小鼠品系，目前六十頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

據(jù)對(duì)SPF設(shè)施的細(xì)菌學(xué)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，從健康SPF小鼠分離的金黃色葡萄球菌的噬菌體型常與從動(dòng)物管理員體表分離的品系一致。目前六十一頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

通常不能治療或根除金黃色葡萄球菌，

飼養(yǎng)人員和實(shí)驗(yàn)人員嚴(yán)格執(zhí)行隔離措施和操作細(xì)則。定期檢測(cè)，及時(shí)淘汰患鼠；酸化飲水；飼料和墊料徹底滅菌；經(jīng)常更換墊料；

防疫目前六十二頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)克雷伯氏菌

人和動(dòng)物的腸道常在菌，是與人和動(dòng)物泌尿，呼吸道感染有關(guān)的條件性致病菌。

小鼠自發(fā)爆發(fā)的疾病臨床癥狀是：食欲不振，弓背，被毛粗亂，打噴嚏及呼吸深快。目前六十三頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)清除克雷伯氏菌病原體：就需要進(jìn)行剖腹產(chǎn)和嚴(yán)格的屏障環(huán)境操作、管理。目前六十四頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)第五節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)

和寄生蟲(chóng)學(xué)質(zhì)量檢測(cè)一.檢測(cè)目的二.檢測(cè)方法三.檢測(cè)規(guī)則目前六十五頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)一、檢測(cè)目的目前六十六頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)1.排除人獸共患病，確保從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)的飼養(yǎng)人員和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的科研或教學(xué)人員身體健康。目前六十七頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)2.排除危害實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的常見(jiàn)病多發(fā)病，確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群的健康，為生命科學(xué)研究提供合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。目前六十八頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)1〕對(duì)新引進(jìn)的普通級(jí)動(dòng)物進(jìn)行檢疫，防止人獸共患病原體或動(dòng)物烈性傳染病帶入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群，或傳播給實(shí)驗(yàn)人員。目前六十九頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)2〕定期對(duì)生產(chǎn)繁殖的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群進(jìn)行抽樣檢測(cè)，及時(shí)了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)群體中微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)質(zhì)量；必要時(shí)作出淘汰或降級(jí)處理。目前七十頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)3〕當(dāng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群發(fā)生傳染病流行時(shí)，檢出感染途徑，提出控制或預(yù)防措施。4〕對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)或?qū)嶒?yàn)設(shè)施進(jìn)行靜態(tài)和動(dòng)態(tài)檢測(cè)，及時(shí)掌握實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境條件，了解是否符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。目前七十一頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

3.研究確定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的劃分，和不同等級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)質(zhì)量指標(biāo)。目前七十二頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)4.確保使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作檢測(cè)的藥品和生物制品的質(zhì)量，保證進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的科學(xué)研究成果和各種動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和重復(fù)性。目前七十三頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)二.

檢測(cè)方法目前七十四頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)原則——

1.國(guó)內(nèi)外通用,比較成熟,便于交流。

2.可操作性強(qiáng)，檢測(cè)結(jié)果易判斷，檢測(cè)率較高。

3.易實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化，便于推廣。目前七十五頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)國(guó)家推薦性標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)檢測(cè)方法1～4》GB/T14926.1～14926.64－2001《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)檢測(cè)方法》GB/T18448.1～18448.10－2001

目前七十六頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病毒學(xué)檢測(cè)方法目前我國(guó)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病毒學(xué)檢測(cè)通常使用血清學(xué)方法，包括：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）免疫熒光試驗(yàn)（IFA）免疫酶染色試驗(yàn)（IEA）血球凝集（HA）和血球凝集抑制（HI）試驗(yàn)?zāi)壳捌呤唔?yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)菌學(xué)檢測(cè)方法

通常采用細(xì)菌分離和培養(yǎng)方法。根據(jù)培養(yǎng)基上菌落特征，將分離到的可疑菌落作生化鑒定。目前七十八頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)檢測(cè)人員的實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)，直接影響到其對(duì)檢測(cè)結(jié)果的判斷準(zhǔn)確性。對(duì)部分細(xì)菌，如沙門(mén)氏菌，支原體等已開(kāi)展血清學(xué)方法檢測(cè)。目前七十九頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)檢測(cè)方法

通常在光學(xué)顯微鏡下查找寄生蟲(chóng)的蟲(chóng)體、蟲(chóng)卵或孢子。對(duì)人獸共患的弓形蟲(chóng)，則采用各種血清學(xué)的方法進(jìn)行檢測(cè)。目前八十頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)三.檢測(cè)規(guī)則1.檢測(cè)頻率以間隔23個(gè)月為宜。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中，即規(guī)定：每3個(gè)月至少檢測(cè)1次。目前八十一頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

病原體剛侵入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體時(shí),較易分離到病原體;而當(dāng)流行趨于平靜可能分離不到病原體,但特異性抗體的檢出率上升。通常在23個(gè)月內(nèi)，抗體檢出率不會(huì)下降太大。隨著時(shí)間的推移，某些個(gè)體的抗體效價(jià)水平會(huì)下降，以及新生的非感染動(dòng)物增加，使抗體陽(yáng)性動(dòng)物的檢出大量減少。目前八十二頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)2.取樣數(shù)量通常對(duì)于動(dòng)物群體中感染率高的病原體，只需少量采樣就能檢出；而當(dāng)感染動(dòng)物比例低時(shí)，若不增加取樣數(shù)量，就可能漏檢。因此，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體中病原體的感染率決定取樣數(shù)量。如病原體感染率為1％，要檢出感染動(dòng)物至少應(yīng)取樣100只。目前八十三頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)病原體檢測(cè)取樣數(shù)量感染率%檢測(cè)可信度99％95％90％9022180322704326054350754409653013972021141110442922目前八十四頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)

達(dá)標(biāo)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物須排除的病原體感染率應(yīng)為“0”,取樣數(shù)量須達(dá)60-90%以上，其檢測(cè)結(jié)果的可信度方可達(dá)到95-99%。

而嚙齒類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采樣，通常都犧牲被檢測(cè)動(dòng)物;

且實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)質(zhì)量檢測(cè)通常與微生物學(xué)質(zhì)量檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行，而病原體的感染率不可能相同。

因此,在標(biāo)準(zhǔn)中采用的取樣數(shù)量和取樣方法，將適當(dāng)參考實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體大小，兼顧絕大多數(shù)病原體的感染率，以決定取樣數(shù)量;并規(guī)定取樣點(diǎn)。目前八十五頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不同生產(chǎn)群體取樣數(shù)群體規(guī)模，只取樣數(shù)量，只<100>5100～500>10>500>20每只隔離器檢測(cè)2只目前八十六頁(yè)\總數(shù)九十五頁(yè)\編于十點(diǎn)活體取樣

對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的活體取樣未作規(guī)定。