聚丙烯酰胺凝膠垂直板型電泳操作方法_第1頁
聚丙烯酰胺凝膠垂直板型電泳操作方法_第2頁
聚丙烯酰胺凝膠垂直板型電泳操作方法_第3頁
聚丙烯酰胺凝膠垂直板型電泳操作方法_第4頁
聚丙烯酰胺凝膠垂直板型電泳操作方法_第5頁
已閱讀5頁，還剩6頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領

文檔簡介

種子生產(chǎn)與經(jīng)營專業(yè)聚丙烯酰胺凝膠垂直板型電泳操作方法

聚丙烯酰胺凝膠垂直板型電泳是在兩塊垂直放置的、間隔數(shù)毫米的平行玻璃板中進行，所得的是垂直的平板狀的凝膠。

一、垂直板型凝膠模子及電泳槽垂直板電泳槽中，有一種操作比較簡便，比較有效的夾芯式電泳槽。將玻璃片嵌入凹槽時，長玻璃片下部與膠帶保持2~3mm的距離，以使此端的凝膠與一側(cè)的電極槽相通。為避免膠液由此狹縫漏掉，灌膠時，可先向凝膠模底部灌入用電極緩沖液配制的分離膠液，待分離膠凝固后即封住凝膠模下面的窄縫，而在通電時又可做為鹽橋。聚丙烯酰胺凝膠液灌在它的上面，形成分離膠。另一較短的玻璃片，其三邊嵌入膠帶中。因這一玻璃片稍低于前者，將來可使另一側(cè)電極的緩沖液沒過玻璃片頂部，使凝膠頂部與電極槽相通，以便樣品在電場中泳動。一、垂直板型凝膠模子及電泳槽一、垂直板型凝膠模子及電泳槽凝膠模樣品槽模板硅橡膠帶玻璃片二、制膠制作凝膠時，將膠液加到距玻璃板頂端約1cm處，然后將樣品梳插入膠液頂部。插入樣品梳的目的是使凝膠聚合后，在凝膠頂部形成數(shù)個相互隔開的凹槽（樣品槽），電泳時將樣品液加在這些凹槽中。凝膠系統(tǒng)全部成分混合后開始計算時間，聚合作用在15min時開始，0.5~1h后完成。聚合作用是放熱的，所以聚合時要加以冷卻，控制聚合時的溫度相同于電泳時的溫度。

小心地取出樣品梳，在兩個電極槽中充滿電極緩沖液。

二、制膠三、加樣品液

樣品的用量與凝膠板厚度有關。對2mm厚和10mm寬的樣品槽，用約20μl樣品液。在樣品液中常加入指示染料如甲基綠或溴酚藍。四、染色

垂直板型電泳是在兩塊垂直放置的、間隔數(shù)毫米的平行玻璃板中進行，所得的是垂直的平

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論