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免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第1頁膠體金免疫層析技術(shù)(colloidalgoldimmunochromatographyassay,GICA)
免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第2頁20世紀(jì)80-90年代在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、單克隆抗體技術(shù)、膠體金免疫技術(shù)和新材料技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展了新型體外診療技術(shù)——膠體金免疫層析技術(shù)(colloidalgoldimmunochromatographyassay,GICA)。
膠體金免疫層析技術(shù)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第3頁
GICA是一個(gè)新型檢測(cè)方法,含有簡(jiǎn)單快速、結(jié)果清楚,可經(jīng)過肉眼判定結(jié)果、無需復(fù)雜操作技巧和特殊設(shè)備、靈敏度高、無污染、攜帶方便等優(yōu)點(diǎn)。己成為臨床快速診療領(lǐng)域發(fā)展一個(gè)新方向,在發(fā)達(dá)國(guó)家己得到廣泛應(yīng)用。疾病快速診療及藥品殘留分析免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第4頁類別應(yīng)用領(lǐng)域檢測(cè)物質(zhì)人類醫(yī)學(xué)各級(jí)醫(yī)院,血站,CDC,防疫站,診療中心;家庭自檢;商檢系統(tǒng);邊檢口岸;公安系統(tǒng).傳染?。ㄒ腋挝屙?xiàng),HIV,SARS等)標(biāo)志物(AFP、肌鈣蛋白、糞便血紅蛋白等)女性妊娠hCG(早孕)毒品(嗎啡,K粉,搖頭丸,冰毒)農(nóng)牧業(yè)畜牧獸醫(yī)站,商檢系統(tǒng),邊檢口岸,農(nóng)牧類院系和研究所傳染病(禽流感,鏈球菌等)病毒(煙草花葉病毒、犬細(xì)小病毒等)環(huán)境環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè)部門,研究機(jī)構(gòu)有害物質(zhì)超標(biāo)食品安全食品安全檢測(cè)中心,各監(jiān)管部門農(nóng)獸藥殘留(磺胺類、瘦肉精等),大腸桿菌,黃曲霉素免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第5頁
膠體金(colloidalgold)也稱金溶膠(goldsol),是金鹽被還原成原子金后形成金顆粒懸液。膠體金免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第6頁zeta電位能夠使膠體金顆粒之間相互排斥,以維持膠體金穩(wěn)定狀態(tài)。
基礎(chǔ)金核雙離子內(nèi)層負(fù)離子(AuC12-)zeta電位外層離子層H+分散在膠體間溶液中免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第7頁
膠體金顆粒對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)吸附功效,而不被壞其生物活性,能夠與蛋白質(zhì)等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等非共價(jià)結(jié)合,形成膠體金標(biāo)識(shí)物。免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第8頁襯板樣品墊金標(biāo)墊吸收墊膜膠體金免疫層析試紙條組成免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第9頁膠體金免疫層析試紙條類型:免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第10頁免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第11頁夾心法反應(yīng)原理C陰性B陽性GICA有三種反應(yīng)模式:夾心法,間接法,競(jìng)爭(zhēng)抑制法。免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第12頁間接法反應(yīng)原理C陰性B陽性免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第13頁陰性弱陽性陽性競(jìng)爭(zhēng)抑制法反應(yīng)原理檢測(cè)線顏色強(qiáng)度與SD濃度負(fù)相關(guān)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第14頁目標(biāo):掌握間接試紙卡檢測(cè)原理,操作方法及結(jié)果判定方法免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第15頁1、禽流感H9亞型抗原檢測(cè)試紙卡2、禽流感抗體檢測(cè)試紙卡3、磺胺嘧啶殘留檢測(cè)試紙卡4、禽流感H9亞型病毒陽性對(duì)照5、禽流感H9亞型病毒陰性對(duì)照6、禽流感抗體陽性對(duì)照7、磺胺嘧啶殘留陽性對(duì)照8、磺胺嘧啶殘留陰性對(duì)照試驗(yàn)材料:免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第16頁1、加被檢樣品:100ul/孔,陽性、陰性對(duì)照。2、5min后觀察結(jié)果。試驗(yàn)步驟:免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)第17頁結(jié)果判定:1、禽流感H9亞型抗原檢測(cè)試紙卡:兩條紅線,陽性;一條紅線,陰性;無紅線,試紙失效。2、禽流感抗體檢測(cè)試紙卡:兩條紅線,陽性;一條紅線,陰性;無紅線,試紙
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