玉米須多糖的清熱利膽作用及急性毒性研究

玉米須多糖的清熱利膽作用及急性毒性研究

【關鍵詞】玉米須多糖；解熱作用；利膽作用；急性毒性

摘要：目的研究玉米須多糖的清熱利膽作用及急性毒性。方法采用干酵母、2，4二硝基苯酚致大鼠發(fā)熱的模型觀察玉米須多糖的解熱作用；采用膽管引流法分別收集并計量給藥后，1，，2，h的膽汁的方法觀察SMPS對肝臟分泌膽汁的影響；采用測定小鼠膽囊重量的方法觀察SMPS對膽囊的影響；對SMPS進行了小鼠急性毒性實驗。結果高、中劑量的SMPS對發(fā)熱大鼠有較好的解熱作用；能明顯增強膽汁分泌量；促進膽囊收縮，降低膽囊重量；小鼠急性毒性實驗表明SMPS毒性低，無法測得LD50。結論玉米須多糖不僅具有明顯的清熱利膽作用而且小鼠急性毒性實驗表明SMPS毒性低，無法測得LD50。

關鍵詞：玉米須多糖；解熱作用；利膽作用；急性毒性

StudiesonAntipyreticCholereticEffectandAcuteToxicityofstigmamaydispolysaccharide

Abstract：ObjectiveToobservetheantipyreticcholereticeffectandtheacutetoxicityofStigmaMaydisPolysaccharide(SMPS).MethodsTheantipyreticactivityofSMPSwasobservedinratswithhightemperatureinducedbydriedyeastand2,4-dinitrophenol;biliaryductcannulabileat，1，，2，hafterintraduodenaladministrationinratswascollectedandcountedtoobservetheeffectofSMPSonbiliarysecretion;theweightofcholecystinmicewascountedtoobservetheeffectofSMPSonthecholecystofmice;theacutetoxicitytestofSMPSwasdonewithatthedosesof2g/kgand1g/kgshowedantipyreticactivityinratswithhightemperatureinducedbydriedyeastand2,4-dinitrophenol;SMPScouldsignificantlyincreasethebiliarysecretion,decreasetheweightofcholecystinmice;theacutetoxicitytestshowedthattheacutetoxicityofSMPSwastoolowtomeasureshowsconsiderableantipyreticandcholereticeffectwithoutobvioustoxicity.

Keywords：StigmaMaydisPolysaccharide(SMPS);Antipyreticeffect;Cholereticeffect;Acutetoxicity

玉米須為禾本科玉蜀屬植物玉米ZeamaysL.的花柱和柱頭,是一種傳統(tǒng)的中草藥，在《全國中草藥匯編》《中藥大辭典》等當代中醫(yī)藥典籍中都有記載［1，2］。它含有多種化學成分，如揮發(fā)油、皂苷、生物堿、黃酮類、多聚戊糖、尿囊素、有機酸、脂溶性維生素K3、維生素E等［3，4］。其性味甘、平、無毒；有利尿、瀉熱、止血、平肝、利膽之效?？捎糜谥委熌I炎、膽結石、糖尿病、黃疸、麻疹、乳糜血尿、血崩等癥［2］?，F(xiàn)代藥理研究證明玉米須有顯著的利尿［5］、降血糖［6］、抑菌［7，8］、降壓［9］、增強免疫［9］、抗癌［10］等功效。但關于玉米須確切的利膽的藥理作用未見報道。我國玉米產量居世界第2位,產量約750萬噸。因此，作為玉米副產物的玉米須的資源十分豐富，但目前對它的開發(fā)利用非常有限，僅少量入藥外，大部分被白白丟棄。為了進一步開發(fā)利用玉米須資源，我們對玉米須的化學成分進行了提取、分離。在對玉米須提取物的有效作用部位進行了大量的篩選工作之后，發(fā)現(xiàn)玉米須多糖不僅具有利膽作用，還有解熱作用。同時，對玉米須多糖的急性毒性進行了研究，以期為進一步開發(fā)利用玉米須提供實驗依據(jù)。

1材料

動物昆明種小鼠，雄性，體重18～22g；Wistar大鼠，250～300g，雄性。均購自河南省實驗動物中心。

用藥

玉米須多糖的提取參照文獻中玉米須多糖的提取方法［11］，將玉米須(采自山東省臨沭)干粉置于沸水中煎煮1h，過濾，濾渣再次煎煮；合并兩次濾液，濃縮至1∶1，加入3倍體積的95％乙醇靜置30min，3000r/min下離心10min，所得沉淀物用95％乙醇、無水乙醇依次洗滌，中干燥稱重。所得沉淀物用苯酚硫酸法鑒定為多糖。主要依據(jù)多糖成分在硫酸作用下，先水解成單糖，單糖迅速脫水生成糠醛衍生物，然后和苯酚縮合成有色化合物，該化合物在490nm波長處有特征吸收。每克玉米須多糖相當于玉米須g。

消炎利膽片廣東博羅先鋒藥業(yè)集團有限公司生產，批號:050820。

阿司匹林腸溶片徐州平光制藥有限責任公司生產，批號：050706。

干酵母混懸液的制備［12］稱取干酵母10g，置于乳缽中，逐漸加入蒸餾水研磨為均勻的懸漿，最后定容為50ml，此液于臨用前配制。

2，4二硝基苯酚溶液的配制［12］精密稱取2，4二硝基苯酚150mg，置于80ml左右生理鹽水中，滴加5mol/LNaOH溶液，不斷攪拌，待藥液澄明變?yōu)榱咙S色，再加入生理鹽水至100ml。

統(tǒng)計分析結果均以+s表示，組間差異性比較采用單因素方差分析，自動處理，為有顯著性差異，為有非常顯著性差異。

2方法與結果

解熱作用研究

對干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響［12］實驗前3d每日測大鼠體溫1次，挑選體溫變化在37～℃，且自身體溫變化低于℃的雄性大鼠60只。實驗當日,取3次體溫的平均值作為基礎體溫,動物按10ml/kg皮下注射20%干酵母混懸液。注射干酵母混懸液3h后體溫開始上升。選取4h后體溫上升高于0.8℃的大鼠50只，隨機分成5組,每組10只。分別為：空白對照組;SMPS高劑量組；SMPS中劑量；SMPS低劑量組(/kg)；阿司匹林組。在注射干酵母混懸液后4h給藥1次?！M為腹腔注射，為灌胃給藥，給藥容積均為10ml/kg。測定致熱后2，3，4，5，7，9h大鼠體溫，并計算體溫變化值。結果見表1。實驗結果表明，大鼠注射干酵母混懸液后，體溫略有下降，到第3小時開始上升，7h達到高峰。SMPS高、中劑量組對大鼠干酵母混懸液致熱有明顯的解熱作用，作用強度隨藥物劑量增加而增強。

對2，4二硝基苯酚致大鼠發(fā)熱的影響［12］實驗前3d測大鼠體溫1次/d，挑選體溫變化在37～℃，且自身體溫變化低于℃的雄性大鼠50只，將實驗動物隨機分為5組，每組10只。分別為：空白對照組；SMPS高劑量組；SMPS中劑量；SMPS低劑量組(g/kg)；阿司匹林組?！M為腹腔注射，為灌胃給藥，給藥容積均為10ml/kg。給藥前測量體溫1次，作為0h時基礎體溫，給藥后隨即％的新配二硝基苯酚10ml/kg，測量注射給藥后1，2，3，4h時的體溫。結果見表2。實驗表明，SMPS高、中劑量組對2，4二硝基苯酚致熱有明顯的解熱作用，作用強度隨藥物劑量增加而增強。

表1SMPS對干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響

與空白對照組比較，*,**；n＝10

表2SMPS對2，4二硝基苯酚致大鼠發(fā)熱的影響

與空白對照組比較，*,**；n＝10

利膽作用研究

對大鼠膽汁分泌的影響［12］雄性Wistar大鼠50只，體重250～290g。隨機分為5組，每組10只。分別為：空白對照組SMPS高劑量組。SMPS中劑量。SMPS低劑量組(g/kg)。消炎利膽組。藥物用蒸餾水配制，給藥量均為10ml/kg,ig1次/d，連續(xù)給藥7d。末次給藥前12h禁食不禁水，實驗以20％烏拉坦腹腔麻醉后，打開腹腔。找到胃幽門部，翻轉十二指腸。對著亮處在十二指腸降部腸系膜中可清晰看到有韌性、里面流著黃色液體的膽管。用眼科鑷將覆蓋在表面的薄膜連續(xù)剝離2cm，以暴露出膽總管。在其下穿2根絲線，結扎乳頭部，用5號靜脈輸液針頭向肝臟方向做膽管穿刺，然后拔掉針頭，從開口處向肝臟方向插入外徑1mm左右的塑料管，結扎固定，收集膽汁。待膽汁流量穩(wěn)定后，按表3中分組及劑量從十二指腸進行末次給藥。給藥后每隔30min收集膽汁1次，共5次。記錄每30min膽汁流量，并計算5次膽汁的總流量。結果見表3。研究結果表明：SMPS連續(xù)給藥7d，各給藥組與空白對照組比較，膽汁流量有顯著增加。表明SMPS對大鼠肝臟膽汁分泌有明顯的促進作用，該作用隨著劑量增大而增強。

表3SMPS對大鼠膽汁分泌的影響

與空白對照組比較，*,**；n＝10

對小鼠膽囊重量的影響［13］取體重18～22g雄性小鼠50只。隨機分成5組，按表3劑量給藥。給藥前禁食16h。給藥后30min處死。摘出膽囊，稱重。計算各組膽囊重量。結果：空白對照組膽囊重mg，SMPS低劑量組mg，SMPS中劑量組mg，SMPS高劑量組mg，消炎利膽片組mg。SMPS中劑量組與對照組相比有顯著性差異，。SMPS高劑量組與對照組相比有非常顯著性差異，。研究結果表明：SMPS能減輕膽囊重量，推測其可能有加速小鼠膽囊收縮排空的作用。

急性毒性測定［12］

LD50測定預試預試時將SMPS按最大質量濃度和最大灌胃容積給藥，觀察7d。結果，SMPS按15g/kg給小鼠灌胃后均未出現(xiàn)死亡，表明SMPS毒性太低，測不出LD50。

最大耐受量的測定SMPS毒性低，預試中測不出LD50，故按最大質量濃度和最大灌胃體積給藥，測定小鼠最大耐受量。取小鼠20只，雌雄各半，用％的SMPS藥液ml/10g,即15g/kg，ig，8h1次，共3次，累計劑量45g/kg。給藥后觀察7d。結果，給藥小鼠在觀察期內未死亡1只，未出現(xiàn)豎毛、躁動、豎尾、興奮跳躍、蜷縮、多動、對刺激反應遲緩或過敏、也未出現(xiàn)強直、震顫及共濟失調等癥狀。證明小鼠對SMPS的最大耐受量為45g/kg。

［1］《全國中草藥匯編》編寫組.全國中草藥匯編，第2版［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1996:166.

［2］江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典，上冊［M］.上海:上?？萍汲霭嫔?，1977:555.

［3］BobryshevNmedicinalplant［J］.Kukkruza,1962,(9);59.

［4］NozzolilloL.Anthocyaninpigmentatuinofmaizesilk.BullLiaison-Groupepoly［J］.phenols,1992,(16):187.

［5］王鼎，郭蓉.玉米須利尿作用的初步研究［J］.內蒙古中醫(yī)藥，1991：38.

［6］李偉，陳穎莉，楊銘.玉米須降血糖的實驗研究［J］.中草藥，1995，26：305.

［7］OgiletsMbactericidalfacecreams［J］.OtkrytiyaIzobret,1987,(13):16.

［8］Neucere,JosephN.InhibitionofAspergillusfavusGrowthbysilkExtractsofResistantanSusceptibleCorn［J］.JournalAgriculturalFoodChem,1996,44(8):1982.

［9］湯魯宏，丁霄霖，尤麗芬，等.玉米須生物活性成分的初步研究--