慶大霉素和阿莫西林的協(xié)同作用對(duì)雞大腸桿菌病的治療試驗(yàn)

東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文學(xué)號(hào)：A06110080慶大霉素和阿莫西林的協(xié)同作用對(duì)雞大腸桿菌病的治療試驗(yàn)2015年11月NEAUB.A.DegreeDissertationNO：A06110080SynergisticEffectofGentamicinandAmoxicillinTreatmentTestofChickenEscherichiaColiStudent’sName：MengYuanjianSupervisor：LiuKexiangDepartmentandfaculty：VeterinaryMedicineMajor：VeterinaryMedicineNortheastAgriculturalUniversityHarbin·ChinaOct·2015慶大霉素和阿莫西林的協(xié)同作用對(duì)雞大腸桿菌病的治療試驗(yàn)-PAGE13-摘要雞大腸桿菌病是危害雞養(yǎng)殖業(yè)最為嚴(yán)重的疾病之一，是由大腸埃希菌屬中的致病性大腸桿菌所致的動(dòng)物和人共患的一種傳染病，以纖維素性漿膜炎、卵黃性腹膜炎和卡他性腸炎等為特征。大腸桿菌病多使用疫苗進(jìn)行預(yù)防，可以使用抗生素進(jìn)行治療。大腸桿菌病給養(yǎng)殖業(yè)造成極大的經(jīng)濟(jì)損失，為了能更好更有效的治療雞大腸桿菌病，本實(shí)驗(yàn)以自然感染大腸桿菌的患雞為治療動(dòng)物，研究藥物單獨(dú)用藥和聯(lián)合用藥對(duì)大腸桿菌病的療效。實(shí)驗(yàn)中將經(jīng)診斷患有大腸桿菌病的雛雞隨機(jī)分為3組，每組30只，第一組給藥硫酸慶大霉素（100mg/kg拌料）、第二組給藥阿莫西林可溶性粉（100mg/kg拌料）、第三組硫酸慶大霉素和阿莫西林可溶性粉聯(lián)合用藥（100mg/kg拌料，各50mg/kg），連續(xù)給藥5d。主要以各組治愈率和存活率等為標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)療效。結(jié)果表明，慶大霉素和阿莫西林對(duì)雞大腸桿菌病均有療效，治愈率分別為83%、73%，而混劑的治愈率為93%。死亡率分別為17%、13%、7%。有效率分別為83%、87%、93%實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明慶大霉素和阿莫西林均可有效控制大腸桿菌病，而混劑可有效增加療效，聯(lián)合用藥能更好的治療大腸桿菌病。 關(guān)鍵詞：雞；大腸桿菌；慶大霉素；阿莫西林；單獨(dú)用藥；聯(lián)合用藥AbstractChickenColibacillosisisharmthechickenindustrymostoneoftheseriousdiseasesandiscomposedofaninfectiousdiseaseofgenusEscherichiacolienteropathogenicEscherichiacolicausedbyanimalandzoonotic,characterizedbycelluloseserousinflammation,vitellineperitonitisandcatarrhalenteritis.Escherichiacoliisusedforpreventionandtreatmentofantibiotics.E.colihascausedgreateconomiclossestotheaquacultureindustry,inordertobetterandmoreeffectivetreatmentofchickenE.colidisease,thisexperimenttothenaturalinfectionofchickenforthetreatmentoftheanimal,thestudyofdrugaloneandthecombinationofdrugtreatmentofEscherichiacoli.Thechickenswererandomlydividedinto3groups,30ratsineachgroup.Thefirstgroupwasadministeredwithgentamicinsulfate(100mg/kg),secondgroupsofamoxicillinsolublepowder(100mg/kg),andthirdgroupsofsulfateandamoxicillinsolublepowder(100mg/kg,50mg/kg),5d.Mainlytothecurerateandsurvivalrateofeachgroupasthestandardevaluationofefficacy.Theresultsshowedthatthecureratewas83%and73%respectively,andthecureratewas93%.Mortalityrateswere17%,13%,7%.Theresultsshowedthattheefficiencyof83%,87%,93%,respectively,theexperimentalresultsshowedthatgentamicinandamoxicillincaneffectivelycontroltheE.coli,andthemixturecaneffectivelyincreasetheefficacy,combinedwithdrugscanbettertreatE.coli.Keywords:chicken;Escherichiacoli;gentamicin;amoxicillin;separatedrug;combineduseofdrugs.目錄中文摘要…………………………I英文摘要…………………………II目錄……………=3\*ROMANIII1前言………………11.1雞大腸桿菌病的概述……………………11.1.1大腸桿菌病的病原………………11.1.2大腸桿菌病的流行病學(xué)…………11.1.3雞大腸桿菌病的發(fā)病機(jī)理………21.1.4雞大腸桿菌病的危害……………21.2藥物性質(zhì)…………………31.2.1慶大霉素的性質(zhì)…………………31.2.2阿莫西林的性質(zhì)…………………31.3本次實(shí)驗(yàn)的目的和意義…………………42材料與方法………………………52.1材料………………………52.1.1藥品………………52.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物…………52.2方法………………………52.2.1病料的采集………………………52.2.2實(shí)驗(yàn)室診斷………………………52.2.3藥敏實(shí)驗(yàn)…………62.2.4實(shí)驗(yàn)分組及處理…………………62.3療效觀察…………………63結(jié)果………………73.1感染雞的剖檢變化………………………73.2實(shí)驗(yàn)室觀察………………83.2.1涂片鏡檢的結(jié)果…………………83.2.2細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果…………………93.2.3藥敏實(shí)驗(yàn)的結(jié)果…………………93.3療效觀察結(jié)果……………94討論………………105總結(jié)………………11參考文獻(xiàn)…………………………12致謝………………131前言1.1雞大腸桿菌病的概述1.1.1大腸桿菌病的病原大腸桿菌病原為致病性大腸埃希氏桿菌。大腸桿菌是中等大小的筆直桿菌，它的大小為1～2.9μm×0.6～0.9μm，有鞭毛，沒(méi)有芽胞，有些菌株可以形成莢膜，革蘭氏染色為陰性，需氧或兼性厭氧，生化反應(yīng)活潑、能分解大部分糖類(lèi)、容易在普通的培養(yǎng)基上增殖，適應(yīng)能力很強(qiáng)[1]。大腸桿菌具有不抗酸性和染色勻一性，對(duì)一般的消毒劑都敏感，還對(duì)抗生素和磺胺類(lèi)藥等都容易產(chǎn)生耐藥性。對(duì)外界的抵抗力不強(qiáng),常用的消毒藥對(duì)大腸桿菌都有很好的殺滅效果。病原性大腸桿菌和人畜腸道內(nèi)正常寄居的非致病性大腸桿菌在形態(tài)、染色體反應(yīng)、培養(yǎng)特性和生化反應(yīng)等方面沒(méi)有區(qū)別，但抗原構(gòu)造不同。根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，已經(jīng)知到的大腸桿菌（O）抗原有170種，表面（K）抗原有103種，鞭毛（H）抗原有60種[2]，所以有許多血清型。根據(jù)菌毛抗原做的血清學(xué)鑒定，最常見(jiàn)的血清型有K88，K99。經(jīng)常引起人畜腸道疾病的血清型中，有致病性大腸桿菌（EPEC）、毒素性大腸桿菌（ETEC）和侵襲性大腸桿菌（EIEC）等區(qū)別，很多腸毒素性大腸桿菌都有F抗原。在170種“0”型抗原血清型中大約一半對(duì)禽有致病性，但常見(jiàn)的是O1、O2、O78、O35四個(gè)血清型[3]。H7雞較易感。已經(jīng)證明了通過(guò)口腔感染后，能在雞大腸內(nèi)增殖而并不引起臨診癥狀的大腸桿菌有O157，H7。因?yàn)椴粩嘤行碌难逍彤a(chǎn)生，越來(lái)越多大腸桿菌病病型也產(chǎn)生了，有敗血型、內(nèi)臟型、腸炎型、肉芽腫型、氣囊炎型、輸卵管炎型、皮下蜂窩組織炎型。致病性大腸桿菌通常具有特定的血清型，動(dòng)物物種間很少發(fā)生交叉感染[12]。1.1.2大腸桿菌病的流行病學(xué)致病性大腸桿菌中的很多血清型可以引起各種畜禽發(fā)生本病，根據(jù)多年的調(diào)查，不同地區(qū)的優(yōu)勢(shì)血清型有一些差別，就是同一個(gè)地區(qū)的不同疫場(chǎng)的優(yōu)勢(shì)血清型也不全部相同。其中O1、02、04、011、018、026、078、088等多見(jiàn)于雞。幼齡畜、禽對(duì)本病最易感。雞由氣囊感染引起的大腸桿菌病以氣囊炎、纖維素性心包炎、肝周炎為特征，3～6周齡的小雞發(fā)病率較高；其他病型，如胚胎感染、卵黃性腹膜炎等就發(fā)生在其他的年齡階段。本病的主要傳染源有帶菌動(dòng)物和患病動(dòng)物，它們可以通過(guò)大便排出病原菌，散布在外界環(huán)境里，污染其他水源、空氣、飼料還有母體的乳頭和皮膚，當(dāng)小崽吮乳、舐舔或飲食的時(shí)候，就通過(guò)小崽的消化道感染；大腸桿菌可以通過(guò)消化道感染家禽，也可以通過(guò)呼吸道感染家禽，或者病原菌可以通過(guò)蛋殼的裂隙進(jìn)入胚胎而發(fā)生感染[4]。本病會(huì)發(fā)生在一年四季，小雞發(fā)病率可達(dá)31%～59%，甚至全部死亡。饑餓或過(guò)飽，飼料配比不當(dāng)或者突然改變飼料，氣候變化，都能誘發(fā)本病[5]。集約化大密度養(yǎng)殖，通風(fēng)不順暢，飼料用具和環(huán)境不徹底消毒，都是引發(fā)本病的原因之一。1.1.3雞大腸桿菌病的發(fā)病機(jī)理致病性大腸桿菌有很多種毒力因子，能引發(fā)不同的病理過(guò)程，已經(jīng)知道的病理過(guò)程有：內(nèi)毒素：當(dāng)菌體崩解的時(shí)候，大腸桿菌外膜含有的脂多糖被釋放出來(lái)，其中的類(lèi)脂A具有內(nèi)毒素的生物學(xué)功能，是一種獨(dú)立的毒力因子，在引起敗血癥的重要原因。外毒素：大腸桿菌也可以產(chǎn)生外毒素，已知的是由ETEC產(chǎn)生的不耐熱腸毒素（LT）和耐熱腸毒素（ST），不耐熱腸毒素有抗原性，可以激活腸毛細(xì)血管上皮細(xì)胞的腺苷環(huán)化酶，增加環(huán)腺苷酸的產(chǎn)生，導(dǎo)致腸粘膜細(xì)胞分泌亢進(jìn)，引發(fā)腹瀉和脫水，但66℃下31min就會(huì)被破壞；耐熱腸毒素沒(méi)有抗原性，100℃加熱35min也不失去活性，可以激活回腸的上皮細(xì)胞的刷狀緣絨毛上的鳥(niǎo)苷環(huán)化酶，使環(huán)鳥(niǎo)苷酸產(chǎn)生增加，同樣也引起分泌性腹瀉[6]。侵襲性：有些ETEC，像各種志賀氏菌一樣，具有直接侵入并破壞腸粘膜細(xì)胞的能力。大腸桿菌素：從患病動(dòng)物的體內(nèi)分離的大腸桿菌，許多具有產(chǎn)生大腸桿菌素V的質(zhì)粒。它與大腸桿菌引起敗血癥的能力有關(guān)。細(xì)胞毒素：由KonowalchuK等在1997年第一次從人源EPEC培養(yǎng)物濾液中發(fā)現(xiàn)出來(lái)，能導(dǎo)致Vero細(xì)胞病變，所以命名為Vero毒素，因毒性作用相似于痢疾志賀氏菌毒素，故又叫類(lèi)志賀毒素（SLT）[13]。1.1.4雞大腸桿菌病的危害在獸醫(yī)臨床上，大腸桿菌是常見(jiàn)的一種病原菌，也是動(dòng)物和人的共生細(xì)菌，它抗原性復(fù)雜，血清型多，臨床癥狀和病理變化也多樣，而且會(huì)與病毒性疾病并發(fā)，也會(huì)和其他細(xì)菌性疾病一起發(fā)病，給畜牧業(yè)的發(fā)展帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，已經(jīng)嚴(yán)重威脅到了畜禽和人類(lèi)的健康，大腸桿菌帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失每一年都非常巨大，所造成的危害十分嚴(yán)重，醫(yī)學(xué)上曾報(bào)道感染大腸桿菌O157后的死亡率為1.5%，病程約為6.9周[11]。大腸桿菌病在獸醫(yī)臨床上帶來(lái)的危害也十分嚴(yán)重，它一年四季都可以發(fā)生，是妨礙養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的常見(jiàn)的傳染病。其發(fā)病率、死亡率相當(dāng)高，給養(yǎng)殖業(yè)造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。在養(yǎng)殖業(yè)里面，不同的品種、不同的日齡的雞一年四季都能發(fā)生感染，但以冬春寒冷最為常見(jiàn)，肉小雞的易感性較高，其中11～44日齡肉雞最常發(fā)病，在發(fā)病雞群死亡周期，累計(jì)死亡率從5%～22%不等，嚴(yán)重的話可達(dá)到30%～40%。導(dǎo)致增重減慢，個(gè)體發(fā)育不均勻，飼料利用率降低[6]。大腸桿菌是雞腸道的一種寄生菌，一般情況下不引起肉雞發(fā)病，如果管理不善，氣候突然變化，舍內(nèi)的飼養(yǎng)密度過(guò)大，雞的飼喂空間和飲水空間不夠，舍內(nèi)空氣中有害氣體濃度超標(biāo)，疫苗接種、營(yíng)養(yǎng)失衡、轉(zhuǎn)群還有飼料霉變等都會(huì)造成大腸桿菌蔓延，而引起本病的發(fā)生與流行。如果治療措施不恰當(dāng)，就容易發(fā)生混合感染，死亡率也會(huì)升高，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。大腸桿菌可以垂直傳播，也可以水平傳播。途徑有三種:一是母雞是攜帶者,將病原體垂直傳染給雛雞；二是在孵化期間大腸桿菌通過(guò)蛋殼裂隙進(jìn)入蛋內(nèi)；三是接觸感染，患病雞與健康雞同一舍飼養(yǎng)或經(jīng)污染的飼料、水、墊草、塵埃、排泄物及分泌物等經(jīng)呼吸道、消化道、泄殖腔途徑進(jìn)入體內(nèi)。所以采用有效的藥物治療，是治療大腸桿菌病的主要有效方法之一。1.2藥物的性質(zhì)1.2.1慶大霉素的性質(zhì)慶大霉素，英文名Gentamicin，慶大霉素是一種氨基糖苷類(lèi)抗生素,是自小單孢子屬（Micromonosporapurpura）培養(yǎng)液中提取獲得的C1、C1a和C23種成分的復(fù)合物。3種成分的抗菌活性和毒性基本一致。其硫酸鹽為白色或類(lèi)似白色的粉末；有引濕性；易溶于水，在乙醇、或乙醚中不溶解。慶大霉素是廣譜抗生素，對(duì)革蘭氏陰性菌有特效。和其他的氨基糖苷類(lèi)藥物作用一樣，慶大霉素干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)合成。慶大霉素能阻斷細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成。慶大霉素是熱穩(wěn)定性的抗生素，所以廣泛應(yīng)用在培養(yǎng)基配制。0.5～1h達(dá)血藥峰濃度，雞肌肉注射的生物利用率是95%。吸收以后主要分布在細(xì)胞外液，也可以進(jìn)入胸腹腔、膽汁、心包腔及滑膜液里，也可以進(jìn)入肌肉組織還有淋巴結(jié)。慶大霉素69%～78%以原型通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)從尿液中排出體外。在陰性菌中，對(duì)大腸桿菌、銅綠假單胞菌、沙門(mén)菌和布魯菌等均有較強(qiáng)的作用，對(duì)腸道菌及銅綠假單胞菌有高效。在陽(yáng)性菌里面，對(duì)耐藥金黃色葡萄球菌的作用最強(qiáng)，對(duì)耐藥的葡萄球菌、溶血性鏈球菌、炭疽桿菌等也是有效的。除此之外，對(duì)支原體也有一定的作用。由于獸醫(yī)臨床廣泛應(yīng)用本品，耐藥菌株已經(jīng)慢慢變多，但沒(méi)有鏈霉素、卡那霉素耐藥菌株普遍，而且耐藥性維持時(shí)間也很短，停止用藥一段時(shí)間后可以恢復(fù)原來(lái)的敏感性[7]。1.2.2阿莫西林的性質(zhì)阿莫西林又叫羥氨芐青霉素。是白色結(jié)晶性粉末，微苦，微溶于水、甲醇，幾乎不溶于乙醇，其注射用鈉鹽易溶于水。對(duì)酸穩(wěn)定，在堿性溶液中很快被破壞。阿莫西林的側(cè)鏈為對(duì)羥基苯甘氨酸，其構(gòu)型為R構(gòu)型。阿莫西林化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有酸性的羧基，含有弱酸性的酚羥基，含有堿性的氨基，因此阿莫西林有三個(gè)PKa分別為2.4,7.4,9.5。本品的水溶液在PH6時(shí)較穩(wěn)定[7]。阿莫西林是半合成的廣譜青霉素類(lèi)藥物。阿莫西林在酸性條件下比較穩(wěn)定，胃腸道吸收率比較高，吸收迅速，穿透細(xì)胞壁的能力強(qiáng)，阿莫西林殺菌作用強(qiáng)。對(duì)G+菌和G-菌(包括球菌和桿菌)都有較強(qiáng)的抑菌和殺菌作用。其中對(duì)肺炎鏈球菌、溶血性鏈球菌等鏈球菌屬、不產(chǎn)青霉素酶葡萄球菌、糞腸球菌等需氧革蘭陽(yáng)性球菌，大腸埃希菌、奇異變形菌、沙門(mén)菌屬、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需氧革蘭陰性菌的不產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶菌株及幽門(mén)螺桿菌具有良好的抗菌活性[8]。阿莫西林可以進(jìn)入腦脊液。乳中的藥物濃度不高。敏感菌：鏈球菌A、B、C、F、G和非分組型、鏈球菌、沙門(mén)菌、放線菌、鉤端螺旋體等。不穩(wěn)定敏感菌：肺炎球菌、腸糞鏈球菌、大腸桿菌、志賀菌、霍亂弧菌、梭狀桿菌等。耐藥菌：葡萄球菌、普通變形桿菌、假單孢菌屬、彎曲桿菌、支原體、立克次體等。1.3目的和意義隨著國(guó)家集約化養(yǎng)禽業(yè)的迅速發(fā)展，大腸桿菌病已經(jīng)成為威脅養(yǎng)雞業(yè)的常見(jiàn)傳染病，也是多發(fā)傳染病之一，給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。大腸桿菌對(duì)氨基糖苷類(lèi)、青霉素類(lèi)抗生素、磺胺類(lèi)藥物及喹諾酮類(lèi)藥物都敏感，可是近年來(lái)還是出現(xiàn)了越來(lái)越多的耐藥菌株。對(duì)于哈爾濱市呼蘭區(qū)流行的菌株，根據(jù)體外藥敏試驗(yàn)，我們選擇了試驗(yàn)中較敏感的藥物——阿莫西林、慶大霉素來(lái)進(jìn)行治療。因?yàn)閱为?dú)用藥和聯(lián)合用藥的藥效有所差異，并且在使用過(guò)程中的方便程度及經(jīng)濟(jì)損耗也不一樣，所以我們通過(guò)此試驗(yàn)來(lái)研究到底單獨(dú)用藥療效好還是聯(lián)合用藥療效好，選出治療效果更好的方式，以減少家禽的死亡率，最終使患病家禽達(dá)到更高的存活率以提高其經(jīng)濟(jì)效益。2材料與方法2.1材料2.1.1藥品硫酸慶大霉素（粉）（包裝：50kg/桶含量：100g：5g批準(zhǔn)文號(hào)：獸藥字（2012）020136185；天津市諾維動(dòng)物藥業(yè)有限公司）。阿莫西林可溶性粉（包裝：100g/袋含量:100g：10g批準(zhǔn)文號(hào)：獸藥字（2010）162061199；河南健恒動(dòng)物藥業(yè)有限公司）。2.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選來(lái)我院就診的哈爾濱市呼蘭區(qū)某養(yǎng)殖場(chǎng)的93只14日齡疑似患有大腸桿菌病的雛雞。其中將三只病危雛雞進(jìn)行解剖診斷。2.2方法2.2.1病料的采集剖檢過(guò)程中將癥狀明顯的患雞進(jìn)行病料采集：分別剪取一部分有明顯病灶的肝臟組織放入經(jīng)過(guò)高壓消毒的平皿中，作為1號(hào)病料。剪取一部分肺組織作為2號(hào)病料。取一部分脾臟組織作為3號(hào)病料。用一次性注射器抽取2ml關(guān)節(jié)液，作為4號(hào)病料。將4份病料送到金牧動(dòng)物醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng)及鑒定是否為大腸桿菌。2.2.2實(shí)驗(yàn)室診斷涂片鏡檢：在無(wú)菌操作條件下取1、2號(hào)病料，剪下一小部分組織進(jìn)行抹片，自然干燥后進(jìn)行劉氏染色。在玻片上滴加劉氏染液A（LiuA）30～45s，使組織細(xì)胞被染成紅色，然后直接加上劉氏染液B（LiuB），吹氣混勻，靜置1～2min，最后用小流水沖洗殘余染液，吸干，即可用顯微鏡觀察。培養(yǎng)特性：用接種環(huán)在無(wú)菌操作條件下取適量3、4號(hào)病料進(jìn)行肉湯平板劃線，放入溫箱中37℃培養(yǎng)24小時(shí)后觀察結(jié)果。培養(yǎng)后鏡檢：先滴一小滴生理鹽水在載玻片中央的位置，然后用滅過(guò)菌的接種環(huán)挑取培養(yǎng)基里生長(zhǎng)比例最大的細(xì)菌進(jìn)行抹片，自然干燥后進(jìn)行革蘭氏快速染色，然后用油鏡觀察。2.2.3藥敏實(shí)驗(yàn)在無(wú)菌操作條件下，將上述培養(yǎng)的細(xì)菌接種于肉湯平板上，用紙片擴(kuò)散法對(duì)鹽酸慶大霉素、泰樂(lè)菌素、鏈霉素、頭孢噻呋、阿莫西林、新霉素、環(huán)丙沙星、林可霉素、大觀霉素進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，37℃培養(yǎng)24小時(shí)后，進(jìn)行結(jié)果觀察。結(jié)果按照抑菌環(huán)的直徑大小來(lái)判斷各抗菌藥療效的有效程度，評(píng)定分為高度敏感、中度敏感或低度敏感三種[9]。2.2.4試驗(yàn)分組及處理試驗(yàn)選用的90只患雞為同一養(yǎng)殖場(chǎng)，共分為三組：Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組。其中：Ⅰ組：硫酸慶大霉素單獨(dú)給藥組（30只），（100mg/kg拌料），一天一次，連續(xù)給藥5天；Ⅱ組：阿莫西林可溶性粉單獨(dú)給藥組（30只），（100mg/kg拌料），一天一次，連續(xù)給藥5天；Ⅲ組：兩種藥聯(lián)合給藥組（30只），（各50mg/kg拌料，），一天一次，連續(xù)給藥5天；按照上述方法給藥，觀察期為兩周，每天觀察雞的各種臨床表現(xiàn)，包括精神狀態(tài)、食欲、糞便、飲水量等體況觀察。2.3療效觀察2.3.1死亡率實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，以死亡雛雞的數(shù)量比小組雞的總數(shù)計(jì)算各組的死亡率。死亡率=死亡數(shù)/小組總數(shù)×100%2.3.2治愈率實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，經(jīng)過(guò)用藥以后，患雞的食欲、飲欲、精神狀況等恢復(fù)正常，再也不出現(xiàn)任何臨床癥狀，都屬于治愈了，以治愈雛雞的數(shù)量比小組雞總數(shù)來(lái)計(jì)算治愈率。治愈率=治愈數(shù)/小組總數(shù)×100%2.3.3有效率實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，通過(guò)給藥后全部治愈的雛雞和沒(méi)有死亡但有臨床癥狀表現(xiàn)的雛雞都看成有效；以最后每組還存活的雛雞數(shù)比小組雞的總數(shù)來(lái)計(jì)算各組的有效率。有效率=存活數(shù)/小組總數(shù)×100%3結(jié)果3.1臨床癥狀與剖檢變化3.1.1臨床癥狀90只試驗(yàn)雞出現(xiàn)的臨床癥狀有：精神沉郁，羽毛松亂，飲食欲下降或廢絕，肛門(mén)被糞污染，垂翅，離群呆立，頭頸回縮，閉眼昏睡，不愿走動(dòng)，拉稀糞，嚴(yán)重的趴在地上不起。3.1.2剖檢變化3只病危雞剖檢特征是：氣囊炎（圖1）；肝臟充血，表面有大量滲出物（圖2），腫脹易碎，肝臟表面有壞死灶（圖3）；纖維素性心包炎（心包腔中有大量纖維素型滲出物），心外膜水腫并覆有淡黃色的滲出物（圖4）。圖1：患雞氣囊炎圖2：患雞肝臟表面大量纖維素性滲出物圖3：患雞肝周炎，腫大易碎圖4：患雞纖維素性心包炎3.2實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果3.2.1涂片鏡檢的結(jié)果圖5：呈兩端鈍圓，散在或成對(duì)存在3.2.2細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果圖6:在普通肉湯平板上長(zhǎng)成1～2毫米的，呈乳白色、半透明、隆起、邊緣整齊，有光澤，濕潤(rùn)光滑型的菌落。3.2.3藥敏試驗(yàn)的結(jié)果高敏藥物：慶大霉素、阿莫西林、鏈霉素（抑菌環(huán)大于15mm）；中敏藥物：泰樂(lè)菌素、環(huán)丙沙星（抑菌環(huán)在10～15mm）；低敏藥物：林可霉素、新霉素、大觀霉素、頭孢噻呋（抑菌環(huán)在10mm以下）。 3.3療效觀察結(jié)果按三種方法給藥后，都能有效地減輕臨床癥狀。給藥5天以后，三組試驗(yàn)患雞的治愈率、死亡率和有效率見(jiàn)表1。表1給藥5d后各組的療效結(jié)果Table1Theefficacyofthetreatmentwas5daysafteradministration序號(hào)死亡數(shù)治愈率死亡率有效率一5只80%17%83%二4只73%13%87%三2只87%07%93%硫酸慶大霉素（粉）和阿莫西林可溶性粉單獨(dú)用藥對(duì)雞大腸桿菌病都有較好的療效，而兩種藥物聯(lián)合用藥時(shí)的效果更佳。4討論雞大腸桿菌病是獸醫(yī)臨床上最常見(jiàn)的雞的傳染病，雞大腸桿菌病的臨床癥狀復(fù)雜，病理特征多，大腸桿菌病常給養(yǎng)殖業(yè)造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。采用有效的藥物治療，是治療大腸桿菌病的有效途徑。雞大腸桿菌病都是由致病性大腸桿菌引起的禽類(lèi)和人類(lèi)共患的傳染病，各階段日齡的雞和各個(gè)品種的雞都容易感染本病。由于養(yǎng)雞業(yè)發(fā)展的越來(lái)越快，特別是集約化飼養(yǎng)越來(lái)越多，大腸桿菌病在一些雞場(chǎng)中會(huì)時(shí)有發(fā)生，根據(jù)調(diào)查報(bào)告顯示，該病的發(fā)病率和死亡率較高，因?yàn)槟壳耙呙珙A(yù)防的效果不是很理想，而耐藥菌株又不斷產(chǎn)生，所以預(yù)防和治療工作都有一定的難度[10]。目前市場(chǎng)銷(xiāo)售治療雞大腸桿菌病的藥物很多，不同制劑和不同用藥方法的療效有一定的差異。就慶大霉素和阿莫西林而言，單獨(dú)用藥時(shí)給藥方便、但效果不如聯(lián)合用藥確實(shí)。與普通口服溶液相比，采用飲水給藥或混飼給藥的方式，是值得引用的。從畜主的口述中可初步判定，這次發(fā)生大腸桿菌感染的原因是雞場(chǎng)的設(shè)備比較簡(jiǎn)陋，建立不起生物安全體系。疫苗也不是正規(guī)廠家生產(chǎn)，這給疫病的流行創(chuàng)造了條件。好在養(yǎng)殖戶(hù)能及時(shí)送檢，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)手段確定了發(fā)病原因，進(jìn)而采取嚴(yán)格的隔離、消毒等措施，及時(shí)地切斷了傳播途徑，對(duì)疫病的控制起了關(guān)鍵性的作用。本次實(shí)驗(yàn)由剖檢結(jié)果可以看出，該雞群所表現(xiàn)出的癥狀與大腸桿菌病的癥狀極其相似，初步懷疑為大腸桿菌病。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室的一系列鑒定，如涂片鏡檢觀察細(xì)菌形態(tài)、細(xì)菌培養(yǎng)確定細(xì)菌的培養(yǎng)特性等來(lái)對(duì)病原菌進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果均符合大腸桿菌的相關(guān)理論，因此診斷病雞患有大腸桿菌病[4]。但由于實(shí)驗(yàn)室的條件有限，具體屬哪一類(lèi)血清型，還需要進(jìn)一步的鑒定。通過(guò)藥敏試驗(yàn)可知硫酸慶大霉素屬于高敏藥物，阿莫西林也屬于高敏藥物，均可對(duì)雞大腸桿菌病起到治療效果。而療效觀察試驗(yàn)中兩種藥物聯(lián)合使用的雛雞的死亡率更低。硫酸慶大霉素和阿莫西林對(duì)大腸桿菌具有高敏作用，而其他的藥物對(duì)該菌是中敏或低敏作用。就硫酸慶大霉素而言，其特點(diǎn)表現(xiàn)黏性更小，對(duì)肌肉無(wú)任何刺激性，更容易被身體組織快速吸收，它透過(guò)膜的速度比頭孢菌素類(lèi)抗生素更快，對(duì)大腸桿菌有較好療效；而阿莫西林對(duì)機(jī)體刺激性小，不容易產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，生物利用度高，臨床效果好，對(duì)機(jī)體活性高，見(jiàn)效快，作用迅速，使用后1小時(shí)就可發(fā)揮作用，可維持有效血藥濃度24小時(shí)，且無(wú)藥物殘留和抗藥性，抗菌力極強(qiáng)，可與多種藥物配合使用，產(chǎn)生抗藥性現(xiàn)象和交叉抗藥性現(xiàn)象的可能性低，顯著降低死亡率，對(duì)大腸桿菌也有顯著療效。而以上兩種藥物聯(lián)合使用效果更佳，治愈率更高，死亡率更低，充分體現(xiàn)了藥物協(xié)同作用的優(yōu)勢(shì)[11]。總結(jié)本次診療過(guò)程，提示養(yǎng)殖場(chǎng)的飼養(yǎng)管理和生物安全體系是生產(chǎn)的關(guān)鍵部分，采取全進(jìn)全出的制度，發(fā)病后不能自行用藥，準(zhǔn)確確診是用藥的前提，所以必須