BoBs在臨床中的應(yīng)用演示文稿

BoBs在臨床中的應(yīng)用演示文稿目前一頁\總數(shù)二十九頁\編于十點BoBs在臨床中的應(yīng)用目前二頁\總數(shù)二十九頁\編于十點全自動生化和免疫分析系統(tǒng)串聯(lián)質(zhì)譜PART1生化遺傳G顯帶高分辨染色體核型分析Q帶、C帶、銀染羊水細胞原位培養(yǎng)PART2細胞遺傳FISHPCRBoBsCMADNA測序PART3分子遺傳實驗室構(gòu)架目前三頁\總數(shù)二十九頁\編于十點染色體病檢測方法目前四頁\總數(shù)二十九頁\編于十點

BACs-on-Beads技術(shù)

BACs-on-Beads技術(shù)：是基于液態(tài)芯片的分析技術(shù)，是將生物素標(biāo)記過的

樣本DNA和參考DNA同時雜交到固化有特異的BACsDNA

探針的微球上，使用Luminex系統(tǒng)進行微球分類和熒光信號

檢測，通過BoBsoft軟件進行結(jié)果判讀，從而檢測染色體的數(shù)目異常和微缺失。目前五頁\總數(shù)二十九頁\編于十點檢測原理

BACs:細菌人工染色體Beads:聚苯乙烯微球Luminex200目前六頁\總數(shù)二十九頁\編于十點檢測原理樣本參考=1=1=1所有分析均使用男、女參考DNA正常結(jié)果:比值約為1.0目前七頁\總數(shù)二十九頁\編于十點檢測原理BoBsoft分析軟件結(jié)果界面閾值S/F值和S/M值大于閾值或小于閾值與女性參考比：紅色曲線與男性參考比：藍色曲線目前八頁\總數(shù)二十九頁\編于十點9紅點：樣本DNA/女性參考DNA;藍點：樣本DNA/男性參考DNAa:正常比值;b:異常比值；c:男性；d:女性；e:21染色體缺失；f:21-三體產(chǎn)前BoBs-檢測結(jié)果判讀目前九頁\總數(shù)二十九頁\編于十點檢測原理目前十頁\總數(shù)二十九頁\編于十點檢測結(jié)果：

arr(1-22)x2,(XN)x1，

arr(1-20,22)x2,(XN)x1,(21)x3arr(1-15,17-22)x2,(XY)x1,(16)x3檢測結(jié)果描述：

PrenatalBoBs檢測結(jié)果未發(fā)現(xiàn)胎兒13,18,21號和X、Y染色體的非整倍體性，未發(fā)現(xiàn)Prader-Willi/Angelman等染色體微缺失綜合征片段缺失的異常。

PrenatalBoBs檢測結(jié)果顯示胎兒為21號染色體三體患者，未發(fā)現(xiàn)胎兒13,18號和X、Y染色體的非整倍體性，未發(fā)現(xiàn)Prader-Willi/Angelman等染色體微缺失綜合征片段缺失的異常。

KaryoliteBoBs結(jié)果顯示男性胎兒，為16號染色體三體患者。檢測結(jié)果目前十一頁\總數(shù)二十九頁\編于十點BACs-on-Beads流程圖目前十二頁\總數(shù)二十九頁\編于十點LuminexxMap

BoBs(BACsonBeads)產(chǎn)前BoBs核型BoBs產(chǎn)前BoBs：非整倍體13,18,21,X,Y和9種微缺失/微重復(fù)綜合征核型BoBs：

所有染色體的非整倍體檢測（1~22，X，Y）目前十三頁\總數(shù)二十九頁\編于十點14Langer-GiedionWilliams-BeurenPrader-WilliWolf-HirschhornAngelmanDiGeorgeCriduChatMiller-DiekerSmith-Magenis

“檢測常見非整倍體和有嚴重危害的、有明顯細胞遺傳學(xué)預(yù)測價值的微缺失”13三體18三體21三體性染色體產(chǎn)前BoBs-檢測疾病13/18/21/X/Y非整倍體+9種微缺失目前十四頁\總數(shù)二十九頁\編于十點微缺失綜合征的出生后診斷到產(chǎn)前診斷微缺失綜合征的出生后診斷相對容易，但幾無治療價值。因此，產(chǎn)前診斷的臨床意義重大目前十五頁\總數(shù)二十九頁\編于十點9種微缺失綜合征發(fā)病率染色體區(qū)帶最突出的臨床特征Digeorge綜合征1/4000-1/500014p1422q11.285%合幵心臟畸形（流出道畸形）、胸腺發(fā)育不全、低鈣血癥、部分存在學(xué)習(xí)困難、進食困難、聽力損傷及骨骼畸形、免疫缺陷、癲癇等Angelman綜合征(AS)1/10000-1/1500015q11.2-q13肌張力低下，嚴重的發(fā)育遲緩、智力遲滯，嚴重的語言障礙、步態(tài)共濟失調(diào)，常伴有丌合時宜的大笑和過分興奮等.多數(shù)在2-5周歲被診斷。Prader-Willi綜合征(PWS)1/10000-1/3000015q11.2-q13產(chǎn)前表現(xiàn)：由于肌張力低下,胎兒宮內(nèi)活動減少。產(chǎn)后表現(xiàn)：早期嚴重的肌張力低下和喂養(yǎng)困難，后期暴飲暴食導(dǎo)致病態(tài)肥胖。發(fā)育遲緩、易激惹、固執(zhí)、強迫性行為等常見。特殊面容：杏仁眼、窄鼻梁、嘴角向下、上唇較厚目前十六頁\總數(shù)二十九頁\編于十點9種微缺失綜合征發(fā)病率染色體區(qū)帶最突出的臨床特征Criduchat綜合征(CdCS)1/20000-1/50000Chr5p幼時哭聲尖，似貓叫，小頭畸形，鼻梁扁平，嚴重的行動障礙和智力低下等；行為異常：過度活躍、暴怒等Williams-Beuren綜合征(WBS)1/7500-1/200007q11.270%伴有心血管畸形（主動脈流出道狹窄），特殊面容（厚嘴唇、鼻孔前傾、長人中）、智力遲滯、發(fā)育遲緩、特殊性格等。嬰兒期常伴有腹痛發(fā)作，高血鈣表現(xiàn)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)和骨骼肌肉系統(tǒng)的發(fā)育遲緩。初次診斷從16月到12歲不等Wolf-Hirschhorn綜合征(WHS)1/500004p16.350%到100%的WHS患兒伴有癲癇，骨骼畸形，先天性心臟病，聽力喪失、泌尿及胃腸道畸形等也較常見目前十七頁\總數(shù)二十九頁\編于十點9種微缺失綜合征發(fā)病率染色體區(qū)帶最突出的臨床特征Smith-Magenis綜合征(SMS)1/2500017p11.2發(fā)育遲緩、智力遲滯、行為異常等；小頭畸形，聯(lián)眉；易激惹、注意力低下，自殘行為，痛閾低下等。Miller-Dieker1/1000001/300000Langer-Giedion15q11.2-q13目前十八頁\總數(shù)二十九頁\編于十點Smith-Magenis綜合征(SMS)-17p11.2G3P3，該患兒為長女，系足月順產(chǎn)，出生后無搶救史，無癲癇發(fā)作史，喂養(yǎng)正常，嬰兒期無明顯暴躁跡象女性患兒15歲，身高1.44米，智力低下，語言能力弱，能回答姓名等簡單問題，容易興奮，在診室內(nèi)又唱又跳面部異常:外眥上斜,巨舌,外吐睡眠:現(xiàn)在每天僅僅睡眠2-3小時，時睡時醒手:雙手有咬傷傷痕。暴躁時抓人打人,自己抓頭發(fā)、抓耳,指甲損傷嚴重。目前十九頁\總數(shù)二十九頁\編于十點Wolf-Hirschhorn綜合征(WHS)羊水染色體核型分析目前二十頁\總數(shù)二十九頁\編于十點絕大多數(shù)的微缺失綜合征在宮內(nèi)發(fā)育期間基本無異常表現(xiàn)，宮內(nèi)發(fā)育遲緩，羊水過多/過少，特征性的臟器畸形是部分微缺失綜合征的唯一表現(xiàn)目前臨床上作為微缺失綜合征預(yù)測高危的產(chǎn)前因素有：NT/NB增厚且排除了胎兒非整倍體異常特征性的胎兒畸形表現(xiàn)（主要為心臟畸形）胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩胎兒宮內(nèi)姿態(tài)異常羊水異常（過多或過少），尤其伴有FGR的胎兒父母之一有明確微缺失綜合征或其他染色體結(jié)構(gòu)異常的有染色體病家族史的BoBs檢測微缺失綜合征的適用人群目前二十一頁\總數(shù)二十九頁\編于十點關(guān)注微缺失綜合征產(chǎn)前染色體非整倍體的快速診斷已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床，但是僅僅關(guān)注染色體非整倍體是遠遠不夠的。微缺失綜合征值得關(guān)注：染色體微缺失綜合征是由微小的、經(jīng)傳統(tǒng)細胞遺傳學(xué)分析難以發(fā)現(xiàn)的染色體畸變而導(dǎo)致的具有復(fù)雜臨床表現(xiàn)的遺傳性疾病畸變小于5Mb，是基因組疾病中最常見的類型常見臨床表型：生長發(fā)育異常、智力發(fā)育遲緩、特殊面容、內(nèi)臟器官畸形、內(nèi)分泌異常、精神行為改變等我國出生人口數(shù)目巨大，微缺失綜合征患兒大多嚴重殘疾，但可相對長期存活，并大多有生育能力，會給家庭和社會造成巨大的經(jīng)濟負擔(dān)目前二十二頁\總數(shù)二十九頁\編于十點液態(tài)芯片檢測，靈敏度、特異性高；檢測范圍大：產(chǎn)前BoBs可同時檢測5種染色體數(shù)目異常和9種微缺失，核型BoBs可同時檢測23對染色體的數(shù)目異常；檢測通量高：一次最多檢測92個樣本，自動讀取數(shù)據(jù)，單個樣本只需40秒-2分鐘；檢測周期短：可用于產(chǎn)前分子的快速診斷。技術(shù)優(yōu)勢目前二十三頁\總數(shù)二十九頁\編于十點遺傳檢測中的應(yīng)用產(chǎn)前診斷BACs-on-Beads產(chǎn)前快速分子診斷流產(chǎn)物檢測/PGS目前二十四頁\總數(shù)二十九頁\編于十點25單次流產(chǎn)流產(chǎn)胎兒組織——核型BoBs

2次及以上流產(chǎn)夫妻雙方外周血高分辨染色體核型分析檢測

胎兒流產(chǎn)組織——

FISH、核型BoBs、SNPArrayB超檢查有不明原因結(jié)構(gòu)異常的胎兒

選擇SNPArray流產(chǎn)病因診斷-臨床咨詢選擇目前二十五頁\總數(shù)二十九頁\編于十點流產(chǎn)物檢測目前二十六頁\總數(shù)二十九頁\編于十點PGS(胚胎植入前遺傳學(xué)篩查）PGS是胚胎植入前遺傳學(xué)篩查（PreimplantationGeneticScreening），在胚胎植入著床之前，利用PGS對早期胚胎進行染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常的檢測，主要通過檢測胚胎的23對染色體結(jié)構(gòu)、數(shù)目，通過比對來分析胚胎是否有遺傳物質(zhì)異常。染色體在細胞分裂之前才形成，因此PGS會在受精卵形成胚胎（培育第3天），或形成囊胎（培育第5天）后進行篩查。染色體有問題的胚胎很難自然發(fā)育到成熟，一般常見的情況是會在第5、6個月的停育流產(chǎn)。即便胚胎能夠存活到自然生產(chǎn)，未來生育出來的嬰兒也極有可能發(fā)生健康問題。比如，智力低下、頭小、眼距寬、耳位低、肌張力低下或亢進、外生殖器發(fā)育不良、癲癇、肛門閉鎖、發(fā)育遲緩、持續(xù)性新生兒黃疸及明顯的青斑、心臟畸形、腎臟畸形、虹膜或視網(wǎng)膜缺損等等。目前二十七頁\總數(shù)二十九頁\編于十點附錄1羊水染色體檢查BoBsSNP1100（左右）包括羊水穿刺費、術(shù)前檢查費等20804160目前二十八頁\總數(shù)二十九頁\編于十點附錄2：各項技術(shù)的特點比較分析（1）技術(shù)檢測范圍分辨率應(yīng)用核型分析全染