戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用

一、戊型肝炎相關(guān)概念及特點(diǎn)戊型肝炎由戊型肝炎病毒（HEV）引發(fā)，HEV是單股正鏈RNA病毒,屬于嗜肝病毒科.約占臨床散發(fā)型肝炎15－20%，戊肝在病毒性肝炎中病死率最高，孕婦病死率可高達(dá)20%。傳輸路徑:主要經(jīng)胃腸道傳輸，常經(jīng)過(guò)水源和食源暴發(fā)或流行,丙球蛋白免疫無(wú)效臨床癥狀:厭食、乏力、惡心、鞏膜黃染、右上腹部不適、嘔吐、肝臟腫大等.其臨床癥狀與甲肝類(lèi)似。1戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第1頁(yè)戊肝不一樣臨床階段HEV感染指標(biāo)臨床階段ALTRNAIgMIgG戊肝急性期++++近期隱性感染-+++戊肝恢復(fù)期--++既往感染---+2戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第2頁(yè)HEV-IgM是良好近期感染標(biāo)志物戊肝病程中各感染指標(biāo)改變過(guò)程清楚顯示，HEV-IgM抗體是一個(gè)良好戊肝病毒近期感染指標(biāo)。3戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第3頁(yè)二.優(yōu)良診療試劑是檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠確保

優(yōu)質(zhì)抗原是檢測(cè)試劑關(guān)鍵！4戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第4頁(yè)關(guān)鍵:構(gòu)象抗原現(xiàn)有試劑以線(xiàn)性表位為主重組蛋白或合成肽作為抗原，未能模擬出HEV最主要構(gòu)象依賴(lài)性抗原表位。優(yōu)質(zhì)抗原是檢測(cè)試劑關(guān)鍵!!!5戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第5頁(yè)2.1HEV基因ORF1主要編碼與病毒RNA復(fù)制相關(guān)非結(jié)構(gòu)蛋白，ORF2為HEV主要結(jié)構(gòu)基因編碼區(qū),編碼病毒衣殼蛋白，ORF3基因編碼產(chǎn)物pORF3為磷蛋白。6戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第6頁(yè)

試劑關(guān)鍵E2抗原發(fā)覺(jué)及其特征1998年，用大腸桿菌表示HEV結(jié)構(gòu)蛋白ORF2一個(gè)片段(E2)時(shí)發(fā)覺(jué)，該蛋白能夠自發(fā)形成二聚體，而且二聚體蛋白對(duì)戊肝恢復(fù)期血清有極強(qiáng)反應(yīng)性，這一反應(yīng)性伴隨二聚體解聚而消失。WesternBlot(See:JMedVirol,,64:125-132)單體二聚體SDS7戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第7頁(yè)E2抗原反應(yīng)性：對(duì)戊肝急性期血清和多年后恢復(fù)期血清有顯著反應(yīng)，恢復(fù)期血清反應(yīng)性集中在二聚體上。急性期血清(10例)恢復(fù)期血清(8例)二聚體E2單體E28戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第8頁(yè)2.2含有動(dòng)物模型診療試劑(恒河猴HEV感染模型)

感染時(shí)間（周）F9HEV感染、發(fā)病與抗體發(fā)生過(guò)程9戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第9頁(yè)感染時(shí)間（周）N2HEV感染、發(fā)病與抗體發(fā)生過(guò)程10戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第10頁(yè)感染時(shí)間（周）F4HEV感染、發(fā)病與抗體發(fā)生過(guò)程11戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第11頁(yè)獻(xiàn)血員中HEV檢測(cè)：E2-IgM(+)、E2-IgG(-)、GL-IgM和IgG均(-)獻(xiàn)血員206血清HEVRNA基因分型I型IV型IV型II型III型12戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第12頁(yè)206血清可感染猴子13戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第13頁(yè)5278構(gòu)象性表位線(xiàn)性表位猴HEV感染過(guò)程中各項(xiàng)指標(biāo)消長(zhǎng)分析14戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第14頁(yè)三.HEVELISA試劑

與

臨床急性肝炎診療15戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第15頁(yè)3.1人們對(duì)戊型肝炎重視逐步增強(qiáng)

新《中華人民共和國(guó)食品安全法實(shí)施條例》實(shí)施條例對(duì)食品安全法中較為標(biāo)準(zhǔn)制度作了詳細(xì)要求：食品從業(yè)者應(yīng)按章檢驗(yàn)戊型病毒型肝炎和甲型病毒性肝炎，同時(shí)取消乙肝檢測(cè)。員工入職新生入校等健康體檢也取消了乙肝檢測(cè)項(xiàng)目。16戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第16頁(yè)食品從業(yè)人員健康體檢新試行條例要求食品從業(yè)人員健康體檢取消了HBV檢測(cè)項(xiàng)目，新增了HAV-M和HEV-M兩種檢測(cè)項(xiàng)目。IgM抗體檢測(cè)目標(biāo)主要是防止近期感染對(duì)食品安全威脅。（包含顯性感染和隱性感染）頒布了《戊型病毒性肝炎診療規(guī)范》，用以明確HEV診療及治療。人們對(duì)戊型肝炎重視逐步增強(qiáng)。17戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第17頁(yè)3.2萬(wàn)泰HEV試劑與其它國(guó)內(nèi)外廠(chǎng)家試劑比較18戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第18頁(yè)3.2.1靈敏度和特異度綜合評(píng)價(jià)

復(fù)旦大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院指標(biāo)正常人群急性戊肝約登指數(shù)(%)陰性數(shù)/檢測(cè)數(shù)特異度（%）陽(yáng)性數(shù)/檢測(cè)數(shù)靈敏度（%）WTIgM273/273100.047/4897.997.9GLIgM264/27396.735/4872.969.6GLIgG233/27385.445/4893.879.619戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第19頁(yè)E2IgM+-TotalGL-IgM+29029-286290Total5762119

臨床非甲非乙急性肝炎中HEVIgM檢出

E2IgM檢出率=100%GLIgM檢出率=50.8%(香港衛(wèi)生署公共衛(wèi)生試驗(yàn)中心)20戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第20頁(yè)E2IgM與GLIgM在急性肝炎中檢出符合情況GLIgME2IgM累計(jì)＋－＋7065135－29361390累計(jì)99426525

其中58例(89%)抗HAVIgM陽(yáng)性(復(fù)旦大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院)21戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第21頁(yè)臨床陰轉(zhuǎn)血清評(píng)價(jià)

－新疆戊肝感染10年后血清抗HEV抗體檢出1992年全國(guó)流調(diào)新疆和田HE暴發(fā)后3~4年HEVIgG感染率為11.79%(Genelabs)地方病通報(bào)

，17（3）：1422戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第22頁(yè)兩種試劑對(duì)WHO戊肝標(biāo)準(zhǔn)血清檢測(cè)比較23戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第23頁(yè)3.2.2試驗(yàn)室數(shù)據(jù)PCR+標(biāo)本總數(shù)萬(wàn)泰檢出SKH22份22份20份（1份陰性灰區(qū)）陽(yáng)性S/C.O均8.456.8924戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第24頁(yè)表1：兩種試劑對(duì)PCR陽(yáng)性檢驗(yàn)

萬(wàn)泰SKH熒光PCR套式PCR編號(hào)C.O=0.265C.O=0.253

112.7641.487

+

+142.8291.165

+

+162.9711.026

+

+172.3431.797

+

+172.3431.797

+

+271.5921.218

+

+292.0260.471

+

+333.1541.68

+

+372.8541.423

+

+403.0811.819

+

+422.8371.935

+

+522.1640.103

+

+552.9941.461

+

+592.8511.239

+

+612.9691.752

+

+632.4581.082

+

+680.8630.089

+

+722.8531.601

+

+733.221.726

+

+741.7911.098

+

+741.7911.098

+

+773.2971.816

+

+25戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第25頁(yè)3.2.3試驗(yàn)室數(shù)據(jù)PCR+標(biāo)本總數(shù)萬(wàn)泰檢出BGD檢出16份15份（1份陰性灰）5份（3份陰性灰區(qū)）檢出百分率93.8%

31.3%

26戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第26頁(yè)標(biāo)本編號(hào)萬(wàn)泰A值（C.O=0.266）BGDA值（C.O=0.150）PCR背景+/P31.0420.021+WX11.0950.131+WX111.9620.441+WX121.5030.387+WX131.6420.108+WX141.9390.523+WX150.1270.011+WX170.8910.026+WX180.4090.489+WX190.7480.126+WX221.0930.020+WX240.9910.076+WX301.1890.016+WX322.9870.045+WX620.8040.027+WX640.4570.192+M261.0041.084/M280.1520.009/M292.0040.439/M302.0450.897/M311.7910.347/M410.0150.012/P11.7120.311/表2：兩種試劑對(duì)PCR陽(yáng)性檢驗(yàn)27戊肝診療試劑在醫(yī)院和疾控的應(yīng)用第27頁(yè)HEV診療指標(biāo)

(依據(jù)戊型病