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生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)pH對(duì)淀粉酶活性的影響第1頁(yè)/共8頁(yè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

了解pH對(duì)酶活性的影響及最適pH的定義。二、原理

酶的催化活性與環(huán)境pH有密切關(guān)系，通常各種酶只在一定pH范圍內(nèi)才具有活性，酶活性最高時(shí)的pH，稱為酶的最適pH，高于或低于此pH時(shí)酶的活性都逐漸降低。不同酶的最適pH不同。酶的最適pH不是一個(gè)特征性的物理常數(shù)，對(duì)于一個(gè)酶，其最適pH因緩沖液和底物的性質(zhì)不同而有差異。第2頁(yè)/共8頁(yè)三、試劑和器材

1.試劑

0.3％氯化鈉的0.5％淀粉溶液、新鮮唾液、0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液、檸檬酸鈉溶液、碘化鉀－碘溶液

2.器材恒溫水浴鍋四、操作步驟

1.取3個(gè)錐形瓶，按下表的比例吸取磷酸氫二鈉溶液和檸檬酸鈉溶液，制備pH為5.0、6.8、8.0的三種緩沖溶液。第3頁(yè)/共8頁(yè)錐形瓶號(hào)0.2mol/L磷酸氫二鈉（mL）0.1mol/L檸檬酸緩沖液pH1235.157.729.724.852.280.285.06.88.02.另取3只干凈試管，按下表操作。第4頁(yè)/共8頁(yè)

試管編號(hào)試劑處理123pH5.0緩沖溶液/mL2--pHh6.8緩沖溶液/mL-2-pHh8.0緩沖溶液/mL--20.5%淀粉溶液/mL111每隔1min逐管加入唾液稀釋液/mL111充分搖勻，置37

℃水浴保溫10min，到達(dá)保溫時(shí)間后，每隔1min依次取出立即加碘化鉀－碘溶液/滴222記錄觀察結(jié)果第5頁(yè)/共8頁(yè)五、注意事項(xiàng)

1.本實(shí)驗(yàn)中的酶反應(yīng)時(shí)間是10min，但實(shí)際是隨不同的唾液淀粉酶的活性而變化的，所以在實(shí)驗(yàn)前先找出準(zhǔn)確的保溫時(shí)間是本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵；

2.加入酶液后務(wù)必充分搖勻，保證酶與全部淀粉溶液接觸，反應(yīng)才能得到理想的顏色梯度變化結(jié)果。第6頁(yè)/共8頁(yè)六、思考題

1.pH值導(dǎo)致酶活性喪失的分子機(jī)理是什么？

2.pH值改變導(dǎo)致的活性

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