中西醫(yī)保險分子生物學大綱

PAGE1第17頁共17頁醫(yī)學分子生物學教學大綱MedicalMolecularBiology（供五年制中西醫(yī)結(jié)合保險專業(yè)使用）一、課程目標1、課程的性質(zhì)和目的課程性質(zhì)：醫(yī)學分子生物學是分子生物學的重要分支，它與基礎(chǔ)醫(yī)學和臨床醫(yī)學密切結(jié)合，研究生物大分子結(jié)構(gòu)、功能、調(diào)控機制及其人體各種生理和病理狀態(tài)的分子機制。它是中西醫(yī)結(jié)合保險專業(yè)的專業(yè)基礎(chǔ)課程之一。目的：通過本課程的學習，使學生掌握分子生物學的基本理論、基本技能和最新進展，并特別注重與基礎(chǔ)醫(yī)學和臨床醫(yī)學的結(jié)合，從而為學生進一步學習其他專業(yè)課程和開展醫(yī)學相關(guān)工作奠定醫(yī)學分子生物學基礎(chǔ)。2、本課程與其它課程的聯(lián)系分子生物學是一門從生物大分子結(jié)構(gòu)和功能水平上闡述各種生命現(xiàn)象的前沿學科，其內(nèi)涵隨著生命科學的發(fā)展日益豐富，其新理論、新技術(shù)迅速滲透到生命科學的各個領(lǐng)域，產(chǎn)生了諸如分子生理學、分子免疫學、分子微生物學、分子神經(jīng)生物學、分子病理學、分子藥理學等新興的交叉學科；同時，醫(yī)學分子生物學的發(fā)展，也有效地推動了新的診斷、治療、預(yù)防方法的建立以及新的健康理念的發(fā)展。先修課程：生物化學、高等有機化學后續(xù)課程：分子生理學、分子免疫學、分子病理學、分子藥理學等。二、課程學時分配總學時36，其中理論27學時，實驗9學時。課程主要內(nèi)容和學時分配見課程學時分配表。課程學時分配表教學環(huán)節(jié)時數(shù)課程內(nèi)容理論實踐教學習題及討論小計實驗實訓見習其他緒論11基因與基因組22DNA的生物合成44RNA的生物合成44蛋白質(zhì)的生物合成44基因表達與調(diào)控44基因工程6915癌基因22總計27936三、建議教材和教學參考書目1.教材唐炳華，王繼峰主編.醫(yī)學分子生物學.第1版.出版地：中國中醫(yī)藥出版社，20112.主要參考書=1\*GB2⑴查錫良主編.醫(yī)學分子生物學.第1版.出版地：人民衛(wèi)生出版社，2005=2\*GB2⑵藥立波主編.醫(yī)學分子生物學.第3版.出版地：人民衛(wèi)生出版社，2008=3\*GB2⑶趙晶主編.醫(yī)學分子生物學學習指導及習題集.第1版.出版地：人民衛(wèi)生出版社，2006=4\*GB2⑷德偉，歐芹主編.醫(yī)學分子生物學（案例版）.第1版.出版地：科學出版社，2008四、課程考核本課程為考查課，采用理論課閉卷考試評定成績。五、課程教學內(nèi)容及基本要求第一章緒論【目的要求】掌握分子生物學的概念；醫(yī)學分子生物學的研究范圍。熟悉分子生物學的發(fā)展簡史以及醫(yī)學分子生物學發(fā)展歷史上的重大事件。了解醫(yī)學分子生物學的現(xiàn)狀與未來；醫(yī)學分子生物學與其他學科的關(guān)系。【教學內(nèi)容】第一節(jié)分子生物學與醫(yī)學分子生物學的研究范圍分子生物學與醫(yī)學分子生物學概述講述分子生物學的概念及醫(yī)學分子生物學的概念研究范圍介紹醫(yī)學分子生物學研究范圍，包括：核酸、蛋白質(zhì)和信號轉(zhuǎn)導第二節(jié)分子生物學發(fā)展簡史準備醞釀階段介紹蛋白質(zhì)的研究以及DNA作為遺傳物質(zhì)的研究建立發(fā)展階段介紹中心法則的建立，以及對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的進一步認識深入發(fā)展階段介紹基因工程技術(shù)的建立，基因組研究的開展，基因表達調(diào)控的研究，以及信號轉(zhuǎn)導機制的研究等。第三節(jié)分子生物學與其他學科及醫(yī)學的關(guān)系分子生物學與醫(yī)學其他學科的關(guān)系分子生物學與中醫(yī)藥研究的關(guān)系【教學方法和時數(shù)】課堂講授1學時本章重點是掌握醫(yī)學分子生物學的概念，熟悉醫(yī)學分子生物學的研究范圍。課外作業(yè)：問答題：試舉例說明醫(yī)學分子生物學在醫(yī)學發(fā)展中的重要性。第二章基因與基因組【目的要求】掌握基因的概念、基本結(jié)構(gòu)和化學本質(zhì)；基因組的概念；原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點和真核生物基因組結(jié)構(gòu)的特點。熟悉病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點；真核生物DNA的多態(tài)性。了解人類基因組計劃；功能基因組學?！窘虒W內(nèi)容】第一節(jié)基因基因的化學本質(zhì)基因的概念和化學本質(zhì)?；虻幕窘Y(jié)構(gòu)基因的基本組構(gòu)，以及編碼序列、非編碼序列、外顯子、內(nèi)含子、啟動子、轉(zhuǎn)錄起始位點、終止子的概念。第二節(jié)基因組基因組的概念病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點，以及操縱子的概念和結(jié)構(gòu)真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點；端粒的概念；重復(fù)序列的概念及種類；多基因家族和基因超家族的概念；假基因的概念。第三節(jié)真核生物DNA的多態(tài)性單核苷酸多態(tài)性SNP的概念及應(yīng)用串聯(lián)重復(fù)序列多態(tài)性VNTR和STR的概念限制性片段長度多態(tài)性RFLP技術(shù)的原理及應(yīng)用單鏈構(gòu)象多態(tài)性SSCP的概念。DNA指紋DNA指紋的概念及應(yīng)用。第四節(jié)人類基因組計劃和功能基因組學人類基因組計劃人類基因組計劃發(fā)起的歷史、核心內(nèi)容。功能基因組學功能基因組學的概念及核心內(nèi)容?！窘虒W方法和時數(shù)】課堂講授2學時本章難點是原核生物和真核生物基因組結(jié)構(gòu)的特點，要求學生熟練掌握原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點和真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點，并注意兩者的區(qū)別。此外，基因也是本章的重點內(nèi)容之一，要求學生熟練掌握基因的概念、化學本質(zhì)及基本結(jié)構(gòu)。課外作業(yè)：一、名稱解釋：基因；基因組；內(nèi)含子；斷裂基因；端粒二、問答題：=1\*GB3①簡述真核生物基因組結(jié)構(gòu)的特點。=2\*GB3②試分析原核生物與真核生物基因組結(jié)構(gòu)的不同點。第三章DNA的生物合成【目的要求】掌握參與DNA復(fù)制的酶學機制；原核生物DNA復(fù)制過程的主要特點；DNA重組的概念、類型及機制；DNA損失的概念和類型。熟悉DNA復(fù)制的基本規(guī)律；真核生物復(fù)制與原核生物的不同；真核生物復(fù)制完整性的機制（端粒爬行模型）；DNA修復(fù)的類型；DNA逆轉(zhuǎn)錄的概念及酶。了解復(fù)制的幾種方式；引起DNA損失的因素及損失的意義；DNA修復(fù)的機制；逆轉(zhuǎn)錄病毒的基因組結(jié)構(gòu)及逆轉(zhuǎn)錄過程?！窘虒W內(nèi)容】第一節(jié)DNA復(fù)制的基本特征復(fù)制的概述復(fù)制和中心法則的概念；復(fù)制的本質(zhì)、化學反應(yīng)及體系。DNA復(fù)制的基本規(guī)律DNA復(fù)制的基本特征；半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制、前導鏈、后隨鏈、岡崎片段的概念；復(fù)制的幾種方式。第二節(jié)原核生物DNA的復(fù)制參與DNA復(fù)制的酶及蛋白質(zhì)參與DNA復(fù)制的主要酶、作用特點以及在復(fù)制過程中的作用，包括：DNA聚合酶、解螺旋酶、拓撲異構(gòu)酶、SSB、引物酶、連接酶等。DNA復(fù)制的基本過程分起始、延伸和終止三個階段，每個階段的特點及參與的酶或蛋白質(zhì)。第三節(jié)真核生物染色體DNA的復(fù)制真核生物染色體DNA與原核生物DNA復(fù)制的不同點不同點包括參與的酶或蛋白質(zhì)，以及過程中的調(diào)控機制的不同。真核生物復(fù)制完整性的保障機制——端粒爬行模型。端粒的概念和結(jié)構(gòu)；端粒酶的概念及組成；端粒爬行模型。第四節(jié)DNA重組一、DNA重組概述DNA重組的概念、類型及生物學意義。二、同源重組同源重組的概念、特點和機制。三、位點特異性重組位點特異性重組的概念、特點和機制。DNA轉(zhuǎn)座轉(zhuǎn)座子的概念、種類和轉(zhuǎn)座機制。第五節(jié)DNA的損傷和修復(fù)DNA損傷DNA損傷概念；導致DNA損傷的因素；DNA損傷的類型及生物學意義。DNA修復(fù)DNA修復(fù)的類型及機制。第六節(jié)DNA的逆轉(zhuǎn)錄合成逆轉(zhuǎn)錄概述逆轉(zhuǎn)錄的概念及酶逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶的作用特點。三、逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組結(jié)構(gòu)及逆轉(zhuǎn)錄過程（自學）【教學方法和時數(shù)】課堂講授4學時本章難點是DNA復(fù)制中的酶學問題，要求學生熟練掌握參與DNA復(fù)制的酶或蛋白質(zhì)，以及這些酶或蛋白質(zhì)作用特點和在復(fù)制過程中的順序及功能。重點掌握原核生物的DNA復(fù)制過程，對于真核生物只要熟悉與原核生物復(fù)制的不同。此外，復(fù)制的基本規(guī)律也是本章的重點內(nèi)容之一，要求學生熟練掌握DNA復(fù)制的四大規(guī)律，以及半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制、前導鏈、隨從鏈和岡崎片段等的概念。課外作業(yè)：一、名稱解釋：半保留復(fù)制；岡崎片段；逆轉(zhuǎn)錄；DNA損傷；轉(zhuǎn)座二、問答題：=1\*GB3①簡述原核生物DNA復(fù)制過程中有哪些酶或蛋白質(zhì)參加，各有何作用。=2\*GB3②試分析端粒是如何維持DNA復(fù)制的完整性。=3\*GB3③簡述DNA復(fù)制的基本特征。=4\*GB3④試述DNA損傷的類型以及DNA修復(fù)的類型。=5\*GB3⑤DNA重組有哪些類型？各概念如何？第五章RNA的生物合成【目的要求】掌握轉(zhuǎn)錄的概念、本質(zhì)及反應(yīng)體系；轉(zhuǎn)錄的基本特征；不對稱轉(zhuǎn)錄的概念；原核生物RNA聚合酶結(jié)構(gòu)及各亞基的作用；啟動子的概念，原核和真核生物啟動子的結(jié)構(gòu)組件；原核生物轉(zhuǎn)錄終止機制。熟悉轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的異同；真核生物RNA聚合酶分別催化的產(chǎn)物；與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的調(diào)控序列；原核生物轉(zhuǎn)錄的基本過程；真核生物轉(zhuǎn)錄與原核生物的不同；通用轉(zhuǎn)錄因子和特異轉(zhuǎn)錄因子的概念；真核生物轉(zhuǎn)錄后加工。了解病毒RNA的復(fù)制【教學內(nèi)容】第一節(jié)轉(zhuǎn)錄的基本特征一、基因的轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄的概念、本質(zhì)、化學機制和反應(yīng)體系。二、轉(zhuǎn)錄的基本特征選擇性轉(zhuǎn)錄、不對稱性轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后加工第二節(jié)RNA聚合酶一、RNA聚合酶的特點二、原核生物RNA聚合酶結(jié)構(gòu)及各亞基的作用三、真核生物RNA聚合酶3種RNA聚合酶催化的產(chǎn)物第三節(jié)與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的調(diào)控序列一、原核生物啟動子啟動子概念及原核生物啟動子的結(jié)構(gòu)組件二、真核生物啟動子真核生物啟動子概念及功能組件三、原核生物與真核生物終止子原核生物的終止機制及真核生物的終止機制第四節(jié)原核生物轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)錄后加工一、轉(zhuǎn)錄起始RNA聚合酶狀態(tài)；RNA聚合酶與啟動子結(jié)合的過程；轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物二、轉(zhuǎn)錄延長RNA聚合酶狀態(tài)；轉(zhuǎn)錄空泡；羽毛狀現(xiàn)象三、轉(zhuǎn)錄終止依賴ρ因子和非依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止轉(zhuǎn)錄后加工rRNA前體加工和tRNA前體加工第五節(jié)真核生物轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)錄后加工一、真核生物轉(zhuǎn)錄過程注意與原核生物的不同；通用轉(zhuǎn)錄因子和特異轉(zhuǎn)錄因子的概念。二、真核生物轉(zhuǎn)錄后加工mRNA前體（加帽、加尾、剪接和RNA編輯）、rRNA前體和tRNA前體加工病毒RNA的復(fù)制介紹病毒RNA復(fù)制的概念和類型?！窘虒W方法和時數(shù)】課堂講授4學時本章難點是原核生物的轉(zhuǎn)錄，要求學生熟練掌握原核生物轉(zhuǎn)錄起始和轉(zhuǎn)錄延長中的RNA聚合酶的變化，理解轉(zhuǎn)錄延長中的轉(zhuǎn)錄空泡形成原因，掌握原核生物轉(zhuǎn)錄終止的兩種機制。此外，轉(zhuǎn)錄的基本特征及與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的調(diào)控元件也是本章的重點內(nèi)容，要求學生掌握并理解不對稱轉(zhuǎn)錄的含義，掌握啟動子的概念，以及原核生物和真核生物啟動子的構(gòu)成組件。課外作業(yè)：一、名稱解釋：不對稱轉(zhuǎn)錄；編碼鏈；模板鏈；通用轉(zhuǎn)錄因子；特異轉(zhuǎn)錄因子二、問答題：=1\*GB3①簡述復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的相似點和區(qū)別點。=2\*GB3②簡述原核生物轉(zhuǎn)錄終止方式。=3\*GB3③簡述原核生物啟動子的結(jié)構(gòu)與功能。=4\*GB3④簡述真核生物RNA加工成熟特點。第六章蛋白質(zhì)的生物合成【目的要求】掌握三種RNA在蛋白質(zhì)合成中的功能；密碼子的概念及特點；原核生物蛋白質(zhì)生物合成過程中起始復(fù)合物的生成；核蛋白體循環(huán)的概念及基本過程；原核生物起始因子、延長因子和釋放因子的功能。熟悉翻譯的概念及參與蛋白質(zhì)生物合成的物質(zhì)；真核生物的翻譯起始；原核生物和真核生物翻譯過程的異同；蛋白質(zhì)的靶向運輸?shù)姆绞健Ａ私舛嗑酆颂求w的概念、意義;蛋白質(zhì)翻譯后修飾的方式；蛋白質(zhì)靶向運輸?shù)臋C制?！窘虒W內(nèi)容】第一節(jié)概述一、翻譯的概念及反應(yīng)體系二、翻譯的基本過程第二節(jié)參與蛋白質(zhì)生物合成的主要物質(zhì)一、mRNAmRNA在蛋白質(zhì)合成中的作用；密碼子的概念及特點；二、tRNAtRNA結(jié)構(gòu)特點；反密碼子概念；tRNA在蛋白質(zhì)生物合成中的作用三、rRNA真核生物與原核生物核糖體的組成；核糖體結(jié)構(gòu)的特點第三節(jié)氨基酸的負載氨基酸負載的概念、過程及催化酶；書寫方式；原核生物和真核生物起始密碼子所對應(yīng)的起始氨基酰-tRNA。原核生物蛋白質(zhì)的生物合成合成起始合成起始復(fù)合物的形成過程；mRNA在小亞基定位結(jié)合的機制；SD序列的概念。合成延伸核蛋白體循環(huán)的概念及幾個階段；延長因子的種類及所起的作用合成終止終止的機制及釋放因子的作用。多聚核糖體多聚核糖體的概念及生物學意義真核生物蛋白質(zhì)的生物合成合成起始起始注意與原核生物的不同；起始掃描模型；Kozak序列；起始因子的功能。合成延長與終止注意與原核生物的不同蛋白質(zhì)的翻譯后修飾蛋白質(zhì)翻譯后修飾的幾種方式。蛋白質(zhì)的靶向轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)靶向轉(zhuǎn)運的種類；信號序列的概念及結(jié)構(gòu)特點；蛋白質(zhì)靶向轉(zhuǎn)運的機制?！窘虒W方法和時數(shù)】課堂講授4學時本章難點是原核生物的蛋白質(zhì)合成，要求學生熟練掌握蛋白質(zhì)合成起始階段的過程，以及原核生物mRNA準確定位于核糖體的機制，掌握蛋白質(zhì)延長階段的核蛋白體循環(huán)的概念及過程，掌握參與核蛋白體循環(huán)的延長因子種類及其作用，掌握原核生物釋放因子的種類及在蛋白質(zhì)合成終止中的作用。此外，參與蛋白質(zhì)合成的物質(zhì)也是本章重點內(nèi)容之一，要求學生熟練掌握3種RNA在蛋白質(zhì)合成中的作用，以及密碼子的概念和特點。課外作業(yè)：一、名稱解釋：密碼子；氨基酸負載；核蛋白體循環(huán)；信號序列二、問答題：=1\*GB3①簡述遺傳密碼的基本特點。=2\*GB3②簡述3種RNA在蛋白質(zhì)合成中的作用。=3\*GB3③簡述原核生物肽鏈合成的主要步驟。=4\*GB3④簡述蛋白質(zhì)生物合成的加工修飾的方式。第七章基因表達與調(diào)控【目的要求】掌握基因表達和基因表達調(diào)控的概念；基因表達的方式，管家基因和組成型表達的概念；參與基因表達轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控的基本因素；乳糖操縱子結(jié)構(gòu)組成與調(diào)控機制；RNApolII轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)節(jié)、順式作用元件與反式作用因子的概念。熟悉原核生物轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控的特點；真核基因表達調(diào)控的特點；真核基因DNA水平調(diào)節(jié)類型；色氨酸操縱子的阻遏蛋白的負性調(diào)節(jié)機制及轉(zhuǎn)錄衰減效應(yīng)了解原核生物翻譯水平的調(diào)控；真核生物轉(zhuǎn)錄后水平、翻譯水平和翻譯后水平的調(diào)控?！窘虒W內(nèi)容】第一節(jié)基因表達調(diào)控的基本規(guī)律基因表達調(diào)控的概述基因表達的概念；基因表達調(diào)控的概念?；虮磉_方式基因表達的兩種方式；組成型表達、管家基因的概念；誘導、阻遏的概念。第二節(jié)原核生物的基因表達調(diào)控原核生物轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控的特點乳糖操縱子模型操縱子的概念；乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)；乳糖操縱子的正性調(diào)節(jié)、負性調(diào)節(jié)及協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)的機制。色氨酸操縱子色氨酸操縱子結(jié)構(gòu)、色氨酸操縱子的阻遏調(diào)節(jié)，及色氨酸操縱子的衰減機制RNA聚合酶活性的調(diào)控原核生物翻譯水平的調(diào)控原核生物翻譯水平調(diào)控的層次；反義RNA的概念及類型。第三節(jié)真核生物的基因表達調(diào)控真核生物基因表達調(diào)控的特點真核生物基因表達調(diào)控的環(huán)節(jié)及DNA水平的調(diào)控RNApol=2\*ROMANII的轉(zhuǎn)錄起始水平調(diào)控順式作用元件、反式作用因子的概念；啟動子、增強子和沉默子的概念；轉(zhuǎn)錄因子的分類；基本轉(zhuǎn)錄因子和特異轉(zhuǎn)錄因子的概念；轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)特點及作用機制。轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控類型。翻譯水平和翻譯后水平的調(diào)控【教學方法和時數(shù)】課堂講授4學時本章難點是原核生物基因表達調(diào)控，要求學生熟練掌握操縱子的概念，掌握乳糖操縱子結(jié)構(gòu)組成，以及乳糖操縱子的正性調(diào)節(jié)、負性調(diào)節(jié)及協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)機制，理解色氨酸操縱子的衰減機制。此外，真核生物RNApol=2\*ROMANII轉(zhuǎn)錄起始水平的調(diào)控也是本章重點內(nèi)容之一，要求學生熟練掌握順式作用元件的概念及種類，反式作用因子的概念，以及轉(zhuǎn)錄因子的類型和結(jié)構(gòu)特點。課外作業(yè)：一、名稱解釋：基因表達；組成型表達；順式作用元件；反式作用因子；操縱子二、問答題：=1\*GB3①簡述真核生物基因表達調(diào)控的特點。=2\*GB3②簡述乳糖操縱子的作用機制。=3\*GB3③簡述色氨酸操縱子的衰減機制。第八章基因工程【目的要求】掌握基因工程和DNA克隆的概念；基因工程常用的重要工具酶；目的基因的概念；質(zhì)粒的概念及作為載體所需的條件；目的基因獲取的方法；基因克隆的基本過程。熟悉PCR反應(yīng)原理及體系；雙脫氧終止法DNA測序的原理；基因文庫與cDNA文庫的概念；Southern雜交、Northern雜交和Western雜交的概念及不同點；回文序列的概念和特點。了解克隆基因的表達；基因打靶技術(shù)；轉(zhuǎn)基因技術(shù)；RNA干涉技術(shù)?！窘虒W內(nèi)容】第一節(jié)概述基因工程基因工程、目的基因的概念及所需的工具酶基因操作基因操作的概念、基本原理和步驟；第二節(jié)目的基因的獲取PCR技術(shù)PCR的概念、基本原理、反應(yīng)體系、反應(yīng)條件及產(chǎn)物分析；此法獲取目的基因的適用范圍RT-PCR技術(shù)RT-PCR的概念和基本過程；注意與PCR的不同；此法的適用范圍基因文庫基因文庫、cDNA文庫的概念；構(gòu)建基因文庫的基本過程；此法的適用范圍人工合成目的基因此法的適用范圍第三節(jié)基因克隆基因克隆概述基因克隆的概念及基本過程克隆載體克隆載體的分類及基本元件；質(zhì)粒的概念、復(fù)制類型及常用質(zhì)粒載體的基本結(jié)構(gòu)和特點；噬菌體載體的特點和類型；M13噬菌體載體的元件及特點。重要的工具酶限制性內(nèi)切酶的概念、作用特點、酶切結(jié)果類型，及在基因克隆中的作用；DNA連接酶的作用特點及在基因克隆中的作用；DNA聚合酶、修飾酶和核酸酶的類型及在基因工程中的應(yīng)用。目的基因和載體重組目的基因與載體重組的幾種方式，包括平端連接、互補黏端連接、加同聚物尾連接和加人工接頭連接。外源DNA導入宿主細胞外源DNA導入原核細胞的方法；外源DNA導入真核細胞的方法；轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)染的概念。細胞篩選和DNA鑒定重組體篩選的方法，包括抗生素篩選、藍白篩選、雜交分析、PCR分析、酶切分析和免疫分析等。第四節(jié)克隆基因的表達表達載體表達載體的概念和基本元件。原核表達系統(tǒng)常用表達系統(tǒng)；原核表達載體的特點；表達方式；原核表達系統(tǒng)的優(yōu)缺點真核表達系統(tǒng)常用表達載體；真核表達系統(tǒng)的優(yōu)缺點第五節(jié)DNA測序和基因拷貝數(shù)分析DNA測序Sanger法測序的原理及過程；測序結(jié)果的分析基因拷貝數(shù)分析Southern雜交、Northern雜交的概念及基本過程；探針的概念、基本條件、種類、標記方法及制備方法；斑點雜交和原位雜交的概念；Western雜交的概念及基本過程；注意Southern雜交、Northern雜交和Western雜交的異同。第六節(jié)基因功能的分析轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的概念、基本流程及應(yīng)用?；虼虬屑夹g(shù)基因剔除技術(shù)；基因剔除載體的構(gòu)建；基因剔除的基本流程。RNA干涉技術(shù)反義RNA技術(shù)和RNA干涉技術(shù)的概念及基本機理?！窘虒W方法和時數(shù)】課堂講授6學時本章難點是基因克隆，要求學生熟練掌握基因克隆的概念和基本原理，包括目的基因的獲取方法，克隆載體的概念及具備元件，目的基因與載體重組的方法，外源DNA導入宿主細胞的方法，重組體篩選的方法等。此外，關(guān)于雜交技術(shù)也是本章的重點內(nèi)容之一，要求學生熟練掌握Southern雜交、Northern雜交和Western雜交的概念及基本過程，并注意這三者的異同點，掌握探針的概念和基本條件，并熟悉探針標記的方法。課外作業(yè)：一、名稱解釋：DNA克?。毁|(zhì)粒；基因組文庫；cDNA文庫；探針二、問答題：=1\*GB3①簡述基因克隆的基本原理。