循環(huán)免疫復(fù)合物測定

循環(huán)免疫復(fù)合物測定第一頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二目的1.掌握循環(huán)免疫復(fù)合物測定原理2.熟悉循環(huán)免疫復(fù)合物檢測的臨床意義第二頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二免疫復(fù)合物(immunecomplex，IC)抗原抗體復(fù)合物，在正常情況下，機(jī)體防御系統(tǒng)作為清除異物抗原的一種方式，清除體內(nèi)免疫復(fù)合物對機(jī)體有利。原理第三頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二在某些情況下，體內(nèi)形成的免疫復(fù)合物不能被及時清除，沉積在機(jī)體某一部位稱為局部免疫復(fù)合物，游離于體液中稱為可溶性免疫復(fù)合物，隨血液循環(huán)的免疫復(fù)合物稱循環(huán)免疫復(fù)合物(circulatingimmunecomplex，CIC)。免疫復(fù)合物沉積可引起多種疾病。第四頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二原理

聚乙二醇比濁法聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)是非離子型親水劑，為乙二醇的聚合物。分子式HO(CH2CHO)nH，有較強(qiáng)脫水作用，破壞蛋白質(zhì)表面的水化層和電子云，用于沉淀蛋白質(zhì)，沉淀具有選擇性。第五頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二在pH、離子強(qiáng)度等條件固定時，蛋白質(zhì)分子量越大，用以沉淀的PEG濃度越小。血清中加入終濃度為3％～5％的聚乙二醇，能相對選擇性地沉淀免疫復(fù)合物。PEG還可抑制CIC解離，促進(jìn)CIC進(jìn)一步聚合成更大的凝聚物，使溶液濁度增加。用分光光度計測定濁度，可反映CIC含量。不能進(jìn)行抗原特異性免疫復(fù)合物的測定，故僅適用于免疫復(fù)合物的粗篩第六頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二材料硼酸緩沖液4.1％聚乙二醇(PEG)溶液微量加樣器、試管等分光光度計、普通冰箱待檢血清不同CIC含量血清可由臨床篩選獲得，不宜凍融第七頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二操作步驟樣品稀釋（0.2ml血清+0.4ml硼酸緩沖液）測A495nm值,硼酸緩沖液調(diào)零表1PEG比濁法測CIC方法測定管對照管稀釋血清（ml）0.40.44.1%PEG（ml）4.0－pH8.4硼酸緩沖液（ml）－4.0按表1加樣混勻4℃冰箱lh室溫10～15min第八頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二結(jié)果判斷待測血清濁度值=（測定管吸光度-對照管吸光度）×100以大于正常人濁度值的均值加2個標(biāo)準(zhǔn)差為CIC陽性大于或等于8.3為CIC陽性第九頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二注意事項低密度脂蛋白可引起濁度增加，應(yīng)空腹采血，高γ球蛋白血癥和標(biāo)本反復(fù)凍融也可引起濁度增加。2％PEG只能沉淀較大分子，4％PEG能沉淀較小分子的循環(huán)免疫復(fù)合物，大于5％PEG，選擇性沉淀循環(huán)免疫復(fù)合物特性消失；當(dāng)溫度4℃時，循環(huán)免疫復(fù)合物沉淀最佳，室溫每升高1℃，A值就下降0.02第十頁，共十二頁，編輯于2023年，星期二臨床意義不是疾病診斷的主要指標(biāo)，但在發(fā)病機(jī)制研究，了解病情進(jìn)展，判斷治療效果方面能提供有意義的幫助對有蛋白尿、關(guān)節(jié)痛、血管炎、漿膜炎、紫癜癥狀且診斷不明確的病人，可考慮檢測循環(huán)免疫復(fù)合物第十一頁，共十二頁，編輯于202