艾滋病常用實驗室檢測及臨床意義分析

艾滋病常用實驗室檢測及臨床意義分析第一頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二主要內(nèi)容HIV抗體檢測CD4檢測病毒載量檢測實驗室安全防護第二頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV抗體-感染成功抗體轉(zhuǎn)陽診斷艾滋病死亡-

4-8周-出現(xiàn)癥狀2-10年1年0.5-2年HIV抗體+

無癥狀有癥狀HIV抗體+艾滋病感染艾滋病毒后的自然發(fā)展過程急性感染期潛伏期發(fā)病期艾滋病感染者艾滋病患者窗口期第三頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二1234急性感染期第四頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二KINETICSOFVIRALMARKERSDURINGPRIMARYHIV-1INFECTIONHIVRNAHIVp24antigenHIVantibodiesHIV感染后血液中核酸、抗原和抗體動態(tài)變化窗口期暴露天數(shù)檢測域第五頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二感染HIV后病毒載量、CD4與病程變化規(guī)律第六頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二第七頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二艾滋病實驗室分類篩查實驗室（CD4檢測實驗室）確證實驗室（CD4、病毒載量實驗室…)第八頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二中國HIV實驗室網(wǎng)絡(luò)

國家艾滋病參比實驗室中國CDC性艾中心艾滋病確認(rèn)中心實驗室省、市艾滋病確認(rèn)實驗室省、市艾滋病篩查中心實驗室省、市、州、縣艾滋病篩查實驗室省、市、州、縣艾滋病檢測點鄉(xiāng)、鎮(zhèn)第九頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV實驗室條件人員:經(jīng)過專門技術(shù)培訓(xùn),取得培訓(xùn)合格證/上崗證;環(huán)境:功能分區(qū),符合生物安全二級要求;儀器設(shè)備:按要求配備，滿足檢測要求。

實驗室必須經(jīng)過資質(zhì)認(rèn)證/驗收！第十頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV病原體診斷HIV抗體檢測艾滋病病毒抗原檢測（P24）HIV核酸檢測病毒分離第十一頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二檢測樣品血清、血漿尿液抗凝全血（CBC、CD4、VL…)PBMC（外周血淋巴細胞）第十二頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二樣品的采集和處理

一、樣品的采集

最常用的樣品是血液，包括血清、血漿和全血(抗凝血)。唾液或尿液有時也可作為測試樣品。常用樣品的采集方法如下：（一）采集樣品應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范及檢測試劑盒要求進行。（二）采集標(biāo)本時應(yīng)注意安全，操作應(yīng)戴雙層手套。建議采用真空采血管及蝶形針具，以免直接接觸血液。第十三頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二

（三）血清樣品采集：用注射器抽靜脈血3－5ml，室溫放置1-2小時，待血液凝固或用3000rpm離心15分鐘，吸出血清備用。（四）抗凝血樣品采集(免疫功能CD4/CD8測定、血液常規(guī)CBC測定、病毒載量）：用加有抗凝劑（K3EDTA）的真空采血管或試管抽取靜脈血，反復(fù)輕搖，常溫6小時以內(nèi)送達實驗室檢測CD4/CD8或CBC后，再分離血漿和血細胞備用。

第十四頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二（五）血清或血漿樣品應(yīng)存放于-20℃，短期內(nèi)（1周）進行檢測的樣品可存放于2-8℃。（六）用于抗原和核酸檢測的血漿和血細胞樣品應(yīng)凍存于-20℃以下，進行病毒RNA檢測的樣品如長期（3個月以上）保存應(yīng)置于-80℃。第十五頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二二、樣品的運送

（一）抗體檢測實驗室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿，血液常規(guī)、CD4和病毒載量等要求送抗凝血。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣品的編號或受檢者姓名、種類和采集時間。第十六頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二

（二）將試管放入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。如果路程較遠或氣候炎熱，應(yīng)在2-8℃條件下運送。抗凝血和抗體檢測樣品路程短可常溫送檢。包裝內(nèi)需附有送檢單。（三）特殊情況下如需對個別樣品進行復(fù)測，可以用特快專遞形式投寄，但必須將盛樣品的試管包扎好，保證不會破碎和溢漏。第十七頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二三、樣品的接收

（一）含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的工作人員打開，用后的包裹應(yīng)進行消毒。（二）核對標(biāo)本與送檢單，檢查樣品管有無破損和溢漏。（三）檢查樣品的狀況，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況。（四）因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。第十八頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV抗體檢測的目的診斷

確定個體HIV感染狀況，包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、根據(jù)特殊需要進行的體檢等。血液篩查防止輸血傳播HIV，包括獻血員篩查和原料血漿篩查。監(jiān)測

了解不同人群HIV感染率及其變化趨勢，包括各類高危人群、重點人群和一般人群。第十九頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV抗體檢測的方法篩查試驗（包括初篩和復(fù)檢）：酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA)、化學(xué)發(fā)光試驗、明膠顆粒凝聚試驗（PA）、免疫滲濾試驗、免疫層析試驗等確證試驗：免疫印跡試驗（WB)、條帶免疫試驗、放射免疫沉淀試驗、免疫熒光試驗等。第二十頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二艾滋病抗體確證試驗

免疫印跡法（WB）為目前最常用的HIV抗體確認(rèn)方法，被公認(rèn)為判斷HIV感染的黃金方法。第二十一頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二艾滋病抗體檢測試劑使用條件

HIV篩查或確認(rèn)試劑必須是HIV/1+2混合型，國家衛(wèi)生部批準(zhǔn)或注冊，經(jīng)過國家醫(yī)藥監(jiān)督管理局批批檢合格，臨床試劑評估優(yōu)良，并且在有效期內(nèi)。第二十二頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二檢測要點1、嚴(yán)格按照試劑說明書操作，不得擅自更改。2、注意防止交叉污染。3、嚴(yán)格遵守實驗室操作規(guī)程。4、認(rèn)真做好實驗記錄。第二十三頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV抗體檢測結(jié)果及結(jié)論

HIV抗體篩查結(jié)果陰性反應(yīng)可做HIV抗體陰性報告，篩查試驗呈陽性反應(yīng)，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報告，不能出HIV抗體陽性報告。篩查陽性反應(yīng)或可疑陽性反應(yīng)不能作最終報告通知被檢測者，對個體診斷來說,只有經(jīng)過確證試驗，結(jié)果陽性才可做HIV抗體陽性報告。第二十四頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二檢測程序及流程圖1、篩查檢測驗收標(biāo)本，用篩查試劑進行檢測，如呈陰性反應(yīng)，報告HIV抗體陰性；對呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本，須進行重復(fù)檢測。2、重復(fù)檢測對篩查呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑重復(fù)檢測。第二十五頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV抗體篩查檢測流程樣品初篩檢測篩查試劑陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)重復(fù)檢測原有試劑和另外一種不同原理（或廠家）的試劑，或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑

一陰一陽均陰性反應(yīng)均陽性反應(yīng)送確認(rèn)實驗室確認(rèn)報告陰性第二十六頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二

HIV抗體確證

1、常用的確證實驗方法是免疫印跡法（WB）。2、免疫印跡試劑有HIV-1/2混合型和單一型。一般先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測，如果呈陰性反應(yīng)，則報告HIV抗體陰性，如果呈陽性反應(yīng)，則報告HIV-1抗體陽性，如果不滿足陽性標(biāo)準(zhǔn)，則判為HIV抗體不確定。如果出現(xiàn)HIV-2型的特異性指示條帶，還需要用HIV-2型免疫印跡試劑再做單一的HIV-2型抗體確認(rèn)試驗，呈陰性反應(yīng)，報告HIV-2抗體陰性；呈陽性反應(yīng)的則報告HIV-2抗體血清學(xué)陽性。第二十七頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV抗體確證檢測流程免疫印跡法（WB，HIV-1/2混合型）HIV-1陽性反應(yīng)不確定反應(yīng)

出現(xiàn)HIV-2指示條帶報告HIV-1陽性結(jié)合流行病學(xué)資料，可以在4周后隨訪檢測，如帶型沒有進展或呈陰性反應(yīng)，則報告陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽性反應(yīng)，則報告陽性；如隨訪期間帶型有進展，但不滿足陽性標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。如帶型沒有進展或呈陰性反應(yīng)則報告陰性；滿足HIV抗體陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)則報告陽性，不滿足陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。陰性反應(yīng)報告陰性篩查試驗陽性反應(yīng)樣品根據(jù)具體情況進一步檢測HIV-2第二十八頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二檢測結(jié)果的報告和處理

HIV抗體篩查：篩查實驗呈陰性反應(yīng)出具HIV抗體陰性報告，如果近期有高危行為，如性亂、注射毒品等，或有急性流感樣癥狀等情況，為排除“窗口期”的可能，建議2—3個月以后再做抗體檢測。篩查實驗呈陽性反應(yīng)，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報告，不能出陽性報告。第二十九頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV抗體篩查呈陽性的處理（1）填寫HIV抗體篩查陽性送檢單（2）盡可能重新采集受檢者的血樣。（3）將二份血樣（或僅原血樣）連同HIV抗體篩查陽性送檢單一并送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心實驗室，再轉(zhuǎn)送艾滋病確認(rèn)實驗室，或直接送確認(rèn)實驗室確認(rèn)。（4）篩查中心實驗室應(yīng)盡快進行復(fù)測。（5）做好檢測后咨詢。第三十頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV抗體確證結(jié)果報告1、HIV抗體陽性應(yīng)出具HIV抗體陽性確認(rèn)報告，并按相關(guān)規(guī)定做好咨詢、保密和報告工作;2、HIV抗體陰性應(yīng)出具HIV抗體陰性確認(rèn)報告，如果近期有高危行為，如性亂、注射毒品等，或有急性流感樣癥狀等情況，為排除“窗口期”的可能，建議1個月以后再做抗體檢測;第三十一頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二抗體確證不確定結(jié)果HIV抗體不確定出具HIV抗體不確定確認(rèn)報告，在備注中應(yīng)注明“1個月后復(fù)查”。1、隨訪：每1個月一次，連續(xù)2次，共2個月。2、做好檢測后咨詢。第三十二頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2009版第三十三頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2009版第三十四頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二第三十五頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二第三十六頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二實驗室記錄要求1、標(biāo)本的登記收到標(biāo)本后，及時登記有關(guān)參數(shù)，包括受檢者姓名或代號、試管編號、性別、年齡、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢驗結(jié)果、送檢日期、報告日期、備注(必要時記錄通信地址)等。2、實驗原始記錄表應(yīng)按實驗要求，設(shè)計操作的原始記錄表，標(biāo)明空白對照、陽性對照、陰性對照、外部對照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)實驗人員加樣。要注明試劑盒來源、測定方法、批號、有效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測日期。第三十七頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二3、HIV陽性標(biāo)本的保存記錄記錄HIV陽性標(biāo)本的儲存量、儲存溫度、儲存起始時間以及標(biāo)本保管人姓名。4、文件存檔實驗原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、檢測記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本保存記錄以及儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存15年以上。最好同時使用計算機保存各種文件和記錄。第三十八頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體

檢測策略及流程

適用范圍

HIV感染產(chǎn)婦所生嬰幼兒；已滿18個月的嬰幼兒，其母親HIV感染狀態(tài)不詳，兒童出現(xiàn)HIV相關(guān)臨床表現(xiàn)，臨床懷疑HIV感染的兒童。第三十九頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體

檢測策略及流程

檢測程序及結(jié)果報告嬰兒滿12個月進行第一次HIV抗體檢測。使用兩種不同原理或不同廠家篩查試劑進行抗體檢測，兩種篩查試劑檢測結(jié)果均為陰性反應(yīng)，報告“HIV抗體陰性（－）”，可排除感染。檢測結(jié)果出現(xiàn)陽性反應(yīng)（一種為陰性反應(yīng)一種為陽性反應(yīng)或兩種均呈陽性反應(yīng)），不能排除感染，應(yīng)繼續(xù)追蹤隨訪，至兒童滿18個月時再次進行HIV抗體檢測。第四十頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體

檢測策略及流程

檢測程序及結(jié)果報告嬰兒滿18個月時應(yīng)再次進行HIV抗體檢測。使用兩種不同原理或不同廠家篩查試劑進行抗體檢測。兩種篩查試劑的檢測結(jié)果均為陰性反應(yīng)，報告“HIV抗體陰性（－）”，可排除感染。檢測出現(xiàn)陽性反應(yīng)（一種為陰性反應(yīng)一種為陽性反應(yīng)或兩種均呈陽性反應(yīng)），進一步進行確證試驗，根據(jù)確證試驗的結(jié)果判斷是否感染HIV。第四十一頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二HIV感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體

檢測策略及流程

檢測程序及結(jié)果報告在發(fā)放檢測報告的同時上報疫情；做好檢測后咨詢。第四十二頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2009版第四十三頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二免疫功能（CD4/CD8）的檢測第四十四頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二T淋巴細胞分類在T淋巴細胞分類中，CD4代表T輔助細胞而CD8代表T抑制細胞和T殺傷細胞。CD4+T淋巴細胞是HIV感染的主要靶細胞，也是免疫反應(yīng)的中心細胞；CD8+T淋巴細胞是免疫反應(yīng)的效應(yīng)細胞。第四十五頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二T淋巴細胞分類正常人的CD4+T淋巴細胞約占總的T淋巴細胞的65%，CD8+T淋巴細胞約占35%。人體感染了HIV后，涉及的主要病理過程就是免疫系統(tǒng)的損害，主要表現(xiàn)為：CD4+T淋巴細胞的丟失，絕對數(shù)量的減少，同時CD8+T淋巴細胞數(shù)量增加，CD4和CD8的比例失調(diào)。因此CD4+T淋巴細胞計數(shù)作為直接測定免疫功能的方法，是提供HIV感染病人免疫系統(tǒng)損害狀況最明確的指標(biāo)。第四十六頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二CD4+T淋巴細胞正常值CD4：410-1590/mm3

CD8：190-1140/mm3CD4/CD8：＞1第四十七頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二CD4+T淋巴細胞計數(shù)意義是艾滋病疾病分期、確定診斷、制定抗病毒治療和預(yù)防機會性感染方案的標(biāo)準(zhǔn)實驗室指標(biāo)，也是與病毒載量相配合預(yù)測疾病進程的可靠指標(biāo)。第四十八頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二CD4+T淋巴細胞檢測意義1、用于HIV感染者的疾病分期：凡CD4+T淋巴細胞＜200/mm3或CD4+T淋巴細胞的百分比＜14%的HIV感染者可歸入艾滋病。

第四十九頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二CD4+T淋巴細胞檢測意義2、判斷HIV感染者的臨床合并癥（各種機會性感染與CD4+T淋巴細胞的相關(guān)性），如CD4+T淋巴細胞＜200/mm3時，很容易發(fā)生卡氏肺囊蟲肺炎；而巨細胞病毒感染和鳥分支桿菌感染常發(fā)生于CD4+T淋巴細胞＜50/mm3的病人，極少見于CD4+T淋巴細胞＞100/mm3的病人。第五十頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二CD4+T淋巴細胞檢測意義3、幫助確定抗HIV藥物治療及機會性感染預(yù)防性治療的適應(yīng)癥，例如，當(dāng)CD4+T淋巴細胞＜200/mm3時，應(yīng)給予抗卡氏肺囊蟲肺炎的預(yù)防性治療；4、抗HIV藥物療效的重要判斷指標(biāo)。第五十一頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二成人及青少年艾滋病分期標(biāo)準(zhǔn)（美國CDC.1993）CD4+T細胞臨床階段A無癥狀或急性HIV感染或持續(xù)性全身淋巴結(jié)腫大B出現(xiàn)癥狀，不是A或CC艾滋病指征性癥狀>500/ul（≥29%）A1B1C1200-499/ul（14-28%）A2B2C2<200/ul（<14%）A3B3C3CD4<200/ul和/或出現(xiàn)艾滋病指征性癥狀（如卡氏肺囊蟲肺炎等）時，就可定義為進入艾滋病期。如表中A3，B3，C1-3期。第五十二頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二CD4+、CD8+T細胞檢測絕對計數(shù)方法單平臺法：應(yīng)用流式細胞儀、絕對計數(shù)管及相應(yīng)軟件，可直接得出CD4+、CD8+T細胞值，操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確，目前廣泛應(yīng)用。多重平臺法：包括白細胞計數(shù)、白細胞中的淋巴細胞百分比及淋巴細胞中的CD4+T/CD8+T細胞百分比等三項實驗室檢測技術(shù)，操作及計算較復(fù)雜，結(jié)果準(zhǔn)確性不如單平臺法。第五十三頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二CD4檢測樣品要求抗凝血新鮮、不溶血、無脂肪血按要求常溫送檢信息滿足要求第五十四頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二樣品的采集1、合適抗凝管：有2ml、4ml、10ml不同容量管；2、抗凝劑：用于流式細胞儀免疫表型檢測的抗凝劑（K2EDTA，K3EDTA）；3、采血管上注明樣品編號等信息；4、按管的容量采集；5、采血后立即握住試管兩端，垂直輕柔顛倒混勻數(shù)次，防止血液凝固；6、填寫相應(yīng)的送樣單，信息滿足要求，編號與采血管一致。第五十五頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二樣品的運輸1、包裝應(yīng)符合國家《病原微生物實驗室生物安全管理條例》防泄漏、防污染，運輸樣品至檢測實驗室；2、要求室溫條件（18~25℃）保存和運輸樣品，避免極端溫度（結(jié)冰或大于37℃），高溫季節(jié)，需用隔熱容器盛裝樣品，并將其置于有冰袋和吸熱物質(zhì)的容器中3、樣品采集后6小時送達實驗室檢測效果最好。第五十六頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二樣品的接收1、專人接收樣品，檢查樣品質(zhì)量、數(shù)量并核對標(biāo)識，送檢單需記錄樣品詳細資料；2、溶血、凝血、嚴(yán)重脂血、結(jié)冰、量不足、管裂有滲漏的樣品視為不合格樣品；3、超過檢測允許時間的樣品接收但不能用于CD4檢測；第五十七頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二樣品檢測要求、報告及結(jié)果錄入建議實驗室及時檢測；一般要求24小時內(nèi)染色，染色后6小時內(nèi)分析；兩天內(nèi)出報告，報告及時反饋到治療點；治療點及時將檢測結(jié)果錄入國家治療信息系統(tǒng)。第五十八頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二第五十九頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二第六十頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二CD4實驗室網(wǎng)絡(luò)全區(qū)目前共有25個CD4檢測實驗室，分布14個市級CDC，3家醫(yī)院和9個縣級CDC，去年自治區(qū)衛(wèi)生廳新招標(biāo)采購多臺流式細胞儀，將陸續(xù)配備到疫情較為嚴(yán)重的縣級CDC和抗病毒治療點。第六十一頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二CD4實驗室網(wǎng)絡(luò)1、自治區(qū)CDC11、貴港市CDC2、百色市CDC12、欽州市CDC3、崇左市CDC13、防城港市CDC4、河池市CDC14、北海市CDC5、桂林市CDC15、賀州市人民醫(yī)院6、南寧市CDC16、廣西龍?zhí)夺t(yī)院7、柳州市CDC17、南寧市四醫(yī)院8、來賓市CDC18、靈山縣CDC9、梧州市CDC19、鹿寨縣10、玉林市CDC20、平南縣CDC…第六十二頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二病毒載量檢測第六十三頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二1、輔助診斷

某些非典型的抗體反應(yīng)，特別是不確定反應(yīng)時，RNA的測定可提供非常有用的證據(jù)。單純使用RNA測定不能完全確定感染與否，但當(dāng)RNA測定出現(xiàn)較高拷貝數(shù)的陽性結(jié)果時（>1000）提示感染發(fā)生的可能性非常大。第六十四頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二2、窗口期輔助診斷在窗口期抗原峰出現(xiàn)前后通常出現(xiàn)一個病毒載量的高峰，通常此高峰高于發(fā)病時的血漿病毒水平，早期病毒RNA測定具有特殊的意義。目前國際上正在嘗試使用這種檢測對采供血樣品進行多個樣品混合后的RNA檢測以降低窗口期傳播的殘余危險度。第六十五頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二3、病程監(jiān)控由于HIV感染發(fā)生后病毒載量的變化具有一定規(guī)律，并且這種變化與疾病的進程有著密切的相關(guān)性。通常在感染后無癥狀期內(nèi)發(fā)生的臨床癥狀很難與AIDS發(fā)病時的癥狀區(qū)別，病毒載量測定可以幫助醫(yī)生判斷一個剛發(fā)生的癥狀是否與HIV感染有關(guān)。第六十六頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二4、指導(dǎo)治療方案及療效測定并非在任何情況下感染者都應(yīng)該進行抗病毒治療，這不但是經(jīng)濟上的原因，更重要的是在于抗病毒藥物的副作用和療效。通常在病毒載量達到一定水平后（如>35000-50000拷貝/毫升）才具有良好的效果。只有通過治療后病毒水平的檢測才能確定治療是否有效，通常治療后病毒水平降低50%才被認(rèn)為臨床有效。1000800600400200654320204060weekHAARTSTIHIV-1plasmaRNACD4+TcellcountHIV-1plasmaRNACD4+Tcellcount第六十七頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二5、預(yù)測疾病進程HIV疾病進程與病毒載量的關(guān)系十分密切，觀察感染者病毒RNA水平可大致預(yù)測其發(fā)病的可能。如右圖所示，病毒載量與6年發(fā)病率的關(guān)系為：<500時5.4%，501-3000時16.6%，3001-10000時31.7%，10001-30000時55.2%，>30000時則為80%。第六十八頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二兩種方法檢測病毒載量（一）RT-PCR（二）NASBAEasyQ第六十九頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二病毒載量檢測樣品要求血漿樣品量約1毫升樣品要求保存低溫保存（-20℃以下）冷凍運輸?shù)谄呤?，共九十三頁，編輯?023年，星期二實驗室網(wǎng)絡(luò)自治區(qū)CDC確證中心實驗室柳州市CDC確證實驗室梧州市CDC確證實驗室賀州市CDC確證實驗室龍?zhí)夺t(yī)院確證實驗室桂林市CDC確證實驗室第七十一頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二3.12×105第七十二頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二低于最低檢測限（＜400拷貝/毫升）第七十三頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二高于最高檢測限（>7.5×105拷貝/毫升）第七十四頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二第七十五頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二第七十六頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二RT-PCR病毒載量結(jié)果的報告三種情況具體的一個數(shù)值（該值在400--7.5×105拷貝/毫升）低于最低檢測限（＜400拷貝/毫升）高于最高檢測限（＞7.5×105拷貝/毫升）第七十七頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二1.6×105第七十八頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二低于最低檢測限（＜50拷貝/毫升）第七十九頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二高于最高檢測限（>3.0×106拷貝/毫升）第八十頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二NASBAEASYQ病毒載量結(jié)果報告的三種情況

具體的一個數(shù)值（該值在50–3.0×106拷貝/毫升）低于最低檢測限（＜50拷貝/毫升）高于最高檢測限（＞3.0×106拷貝/毫升）第八十一頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二注意事項1、不同檢測方法的結(jié)果不能直接比較，必須轉(zhuǎn)化為國際單位

RT-PCR:1IU/ml=0.51copies/mlNASBAEASYQ:1IU/ml=1copies/ml第八十二頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二注意事項2、檢測結(jié)果低于最低檢測限不能排除HIV感染3、病毒載量結(jié)果低于1000copies/ml不進行耐藥檢測，只有大于1000copies/ml的病人才做耐藥檢測。第八十三頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二艾滋病檢測實驗室安全防護一、建立安全制度（一）實驗室的設(shè)備、建筑和設(shè)施的安全性應(yīng)通過專家的評審。（二）建立安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序，該程序應(yīng)適用于現(xiàn)有的實驗條件，并與實驗室其他規(guī)章制度一致。（三）無論是否發(fā)生意外事故，每年都要對安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序及其實施情況進行檢查。（四）制定意外事故處理預(yù)案。建立意外事故的登記和報告制度。第八十四頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二二、人員管理和培訓(xùn)（一）人員管理1、實驗室主任應(yīng)了解所有工作人員。在安排工作區(qū)域時，要根據(jù)人員的工作種類和所涉及的生物材料，對實驗室環(huán)境做安全檢查。2、新調(diào)入人員、外來合作、進修和學(xué)習(xí)的人員在進入實驗室之前必須經(jīng)過實驗室主任的批準(zhǔn)。非實驗室人員和物品不得進入實驗室。3、嚴(yán)格執(zhí)行實驗室工作人員年度采血檢測HIV抗體和備案制度，工作人員血清應(yīng)長期保留。第八十五頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二（二）培訓(xùn)

1、所有工作人員必須經(jīng)過HIV檢測技術(shù)和實驗室安全培訓(xùn)，包括上崗培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，并接受實驗室管理人員的監(jiān)督。實驗室的安全責(zé)任人要對工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，所有工作人員都有責(zé)任保護自己和他人的安全。2、必須告知新上崗人員實驗室工作的潛在危險，進行安全教育，直至有能力后方可單獨工作。第八十六頁，共九十三頁，編輯于2023年，星期二三、安全保障措施（一）個人保健

1、高標(biāo)準(zhǔn)的個人保健對于減少感染的危險性很重要。皮膚受損、患病都會增加感染的危險。皮膚的傷口和擦傷都應(yīng)以防水敷料覆蓋。2、進實驗室前要摘除