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文檔簡介

生物化學(xué)實驗pH對淀粉酶活性的影響第1頁/共8頁一、實驗?zāi)康?/p>

了解pH對酶活性的影響及最適pH的定義。二、原理

酶的催化活性與環(huán)境pH有密切關(guān)系，通常各種酶只在一定pH范圍內(nèi)才具有活性，酶活性最高時的pH，稱為酶的最適pH，高于或低于此pH時酶的活性都逐漸降低。不同酶的最適pH不同。酶的最適pH不是一個特征性的物理常數(shù)，對于一個酶，其最適pH因緩沖液和底物的性質(zhì)不同而有差異。第2頁/共8頁三、試劑和器材

1.試劑

0.3％氯化鈉的0.5％淀粉溶液、新鮮唾液、0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液、檸檬酸鈉溶液、碘化鉀－碘溶液

2.器材恒溫水浴鍋四、操作步驟

1.取3個錐形瓶，按下表的比例吸取磷酸氫二鈉溶液和檸檬酸鈉溶液，制備pH為5.0、6.8、8.0的三種緩沖溶液。第3頁/共8頁錐形瓶號0.2mol/L磷酸氫二鈉（mL）0.1mol/L檸檬酸緩沖液pH1235.157.729.724.852.280.285.06.88.02.另取3只干凈試管，按下表操作。第4頁/共8頁

試管編號試劑處理123pH5.0緩沖溶液/mL2--pHh6.8緩沖溶液/mL-2-pHh8.0緩沖溶液/mL--20.5%淀粉溶液/mL111每隔1min逐管加入唾液稀釋液/mL111充分搖勻，置37

℃水浴保溫10min，到達保溫時間后，每隔1min依次取出立即加碘化鉀－碘溶液/滴222記錄觀察結(jié)果第5頁/共8頁五、注意事項

1.本實驗中的酶反應(yīng)時間是10min，但實際是隨不同的唾液淀粉酶的活性而變化的，所以在實驗前先找出準確的保溫時間是本實驗的關(guān)鍵；

2.加入酶液后務(wù)必充分搖勻，保證酶與全部淀粉溶液接觸，反應(yīng)才能得到理想的顏色梯度變化結(jié)果。第6頁/共8頁六、思考題

1.pH值導(dǎo)致酶活性喪失的分子機理是什么？

2.pH值改變導(dǎo)致的活性

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