2023年生物技術(shù)期末復習-基因工程原理（生物技術(shù)）考試高頻試題（歷年真題）帶答案

2023年生物技術(shù)期末復習-基因工程原理（生物技術(shù)）考試高頻試題（歷年真題）帶答案（圖片大小可自由調(diào)整）卷I一.綜合考核題庫(共90題)1.Northern印跡雜交可用于檢測：A、目的基因在轉(zhuǎn)錄水平上的變化B、目的基因在翻譯水平上的變化C、染色體是否異常D、目的基因在復制水平上的變化2.試述免疫共沉淀技術(shù)的原理？3.考斯質(zhì)粒（cosmid）是一種A、天然質(zhì)粒載體B、由l-DNA的cos區(qū)與一質(zhì)粒重組而成的載體C、能裂解受體細胞的烈性載體D、能在受體細胞內(nèi)復制并包裝的載體4.隱性質(zhì)粒5.質(zhì)粒載體能夠克隆多大的DNA片段A、20kbB、30kbC、40kbD、10Kb6.基因治療是把健康的外源基因?qū)階、有基因缺陷的染色體中B、有基因缺陷的細胞器中C、有基因缺陷的DNA分子中D、有基因缺陷的細胞中7.什么是動物乳腺生物反應器？8.質(zhì)粒ColE1同pSC10共整合后，得到的重組質(zhì)粒pSC134，具有兩個復制起始點，這兩個起始點在任何細胞中都是可以使用的。9.欲將某一具有突出單鏈末端的雙鏈DNA分子轉(zhuǎn)變成平末端的雙鏈形式，通常可采用S1核酸酶切割或_________ 。10.用人工合成的含有所需堿基變化的寡聚核苷酸，可以將特殊突變引入克隆的基因。11.用限制性內(nèi)切核酸酶HaeIII分別切割載體DNA和供體DNA后，可用E.coliDNA連接酶進行連接。12.細菌抗藥性基因一般存在于A、核酸DNAB、質(zhì)粒C、RNAD、小的直線型DNA13.基因治療的載體只有病毒載體系統(tǒng)。14.向有功能缺陷的細胞補充相應功能基因，以糾正或補償其基因缺陷，達到治療的目的。這個過程叫做A、基因治療B、基因置換C、基因修正D、基因激活15.印跡是如何形成的？16.1982年在美國誕生了世界上第一種基因工程藥物A、重組人胰島素B、人生長激素C、凝血因子D、干擾素17.II型限制性核酸內(nèi)切酶在發(fā)揮作用時需要ATP和Mg2+。18.藍白斑篩選是A、表型檢測法B、核酸雜交檢測法C、序列鑒定法D、物理特性檢測法19.多核苷酸激酶之所以能夠用于DNA片段的標記，是因為它能夠?qū)蝹€的32P標記的單核苷酸加到每一DNA鏈的5’端。20.接合質(zhì)粒21.對基因功能的研究，首先需要獲取基因或基因片段，即______________。22.限制性內(nèi)切核酸酶的星號活性是指A、在非常規(guī)條件下，識別和切割序列發(fā)生變化的活性B、活性大大提高C、切割速度大大加快D、識別序列與原來的完全不同23.Southern印跡是用DNA探針檢測DNA片段，而Northern印跡則是A、用RNA探針檢測RNA片段B、用DNA探針檢測RNA片段C、用DNA探針檢測蛋白質(zhì)片段D、用RNA探針檢測DNA片段24.基因工程是_________年代發(fā)展起來的遺傳學的一個分支學科。25.逆轉(zhuǎn)錄合成第一條鏈時一般采用下列哪一種酶A、鼠源反轉(zhuǎn)錄酶B、雞源反轉(zhuǎn)錄酶C、兔源反轉(zhuǎn)錄酶D、禽源反轉(zhuǎn)錄酶26.Bal31核酸酶是Ca2+依賴性的，在反應混合物中加入EDTA便可抑制它的活性。27._________決定PCR擴增產(chǎn)物的特異性與長度。28.Klenow大片段酶具有幾種酶活性A、1種B、2種C、3種D、4種29.cDNA克隆與基因組克隆有何不同？30.在______技術(shù)中，DNA限制性片段經(jīng)凝膠電泳分離后，被轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜(或尼龍膜)上，然后與放射性的DNA探針雜交。31.第一個用于構(gòu)建重組體的限制性內(nèi)切核酸酶是____。32.核酸序列測定技術(shù)的發(fā)展經(jīng)歷了哪幾個重要階段？33.最早建立成功的轉(zhuǎn)基因哺乳動物是_________。34.組成型啟動子35.EcoRI切割載體DNA和供體DNA所產(chǎn)生的片段在用于重組連接前要A、用CIP處理載體DNA防止自身環(huán)化B、進行瓊脂糖凝膠電泳檢測C、上述說法都正確D、用65℃處理5～10min使限制性內(nèi)切核酸酶失活36.限制性內(nèi)切核酸酶可以特異性地識別：A、雙鏈DNA的特定堿基對B、雙鏈DNA的特定堿基序列C、特定的三聯(lián)密碼D、以上都正確37.切口平移法標記DNA探針時，需用的酶是：A、DNaseIB、RnaseC、DNA連接酶D、限制酶38.YAC載體具有什么樣的功能性DNA序列？為什么在克隆大片段時，YAC具有優(yōu)越性？39.westernblot雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質(zhì)D、染色體40.基因工程以_________為基本材料。41.下列符合PCR反應的引物設計要求的是A、引物長度一般要求有16-30bpB、G+C含量一般為40%-60%C、四種堿基隨機分布D、兩引物之間不應互補E、引物自身不應存在互補序列而引起自身折疊42.基因治療通常采用哪種載體比較合適A、逆轉(zhuǎn)錄病毒B、Ti質(zhì)粒C、噬菌體D、質(zhì)粒pBR32243.啟動子從轉(zhuǎn)錄模式上可分為哪兩種？表達系統(tǒng)常選用哪一種？其機理是什么？44.EcoRI的識別序列是A、5-GATTC-3B、5-CTGGCAG-3C、5-CCCGGG-3;D、5-GGATCC-345.黏性末端連接法是最常用的連接方法，具有許多優(yōu)點，但是也有一些不足，請指出這些不足之處。46.基因工程中所用的大腸桿菌菌株是__________的菌株，這樣可以避免從中分離出來的DNA，不被限制性核酸內(nèi)切酶完全消化或完全不被消化。47.我國科學家在利用基因工程培育抗蟲棉的過程中，重組子導入全部受體細胞占的受體細胞的多少A、大部分B、一半C、很少D、全部48.用_________表達乳鐵蛋白可謂是乳腺生物反應器的典型代表。49.作為載體需要具備哪些功能？50.何謂轉(zhuǎn)基因動物？51.質(zhì)粒載體的裝載容量為10Kb-20Kb。52.YAC是下列哪種克隆載體的縮寫A、酵母人工染色體B、人工Y染色體C、細菌人工染色體D、粘粒53.下列具有生物活性的外源蛋白是A、包涵體型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、復合蛋白54.T4DNA連接酶和E．coli連接酶都能催化平末端和黏性末端的連接。55.基因工程中的工具酶有哪些A、限制性核酸內(nèi)切酶B、DNA連接酶C、DNA聚合酶D、堿性磷酸酶E、末端核苷酸轉(zhuǎn)移酶56.核酸雜交的原理是根據(jù)RNA分子間互補。57.用同一種酶切割載體和目的基因后進行連接，連接產(chǎn)物會含大量自身環(huán)化載體，采用下列哪種酶處理，可防止自身環(huán)化A、核酸外切酶B、核苷酸激酶C、末端轉(zhuǎn)移酶D、堿性磷酸酶58.________技術(shù)是基于互補的DNA單鏈分子能夠形成穩(wěn)定雙螺旋結(jié)構(gòu)的天然特性而發(fā)展起來的。59.一般來說，識別序列的堿基對越多，則這種酶在DNA上出現(xiàn)的頻率越高。60.用藍白斑篩選重組子時，白斑表示外源基因插入到載體中了。61.只有完整的復制子才能進行獨立復制，一個失去了復制起點的復制子不能進行獨立復制。62.試述分子雜交技術(shù)的原理？63.對柯斯質(zhì)粒(cosmid)描述正確的是A、它具有COS位點，因而可進行體外包裝B、它具有質(zhì)粒DNA的復制特性C、進入受體細胞后，可引起裂解反應D、進入受體細胞后，可引起溶源化反應E、能與有同源序列的質(zhì)粒進行重組64.下列屬于基因工程步驟的是（）A、提取目的基因B、目的基因與運載體結(jié)合C、目的基因?qū)胧荏w細胞D、目的基因的表達65.下列哪一種方法屬于核酸分子雜交A、southernblotB、PCR擴增C、限制圖譜分析法D、抗藥性標志篩選66.大腸桿菌DNA連接酶在體內(nèi)的主要作用是在DNA復制、修復中封閉缺口，A、將雙鏈DNA分子中的5’磷酸基團同3’羥基基團末端重新形成磷酸二酯鍵B、作用時不消耗能量C、需要Mn2+等二價輔助離子D、也可以連接RNA分子67.連接反應中，下列哪項物質(zhì)是T4DNA連接酶所必須的輔助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP68.構(gòu)建cDNA文庫的首要步驟是A、分離既定組織或者細胞的DNAB、分離既定組織或者細胞的mRNAC、逆轉(zhuǎn)錄合成cDNAD、cDNA的克隆69.酵母人工染色體含有下列哪些元件A、酵母染色體的端粒序列B、酵母染色體的復制子C、酵母染色體的中心粒序列D、酵母系統(tǒng)的選擇標記E、大腸桿菌的復制子和選擇標記70.黏粒（Cosmid)是一種人工構(gòu)建的載體，A、它具有cos位點，因而可進行體外包裝B、它具有質(zhì)粒DNA的復制特性C、進入受體細胞后，可引起裂解反應D、進入受體細胞后，可引起溶原化反應E、能承載大于自身大小的DNA片段71.下面關(guān)于穿梭質(zhì)粒載體描述最正確的是A、在不同的宿主中具有不同的復制機制B、在不同的宿主細胞中使用不同的復制起點C、在不同的宿主細胞中使用不同的復制酶D、在不同的宿主細胞中具有不同的復制速率72.在基因工程中，可用堿性磷酸酶A、防止DNA的自身環(huán)化B、同多核苷酸激酶一起進行DNA的5’端標記C、制備突出的3’端D、催化DNA連接E、上述說法都正確73.在細菌中增殖來自某一生物的染色體DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合體叫做A、基因文庫B、基因庫C、基因組文庫D、cDNA文庫74.目前，嚴重危害人類健康和生命，其死亡率居各類疾病之首的是A、艾滋病B、心血管疾病C、惡性腫瘤D、血友病75.在眾多的植物轉(zhuǎn)基因方法中，_________的方法應用最多。76.用不同的產(chǎn)生黏性末端的限制性內(nèi)切核酸酶分別切割載體和外源DNA，得到的黏性末端是不親和的黏性末端。77.基因重組的步驟包括A、用PCR技術(shù)擴贈出大量的重組DNA分子B、用連接酶將外源DNA和載體連接C、通過轉(zhuǎn)化將重組DNA導入宿主細胞D、用載體上的相應抗性篩選含有重組DNA的克隆E、將重組DNA導入人體，用于疾病治療78.Tet是下列哪一種抗性標記的簡寫名稱A、氨芐青霉素B、卡那霉素C、氯霉素D、四環(huán)素79.連接反應中，為了維持還原環(huán)境，穩(wěn)定酶活性，需在連接緩沖液中添加A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP80._________是自然界存在的植物基因工程的天然載體。81.表達載體的結(jié)構(gòu)元件包括哪些A、具備與克隆載體相同的復制原點、多克隆位點、篩選標記B、啟動子C、轉(zhuǎn)錄終止子D、核糖體識別位點E、翻譯起始密碼子和終止密碼子82.催生基因工程技術(shù)誕生的關(guān)鍵技術(shù)是DNA轉(zhuǎn)化技術(shù)的突破。83.在轉(zhuǎn)基因植物中經(jīng)常會用到農(nóng)桿菌，請問農(nóng)桿菌是什么微生物？84.用藍白斑篩選重組子時，IPTG的作用是：A、作為顯色反應的指示劑B、作為酶的作用底物C、誘導載體上的抗性基因表達D、誘導載體上的LacZ基因表達85.轉(zhuǎn)錄水平的鑒定是指_________。86.在限制與修飾系統(tǒng)中，修飾主要是甲基化作用，一旦位點被甲基化了，其他的限制酶就不能切割了。87.下列哪一種限制性核酸內(nèi)切酶是單功能酶A、I型B、II型C、III型D、IV型88.通常可在三種溫度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以_________最好。89.質(zhì)粒具有下列哪幾項生物學特性A、質(zhì)粒的復制B、拷貝數(shù)C、不相容性D、轉(zhuǎn)移性E、表達性90.標記靈敏度高效果好的探針是A、32PB、地高辛C、生物素D、熒光素卷I參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:A2.正確答案:以抗體和抗原之間的相互作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。3.正確答案:D4.正確答案:指宿主細胞含有某種質(zhì)粒，但無異樣性狀表現(xiàn)，目前的檢測手段還未能檢測出因含該基因而導致性狀、宿主代謝物等的改變。5.正確答案:D6.正確答案:D7.正確答案:能夠分泌乳汁的轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)其他來源的基因產(chǎn)品，并通過乳腺分泌出來。8.正確答案:錯誤9.正確答案:DNA聚合酶補平10.正確答案:正確11.正確答案:錯誤12.正確答案:B13.正確答案:錯誤14.正確答案:A15.正確答案:DNA沿凝膠平面垂直方向移出并轉(zhuǎn)移到膜上，轉(zhuǎn)移后各個DNA片段在膜上的相對位置與凝膠中的相對位置一樣。16.正確答案:A17.正確答案:錯誤18.正確答案:A19.正確答案:錯誤20.正確答案:指含有nic/born基因，能自我轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒。21.正確答案:目的基因22.正確答案:A23.正確答案:B24.正確答案:20世紀70年代25.正確答案:A26.正確答案:錯誤27.正確答案:引物28.正確答案:B29.正確答案:基因組克隆包含所有不在cDNA中出現(xiàn)的內(nèi)含子。30.正確答案:Southern雜交31.正確答案:EcoRl32.正確答案:經(jīng)典的手工測序；第一代測序技術(shù)；第二代測序技術(shù)；第三代測序技術(shù)。33.正確答案:轉(zhuǎn)基因小鼠34.正確答案:指該啟動子指導的基因表達于各個組織。35.正確答案:A36.正確答案:B37.正確答案:A38.正確答案:YAC帶有天然染色體所有的功能元件，包括一個著絲粒，一個DNA復制起點，兩個端粒。YAC能夠容納長達幾百kb的外源DNA，這是質(zhì)粒和黏粒辦不到的。大片段的插入更有可能包含完整的基因，在染色體步移中每次允許更大的步移距離，同時能夠減少完整基因組文庫所需的克隆數(shù)目。39.正確答案:C40.正確答案:DNA41.正確答案:A,B,C,D,E42.正確答案:A43.正確答案:啟動子從轉(zhuǎn)錄模式上分為：組成型啟動子和誘導型啟動子，表達系統(tǒng)常選用誘導型啟動子，機理：指在某些特定的物理或化學信號的刺激下，該種類型的啟動子可以大幅度的提高基因的轉(zhuǎn)錄水平。44.正確答案:A45.正確答案:(1)載體易自身環(huán)化；(2)若是用同一種限制性內(nèi)切核酸酶產(chǎn)生的黏性末端連接又不易定向克??；(3)難插入特定的基因；(4)再者就是大片段DNA的重組率較低，即使用堿性磷酸酶處理了載體，防止了載體的自身環(huán)化，載體也有成環(huán)的傾向；(5)用這種方法產(chǎn)生的重組體往往含有不止一個外源片段或不止一個載體連接起來的串聯(lián)重組體，增加篩選工作的困難。46.正確答案:甲基化酶失活突變47.正確答案:C48.正確答案:轉(zhuǎn)基因牛49.正確答案:為外源基因提供在受體細胞中的復制和整合能力；為外源基因提供進入受體細胞的轉(zhuǎn)移能力；為外源基因提供在受體細胞中的擴增和表達能力，外源基因的擴增依賴于載體分子在受體細胞中高拷貝自主復制的能力。50.正確答案:指利用基因工程技術(shù)，將人們想要研究的基因在動物體實現(xiàn)表達。51.正確答案:錯誤52.正確答案:A53.正確答案:B54.正確答案:錯誤55.正確答案:A,B,C,D,E56.正確答案:錯誤57.正確答案:D58.正確答案:核酸雜交59.正確答案:錯誤60.正確答案:正確61.正確答案:正確62.正確答案:將標記的核酸探針以堿基互補配對原則與組織細胞中的待測核酸進行特異性的雜交組合，形成探針標記與待測核酸的雜交體，然后利用各種標記物的顯色技術(shù)，在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下探察待測目標核酸的存在及位置。63.正確答案:A,B,D,E64.正確答案:A,B,C,D65.正確答案:A66.正確答案:A67.正確答案:D68.正確答案:B69.正確答案:A,B,C,D,E70.正確答案:A,B,D71.正確答案:B72.正確答案:A,B73.正確答案:A74.正確答案:C75.正確答案:農(nóng)桿菌介導76.正確答案:錯誤77.正確答案:A,B,C,D78.正確答案:D79.正確答案:A80.正確答案:Ti質(zhì)粒81.正確答案:A,B,C,D,E82.正確答案:錯誤83.正確答案:存在于土壤中的一種革蘭氏陰性細菌，能在自然條件下感染大多數(shù)雙子葉植物的受傷部位，并誘導產(chǎn)生冠癭瘤或發(fā)狀根。84.正確答案:D85.正確答案:mRNA檢測86.正確答案:錯誤87.正確答案:B88.正確答案:-70℃89.正確答案:A,B,C,D90.正確答案:C卷II一.綜合考核題庫(共90題)1.具平末端的DNA片段的連接可以采用________________、同聚物加尾法、銜接物連接法。2.柯斯質(zhì)粒是一類人工構(gòu)建的質(zhì)粒-噬菌體雜合載體，它的復制子來自_________，cos位點序列來自λ噬菌體。3.在LacI標記基因插入外源基因，經(jīng)IPTG誘導，在X-gal培養(yǎng)基中顯_________色，為陽性克隆。4.在連續(xù)流加新鮮培養(yǎng)基的同時連續(xù)放出發(fā)酵液，這種培養(yǎng)方式是A、補料分批培養(yǎng)B、連續(xù)培養(yǎng)C、透析培養(yǎng)D、分批培養(yǎng)5.雙酶切或多酶切時，一般先用低鹽濃度的酶切，再用高鹽濃度的酶切。6.誘導型啟動子7.Cre-loxP系統(tǒng)兩個loxP位點位于同一條DNA鏈上且方向相同，Cre重組酶敲除loxP間的序列8.既能在E．coli又能在S．cerevisiae中自我復制的載體DNA稱為_________。9.具有EcoRI末端的外源DNA片段可以以兩個方向插入到EcoRI末端的載體中。10.一般情況下，質(zhì)粒既可以整合到染色體上，也可以獨立存在。11.關(guān)于轉(zhuǎn)化的敘述中錯誤的是A、處于感受態(tài)的細菌易于吸收外源性DNAB、常用的制備感受態(tài)的方法是用冰冷的CaCl2溶液處理C、細菌吸收外源性DNA，遺傳性狀可發(fā)生改變D、感受態(tài)在細菌生長的任何時期都可出現(xiàn)12.下列各常用載體的裝載量排列順序，正確的是A、Cosmid;YAC;PlasmidB、YAC;Cosmid;PlasmidC、Plasmid;YAC;CosmidD、Cosmid;Plasmid;YAC13.轉(zhuǎn)基因技術(shù)導致的生物安全威脅屬于生態(tài)環(huán)境破壞。14.基因組文庫一般保存在多少溫度下A、4℃B、-10℃C、-60℃D、-80℃15._________是指利用基因工程原理和技術(shù)，將感興趣的基因在植物中表達并實現(xiàn)穩(wěn)定遺傳。16.1970年，第一次重組DNA分子轉(zhuǎn)化成功的基因克隆實驗，標志著基因工程誕生了。17.λ噬菌體DNA和M13單鏈噬菌體DNA在成熟前的DNA復制都是用滾環(huán)模型。18.作為PUC系列載體抗性篩選標記的是A、卡那霉素B、四環(huán)素C、氨芐青霉素D、氯霉素19.基因工程在食品工業(yè)上有何應用發(fā)展？20.下列是構(gòu)建基因組文庫的常用載體，哪一種載體需要用的受體細胞和其余三種不一樣A、柯斯質(zhì)粒B、YACC、BACD、噬菌體21.將攜帶有外源基因并能持久傳遞給子代的動物稱為_________。22.大腸桿菌作為外源基因表達系統(tǒng)的優(yōu)點是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆機表達系統(tǒng)成熟完善D、全基因組測序完成E、被美FDA批準為安全的基因工程受體生物23.基因工程藥物的特點是高技術(shù)，短周期，高投入，高風險，高收益。24.基因打靶包括基因敲除和_________。25.PCR的衍生技術(shù)包括A、反轉(zhuǎn)錄PCRB、實時熒光定量PCRC、反向PCRD、巢式PCRE、RACE-PCR26.質(zhì)粒具有____________，它是指在自然條件下，很多質(zhì)?？梢酝ㄟ^稱為細菌接合的作用轉(zhuǎn)移到新宿主內(nèi)。27.下面關(guān)于多克隆位點MultipleCloneSite（MCS)的描述錯誤的一項是A、僅位于質(zhì)粒載體中B、具有多種酶的識別序列C、不同酶的識別序列可以有重疊D、一般是人工合成后添加到載體中28.對松弛型質(zhì)粒描述正確的是A、在寄主細胞中拷貝數(shù)較多B、可用氯霉素擴增C、一般沒有選擇標記D、上述A、B

兩項正確29.下列哪一種酶作用時需要引物?A、限制性核酸內(nèi)切酶B、末端轉(zhuǎn)移酶C、反轉(zhuǎn)錄酶D、DNA連接酶30.目前應用最廣泛的原核表達系統(tǒng)是A、酵母菌表達系統(tǒng)B、枯草桿菌表達系統(tǒng)C、大腸桿菌表達系統(tǒng)D、葡萄球菌表達系統(tǒng)31.將含有一個mRNA的DNA拷貝的克隆稱作一個cDNA克隆，源于同一批RNA制備物的克隆群則構(gòu)建了一個______。32.雙鏈DNA中一段自我互補的序列被稱為回文序列，這種序列一般具有哪些特征。A、有對稱軸B、兩條鏈的5’→3’方向的序列相同C、是Ⅱ類酶的識別序列D、可增強基因的表達E、是I類酶的識別序列33.末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶起作用時需要A、二價陽離子B、一價陰離子C、二價陰離子D、一價陽離子34.pBR322是一種改造型的質(zhì)粒，含有兩個抗性基因，其中四環(huán)素抗性基因來自A、ColElB、Ri質(zhì)粒C、pSCl01D、pUCl835._________的使用，使基因操作技術(shù)有了突破性的飛躍，成為2011年的Nature年度技術(shù)。36.Cohen等在_________年構(gòu)建了第一個有功能的重組DNA分子。37.PCR反應中常用的酶是______。38.最早建立成功的轉(zhuǎn)基因哺乳動物是A、轉(zhuǎn)基因猴B、轉(zhuǎn)基因小鼠C、轉(zhuǎn)基因綿羊D、轉(zhuǎn)基因豬39.當載有文庫的菌落被轉(zhuǎn)移到雜交膜上用于篩選時，需要堿性溶液處理的步驟，這一步驟的意義何在?A、啟動雜交探針與互補序列間的反應B、標記DNA，便于檢測C、裂解菌體細胞，并使DNA變性D、促使文庫DNA結(jié)合到雜交膜上40.要對一雙鏈的DNA分子進行3’端標記，可用A、DNA聚合酶IB、T4DNA聚合酶C、T7DNA聚合酶D、Klenow酶41.構(gòu)建重組子時中不需要A、基因載體B、DNA連接酶C、核酶D、限制酶42.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_________切割DNA聚合酶I得到的分子量為76kDa的大片段。43.通過基因敲除技術(shù)使生物體缺失一個或更多基因，從而判斷這些被敲掉基因的功能，常稱之為_______________。44.影響限制性核酸內(nèi)切酶酶切的反應條件有哪些A、溫度B、鹽離子濃度C、緩沖體系D、反應體積和甘油濃度E、限制性核酸內(nèi)切酶反應的時間45.基因表達載體中啟動子的本質(zhì)是_________。46.下列哪一項不是逆轉(zhuǎn)錄病毒的特點A、基因組很小B、表達時間短C、可感染分裂細胞D、可整合到宿主染色體上47.由于DNA是由四種堿基組成的，所以任何限制性內(nèi)切核酸酶的切割頻率的理論值應該是_________。48.M1載體在多克隆位點的兩側(cè)引入了T7和T3兩個噬菌體的啟動子，這樣增加了該載體的功能，下述四種功能中哪一種是不正確的?A、可以對插入到多克隆位點的外源片段進行轉(zhuǎn)錄分析B、利用這兩個啟動子的通用引物進行PCR擴增C、利用通用引物進行序列分析D、利用這兩個啟動子進行定點突變49.Southern印跡的DNA探針()雜交。A、可與任何含有相同序列的DNA片段B、可與任何含有互補序列的DNA片段C、可與用某些限制性內(nèi)切核酸酶切成的DNA片段D、只與完全相同的片段50.什么是熒光定量PCR?51.列舉質(zhì)粒載體必須具備的4個基本特性。52.關(guān)于cDNA的最正確的說法是A、同mRNA互補的單鏈DNAB、同mRNA互補的雙鏈DNAC、以mRNA為模板合成的雙鏈DNAD、以上都正確

53.核酸修飾酶包括有哪些酶？54.迄今所發(fā)現(xiàn)的限制性內(nèi)切核酸酶既能作用于雙鏈DNA，又能作用于單鏈DNA。55.PCR反應中引物長度一般是A、5bpB、10bpC、16bpD、20bp56.YAC是至今最大容量的克隆載體。57.寫出動物基因工程的常用方法？58.核酸雜交探針可分為兩大類：DNA探針和_______。59.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一個6bp的Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶的識別序列，該位點的序列可能是什么？60.下列哪一種疾病是獲得性免疫缺陷綜合癥A、血友病BB、心血管疾病C、艾滋病D、囊性纖維化61.基因工程中有三種主要類型的載體：_________、病毒DNA質(zhì)粒和病毒DNA雜合體。62.何謂基因組文庫？63.克隆即無性繁殖的意思，通過克隆可以在無性的條件下獲得遺傳結(jié)構(gòu)和表型完全相同的一群個體。64.II型限制性核酸內(nèi)切酶的酶蛋白分子是由單一亞基構(gòu)成。65.基因組文庫中包括有內(nèi)含子和外顯子，而cDNA文庫中則不含_________。66.逆轉(zhuǎn)錄酶具有下列哪些酶活性A、5’-3’聚合酶活性B、5’-3’DNA外切酶活性C、3’-5’外切酶活性D、末端轉(zhuǎn)移酶活性E、RnaseH活性67.切口平移法標記DNA探針時應用的酶是_____。68.利用反義RNA、核酶等反義技術(shù)及RNA干擾技術(shù)等能特異地封閉基因表達的特性，抑制一些有害基因的表達，以達到治療疾病的目的。這是基因治療策略中的哪一項A、基因修正B、基因增補C、基因激活D、基因失活69.Ⅱ型限制性內(nèi)切核酸酶：A、有內(nèi)切核酸酶和甲基化酶活性且經(jīng)常識別回文序列B、僅有內(nèi)切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一種酶提供C、限制性識別非甲基化的核苷酸序列D、有外切核酸酶和甲基化酶活性70._________是分子生物學、組織化學及細胞學相結(jié)合而產(chǎn)生的一門新興技術(shù)，始于20世紀60年代。71._________成為國際國內(nèi)人體健康戰(zhàn)略的重中之重。72.DNA片段之間的連接方式有哪些？73.Ti質(zhì)粒74.BergP的創(chuàng)造性的工作是在體外構(gòu)建了重組DNA分子，所用的載體是一種具有復制能力的細胞質(zhì)質(zhì)粒。75.基因工程中常用的DNA聚合酶有哪些？76.pBR322質(zhì)粒克隆載體含有的抗性標記為A、四環(huán)素和氨芐青霉素B、氨芐青霉素和慶大霉素C、四環(huán)素和慶大霉素D、潮霉素和四環(huán)素77.下列哪一種測序方法不需要跑膠A、化學降解法B、自動測序法C、膠磷酸測序法D、雙脫氧末端終止法78.下列哪一項不屬于遺傳表型檢測法A、抗藥性標記基因B、LacZ基因藍白斑篩選C、GFPD、核酸分子雜交79._________是一種借助顯微鏡將外源DNA直接注入受體細胞的方法。80._________是指真核生物基因組中能特異與核基質(zhì)結(jié)合并富含AT的DNA序列。81.Sanger雙脫氧末端終止法膠板上的鏈就是模板鏈。82.根據(jù)Northern印跡的結(jié)果可以說明_________。83.質(zhì)粒生物學特性不包括A、自我復制B、轉(zhuǎn)移性C、相容性D、高拷貝數(shù)84.受體細胞的_________是接受外源DNA的生理狀態(tài)_。85.用來鑒定DNA的技術(shù)是：A、Northern雜交B、Western雜交C、親和層析D、Southern雜交86._________讓外源DNA沿著花粉管經(jīng)過珠心進入尚未形成正常細胞壁的卵子、合子或早期胚胎細胞中，從而實現(xiàn)基因的轉(zhuǎn)移。。87.基因重組只能通過人工進行。88.同尾酶89.DNA連接酶反應的時間一般為_____________就足以取得較好的連接效果。90.在cDNA技術(shù)中，所形成的DNA發(fā)夾環(huán)可用A、限制性內(nèi)切核酸酶切除B、3’切核酸酶切除C、S1核酸酶切除D、5’切核酸酶切除卷II參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:直接鏈接法2.正確答案:質(zhì)粒3.正確答案:白4.正確答案:B5.正確答案:正確6.正確答案:在一定的誘導劑作用下，才能啟動基因的轉(zhuǎn)錄與表達。7.正確答案:正確8.正確答案:穿梭載體9.正確答案:正確10.正確答案:錯誤11.正確答案:D12.正確答案:B13.正確答案:錯誤14.正確答案:D15.正確答案:轉(zhuǎn)基因植物16.正確答案:錯誤17.正確答案:正確18.正確答案:D19.正確答案:主要是通過基因重組，使各種轉(zhuǎn)基因生物提高生產(chǎn)谷氨酸、調(diào)味劑、酒類和油類等有機物的產(chǎn)率；或者改良這些有機物組成成分，提高利用價值。20.正確答案:B21.正確答案:轉(zhuǎn)基因動物22.正確答案:A,B,C,D,E23.正確答案:錯誤24.正確答案:基因敲入25.正確答案:A,B,C,D,E26.正確答案:轉(zhuǎn)移性27.正確答案:A28.正確答案:D29.正確答案:C30.正確答案:C31.正確答案:cDNA文庫32.正確答案:A,B,C33.正確答案:A34.正確答案:C35.正確答案:ZFN技術(shù)36.正確答案:197337.正確答案:TaqDNA聚合酶38.正確答案:B39.正確答案:C40.正確答案:B41.正確答案:A42.正確答案:枯草桿菌蛋白酶43.正確答案:缺失基因功能44.正確答案:A,B,C,D,E45.正確答案:一段DNA片段46.正確答案:B47.正確答案:4n48.正確答案:D49.正確答案:B50.正確答案:是一種利用外參或者內(nèi)參為標準，在PCR體系中加入熒光信號強度與DNA數(shù)目相關(guān)的熒光物質(zhì)，并通過對PCR擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時變化檢測來實現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析工作。51.正確答案:（1）獨立復制；（2）有選擇標記；（3）有獨特的酶切位點；（4）能轉(zhuǎn)化但不擴散。52.正確答案:C53.正確答案:末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶；T4多核苷酸激酶；堿性磷酸酶；核酸外切酶；單鏈DNA內(nèi)切酶；甲基化酶。54.正確答案:錯誤55.正確答案:D56.正確答案:正確57.正確答案:顯微注射技術(shù)構(gòu)建轉(zhuǎn)基因小鼠；基因打靶策略；病毒載體法；精子載體法；ZFN介導轉(zhuǎn)基因；TALEN技術(shù)。58.正確答案:RNA探針59.正確答案:回文序列是：5'-CATATG-3'。60.正確答案:C61.正確答案:質(zhì)粒DNA62.正確答案:指將某生物的全部基因阻DNA切割成一定長度的DNA片段克隆到某種載體上而形成的集合。63.正確答案:錯誤64.正確答案:正確65.正確答案:內(nèi)含子66.正確答案:A,B,C,D,E67.正確答案:DNA聚合酶I68.正確答案:D69.正確答案:B70.正確答案:原位雜交技術(shù)71.正確答案:轉(zhuǎn)化醫(yī)學72.正確答案:具黏性末端的DNA片段之間的連接、具平末端DNA片段之間的連接、DNA片段末端修飾后進行連接、DNA片段加連桿（linker）后的連接。73.正確答案:是根癌農(nóng)桿菌染色體外的遺傳物質(zhì)，為共價閉合雙鏈環(huán)狀DNA分子。74.正確答案:錯誤75.正確答案:大腸桿菌DNA聚合酶；Klenow大片段酶；T7DNA聚合酶；T4DNA聚合酶；修飾過的T7DNA聚合酶；逆轉(zhuǎn)錄酶；TaqDNA聚合酶。76.正確答案:A77.正確答案:C78.正確答案:D79.正確答案:顯微注射法80.正確答案:核基質(zhì)附著區(qū)81.正確答案:錯誤82.正確答案:外源基因是否進行了轉(zhuǎn)錄83.正確答案:C84.正確答案:感受態(tài)85.正確答案:D86.正確答案:花粉管導入法87.正確答案:錯誤88.正確答案:有的限制性核酸內(nèi)切酶雖然識別序列各不相同，但切割后都產(chǎn)生相同的黏性末端，稱之為同尾酶。89.正確答案:30min90.正確答案:C卷III一.綜合考核題庫(共90題)1.分離既定組織或者細胞的_____________是構(gòu)建cDNA文庫的首要步驟。2.用Sanger雙脫氧鏈終止法進行DNA測序時，必須具有幾個反應系統(tǒng)A、5個B、2個C、3個D、4個3.原核啟動子是由兩端緊密連接且又高度保守的核苷酸序列組成。4.基因工程的三大基本元件是供體基因、受體細胞、_____________。5.基因治療一般都是通過體內(nèi)法這一途徑進行的。6.將抗體、抗原或細胞因子的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，改變病人免疫狀態(tài)，從而達到預防和治療疾病的目的。這是基因治療策略中的哪一項A、基因增補B、基因激活C、基因失活D、免疫調(diào)節(jié)7.Southern雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質(zhì)D、染色體8.DNA沿凝膠平面垂直方向移出并移除到膜上，轉(zhuǎn)移后各個DNA片段在膜上的相對位置與凝膠中的相對位置一樣，因此也稱為_____________。9.下列哪種酶的發(fā)現(xiàn)是PCR反應能迅速發(fā)展和廣泛應用的主要原因A、TaqDNA聚合酶B、核酸內(nèi)切酶C、T4多核苷酸激酶D、S1核酸酶10.DNA聚合酶I_________的是用枯草桿菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子質(zhì)量為76kDa的大片段。11.在cDNA的合成中要用到_________，其作用是切除在第二鏈合成時形成的發(fā)夾環(huán)。12.核酸分子雜交探針必須滿足的條件不包括A、單鏈結(jié)構(gòu)B、足夠長度C、不含互補區(qū)D、只能是DNA13.基因工程中所用的質(zhì)粒載體大多是改造過的，真正的天然質(zhì)粒載體很少，在下列載體中只有哪種被視為用作基因工程載體的天然質(zhì)粒載體。A、pBR322B、pSC101C、pUB110D、pUC1814.限制與修飾現(xiàn)象是宿主的一種保護體系，它是通過對外源DNA的修飾和對自身DNA的限制實現(xiàn)的。15.染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)是研究生命體組織或細胞內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的一種技術(shù)方法16.巴斯德畢赤酵母表達系統(tǒng)優(yōu)于釀酒酵母表達系統(tǒng)。17.關(guān)于重組體的敘述，下列哪項不正確：A、重組體可直接表達外源基因B、重組體只能在宿主細胞或體外表達系統(tǒng)中表達外源基因C、重組體是由目的基因和載體通過連接酶連接而成的D、重組體中含有外源基因18.以病毒為載體產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因的動物是_________。19.核酸雜交探針就是帶有放射性標記的DNA分子。20.什么是S1核酸酶作圖(S1nucleasemapping)？21.一個帶有質(zhì)粒的細菌在有EB的培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，一部分細胞中已測不出質(zhì)粒，這種現(xiàn)象叫_________ 。22.T4DNA連接酶能催化（）相鄰的5’端磷酸基團與3’端羥基末端之間形成磷酸二酯鍵A、雙鏈DNAB、單鏈DNAC、mRNAD、rRNA23.基因工程的操作程序可簡單地概括為A、載體和目的基因的分離、提純與鑒定B、分、切、接、轉(zhuǎn)、篩C、將重組體導人宿主細胞，篩出含目的基因的陽性株D、將載體和目的基因接合成重組體24.沒有啟動子，基因就不能轉(zhuǎn)錄。25.下列哪一型限制性核酸內(nèi)切酶占比例最大A、I型B、II型C、III型D、IV型26.基因工程藥品的試驗分為幾個時期A、2個B、3個C、4個D、1個27._________是指編碼產(chǎn)物能夠被快速測定，常用來判斷外源基因是否已經(jīng)成功導入寄主細胞并檢測其表達活性的一類特殊用途的基因。28.PCR反應中DNA模板量一般為A、100-10000拷貝B、100-100000拷貝C、1000-10000拷貝D、10-100拷貝29.如果PCR的每一次循環(huán)都把上一次循環(huán)中合成的DNA增加了1倍，那么10個循環(huán)就擴增了1000 倍，20個循環(huán)就擴增了100萬倍，30個循環(huán)就擴增了10億倍。30.常規(guī)PCR反應所用到的酶是()A、限制性核酸酶B、逆轉(zhuǎn)錄酶C、DNA連接酶D、Taq酶31.Ptrp表示（）A、噬菌體啟動子B、色氨酸啟動子C、乳糖和色氨酸復合啟動子D、乳糖啟動子32.利用噬菌體或動物病毒作為載體轉(zhuǎn)化細胞的過程稱為轉(zhuǎn)移。33.PCR引物常見的長度范圍是30bp-45bp。34.說明SangerDNA測序法的原理。35.M13噬菌體顆粒是_________狀的，其基因組為單鏈DNA。36.__________通常是指通過基因工程、抗體工程、細胞工程技術(shù)等制備生物藥品用于疾病診斷、預防和治療的行業(yè)。37.在DNA分離過程中，通常要進行透析，其目的是_________。38.基因工程的基本流程是A、目的基因的分離、獲取與制備B、目的基因與載體連接構(gòu)建成為重組載體分子C、重組DNA分子導入到受體細胞D、外源目的基因陽性克隆的鑒定和篩選E、外源目的基因的表達39.原位雜交是指A、菌落雜交B、液相雜交C、直接對染色體或組織雜交D、轉(zhuǎn)膜雜交40.基因重組的載體必須具備下列哪些特點：A、本身是一個復制單位，能在受體細胞中復制B、插入外源DNA后也不影響自身的復制C、易于進入受體細胞D、通過自身的酶系在受體細胞中復制E、通常帶有抗性基因，易于篩選和鑒定41.被FDA批準為安全的基因工程受體生物的細菌是A、金黃色葡萄球菌B、蠟樣芽孢桿菌C、大腸桿菌D、變形桿菌42.Cre-loxP系統(tǒng)四個loxP位點分別位于兩條DNA鏈或染色體上，Cre重組酶誘導兩條DNA鏈發(fā)生交換或染色體易位43.基因工程中常用的DNA聚合酶有A、大腸柑橘聚合酶IB、Klenow大片段酶C、T4噬菌體聚合酶D、T7噬菌體聚合酶E、逆轉(zhuǎn)錄酶44.關(guān)于宿主控制的限制修飾現(xiàn)象的本質(zhì)描述不太恰當?shù)氖茿、由作用于同一DNA序列的兩種酶構(gòu)成B、這一系統(tǒng)中的核酸酶都是II類限制性內(nèi)切核酸酶C、這一系統(tǒng)中的修飾酶主要是通過甲基化作用對DNA

進行修飾D、不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制--修飾系統(tǒng)45.在微生物遺傳學和分子遺傳學研究領(lǐng)域中的技術(shù)上的三大發(fā)明對基因工程的誕生起到了決定性的作用，這三大發(fā)明是下列哪些A、利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶體外切割和連接DNA片段B、遺傳密碼子的破譯C、質(zhì)粒改造成載體以攜帶DNA片段克隆D、逆轉(zhuǎn)錄酶的使用E、明確了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)和半保留復制機制46.釀酒酵母表達系統(tǒng)常用啟動子有哪些？47.下列不是Southern印跡步驟的是（）A、DNA與載體的連接B、用凝膠電泳分離DNA片段C、DNA片段轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上D、用限制酶消化DNA48.在非最適反應條件下，有些限制性核酸內(nèi)切酶能切割和識別與特定識別序列相似的序列，這種改變的特殊活性叫做______。49.常用的固相雜交類型有A、Southern雜交B、Northern雜交C、組織原位雜交D、菌落原位雜交E、斑點雜交50.關(guān)于黏粒載體的描述錯誤的是A、是由λ噬菌體與質(zhì)粒DNA重組的載體B、既有質(zhì)粒的特性，又有噬菌體DNA的特性(如可體外包裝)C、可插入大片段的外源DNA片段D、可像YAC載體那樣構(gòu)建大片段的基因組文庫

51.原核啟動子在轉(zhuǎn)錄起始點上游有一段富含A和T的區(qū)域稱為A、-15區(qū)B、-35區(qū)C、-45區(qū)D、-10區(qū)52.限制性核酸內(nèi)切酶是由細菌產(chǎn)生的，其生理意義是A、修復自身的遺傳缺陷B、促進自身的基因重組C、強化自身的核酸代謝D、提高自身的防御能力53.利用DNA自動測序時通常進行標記的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP54.表達載體和基因工程克隆一般載體在元件構(gòu)成上有何差別？55.用同一種酶切割載體和外源DNA得到黏性末端后，為防止它們自身環(huán)化，要用CIP將它們脫磷酸。56.______________是應用最廣也是研究最深入的DNA聚合酶。57.不同的限制性核酸內(nèi)切酶都鹽離子強度有不同的要求，一般按離子強度不同分為低鹽、_________、高鹽三類。58.基因操作的核心部分是_________。59.原核表達系統(tǒng)中通常使用的可調(diào)控的啟動子有A、LacB、TrpC、TacD、RecE、Tra60.一個質(zhì)粒含有四環(huán)素抗性基因(tetr)和LacZ基因，tetr內(nèi)有一HindIII位點，LacZ中有一EcoRI

位點。如用這兩種切割載體一并連接入相應的外源片段，則帶有該重組質(zhì)粒的細胞將A、對四環(huán)素敏感，在X-gal平板上呈現(xiàn)藍色B、有四環(huán)素抗陛，在X-gal平板上呈現(xiàn)白色C、對四環(huán)素敏感，在X-gal平板上呈現(xiàn)白色D、有四環(huán)素抗性，在X-gal平板上呈現(xiàn)藍色61.某學生在用EcoRI切割外源DNA片段時，出現(xiàn)了星號活性，請分析可能的原因？62.PCR反應中的復性溫度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃63.Cosmid的特點元件是64.PCR技術(shù)的應用在哪些方面？65.擴增外源基因時需要DNA載體中的（）性質(zhì)A、青霉素抗性B、卡那霉素抗性C、自我復制能力D、自我轉(zhuǎn)錄能力66.常用的_________使抗生素失活，解除抗生素對轉(zhuǎn)化細胞在轉(zhuǎn)錄和翻譯過程中的抑制作用，使轉(zhuǎn)化細胞得以繼續(xù)生長。67.限制酶主要是從_________中分離純化出來的。68.下列哪一項不是質(zhì)粒作載體使用時必須具備的條件A、分子量小B、高拷貝數(shù)C、增強子D、MCS69.__________________是指那些既能在真核細胞中繁殖又能在原核細胞中繁殖的載體。70.用化學降解法進行DNA測序時，必須具有幾個反應系統(tǒng)A、2個B、3個C、4個D、1個71.II類限制酶反應中必須添加的陽離子是A、Na+B、Ca2+C、Mg2+D、Mn2+72.原生質(zhì)體就是去處了細胞壁的細胞。73.westernblot是屬于下列哪一種檢測方法A、表型檢測法B、蛋白質(zhì)雜交檢測法C、序列鑒定法D、物理特性檢測法74.下列哪項是表達載體特有的而克隆載體沒有的元件A、復制點B、篩選標記C、多克隆位點D、啟動子75.經(jīng)典的DNA測序方法有兩種，即Sanger雙脫氧末端終止法和_______________。76.請寫出天然DNA提取的三個主要步驟。77.klenow片段聚合酶具有哪些活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端轉(zhuǎn)移酶活性78.甲醇酵母表達系統(tǒng)具有的抗藥性基因是A、氨芐青霉素和卡那霉素B、四環(huán)素和氨芐青霉素C、氨芐青霉素和慶大霉素D、四環(huán)素和慶大霉素79.按照人們的意愿，改變基因中堿基的組成，以達到基因突變的技術(shù)稱為________。80.DNA經(jīng)限制性內(nèi)切酶切割后可產(chǎn)生兩種末端：___________和平頭末端。81.pGEM質(zhì)粒有幾個啟動子A、0個B、2個C、3個D、4個82.對外源基因進行百萬倍的擴增可采用________技術(shù)83.根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能特性，可將DNA限制性內(nèi)切酶分為幾類A、I型酶B、II型酶C、III型酶D