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文檔簡介

實驗檢測生物組織第一頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二

斐林試劑蘇丹Ⅲ橘黃色紅色磚紅色沉淀紫色蘇丹Ⅳ

雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)試劑實驗現(xiàn)象還原性糖脂肪蛋白質(zhì)某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。實驗原理第二頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二選材:含糖量較高的白色或近于白色的植物組織(排除色素對顯色的干擾),蘋果、梨最好

。

實驗流程(步驟)1.可溶性還原糖

制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)取液:(2mL)顯色反應(yīng)

2mL組織樣液剛配制的斐林試劑2mL現(xiàn)象:

呈現(xiàn)藍色變成磚紅色(用前混勻)50~65.C水浴加熱2min第三頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二還原糖的檢測和觀察:第四頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二還原糖的檢測結(jié)果第五頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二2.脂肪的鑒定

取材:花生種子(浸泡3-4h),去皮,將子葉削成薄片

制片:①選取最薄的薄片移至載玻片中央②在薄片上滴加蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)染液2-3滴,染色2-3min③滴加體積分數(shù)為50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色(多余的蘇丹Ⅲ

)④吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片顯微觀察:先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察現(xiàn)象:有被染成橘黃色(或紅色)的脂肪微粒脂肪微粒第六頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二脂肪的檢測結(jié)果第七頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二3.蛋白質(zhì)的鑒定選材與制備組織樣液:豆?jié){溶液豆?jié){顯色反應(yīng)2mL組織樣液雙縮脲試劑A2mL現(xiàn)象:無色雙縮脲試劑B3-4滴紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供Cu2+)第八頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果第九頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二還原性糖的鑒定關(guān)鍵步驟:斐林試劑甲(0.1g/ml的NaOH溶液2ml)和乙液(0.05g/ml的CuSO4溶液2ml)先混合,再使用?,F(xiàn)配現(xiàn)用。脂肪的鑒定關(guān)鍵步驟:子葉削成理想薄片。蛋白質(zhì)的鑒定關(guān)鍵步驟:先加試劑A(0.1g/ml的NaOH溶液2ml),再加試劑B(0.05g/ml的CuSO4溶液3~4滴)。第十頁,共十一頁,編輯于2023年,星期二鑒定物質(zhì)實驗試劑實驗現(xiàn)象注意事項還原性糖斐林試劑磚紅色沉淀試劑現(xiàn)用現(xiàn)配、沸水浴加熱脂肪蘇丹Ⅲ、ⅣⅢ橘黃色、Ⅳ紅色必須用顯微

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