2013高考生物復習課件：選修1-3 ＤＮＡ和蛋白質技術（人教版選修1）

(對應學生用書P225)知識梳理一、DNA的粗提取與鑒定1．DNA提取的方法(1)基本思路：選用一定的物理或化學方法分離具有不同物理或化學的生物大分子。(2)原理：利用DNA與RNA、蛋白質和脂質等在物理和化學性質方面的差異，提取DNA，去除其他成分。項目兩支20mL的試管1號2號實驗步驟加入2mol/L的NaCl溶液5mL5mL加入絲狀物(DNA)√用玻璃棒攪拌絲狀物溶解加入二苯胺試劑

4mL4mL沸水浴加熱5min5min觀察現(xiàn)象

不變藍

變藍

問題探究1：在DNA的提取過程中，DNA的哪種理化性質是提取、提純的重要依據(jù)？提示：DNA在不同濃度NaCl溶液中的溶解度。二、PCR擴增技術(1)PCR原理：DNA的熱變性。(2)PCR反應過程①變性：當溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈。②復性：溫度下降到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。③延伸：溫度上升到72℃左右時，溶液中的4種脫氧核苷酸(A，T，C，G)在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈。問題探究2：人和哺乳動物的紅細胞為什么是提取血紅蛋白的理想材料？提示：人的哺乳動物成熟的紅細胞中不含細胞核，也沒有DNA，不適于作DNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。自主檢測1．使用凝膠色譜法分離蛋白質實驗中，相對分子質量不同的蛋白質在凝膠中的行進過程可表示為圖中(

)【解析】該方法中大分子蛋白質不進入凝膠內(nèi)部最先流出，小分子進入凝膠內(nèi)部路徑長后流出?！敬鸢浮?/p>

B2．下列關于DNA的粗提取實驗和血紅蛋白的提取實驗，敘述正確的是(

)A．前者選擇雞血細胞作為材料較好，后者選擇哺乳動物成熟的紅細胞作為實驗材料較好B．樣品預處理時，前者靜置1天處理除去上清液；后者需要加入清水，反復低速短時間離心洗滌，至上清液無黃色C．在DNA粗提取實驗中，往2mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時，應該緩慢加入，直到出現(xiàn)黏稠物為止D．洗滌紅細胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機鹽等【解析】

Ⅱ.雞血細胞有細胞核，適于提取DNA；哺乳動物成熟紅細胞無細胞核和眾多細胞器，適用于提取血紅蛋白。提取血紅蛋白的實驗中，洗滌紅細胞時，不能加清水，應該加入生理鹽水，否則細胞提早釋放出血紅蛋白與雜質混合，加大提取難度。DNA初次析出時，加蒸餾水至黏稠物不再增加為止。洗滌紅細胞的目的是去除雜質蛋白，以利于血紅蛋白的分離和純化?！敬鸢浮?/p>

A3．標準的PCR過程一般分為變性、復性、延伸三大步，這三大步需要的溫度依次是(

)A．95℃、55℃、72℃

B．72℃、50℃、92℃C．50℃、92℃、72℃ D．80℃、50℃、72℃【解析】當溫度上升到90℃以上(90℃～95℃)時，雙鏈DNA解旋為單鏈，稱為變性；當溫度下降到50℃左右(40℃～60℃)時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合，稱為復性；當溫度上升到72℃(70℃～75℃)時，溶液中的四種脫氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈，稱為延伸。【答案】

A4．現(xiàn)代生物已向兩個方面發(fā)展，宏觀研究的水平為生態(tài)系統(tǒng)水平，微觀研究的水平為分子水平，對于分子的研究，其物質的提取和分離顯得尤為重要。下面是物質提取和分離的相關問題，請回答：(一)DNA分子的提取和分離(1)在提取菜花細胞中的DNA時，采用的是研磨法，為什么不能像用雞血那樣，用蒸餾水使其破裂？___________________________。(2)在提取實驗過程中用到兩種濃度的NaCl溶液，說明其作用：①2mol/LNaCl溶液：_________________________________；②0.14mol/LNaCl溶液：______________________________。(3)在整個操作過程中，每100mL血液中加入3g檸檬酸鈉的作用是：_____________________________________________________。(4)鑒定DNA所用的試劑：________。(二)血紅蛋白的提取和分離(1)在血紅蛋白的提取和分離過程中：粗分離、純化和純度鑒定時，都會用到緩沖溶液，其作用是____________________。(2)在洗脫過程中，對洗脫液的流速要求穩(wěn)定的目的是：_______________________________________________(三)不同的化學物質，其理化特性不同，提取方法也有所差異，如胡蘿卜素不溶于水，易溶于________，因此可以用________方法進行提取?！窘馕觥?/p>

(一)(1)DNA分子提取中理想的材料為富含DNA的細胞，動物中雞血細胞核，放入蒸餾水中會使細胞漲破釋放出DNA，而植物細胞含有細胞壁不能因吸水而漲破。(2)實驗過程中兩次用到NaCl溶液，初次為2mol/L的NaCl溶液，用于溶解DNA，而0.14mol/L的NaCl溶液會使DNA析出。(3)為了防止凝血現(xiàn)象的發(fā)生應加入檸檬酸鈉。(4)鑒定DNA所用的試劑為二苯胺試劑。(二)(1)為保持蛋白質的生理活性，防止變性從而用緩沖液保持pH的恒定。(2)洗脫液的液速變化過快，導致分離純化不充分。(三)胡蘿卜素的化學性質比較穩(wěn)定，不溶于水，易溶于有機溶劑。因此可以用有機溶劑作萃取劑，以萃取的方法來提取?！敬鸢浮?/p>

(一)(1)植物細胞具有細胞壁，不會吸水漲破，只有通過研磨，才能釋放出DNA。(2)①溶解DNA分子，過濾并除去不溶于NaCl溶液的雜質②使DNA分子析出，過濾并除去溶于NaCl溶液中的雜質(3)防止出現(xiàn)凝血(4)二苯胺試劑(二)(1)維持血紅蛋白環(huán)境中pH的穩(wěn)定(2)維持洗脫液加在色譜柱上的壓力穩(wěn)定(三)有機溶劑有機溶劑萃取(對應學生用書P226)考點1

DNA的粗提取與鑒定

基本原理方法目的DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低溶于NaCl溶液中并稀釋①NaCl溶液為2mol/L時，DNA溶解，而部分蛋白質發(fā)生鹽析而生成沉淀，通過過濾可除去部分蛋白質及不溶于NaCl溶液的雜質②當NaCl溶液稀釋至0.14mol/L時，DNA析出，過濾可除去溶于NaCl中的部分蛋白質和其他雜質基本原理方法目的DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白質DNA不溶于酒精溶液加入冷卻酒(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白質DNA可被二苯胺染成藍色加入二苯胺，并沸水浴鑒定DNA3．實驗步驟(1)步驟：提取血細胞核物質(蒸餾水漲破)→溶解(2mol/L的NaCl)→過濾(除雜質)→析出(滴蒸餾水，降NaCl濃度至0.14mol/L)→過濾→再溶解(2mol/L的NaCl)→過濾→進一步提純(體積分數(shù)為95%的冷卻酒精)→鑒定。(2)鑒定比較加入物質結果圖示實驗組均加入：①4mL二苯胺試劑②2mol/LNaCl溶液5mL絲狀物(DNA)溶液逐漸變藍對照組____不變藍典例1

回答下列有關“DNA的粗提取與鑒定”實驗的問題。(1)下列有關“DNA的粗提取與鑒定”實驗原理的敘述正確的是(

)A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，隨NaCl溶液濃度的降低而減小B．利用DNA不溶于酒精的性質，可除去細胞中溶于酒精的物質而得到較純的DNAC．DNA是大分子有機物，不溶于水而溶于某些有機溶劑D．在沸水中，DNA遇二苯胺會出現(xiàn)紫色反應(2)由于雞血較難找到，某學生試圖用人血代替，結果沒有成功，其原因最可能是(

)A．操作方法不對 B．人血含DNA太少C．NaCl溶液濃度太高 D．加二苯胺太少(3)下圖為該實驗過程中的一些重要操作示意圖：①正確的操作順序是________________________________。②上圖C、E步驟都加入蒸餾水，但其目的不同，分別是____________和____________。③上圖A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過________才能使用，該步驟的目的是________________。④為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可滴加________試劑，沸水浴，如果出現(xiàn)________則該絲狀物的主要成分為DNA。【解析】

(1)DNA在NaCl溶液中的溶解規(guī)律如圖：DNA不溶于酒精等有機溶劑，在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺后呈現(xiàn)藍色。(2)由于人屬于哺乳動物，成熟的紅細胞中不含細胞核、線粒體，所以幾乎不含DNA，很難提取到DNA。(3)DNA粗提取的過程為：紅細胞加蒸餾水，脹破后過濾→用2mol/LNaCl溶解→過濾除去不溶雜質加蒸餾水，析出含DNA的黏稠物→過濾→黏稠物溶解在2mol/LNaCl中→過濾→溶于95%酒精進一步提純，所以根據(jù)圖示及以上分析，正確操作順序為C→B→E→D→A?！敬鸢浮?/p>

(1)B

(2)B(3)①C→B→E→D→A②加速血細胞的破裂降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出③充分預冷提取含雜質較少(或較純凈)的DNA④二苯胺(或甲基綠)藍色(藍綠色)1.實驗步驟中3次加入NaCl溶液的濃度和作用：濃度均為2mol/L，作用均為溶解DNA。2．實驗步驟中2次加入蒸餾水的目的：第一次加入是使雞血細胞吸水漲破，第二次是稀釋NaCl溶液至0.14mol/L，從而析出DNA。3．實驗中4次過濾的比較第一次過濾第二次過濾第三次過濾第四次過濾濾液中含DNA的核物質DNA溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質DNA紗布上細胞膜、核膜等殘片溶于2mol/LNaCl溶液的雜質DNA不溶2mol/LNaCl溶液的雜質第一次過濾第二次過濾第三次過濾第四次過濾過濾前加入的物質蒸餾水NaCl溶液蒸餾水NaCl溶液過濾的目的去除細胞膜、核膜等雜質去除不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質去除溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質去除不溶于2mol/LNaCl的雜質4.其他注意事項(1)甲基綠可將DNA染成綠色且不需水浴加熱，二苯胺鑒定DNA屬于顏色反應，需要沸水浴加熱5min，可使DNA呈藍色。(2)二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，否則二苯胺會變成淺藍色，影響鑒定效果。(3)DNA進一步提純(第四次過濾的濾液)時要選用預冷的95%的酒精，作用如下：①抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解；②降低分子運動，易于形成沉淀析出；③低溫有利于增加DNA分子柔韌性，減少斷裂。舉一反三1．(2011·西安模擬)在采用雞血為材料對DNA進行粗提取的實驗中，若需進一步提取雜質較少的DNA，可以依據(jù)的原理是(

)A．在物質的量濃度為0.14mol/L的氯化鈉溶液中DNA的溶解度最小B．DNA遇二苯胺在沸水浴的條件下會染成藍色C．DNA不溶于酒精而細胞中的一些物質易溶于酒精D．質量濃度為0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液具有抗凝血作用【解析】進一步提取含雜質較少的DNA，可依據(jù)DNA在體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液中溶解度極低的原理予以分離?！敬鸢浮?/p>

C2．(2011·江蘇卷)在利用雞血進行“DNA的粗提取與鑒定”的試驗中，相關的敘述正確的是(

)A．用蒸餾水將NaCl溶液濃度調制0.14mol/L，濾去析出物B．調節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質C．將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍色D．用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相同【解析】

DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，應濾出析出物：將絲狀物溶解在2mol/NaCl溶液中，加入二苯胺試劑后需加熱呈藍色：用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟不同，植物細胞有細胞壁?！敬鸢浮?/p>

B3．(2010·江蘇)某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關探究活動。具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10g。剪碎后分成兩組，一組置于20℃、另一組置于－20℃條件下保存24h。DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。第二步：先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20mL體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的2moL/LNaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測：在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑。混合均勻后，置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結果如下表。

(注：“＋”越多表示藍色越深)分析上述實驗過程，回答下列問題：(1)該探究性實驗課題的名稱是__________________________________________________。(2)第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少________。材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20℃＋＋＋＋＋＋－20℃＋＋＋＋＋＋＋＋＋(3)根據(jù)實驗結果，得出結論并分析。①結論1：與20℃相比，相同實驗材料在－20℃條件下保存，DNA的提取量較多。結論2：___________________________________________。②針對結論1，請?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲_____________________________________________________。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎上繼續(xù)操作的步驟是：________________________________。然后用體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出?！窘馕觥勘绢}考查DNA的粗提取和鑒定的相關知識，分析題意可知自變量是材料不同和材料保存溫度不同，因變量是DNA提取量不同。實驗目的則是探究不同保存溫度和不同材料對DNA提取量的影響?！敬鸢浮?/p>

(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響(2)DNA斷裂(3)①等質量的不同實驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃中提取的DNA量最多②低溫抑制了相關酶的活性，DNA降解速率慢(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液考點2

PCR擴增技術與體內(nèi)DNA復制1.PCR的反應過程(1)變性：當溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解旋為單鏈，如下圖：(2)復性：溫度下降到50℃左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合，如下圖：(3)延伸：溫度上升到72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈，如下圖：2．PCR擴增技術和DNA復制的比較DNA復制PCR擴增技術場所

細胞核內(nèi)

生物體外原理

堿基互補配對

堿基互補配對酶DNA聚合酶、解旋酶耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)條件模板、ATP、引物鏈(RNA)、常溫模板、ATP、引物鏈(DNA及RNA片段)、溫度變化(90～95℃→55～60℃→70～75℃)DNA復制PCR擴增技術原料四種脫氧核苷酸

四種脫氧核苷酸特點形成的是整個DNA分子，一個細胞周期只復制一次短時間內(nèi)形成大量目的基因DNA片段，呈指數(shù)增長——2n典例2(2011·?？谀M)多聚酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。請回答下列有關PCR技術的基本原理及應用的問題。(1)DNA的兩條鏈是反向平行的，通常將________的末端稱為5′端，當引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結合后，DNA聚合酶就能從引物的________開始延伸DNA鏈。(2)PCR利用DNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問題，但又導致了DNA聚合酶失活的新問題。20世紀，科學家從一種Taq細菌中分離到____________，它的發(fā)現(xiàn)和應用解決了上述問題。要將Taq細菌從其他普通的微生物中分離出來，所用的培養(yǎng)基叫________。(3)PCR的每次循環(huán)可以分為________三步。假設在PCR反應中，只有1個DNA片段作為模板，請計算在5次循環(huán)后，反應物中大約有________個這樣的DNA片段。(4)請用簡圖表示出1個DNA片段PCR反應中第二輪的產(chǎn)物。(5)簡述PCR技術的主要應用。_______________________________________________________?！窘馕觥勘绢}考查PCR技術的原理和過程。【答案】

(1)磷酸基團3′端(2)耐高溫的TaqDNA聚合酶選擇培養(yǎng)基(3)變性、復性和延伸32(4)如下圖所示。(5)遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學、基因克隆和DNA序列測定等舉一反三1．關于PCR技術的應用，錯誤的一項是(

)A．古生物學、刑偵破案、DNA序列測定B．診斷遺傳病、基因克隆、古生物學C．DNA序列測定、基因克隆、刑偵破案D．診斷遺傳疾病、合成核苷酸、DNA序列測定【解析】

PCR技術是一種體外迅速擴增DNA片段的技術，不能合成核苷酸?！敬鸢浮?/p>

D2．(2011·山東高考押題卷二)PCR是一種體外迅速擴增DNA片段的技術，下列有關PCR過程的敘述，不正確的是(

)A．變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵B．復性過程中引物與DNA模板鏈的結合是依靠堿基互補配對原則完成的C．延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP和四種核糖核苷酸D．PCR與細胞內(nèi)DNA復制相比所需要酶的最適溫度較高【解析】

PCR是一種體外迅速擴增DNA片段的技術，其延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP和四種脫氧核苷酸?！敬鸢浮?/p>

C3．(2011·霍洲一中第六次模擬理綜)PCR技術是把一DNA片段在體外酶的作用下，合成許許多多相同片段的一種方法，利用它能快速而特異地擴增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本過程如下圖所示：圖中表示每次擴增過程中需要的引物(加入足夠多)。每個引物含20個核苷酸，并分別與DNA片段兩端堿基互補，其作用是引導合成DNA子鏈，還作為子鏈的一部分，不會從模板鏈上脫落下來。(1)PCR技術的原理是模擬生物體內(nèi)的________過程。(2)PCR擴增過程中需要對DNA片段進行高溫處理，其目的是________，此過程在生物體內(nèi)需________酶的參與，作用部位是DNA的________鍵。(3)據(jù)圖分析，擴增過程中需要的引物有________種，其實質是________，假如引物都用3H標記，從理論上計算，所得DNA分子中含有3H標記的占________。(4)假定DNA片段含200對脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴增，從理論上計算還需要提供________個游離脫氧核苷酸。【答案】

(1)DNA復制(2)使DNA的兩條鏈彼此分開(或解旋)解旋氫(3)兩單鏈DNA

100%

(4)2520考點3血紅蛋白的提取和分離1.蛋白質分離的依據(jù)蛋白質各種特性的差異，如分子的形狀和大小、所帶電荷的性質和多少、溶解度、吸附性質和對其他分子的親和力等，可以用來提取和分離不同種類的蛋白質。2．方法及原理(1)凝膠色譜法原理蛋白質比較相對分子質量大

相對分子質量小凝膠內(nèi)部

不能進入

能進入運動方式

垂直向下垂直向下和無規(guī)則擴散運動經(jīng)過路程

較短

較長洗脫次序

先流出

后流出

凝膠色譜柱的直徑大小不影響分離效果，但直徑過大造成洗脫液體積大，樣品稀釋度大；凝膠色譜柱的高度與分離度有關。(2)凝膠電泳法原理凝膠電泳法的原理是不同蛋白質的帶電性質、電量、形狀和大小不同，在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導致不同蛋白質在電場中的運動方向和運動速度不同。如下表：決定運動方向形成庫侖力形成阻力決定運動速率電荷性質√電荷量

√

√分子形狀

√

√分子大小

√

√典例3(2011·海南模擬)紅細胞含有大量的血紅蛋白，紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶氧氣或二氧化碳，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，請回答下列有關問題：(1)以上所述的過程即是樣品處理，它包括________、________、分離血紅蛋白溶液。(2)收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離。①透析的目的是_____________________________________。②透析的原理是_____________________________________。(3)然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。①樣品純化的目的是________________________________。②血紅蛋白有什么特點？____________________________。這一特點對進行蛋白質的分離有什么意義？____________。【解析】

蛋白質的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。為防止血液凝固，在采血容器中要預先加入抗凝血劑檸檬酸鈉。透析可以去除樣品中相對分子質量較小的雜質，或用于更換樣品的緩沖液，透析袋一般是用硝酸纖維素(又稱玻璃紙)制成的，能使小分子自由進出，而將大分子保留在袋內(nèi)。血紅蛋白因含血紅素而呈現(xiàn)紅色，在凝膠色譜分離時，可以通過觀察顏色來判斷什么時候應該收集洗脫液，使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作?！敬鸢浮?/p>

(1)紅細胞的洗滌血紅蛋白的釋放(2)①去除樣品中相對分子質量較小的雜質②透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)(3)①通過凝膠色譜法將相對分子質量較大的雜蛋白除去②血紅蛋白呈現(xiàn)紅色，在凝膠色譜分離時，可以通過觀察顏色來判斷什么時候應該收集洗脫液使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作

1.紅細胞洗滌過程中，洗滌三次后，上清液仍有黃色，可增加洗滌次數(shù)，否則無法除去血漿蛋白；離心時轉速要低，時間要短，否則白細胞等會一同沉淀，達不到分離效果。2.血紅蛋白釋放過程中，蒸餾水的作用是漲破紅細胞，甲苯的作用主要是溶解細胞膜。3.為了加快干凝膠的膨脹，可將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱，逐漸升溫至接近沸騰，通常只需1～2h。這種方法不但節(jié)約時間，而且可以除去凝膠中可能帶有的微生物，排除膠粒內(nèi)的空氣。4．滴加樣品時，吸管管口要貼著管壁環(huán)繞移動，防止破壞凝膠面。舉一反三1．(2011·南通市模擬)分離血紅蛋白時，將攪拌好的混合液轉移到離心管中，以2000r/min的速度離心10min后，可以明顯看到試管中的溶液分為4層。下列描述中，正確的是(

)A．第1層為無色透明的甲苯層B．第2層為紅色透明層，含血紅蛋白C．第4層為白色薄層固體，是脂溶性沉淀物D．第3層為暗紅色沉淀物，含破裂的細胞