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實(shí)驗(yàn)三心臟的起搏點(diǎn)和心動(dòng)周期的觀察第一頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二【目的要求】1、學(xué)習(xí)暴露蛙類心臟的方法,熟悉心臟的結(jié)構(gòu)。2、觀察心臟各部分自動(dòng)節(jié)律性活動(dòng)的時(shí)相及頻率。3、用結(jié)扎法觀察兩棲類動(dòng)物心臟的起搏點(diǎn)和心臟不同部位傳導(dǎo)系統(tǒng)的自動(dòng)節(jié)律性高低。4、學(xué)習(xí)在體蛙類心臟活動(dòng)的描記方法。5、觀察心室在收縮活動(dòng)的不同時(shí)期對(duì)額外刺激的反應(yīng)。6、了解心肌興奮性的變化及代償間歇的發(fā)生機(jī)理。第二頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二【基本原理】心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自動(dòng)節(jié)律性,但各部分的自動(dòng)節(jié)律性高低不同。兩棲類動(dòng)物的心臟起搏點(diǎn)是靜脈竇(哺乳動(dòng)物的是竇房結(jié))。正常情況下,靜脈竇(竇房結(jié))的自律性最高,能自動(dòng)產(chǎn)生節(jié)律性興奮,并依次傳到心房、房室交界區(qū)、心室,引起整個(gè)心臟興奮和收縮,這種有節(jié)律的活動(dòng)可以用機(jī)械方法或通過換能器記錄下來,稱為心搏曲線。在心臟的收縮期和舒張?jiān)缙?,任何刺激均不能引起心肌興奮與收縮,而在心肌舒張?jiān)缙谝院螅9?jié)律性興奮到達(dá)之前,給心臟施加一個(gè)閾上刺激就能引起一次提前出現(xiàn)的心肌收縮,稱為期前收縮。期前收縮也有一個(gè)較長的不應(yīng)期,因此下一次正常的竇性節(jié)律性興奮到達(dá)時(shí),正好落在期前收縮的有效不應(yīng)期內(nèi),不能引起心肌收縮。這樣出現(xiàn)一個(gè)較長時(shí)間的間歇期,稱為代償間歇。第三頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二【動(dòng)物、器材與試劑】(以下是每組所需的種類和數(shù)量)蛙或蟾蜍1只、紗布1塊、毀髓針1支、眼科鑷1把、手術(shù)剪1把、眼科剪1把、蛙板1塊、蛙釘4只、玻璃分針1支、滴管1支、細(xì)棉線30cm、解剖盤1只、任氏液至少100mL、秒表1塊、蛙心夾1只、雙極刺激電極1個(gè)、橡皮泥或電極支架1個(gè)、張力換能器(50g)1個(gè)、二道生理紀(jì)錄儀1臺(tái)、生理多用儀1臺(tái)、鐵支架1個(gè)、雙凹夾1個(gè)。第四頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二【方法與步驟】1、取蛙或蟾蜍一只,雙毀髓,腹面朝上固定于蛙板上,左手持鑷子提起胸骨后端的皮膚剪一小口,然后向左、右兩側(cè)鎖骨外側(cè)剪開皮膚。把游離的皮膚掀向頭端。再用鑷子,提起胸骨后方的腹肌,剪開一小口后,剪刀伸入胸腔(勿傷及心臟和血管),沿皮膚切口剪開胸壁,剪斷左右烏喙骨和鎖骨,使創(chuàng)口呈一倒三角形,充分暴露心臟部位。持眼科鑷提起心包膜并用眼科剪剪開心包膜,暴露心臟。第五頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二2、從心臟的腹面可看到一個(gè)心室,其上方有兩個(gè)心房,房室之間有房室溝。心室右上方有一動(dòng)脈圓錐,是動(dòng)脈根部的膨大,動(dòng)脈干向上分成左右兩分支。用系線的蛙心夾在心臟收縮到最小時(shí)夾住少許心尖部肌肉,輕輕提起蛙心夾,將心臟倒吊,可以看到心臟背面有節(jié)律搏動(dòng)的靜脈竇,在心房與靜脈竇之間有一條白色半月形界線,稱為竇房溝。前、后腔靜脈與左、右肝靜脈的血液流入靜脈竇。(圖8)第六頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二3、仔細(xì)觀察靜脈竇、心房及心室收縮的順序和頻率。4、將刺激電極(雙電極)安放在心室外壁,使之既不影響心搏又能同心室緊密接觸(可用橡皮泥或電極支架固定電極柄),刺激電極與多用儀的刺激輸出端相連。將蛙心夾的系線與張力傳感器的應(yīng)變梁孔連接,調(diào)節(jié)系線的拉力,使心臟的收縮活動(dòng)在二道生理記錄儀上出現(xiàn)。調(diào)整掃描速度,使心搏曲線的幅度與寬度適中。5、描記正常心搏曲線,觀察曲線的收縮相和舒張相。第七頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二6、用中等強(qiáng)度的單個(gè)閾上刺激分別在心室收縮期或舒張?jiān)缙诖碳ば氖?,觀察能否引起期前收縮。7、用同等強(qiáng)度的單個(gè)閾上刺激在心室舒張?jiān)缙谥蟮牟煌瑫r(shí)段刺激心室,觀察有無期前收縮出現(xiàn)。8、以上刺激若能引起期前收縮,觀察其后有無代償間歇出現(xiàn)。9、用閾上刺激連續(xù)刺激心室肌,觀察臟臟是否會(huì)出現(xiàn)強(qiáng)直收縮。10、分離主動(dòng)脈兩分支的基部,用眼科鑷在主動(dòng)脈干下穿一細(xì)線。將蛙心心尖翻向頭端,暴露心臟背面,在靜脈竇和心房交界處的半月形白線(即竇房溝)處將預(yù)先穿入的線作一結(jié)扎,即斯氏第一結(jié)扎(圖9),以阻斷靜脈竇和心房之間的傳導(dǎo)。觀察蛙心各部分的搏動(dòng)節(jié)律變化,并記錄各自的跳動(dòng)頻率(次·min-1)。待心房、心室復(fù)跳后,再分別記錄心房心室的復(fù)跳時(shí)間和蛙心各部分的搏動(dòng)頻率(次·min-1),比較結(jié)扎前后的變化。第八頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二第九頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二11、第一結(jié)扎實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目完成后,再在心房與心室之間即房室溝用線作第二結(jié)扎,即斯氏第二結(jié)扎(圖9)。結(jié)扎后,心室停止跳動(dòng),而靜脈竇和心房繼續(xù)跳動(dòng),記錄其各自的跳動(dòng)頻率(次·min-1)。經(jīng)過較長時(shí)間的間歇后,心室又開始跳動(dòng),記錄心室復(fù)跳時(shí)間,及蛙心各部分的跳動(dòng)頻率(次/·min-1)。將記錄結(jié)果記入下表:第十頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二第十一頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二【注意事項(xiàng)】1、經(jīng)常給心臟滴加任氏液,以保持心臟適宜的環(huán)境。2、采用二道生理記錄儀時(shí),注意儀器接地。3、張力傳感器與蛙心夾之間的細(xì)線應(yīng)保持適宜的緊張度。4、雙極刺激電極與心室接觸良好的同時(shí),還應(yīng)盡量不讓其阻礙心臟的自發(fā)收縮。5、要嚴(yán)格掌握刺激時(shí)間和時(shí)段。6、結(jié)扎前要認(rèn)真識(shí)別心臟的結(jié)構(gòu)。7、結(jié)扎部位要準(zhǔn)確地落在相鄰部位的交界處,結(jié)扎時(shí)用力逐漸增加,直到心房或心室搏動(dòng)停止。8、斯氏第一結(jié)扎后,若心室長時(shí)間不恢復(fù)跳動(dòng),施實(shí)斯氏第二結(jié)扎則可能使心室恢復(fù)跳動(dòng)。第十二頁,共十三頁,編輯于2023年,星期二【思考題】1.正常情況下,兩棲類動(dòng)物(或哺乳類動(dòng)物)的心臟起搏點(diǎn)是心臟的哪一部分?它為什么能控制潛在起搏點(diǎn)的活動(dòng)?2.斯氏第一結(jié)扎后,房室搏動(dòng)發(fā)生什么變化,為什么?3.斯氏第二結(jié)扎
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