試驗(yàn)八巴氏小體課件

課程目錄實(shí)驗(yàn)一植物種子萌發(fā)和根尖取材固定實(shí)驗(yàn)二植物染色體制片及有絲分裂的觀察實(shí)驗(yàn)三減數(shù)分裂制片技術(shù)及蝗蟲精巢細(xì)胞顯微觀察實(shí)驗(yàn)四果蠅培養(yǎng)、麻醉及雌雄鑒別實(shí)驗(yàn)五果蠅唾腺染色體制備實(shí)驗(yàn)六果蠅單因子雜交/伴性遺傳實(shí)驗(yàn)七染色體組型分析實(shí)驗(yàn)八果蠅基因組DNA提取實(shí)驗(yàn)九人類巴氏小體的觀察實(shí)驗(yàn)十果蠅單因子雜交/伴性遺傳數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)十一Hardy-Weinberg遺傳平衡定律的檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十二人類性狀特征的遺傳分析

實(shí)驗(yàn)九人類巴氏小體的觀察

什么是巴氏小體？巴氏小體，又叫巴爾體（Barrbody），指雌性哺乳動物體細(xì)胞間期，一塊染色很深的染色質(zhì)。巴氏小體實(shí)際上是濃縮了的X染色體，其上的基因基本不轉(zhuǎn)錄。巴氏小體位于細(xì)胞中的什么位置？在細(xì)胞內(nèi)的位置：核膜邊緣或靠近內(nèi)側(cè)形狀：半圓形、三角形、卵形、短棒形及雙球形大?。褐睆郊s為1微米巴氏小體的研究歷史1949年加拿大學(xué)者Barr在雌貓神經(jīng)原細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)。1955年Barr在女性口腔細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)Barrbody。1959年人們把性染色體異常造成的畸形與巴氏小體的研究聯(lián)系起來。1971年Barrbody被命名為x染色質(zhì)。食管癌病人巴氏小體出現(xiàn)率低于10％；正常人細(xì)胞出現(xiàn)率為20－45％。最新研究進(jìn)展主要內(nèi)容一實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理（掌握）三實(shí)驗(yàn)材料四實(shí)驗(yàn)儀器及用具五藥品和試劑六實(shí)驗(yàn)步驟（理解）七作業(yè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1通過實(shí)驗(yàn)學(xué)會巴氏小體檢查方法，掌握觀察與鑒別X染色質(zhì)的簡易方法；

2了解人類男女性別性染色體的功能差異；并為了解人體染色體的畸變與疾病提供參考條件.

性別分化胚胎發(fā)育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮質(zhì)內(nèi)部髓質(zhì)發(fā)育為雄性生殖腺（睪丸）XY染色體發(fā)育為雌性生殖腺（卵巢）XX染色體XXY型染色體，皮質(zhì)、髓質(zhì)同時(shí)發(fā)育。二、實(shí)驗(yàn)原理哺乳動物的雌性細(xì)胞有兩條X染色體，其中一條來自母方，另一條來自父方，在胚胎發(fā)育的早期（16天），這兩條X染色體中的一條隨機(jī)濃縮形成巴氏小體，（袋鼠例外：總是來自父方的x染色體失活）。雌性哺乳動物的體細(xì)胞雄性哺乳動物的體細(xì)胞一個(gè)巴氏小體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的Y染色體雌性體細(xì)胞中1條X染色體為何失活而凝縮成巴氏小體？從X、Y染色體自身的特點(diǎn)來考慮……基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)【重點(diǎn)】

雌性xx兩條染色體上基因劑量有2份，失活1份，使x連鎖性狀的表現(xiàn)在雌雄個(gè)體間無差異。在失活的x染色體上x染色質(zhì)并不缺失，其上的某些基因如xg血型基因、類固醇硫酸酯基因并不失活。理論解釋Lyon假說【重點(diǎn)】

雌性動物體細(xì)胞X染色體只有一條是有活性個(gè)的，那么雌雄個(gè)體X染色體上的基因效果相當(dāng)X染色體的失活是隨機(jī)的，即雌性動物的染色體角度看是嵌合體失活發(fā)生在胚胎發(fā)育的早期，已失活細(xì)胞分裂產(chǎn)生的細(xì)胞群遺傳結(jié)構(gòu)相同。雌性動物伴性基因的作用產(chǎn)生嵌合體性染色體模式【了解】體細(xì)胞間期Barr是小體的檢查臨床意義在于：

1胎兒性別鑒定：從胎兒羊水中取得脫落的細(xì)胞檢查，如有巴氏小體，胎兒為女性，如果細(xì)胞中無巴氏小體，胎兒為男性。

2成人性別鑒定：變性男運(yùn)動員參加女子項(xiàng)目，可通過檢查其白細(xì)胞中有無巴氏小體而確定其性別。

3性別畸形的判斷：是否缺失或者多出巴氏小體。

巴氏小體的臨床意義有哪些？三、實(shí)驗(yàn)材料

男、女性口腔頰部粘膜細(xì)胞。四、實(shí)驗(yàn)儀器及用具顯微鏡、載玻片、蓋玻片、牙簽，離心管五、藥品和試劑

Giemsa染液，固定液，5mol/LHCl，低滲液（一）直接涂片法：（每組2-3張女生口腔細(xì)胞涂片,1張男生口腔細(xì)胞涂片。）1涂片：受檢者用自來水漱口，用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞（腮幫子處），將刮取物均勻涂布于載玻片上，晾干。2固定：將涂片放入95％的乙醇中固定30min，取出晾干。3水解：將涂片放入5molHCl中室溫下水解10min，自來水緩緩沖洗。4染色：用Gimsa染液染色8-10分鐘，勿干燥，用水沖洗后晾干鏡檢。5鏡檢：從低倍鏡到高倍鏡依次觀察。

六、實(shí)驗(yàn)步驟

紅色字體為注意事項(xiàng)！??！紅色字體為注意事項(xiàng)！??！漱口刮取涂布固定晾干取樣步驟（二）滴片法：1取材：受檢者用自來水漱口，用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞，將刮取物涮于裝有1ml生理鹽水的離心管中。2離心：離心10分鐘（5000轉(zhuǎn)/分），棄上清液。3低滲：加1ml低滲液混勻，37度低滲6分鐘，離心10分鐘，棄上清液。4固定：加固定液95％的乙醇1ml，室溫固定10分鐘，離心，棄上清。5滴片：加200ul固定液與沉淀物混成細(xì)胞懸液，用滴管吸取細(xì)胞懸液，滴于潔凈載玻片上，晾干。6水解：5molHCl水解10分鐘。自來水沖洗。7染色：Giemsa染色8分鐘，沖去染液，干后鏡檢。直接涂片法操作簡單，但口腔上皮細(xì)胞不易分散，細(xì)胞常重疊，而且標(biāo)本上涂大量細(xì)胞才能滿足計(jì)數(shù)的需要。滴片法稍繁瑣，離心收集細(xì)胞較難，但細(xì)胞分散均勻，細(xì)胞經(jīng)低滲后核膜膨脹，巴氏小體增大，利于辨認(rèn)。兩種方法的比較細(xì)胞的理想狀態(tài)：⑴核質(zhì)是網(wǎng)狀或細(xì)顆粒狀分布。⑵核膜清晰，核無缺損。⑶染色適度。⑷周圍無雜菌。巴氏小體的辨認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)：

選定的細(xì)胞，在高倍鏡或油鏡下進(jìn)一步觀察。巴氏小體的形態(tài)表現(xiàn)為一結(jié)構(gòu)致密濃染小體，輪廓清楚，常附著于核膜邊緣或靠近內(nèi)側(cè)。七、作業(yè)：1.