埃博拉出血熱標(biāo)本采集包裝運(yùn)輸與檢測(cè)

（優(yōu)選）埃博拉出血熱標(biāo)本采集包裝運(yùn)輸與檢測(cè)當(dāng)前第1頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)埃博拉出血熱(Ebolahemorrhagicfever)是由埃博拉病毒(Ebolavirus)引起的一種急性傳染病。人主要通過接觸病人或感染動(dòng)物的體液、分泌物和排泄物等而感染。臨床表現(xiàn)主要為突起發(fā)熱、出血和多臟器損害，病死率可高達(dá)50%-90%。本病潛伏期為2～21天，通常為8～10天。2014年，在幾內(nèi)亞、利比里亞和塞拉利昂等西非國(guó)家發(fā)生歷史上最嚴(yán)重的埃博拉出血熱暴發(fā)疫情。埃博拉病毒簡(jiǎn)介當(dāng)前第2頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)為指導(dǎo)醫(yī)療機(jī)構(gòu)和疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)工作人員對(duì)埃博拉出血熱相關(guān)標(biāo)本的采集、包裝、運(yùn)輸和檢測(cè)工作，保證生物安全。培訓(xùn)目的當(dāng)前第3頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)

埃博拉出血熱留觀、疑似或確診病例：標(biāo)本采集的個(gè)人防護(hù)生物安全要求包裝的要求運(yùn)輸?shù)姆绞綄?shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法培訓(xùn)內(nèi)容當(dāng)前第4頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》衛(wèi)生部《人間傳染的病原微生物名錄》

國(guó)際民航組織《危險(xiǎn)物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》《中國(guó)疾病預(yù)防控制中心關(guān)于規(guī)范埃博拉出血熱病例標(biāo)本接收和檢測(cè)結(jié)果反饋等工作的通知》中疾控應(yīng)急發(fā)〔2014〕322號(hào)知識(shí)要點(diǎn)-國(guó)內(nèi)的法律法規(guī)及管理辦法當(dāng)前第5頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)應(yīng)遵守《醫(yī)院感染管理規(guī)范》和《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》等相關(guān)生物安全規(guī)定。在標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防的基礎(chǔ)上，應(yīng)采取避免飛沫和接觸感染的預(yù)防措施。標(biāo)本的采集當(dāng)前第6頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)采樣人員應(yīng)該接受埃博拉病人采血規(guī)程的培訓(xùn)培訓(xùn)內(nèi)容PPE的規(guī)范使用采血要求及注意事項(xiàng)采血時(shí)，需2名采血人員同時(shí)在場(chǎng)標(biāo)本的采集-人員要求當(dāng)前第7頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)工作服一次性工作帽雙層醫(yī)用手套防滲透防護(hù)服(連帽，猴服)醫(yī)用防護(hù)口罩(N95及以上)+護(hù)目鏡或防護(hù)面屏

或普通外科口罩+正壓頭盔工作鞋+一次性防水靴套

或長(zhǎng)筒膠靴防滲漏防護(hù)服(反穿式)標(biāo)本的采集-個(gè)人防護(hù)當(dāng)前第8頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)應(yīng)提前將所有采血物品準(zhǔn)備齊全，并配備：洗手的設(shè)施備用手套消毒液銳器盒標(biāo)本的采集-物品準(zhǔn)備當(dāng)前第9頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)一般發(fā)病后2周內(nèi)，可在患者血標(biāo)本中檢測(cè)到病毒核酸和抗原，發(fā)病后3～10天的標(biāo)本核酸和抗原的檢出率高。留觀病例、疑似病例診斷埃博拉病毒感染應(yīng)采集發(fā)病3天以后的血標(biāo)本。標(biāo)本的采集-采集時(shí)間當(dāng)前第10頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)用分離膠無菌真空促凝管采集靜脈血，每管3ml留觀病例、疑似病例采集4管2管送指定的具有埃博拉出血熱檢測(cè)資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)2管保存于樣本采集單位或所在省級(jí)疾控中心標(biāo)本的采集-采血管種類及采血量當(dāng)前第11頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)采集后的處理方式應(yīng)用封口膜封閉管口，消毒后由協(xié)助者將病人信息填寫在采血管上，放入試管架中退入潛在污染區(qū)，將采血管放入50ml離心管內(nèi)離心管消毒后，放入第二層包裝盡快送檢如不能立即送檢，則置于4℃下保存，填寫標(biāo)本采集登記表保存方式全血采用冷藏運(yùn)輸，血清采用冷凍運(yùn)輸標(biāo)本的采集當(dāng)前第12頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)恢復(fù)期標(biāo)本采集確診病例采集恢復(fù)期血標(biāo)本2份，每份2管采集時(shí)間應(yīng)間隔不少于48小時(shí)，送國(guó)家疾控中心病毒病所進(jìn)行埃博拉病毒相關(guān)檢測(cè)，用于指導(dǎo)病例管理恢復(fù)期血標(biāo)本，并不限定必須于出院前采集可采集發(fā)病2周后或出院(死亡)前標(biāo)本標(biāo)本的采集當(dāng)前第13頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)采取A類包裝，符合UN2814要求容器或包裝材料應(yīng)達(dá)到國(guó)際民航組織《危險(xiǎn)物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》（Doc9284包裝說明PI602）規(guī)定的A類包裝標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本的包裝當(dāng)前第14頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)三層包裝第一層為自封袋或50ml離心管第二層為防水、防漏的安全殼容器第三層為運(yùn)輸包裝包裝要求樣本應(yīng)用吸水紙等包裹，固定在自封袋或離心管內(nèi)在堅(jiān)固、防水、防漏的第二層安全殼容器中，用吸水紙等填充物將內(nèi)有標(biāo)本的自封袋或離心管固定好，裝入第三層包裝第二層和第三次包裝之間應(yīng)放置冰排等制冷材料安全殼容器和外包裝須與IATA危險(xiǎn)物品條例包裝制度650相符合標(biāo)本的包裝當(dāng)前第15頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)包裝中的注意事項(xiàng)用0.5%有效氯消毒50ml離心管表面，并在潛在污染區(qū)放入第二層包裝第二層包裝用0.5%有效氯浸泡消毒15min后，擦拭干凈帶入清潔區(qū)，放入外層包裝標(biāo)本的包裝當(dāng)前第16頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)樣品清單填寫標(biāo)本說明兩份，寫明標(biāo)本的基本信息、運(yùn)送者及接收者地址等將標(biāo)本說明密封在塑料袋里，用膠布分別粘貼于最外層包裝的內(nèi)側(cè)和外側(cè)標(biāo)本相關(guān)信息需留檔以便查驗(yàn)，方便實(shí)驗(yàn)室操作人員查對(duì)標(biāo)本數(shù)量標(biāo)本的包裝當(dāng)前第17頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)收取標(biāo)本由醫(yī)院所在地的疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)到醫(yī)院收取標(biāo)本。標(biāo)本運(yùn)輸之前，應(yīng)按相關(guān)生物安全規(guī)定，與樣本接收單位生物安全管理部門聯(lián)系，辦理相關(guān)手續(xù)。運(yùn)送日期確定后，立即將運(yùn)送時(shí)間和運(yùn)輸方式通知接收單位，做好接收準(zhǔn)備。標(biāo)本的包裝當(dāng)前第18頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)中國(guó)疾控中心檢測(cè)的標(biāo)本運(yùn)輸流程當(dāng)前第19頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)省市內(nèi)運(yùn)送埃博拉出血熱標(biāo)本的運(yùn)輸流程當(dāng)前第20頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)生物安全要求

由專人專車運(yùn)送，運(yùn)送人員須有相關(guān)資質(zhì)，且不得少于兩人申請(qǐng)單位對(duì)與運(yùn)送人員進(jìn)行埃博拉病毒相關(guān)的生物安全培訓(xùn)在運(yùn)送過程中采取相應(yīng)的防護(hù)措施運(yùn)輸前仔細(xì)檢查容器，要符合安全要求按照規(guī)定進(jìn)行標(biāo)本運(yùn)輸前的包裝和送達(dá)后的開啟標(biāo)本運(yùn)輸?shù)纳锇踩螽?dāng)前第21頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)省市間標(biāo)本運(yùn)輸跨省、自治區(qū)、直轄市運(yùn)輸疑似病例或留觀病例樣本時(shí)，應(yīng)當(dāng)將申請(qǐng)材料提交至運(yùn)輸出發(fā)地省級(jí)衛(wèi)生計(jì)生行政部門進(jìn)行初審對(duì)符合要求的，省級(jí)衛(wèi)生計(jì)生行政部門應(yīng)當(dāng)在3個(gè)工作日內(nèi)出具初審意見，并將初審意見和申報(bào)材料上報(bào)衛(wèi)計(jì)委審批衛(wèi)計(jì)委應(yīng)當(dāng)自收到申報(bào)材料后3個(gè)工作日內(nèi)做出是否批準(zhǔn)的決定符合法定條件的，頒發(fā)準(zhǔn)運(yùn)證書省市間BSL-3實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本運(yùn)輸流程當(dāng)前第22頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)WHO、美國(guó)CDC等其他國(guó)家及地區(qū)關(guān)于標(biāo)本的采集、包裝和運(yùn)輸?shù)奈募?/p>

WHO的英國(guó)衛(wèi)生署的《PHEMicrobiologyServicesVHFSampleTestingQueries》2014.9美國(guó)CDC的知識(shí)要點(diǎn)-國(guó)外的情況當(dāng)前第23頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)推薦用EDTA塑料采血管采集全血，最低量4ml保存聚茴香腦硫酸鈉(SPS)或檸檬酸采血管中,或促凝采血管也可以尿液標(biāo)本也是可以的，但需要盡快檢測(cè)。死亡者或無法采血的兒童采集咽拭子知識(shí)要點(diǎn)-國(guó)外的情況-標(biāo)本的采集當(dāng)前第24頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)WHO和美國(guó)CDC包裝形式均與我國(guó)一致，運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的容器或包裝材料應(yīng)當(dāng)達(dá)到國(guó)際民航組織《危險(xiǎn)物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》（Doc9284包裝說明PI602）規(guī)定的A類包裝標(biāo)準(zhǔn)知識(shí)要點(diǎn)-國(guó)外的情況-標(biāo)本的包裝當(dāng)前第25頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)WHO關(guān)于運(yùn)輸主要依據(jù)，如果本國(guó)沒有實(shí)驗(yàn)室可以做檢測(cè)可將標(biāo)本寄到所寫的實(shí)驗(yàn)室。美國(guó)則按照各州的規(guī)定運(yùn)輸標(biāo)本知識(shí)要點(diǎn)-國(guó)外的情況-標(biāo)本的運(yùn)輸當(dāng)前第26頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)WHO發(fā)布的安全采集埃博拉出血熱疑似患者血液標(biāo)本當(dāng)前第27頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)當(dāng)前第28頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)當(dāng)前第29頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)當(dāng)前第30頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)WHO發(fā)布的如何安全運(yùn)輸埃博拉出血熱疑似患者血液標(biāo)本的流程

（國(guó)內(nèi)運(yùn)輸）當(dāng)前第31頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)當(dāng)前第32頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)當(dāng)前第33頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)檢測(cè)方法1.病毒核酸檢測(cè)方法

（1）實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法

（2）一步法常規(guī)RT-PCR方法2.埃博拉病毒抗原抗體檢測(cè)方法

（1）埃博拉病毒抗原檢測(cè)方法（雙抗體夾心法ELISA、膠體金快診）

（2）埃博拉病毒IgM抗體檢測(cè)（抗體捕捉法ELISA）

（3）埃博拉病毒IgG抗體檢測(cè)方法（間接法ELISA）標(biāo)本的檢測(cè)當(dāng)前第34頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)埃博拉病毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)相關(guān)活動(dòng)嚴(yán)格按照《人間傳染的病原微生物名錄》的要求，在相應(yīng)的生物安全級(jí)別實(shí)驗(yàn)室開展。病毒培養(yǎng)在BSL-4實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)在ABSL-4實(shí)驗(yàn)室未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作在BSL-3實(shí)驗(yàn)室滅活材料的操作在BSL-2實(shí)驗(yàn)室按照《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》等相關(guān)規(guī)定要求，做好生物安全工作。實(shí)驗(yàn)室生物安全要求當(dāng)前第35頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)

埃博拉病毒檢測(cè)機(jī)構(gòu)應(yīng)將所有陽性和部分陰性血清標(biāo)本送中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病所進(jìn)行復(fù)核檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果應(yīng)及時(shí)反饋標(biāo)本送檢單位，并盡快上報(bào)上級(jí)主管部門。當(dāng)前第36頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)

埃博拉病毒相關(guān)感染性標(biāo)本的滅活，應(yīng)在BSL-3實(shí)驗(yàn)室Ⅱ級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。

標(biāo)本的滅活處理當(dāng)前第37頁\共有38頁\編于星期五\18點(diǎn)（1）TRIzol（或TriPure）滅活法

提取病毒RNA時(shí)，標(biāo)本