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細菌的形態(tài)觀察實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)微生物涂片、染色的基本技術(shù),掌握細菌的簡單染色法。初步認識細菌的形態(tài)特征。學(xué)習(xí)訓(xùn)練無菌操作技術(shù)。學(xué)習(xí)并掌握普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和油鏡的使用技術(shù)及維護的基本知識。實驗原理簡單染色是利用單一染料對細菌進行染色的一種方法,適用于菌體一般形狀和細菌排列的觀察。常用堿性染料進行簡單染色,因為在中性、堿性或弱酸性溶液中,細菌細胞通常帶負電荷,而堿性染料在電離時,其分子的染色部分帶正電荷,因此堿性染料的染色部分很容易與細菌結(jié)合使細菌著色,經(jīng)染色后的細菌細胞與背景形成鮮明的對比,在顯微鏡下更易于識別。實驗原理顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率
1.放大倍數(shù):物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)
2.
顯微鏡的分辨率:是表示顯微鏡辨析兩點之間距離的能力??捎霉奖硎緸椋?/p>
D=λ/2n·sin(α/2)
式中D:物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。:可見光的波長(平均0.55m)n:物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折射率:鏡口角(即入射角)。實驗步驟涂片干燥固定染色水洗干燥鏡檢無菌操作制片過程:注意事項革蘭氏染色成敗的關(guān)鍵是酒精脫色。如脫色過度,革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰性菌;如脫色時間過短,革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。染色過程中勿使染色液干涸。用水沖洗后,應(yīng)吸去玻片上的殘水,以免染色液被稀釋影響染色效果。選用幼齡的細菌。G+菌培養(yǎng)12h-16h,E.coli培養(yǎng)24h。若菌齡太老,由于菌體死亡或自溶常使革蘭氏陽性菌轉(zhuǎn)呈陰性反應(yīng)。1、使用顯微鏡時加香柏油的目的是什么?2、在制片的過程中
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