新鮮蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留快速檢測(cè)技術(shù)詳解演示文稿

新鮮蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留快速檢測(cè)技術(shù)詳解演示文稿當(dāng)前第1頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（優(yōu)選）新鮮蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留快速檢測(cè)技術(shù)當(dāng)前第2頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)一農(nóng)藥殘留（pesticideresidue）農(nóng)藥使用后殘存在生物體、農(nóng)副產(chǎn)品和環(huán)境中的微量農(nóng)藥母體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。以mg/kg,ug/kg,ng/kg表示。中國(guó)一般只檢測(cè)農(nóng)藥母體。發(fā)達(dá)國(guó)家檢測(cè)母體、代謝物、環(huán)境降解產(chǎn)物、工業(yè)品雜質(zhì)。當(dāng)前第3頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)二農(nóng)藥殘留分析（pesticideresidueanalysis）

對(duì)待測(cè)樣品中微量農(nóng)藥殘留進(jìn)行定性、定量分析。目的:為新農(nóng)藥提供其在農(nóng)作物上的殘留動(dòng)態(tài)和最終殘留量。制定農(nóng)藥最大殘留限量和合理使用準(zhǔn)則。評(píng)價(jià)農(nóng)藥殘留對(duì)農(nóng)畜產(chǎn)品和環(huán)境的危險(xiǎn)性。為制定防治農(nóng)藥污染措施提供依據(jù)。當(dāng)前第4頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)二農(nóng)藥殘留分析（pesticideresidueanalysis）特點(diǎn):分析目的物含量低，在樣品中僅以u(píng)g,ng甚至pg、fg量存在目的物種類多，化學(xué)結(jié)構(gòu)差異大。樣品種類多，干擾物成分各異。方法要求快速、簡(jiǎn)便、成本低、靈敏、準(zhǔn)確、安全（QuEChERS)。對(duì)樣品的前處理和儀器測(cè)試要求越來(lái)越高。當(dāng)前第5頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)二農(nóng)藥殘留分析（pesticideresidueanalysis）分類:1單殘留分析（singalresidueanalysis)對(duì)待測(cè)樣品中某類某一種農(nóng)殘定性定量（已知、未知）農(nóng)藥注冊(cè)（中國(guó)、外國(guó)）中國(guó)國(guó)標(biāo)方法2多殘留分析（multiresidueanalysis）對(duì)待測(cè)樣品中多類多種農(nóng)藥殘留同時(shí)定性和定量（已知、未知）單種類農(nóng)藥多殘留分析（有機(jī)磷、有機(jī)氯等）中國(guó)國(guó)標(biāo)方法多種類農(nóng)藥多殘留分析未知多類多種殘留分析（快速掃描-MRSM）（CDFA、FDA、Canada）當(dāng)前第6頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)三農(nóng)殘分析基本概念1添加回收率（fortifiedrecovery）空白樣品中加入一定濃度某一種或幾種農(nóng)藥（C1）后，其樣品中此農(nóng)藥濃度測(cè)定值（C2）對(duì)加入值的百分率（F）。F=C2/C1*100%添加回收率旨在衡量測(cè)定值與真值之間的誤差，是制定農(nóng)殘分析方法準(zhǔn)確度和可行性的指標(biāo)。一般以MRL值水平高一個(gè)數(shù)量級(jí)、低一個(gè)數(shù)量級(jí)和同一個(gè)數(shù)量級(jí)三個(gè)濃度水平進(jìn)行添加，或者在1、5和10LOQ水平添加，測(cè)定添加回收率；可以單個(gè)農(nóng)藥添加測(cè)定單殘留添加回收率，也可多種農(nóng)藥同時(shí)添加，測(cè)定多殘留添加回收率。至少重復(fù)三次。測(cè)試樣品具代表性（3-4種）。測(cè)試農(nóng)藥具代表性（4類-5類）。單殘留回收率：80—100%，多殘留回收率：70—120%。當(dāng)前第7頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)三農(nóng)殘分析基本概念

2變異系數(shù)（Coefficientofvariation,CV）衡量回收率偏異程度，判定農(nóng)殘分析方法的精確度（重現(xiàn)性）指標(biāo)。

CV=標(biāo)準(zhǔn)偏差/平均回收率*100%一般≤20%當(dāng)前第8頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)三農(nóng)殘分析基本概念3檢出限，定量限（1）檢出限（limitofdetection）衡量?jī)x器或方法靈敏度（檢出目的物）的指標(biāo)。要求低于測(cè)定目的物的MRL值（最好低一個(gè)數(shù)量級(jí)）。在色譜圖上可清楚確認(rèn)的分析目的物色譜峰的下限。通常為噪音3倍（S/N=3）。分為儀器檢出限和方法檢出限儀器檢出限無(wú)樣品基質(zhì)存在，在與樣品測(cè)定完全相同的條件下，某種分析儀器能夠檢出分析目的物的最小量或最低濃度。方法檢出限有樣品基質(zhì)存在，在與樣品測(cè)定完全相同的條件下，某種方法能夠檢出分析目的物的最小量或最低濃度。當(dāng)前第9頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)三農(nóng)殘分析基本概念3檢出限，定量限（2)定量限（limitofquantitation）衡量?jī)x器或方法靈敏度（定量目的物）的指標(biāo)。在色譜圖上可準(zhǔn)確定量分析目的物色譜峰值的下限。通常為噪音10倍（S/N=10）。分為儀器定量限和方法定量限儀器定量限無(wú)樣品基質(zhì)存在，在與樣品測(cè)定完全相同的條件下，某種分析儀器能夠準(zhǔn)確定量分析目的物的最小量或最低濃度。方法定量限有樣品基質(zhì)存在，在與樣品測(cè)定完全相同的條件下，某種方法能夠準(zhǔn)確定量分析目的物的最小量或最低濃度。當(dāng)前第10頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)三農(nóng)殘分析基本概念3檢出限，定量限（3）測(cè)定方法儀器檢出限或定量限,用某分析目的物的最低濃度標(biāo)樣測(cè)定。Agilent儀器化學(xué)工作站可以直接測(cè)定S/N。如:α-BHC標(biāo)樣濃度為0.01ppm，S/N=30，則儀器LOD=0.001ppm,儀器LOQ=0.003ppm方法檢出限或定量限,用添加某分析目的物最低濃度水平或預(yù)測(cè)水平的樣品，經(jīng)過(guò)該方法的全部操作程序測(cè)定。重復(fù)實(shí)驗(yàn)兩次。如:α-BHC添加在韭菜中，CDFA方法添加水平為0.01ppm，樣品最終濃度為0.01ppm，S/N=12，方法LOD=0.0025ppm，方法LOQ=0.008ppm。當(dāng)前第11頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)三農(nóng)殘分析基本概念4農(nóng)殘分析方法認(rèn)證指標(biāo)

準(zhǔn)確度（Accuracy）真值（truevalue）回收率精密度（Precision）重現(xiàn)性（reproducibility），變異系數(shù)靈敏度（sensitivity），檢出限，定量限儀器線性范圍（Linearity），標(biāo)準(zhǔn)曲線（standardcurves）（五個(gè)不同濃度，覆蓋三個(gè)數(shù)量級(jí)或1X,5X,10XLOQ水平）相關(guān)系數(shù)（R≥0.9900),測(cè)定天數(shù)（≥3days）當(dāng)前第12頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)三農(nóng)殘分析基本概念5農(nóng)殘分析質(zhì)量保證和質(zhì)量控制（QA/QC）試劑空白實(shí)驗(yàn)（reagentblank）（每日）基質(zhì)空白實(shí)驗(yàn)（matrixblank）（每日）農(nóng)藥標(biāo)樣（基質(zhì)中添加農(nóng)藥混合標(biāo)樣；至少兩種基質(zhì)；2XLOQ水平）（每日）添加回收率（添加混標(biāo)，輪換添加）（每日）LOD、LOQ、儀器、方法（儀器、方法條件改變時(shí)）儀器線性關(guān)系、標(biāo)準(zhǔn)曲線、相關(guān)系數(shù)（至少三天）當(dāng)前第13頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三農(nóng)殘分析基本概念6最大殘留限量（MaximumResidueLimit，MRLs）在農(nóng)畜產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的法定最高允許濃度，又稱最高殘留限量，以每千克農(nóng)畜產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的毫克數(shù)（毫克/千克）表示。制訂目的：控制食品中過(guò)量農(nóng)藥殘留以保障食用者安全，對(duì)超標(biāo)的產(chǎn)品采取措施，即禁止食用。推行和指導(dǎo)合理用藥，農(nóng)產(chǎn)品監(jiān)測(cè)超標(biāo)時(shí)，表明未按規(guī)定用藥。減少國(guó)際貿(mào)易糾紛，各國(guó)均制訂本國(guó)的MRLs，國(guó)際組織FAO/WHO也制定其相應(yīng)的MRLs標(biāo)準(zhǔn)。制訂方法：按照農(nóng)藥標(biāo)簽上規(guī)定的施藥劑量和方法使用農(nóng)藥后，在農(nóng)產(chǎn)品中的最大殘留濃度，其數(shù)值必須是毒理學(xué)上可以接受的，由各國(guó)政府部門按法規(guī)公布。在農(nóng)殘檢測(cè)中，以MRL值判斷是否超標(biāo)。（一）專業(yè)術(shù)語(yǔ)當(dāng)前第14頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)食品中農(nóng)藥的最大允許殘留限量（mg/kg）（強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)）谷類稻谷蔬菜水果食用油茶葉辛硫磷敵百蟲(chóng)亞胺硫磷甲胺磷乙酰甲胺磷二嗪磷殺螟硫磷甲拌磷倍硫磷敵敵畏呋喃丹久效磷甲基對(duì)硫磷毒死蜱樂(lè)果馬拉硫磷對(duì)硫磷0.050.10.50.20.15.00.020.050.10.1（成品糧）0.053（成品糧),80.10.10.50.020.10.050.10.50.20.50.5不得檢出0.050.2

1（葉菜）1不得檢出不得檢出0.05（全果）0.10.50.50.50.5不得檢出0.050.21（梨果）0.3（柑桔）1不得檢出不得檢出不得檢出不得檢出0.01不得檢出0.05（棉籽油）0.1（棉籽油）0.05（棉籽油）不得檢出不得檢出0.5摘自“農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)匯編”農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所2001.9當(dāng)前第15頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）基本程序前處理儀器分析預(yù)處理農(nóng)殘分析提取凈化濃縮ECD、ELCDFPD、NPDAED、XSDGCHPLCGC/MSLC/MSEI、CI其它UV、FLD、DAD樣品采集貯藏ESI、APCITLC、CEELISA當(dāng)前第16頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)

（三）農(nóng)殘分析結(jié)果計(jì)算與表述

（外標(biāo)法，單點(diǎn)定量）當(dāng)前第17頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)第二部分農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)綜述當(dāng)前第18頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介一樣品予處理取樣：均勻、代表性處理：水樣，過(guò)濾；土樣，陰干、研細(xì)、過(guò)篩（40目）；動(dòng)植物樣：高水分（水果、蔬菜），切塊、食品加工器中加工低水分（糧食）磨碎，過(guò)篩高脂肪（畜產(chǎn)品），切塊，攪肉機(jī)中加工。當(dāng)前第19頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介二提取用溶劑把分析目的物從樣品中溶解抽提出來(lái)。溶劑的選擇：目的物溶解度大，基質(zhì)干擾物溶解度小，純度高（農(nóng)殘級(jí)、HPLC級(jí)、分析純重蒸，濃縮200X，儀器檢測(cè)）當(dāng)前第20頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介二提取按溶劑類型分類乙腈法—CDFA（US）Dr.Mill乙酸乙酯法—?dú)W盟法(Sweden)丙酮法—FDA（US）Dr.Luke混合溶劑法（乙腈-丙酮-甲醇）—FDA（US）（測(cè)定牛奶中有機(jī)磷、有機(jī)氯）當(dāng)前第21頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介二提取按樣品類型分類浸泡、振蕩、索氏提取-土壤（非結(jié)合殘留）勻漿外攪拌器：水果、蔬菜、茶葉、糧食，（脂肪<2%）。內(nèi)攪拌器：畜產(chǎn)品，（脂肪>2%）其它—SFE，超聲波提取當(dāng)前第22頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介三凈化1液液萃取法（LLE）分析目的物在兩種不相溶的溶劑中進(jìn)行分配。利用目的物與干擾物在兩種不相溶的溶劑中溶解度差異而達(dá)到分離目的。根據(jù)目的物與干擾物性質(zhì)，選擇溶劑對(duì)。傳統(tǒng)方法多采用（如國(guó)標(biāo)法）。逐漸被取代（費(fèi)時(shí)、費(fèi)試劑、回收率易偏低）。當(dāng)前第23頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)乙酸乙酯高丙酮乙腈農(nóng)藥回收率高較好高除脂肪

一般好好好

較好一般好一般

低低除蛋白較好好好除糖份較好除水分一般一般較好GC兼容性較好SPE兼容性一般一般好GPC兼容性一般揮發(fā)性一般一般成本較高毒性低低較低較低有機(jī)溶劑提取效果比較當(dāng)前第24頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介三凈化

2固相萃取法SPE固相微萃取法SPME分析目的物在鍵合硅吸附劑與溶劑中進(jìn)行分配，而與干擾物分離。原理：如圖1，圖2適用范圍廣，各種不同結(jié)構(gòu)類型的SPE商品柱適用于各種結(jié)構(gòu)類型的農(nóng)藥分析。如表1優(yōu)點(diǎn)：如表2已成為農(nóng)殘分析主要前處理手段，代替LLE。發(fā)達(dá)國(guó)家廣泛應(yīng)用，我國(guó)正在推廣。Next當(dāng)前第25頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介圖1當(dāng)前第26頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介圖2Back當(dāng)前第27頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介鍵合官能團(tuán)分析官能團(tuán)基質(zhì)典型洗脫溶液應(yīng)用范圍非極性萃取C18-OcatadecylC8-OctylC2-EthylCH-CyclohexylPH-PhenylCN-End-cappedCyanopropyl疏水基：芳香環(huán)烷基鏈水基質(zhì)：水緩沖溶液生物流體甲醇乙腈乙酸乙酯氯仿酸化甲醇己烷濫用藥物肽農(nóng)藥治療類藥物的監(jiān)測(cè)極性萃取CN-Cyanopropyl2OH-DiolSl-SilicaNH2-Aminopropyl親水基團(tuán)：羥基胺基雜原子（S.O.N)非極性基質(zhì)：己烷油類氯仿脂肪類甲醇異丙醇丙酮維生素D代謝物脂肪分離油類添加劑碳水化合物酚類陽(yáng)離子交換萃取SCX-BenzenesulfonicAcid(Strong)PRS-PropylsulfonicAcid(Strong)CBA-CarboxylicAcid(weak)陽(yáng)離子：胺類嘧啶類水基質(zhì)：水酸性緩沖溶液生物流體堿性緩沖溶液高離子強(qiáng)度緩沖溶液兒茶酚胺類除草劑藥物陰離子交換萃取SAX-QuaternaryAmine(Strong)PSA-Primary/SecondaryAmineNH2-Aminopropyl(Weak）DEA-Diethyl-aminopropyl(Weak)陰離子：羧酸磺酸磷酸鹽（或酯）水基質(zhì)：水堿性緩沖溶液生物流體酸性緩沖溶液高離子強(qiáng)度緩沖溶液有機(jī)酸維生素脂肪酸磷酸鹽（或酯）表1當(dāng)前第28頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介鍵合官能團(tuán)分析官能團(tuán)基質(zhì)典型洗脫溶液應(yīng)用范圍共價(jià)萃取PBA-Phenyl-boronicAcid連位二醇水基質(zhì)：堿性緩沖溶液生物流體酸性緩沖溶液酸化甲醇核苷酸類核苷類碳水化合物兒茶酚胺類特殊相BondElutCertify陽(yáng)離子型濫用藥物藥物水基質(zhì)：水酸性緩沖溶液生物流體強(qiáng)酸強(qiáng)堿酸/堿性有機(jī)混合物堿性藥物中性藥物BondElutCertifyII陰離子型濫用藥物藥物羧酸磺酸水基質(zhì)：水堿性緩沖溶液生物流體強(qiáng)酸強(qiáng)堿酸/堿性有機(jī)混合物酸性藥物EnvirElut疏水基：芳香環(huán)烷基鏈水基質(zhì)：水流體己烷二氯甲烷油、油脂、脂肪農(nóng)藥酚類多環(huán)芳烴續(xù)表1當(dāng)前第29頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介鍵合官能團(tuán)分析官能團(tuán)基質(zhì)典型洗脫溶液應(yīng)用范圍特殊相AccuCAT陰，陽(yáng)離子水基質(zhì)：水生物流體緩沖溶液酸性/堿性緩沖溶液高離子強(qiáng)度緩沖溶液有機(jī)酸兒茶酚胺類堿性藥物TCA疏水基：芳香環(huán)烷基鏈水基質(zhì)：生物流體甲醇?jí)A性甲醇TricyclicsBenzodiazepinesLMS疏水基：芳香環(huán)烷基鏈水基質(zhì)：水流體乙腈藥物ENV疏水基：芳香環(huán)烷基鏈水基質(zhì)：水流體乙腈甲醇乙酸乙酯爆炸物農(nóng)藥PPL疏水基：芳香環(huán)烷基鏈水基質(zhì)：水流體甲醇乙酸乙酯酚類續(xù)表1Back當(dāng)前第30頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介

項(xiàng)目方法液-液萃取法（LLE)固相萃取法(SPE)取樣量1000ml×42-200ml×4包裝運(yùn)輸貯藏大量水樣少量柱或溶劑（田間過(guò)柱、洗脫或?qū)嶒?yàn)室洗脫）萃取有機(jī)溶劑用量操作時(shí)間100ml/樣0.5小時(shí)/樣（萃?。?，4—8小時(shí)（脫水）/樣8ml/樣5—10分鐘（過(guò)柱，100ml)6分鐘/樣（轉(zhuǎn)移、定容）濃縮100ml

1ml(100倍）20分鐘不需濃縮過(guò)鍵柱時(shí)100ml1ml(100x)凈化過(guò)凈化柱不需凈化總耗時(shí)間6—10小時(shí)/樣10—20分鐘/樣優(yōu)缺點(diǎn)費(fèi)時(shí)、費(fèi)溶劑、設(shè)備復(fù)雜結(jié)果準(zhǔn)確度、精密度較低省時(shí)，省溶劑、操作簡(jiǎn)單、易實(shí)現(xiàn)半自動(dòng)化、自動(dòng)化，結(jié)果準(zhǔn)確度、精密度較高表2固相萃取法與液-液萃取法操作比較Back當(dāng)前第31頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介三凈化3凝膠滲透法（GPC）.原理：基于物質(zhì)分子大小和形狀不同來(lái)實(shí)現(xiàn)分離的。主要依據(jù)相對(duì)分子量的差別，通過(guò)GPC將農(nóng)藥與農(nóng)藥、農(nóng)藥與共提取物分開(kāi)。從而使之得到分離和凈化。（大多數(shù)農(nóng)藥分子量小于500）如圖3優(yōu)點(diǎn)：凈化容量大，適用于有機(jī)磷、有機(jī)氯農(nóng)藥的提取，去除脂肪和色素。大多數(shù)農(nóng)藥回收率較高。容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。缺點(diǎn)：凝膠柱成本較高，溶劑用量大。歐洲應(yīng)用的較多。當(dāng)前第32頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介圖3當(dāng)前第33頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介三凈化4超臨界萃取法（SFE）

用超臨界流體為萃取劑，從復(fù)雜組分中把目的物組分提取出來(lái)。原理：依據(jù)超臨界流體中不同物質(zhì)的溶解度不同達(dá)到分離的目的。優(yōu)點(diǎn)：①快速方便、選擇性強(qiáng)；②流體密度、溶解度、粘度都能通過(guò)壓力控制；③超臨界流體常溫下可自然揮發(fā)，省去了濃縮步驟；④可與GC、LC及超臨界色譜聯(lián)機(jī)；⑤樣品用量少、回收率高等。缺點(diǎn)：①設(shè)備投資大、技術(shù)要求高；②分析物質(zhì)濃度過(guò)高干擾檢測(cè)；③基質(zhì)對(duì)萃取過(guò)程影響較大；④適用的農(nóng)藥和樣品范圍較窄SFE是農(nóng)藥多殘留分析中具有發(fā)展前景的技術(shù)。當(dāng)前第34頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介三凈化5其它：磺化法、冷凍法、凝結(jié)沉淀法?；腔ǎ豪弥竞拖炠|(zhì)能與濃硫酸進(jìn)行磺化反應(yīng)的原理，有效去除基質(zhì)中的脂肪和蠟質(zhì)（前提是測(cè)定的農(nóng)藥不與硫酸反應(yīng)，常用于有機(jī)氯農(nóng)藥檢測(cè)）。冷凍法：低溫下有機(jī)溶液里，動(dòng)植物中脂肪、蠟質(zhì)沉淀析出，而農(nóng)藥留在溶液中，達(dá)到分離目的。凝結(jié)沉淀法：用凝結(jié)劑將脂肪和色素等雜質(zhì)沉淀的凈化方法，適用于極性較強(qiáng)，在水中有一定溶解度的農(nóng)藥。當(dāng)前第35頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)簡(jiǎn)介四濃縮真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法：處理溶劑量大、速度快、損失率高。KD濃縮器：處理量大、農(nóng)藥提取較充分、損失率較真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器低、耗時(shí)較長(zhǎng)。氮吹儀：濃縮效率高，農(nóng)藥損失率低，溶劑處理量小，與SPE凈化方法結(jié)合是理想的濃縮裝置。自然揮發(fā)法：濃縮慢，適于體積小，易揮發(fā)的溶劑。當(dāng)前第36頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）國(guó)外農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)一趨勢(shì):對(duì)農(nóng)產(chǎn)品,食品安全高度重視,表現(xiàn)在:-體系完備；法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)健全；機(jī)構(gòu)、人員、設(shè)備完善-監(jiān)控、檢測(cè)及時(shí)有力；確保消費(fèi)者身體健康和商品在國(guó)際市場(chǎng)上的競(jìng)爭(zhēng)力

為達(dá)到ISO9000和各國(guó)政府法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)（如GLP），要求檢測(cè)技術(shù)：-檢測(cè)能力大-方法指標(biāo)嚴(yán)-樣品處理量小-分析目的物種類,數(shù)量多-準(zhǔn)確度精確度靈敏度要求高-數(shù)據(jù)文件處理量大當(dāng)前第37頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）國(guó)外農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)二概況:GC-揮發(fā)性農(nóng)藥快速篩選HPLC-半揮發(fā),不揮發(fā),極性,熱不穩(wěn)定性農(nóng)藥確證(結(jié)構(gòu)鑒定)-GC/MS,LC/MS分析目的物-母體,農(nóng)藥代謝物,降解產(chǎn)物,結(jié)合殘留當(dāng)前第38頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）國(guó)外農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)

1前處理技術(shù)(1)傳統(tǒng)技術(shù)如液-液萃取(LLE);索式提取(SoxhletExtraction);振蕩-過(guò)濾(Shake-Filter);勻漿(blending)等仍在使用(參考文獻(xiàn)1)。(2)最大進(jìn)展是固取萃取(SPE)廣泛用于農(nóng)殘分析,集萃取、凈化、濃縮于一步,具有縮短分析時(shí)間,降低成本,節(jié)省有機(jī)溶劑,可實(shí)現(xiàn)半自動(dòng)化,全自動(dòng)化操作等優(yōu)點(diǎn)(參考文獻(xiàn)2,3)。(3)用活性碳柱和SPE柱凈化,GC/MS和HPLC-FLD，檢測(cè)水果,蔬菜中200多種有機(jī)氯、有機(jī)磷、含氮和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留方法已發(fā)表(參考文獻(xiàn)7)。二概況:當(dāng)前第39頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）國(guó)外農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)二概況:1前處理技術(shù)(4)非極限萃取(nonexhaustiveextraction)、用SPE拄(Cartridges)和膜(disks)結(jié)合GC和GC/MS方法，在線和非在線液體提??；固相微萃取(SPME)；超臨界萃取(SFE)；基質(zhì)固相分散萃取(Matrixsolid-phasedispersionextraction)；苯乙烯-二乙烯基苯共聚物萃??；多孔碳柱和SPE拄或膜(特別是C8,C18)結(jié)合使用；加速溶劑萃取(acceleratedsolvantextraction)；微波萃??；鈍化擴(kuò)散聚合物膜(passivediffusionthroughpolymericmembranes)；離心分離層析；自動(dòng)液-液、索氏和SPE萃??；自動(dòng)化凝膠滲透層析；液體樣品經(jīng)固相沉淀后，SFE萃取水中揮發(fā)和半揮發(fā)農(nóng)藥；頂空SPME等前處理技術(shù)，在制備液體和固體樣品時(shí)如何應(yīng)用均有報(bào)導(dǎo)(參考文獻(xiàn)4,5,6)。當(dāng)前第40頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）國(guó)外農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)

二概況:2GC,GC/MS(1)高效毛細(xì)管柱(非極性和中等極性固定相）,雙柱定性定量代替?zhèn)鹘y(tǒng)填充柱。(2)廣泛使用元素選擇撿定器(ECD,FPD,NPD等)。(3)GC/MS和GC/MS-MS作確證和結(jié)構(gòu)鑒定。(4)SPE結(jié)合GC/MS，提供了有效和強(qiáng)有力的分析系統(tǒng)。(5)用原子發(fā)射撿定器(AED)可以篩選400多種農(nóng)藥殘留。(6)手性高分辨率GC/MS用于選擇性檢測(cè)農(nóng)藥異構(gòu)體和對(duì)映異構(gòu)體。當(dāng)前第41頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）國(guó)外農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)二概況:3HPLC，LC/MS(1)C8、C18反相柱最常用于HPLC農(nóng)殘檢測(cè)。(2)吸附柱(silica,gel)；極性鍵合柱(cyano,amino)；離子交換；離子色譜(IC)；離子對(duì)；混合官能度柱(multimodal)也用于特殊分析。(3)HPLC-SFC/MS改善選擇性,達(dá)到凈化測(cè)定一體化(4)固定和可調(diào)波長(zhǎng)UV-VIS檢定器常用于HPLC農(nóng)殘分析，二極管陳列UV-VIS檢定器和MS，提供農(nóng)藥結(jié)構(gòu)鑒定,其他如FLD和電化學(xué)檢定器用于單個(gè)或多個(gè)檢定器系統(tǒng)。(5)LC/MS和LC/MS-MS(ES)用于農(nóng)藥多殘留分析已有報(bào)導(dǎo)。當(dāng)前第42頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）國(guó)外農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)二概況:4CE(capillaryelectrophoresis),IC(ionchroniatography)和其他色譜(1)SFC(超臨界色譜)結(jié)合SFE用于土壤中農(nóng)藥分析。(2)歐洲廣泛應(yīng)用高效自動(dòng)化薄層層析(TLC)定量檢測(cè)飲用水中污染物。(3)CE,CE/MS和IC分離,測(cè)定作物和其他基質(zhì)中農(nóng)藥、農(nóng)藥代謝物殘留和無(wú)機(jī)物殘留是很大進(jìn)展。用CE分析大豆中多種極性農(nóng)藥是一個(gè)典型例子。(4)CE,IC和AAS(原子吸收),ICP-AES,ICP-MS結(jié)合用于重金屬分析當(dāng)前第43頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）國(guó)外農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)二概況:5生物技術(shù)方法(1)特異性抗體的開(kāi)發(fā)，導(dǎo)致免疫分析方法(Immunoassay)用于實(shí)驗(yàn)室和田間農(nóng)殘分析。

(2)免疫分析商品化檢測(cè)試紙，在分析有機(jī)磷、氨基甲酸酯、硫代氨基甲酸酯、氯代苯氧羧酸、均三氮苯、苯胺、有機(jī)氯等農(nóng)藥殘留成為有價(jià)值的方法。(3)免疫分析用于大監(jiān)測(cè)項(xiàng)目、農(nóng)藥登記、代謝物研究、親合色譜(affinitychromatography)、食品調(diào)查、人類和環(huán)境對(duì)農(nóng)藥暴露研究等方面。

當(dāng)前第44頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（三）國(guó)內(nèi)農(nóng)殘檢測(cè)面臨任務(wù)形勢(shì):1.農(nóng)藥生產(chǎn)產(chǎn)量40萬(wàn)噸,居世界第二位(僅次于美國(guó))，其中殺蟲(chóng)劑占總量70%；有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑占?xì)⑾x(chóng)劑產(chǎn)量70%；甲胺磷,甲基對(duì)硫磷,對(duì)硫磷,氧樂(lè)果，久效磷又占有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑產(chǎn)量70%。

2.農(nóng)藥使用年使用量27萬(wàn)噸居世界前列；使用區(qū)域集中(江蘇,浙江,山東等)；施用作物-蔬菜,播種面積占農(nóng)作物10%,單位面積施藥量最大,年人均占有量最大(300公斤)當(dāng)前第45頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（三）國(guó)內(nèi)農(nóng)殘檢測(cè)面臨任務(wù)3.農(nóng)藥污染(蔬菜)1)2001年全國(guó)23個(gè)城市181種蔬菜檢測(cè),超標(biāo)率47.5%。2)某省五個(gè)菜市場(chǎng)抽檢48個(gè)菜樣,44個(gè)不合格,高毒農(nóng)藥檢出率達(dá)30%。3)北京部分市場(chǎng)檢測(cè)超標(biāo)率18%,自產(chǎn)有機(jī)磷超標(biāo)率17%,進(jìn)京菜農(nóng)藥超標(biāo)率69%。4)上海,廣西,天津相繼發(fā)生甲胺磷污染蔬菜造成急性中毒事件,中毒人數(shù)達(dá)數(shù)百人。5)調(diào)查結(jié)果表明，有機(jī)磷(甲胺磷,乙酰甲胺磷,氧樂(lè)果,敵敵畏等)和氨基甲酸酯(克百威)是造成蔬菜中農(nóng)殘超標(biāo),引發(fā)急性中毒的主要農(nóng)藥品種。當(dāng)前第46頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（三）國(guó)內(nèi)農(nóng)殘檢測(cè)面臨任務(wù)基于上述情況造成農(nóng)產(chǎn)品(蔬菜),污染嚴(yán)重國(guó)際市場(chǎng)-出口受阻(面臨法規(guī),標(biāo)準(zhǔn);檢測(cè)技術(shù),方法的嚴(yán)重挑戰(zhàn))。國(guó)內(nèi)市場(chǎng)-消費(fèi)者憂心重重(放心工程)。農(nóng)業(yè)部實(shí)施無(wú)公害食品行動(dòng)計(jì)劃，建立農(nóng)藥殘留檢測(cè)系統(tǒng)。急需建立與國(guó)際接軌的農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù),標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)和GLP實(shí)驗(yàn)室,取代我國(guó)現(xiàn)有檢測(cè)農(nóng)藥品種數(shù)量單一、前處理復(fù)雜、費(fèi)時(shí)、靈敏度，準(zhǔn)確度差的農(nóng)殘檢測(cè)方法，以出具科學(xué),公正,國(guó)際認(rèn)可的農(nóng)殘檢測(cè)數(shù)據(jù)。當(dāng)前第47頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（四）CDFA-MRSM特點(diǎn)一簡(jiǎn)介CDFA-MRSM是由CaliforniaDepartmentofFoodandAgriculture(CDFA)下屬CenterofAnalyticalChemistry(CAC)開(kāi)發(fā)的農(nóng)藥多殘留快速掃描技術(shù)(Multiresiduescreenmethod-MRSM)適用于新鮮蔬菜水果中四大類（有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯、氨基甲酸酯）200多種農(nóng)藥母體、代謝物、降解產(chǎn)物的檢測(cè)固相萃取代替液-液萃取,氮吹儀濃縮代替旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,雙毛細(xì)管柱、雙檢定器、GC、HPLC定性定量，GC/MS確證是美國(guó)農(nóng)業(yè)部(USDA)、FDA、EPA認(rèn)可的官方方法在加州CDFA、佛羅里達(dá)州FDOACS(FloridaDepartmentofAgricultureandConsumerServices)和WashingtonDepartmentofAgriculture等實(shí)驗(yàn)室使用，質(zhì)量保證和方法認(rèn)證程序，遵從美國(guó)農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥數(shù)據(jù)庫(kù)項(xiàng)目(USDA、PDP)和EPA、FDA的GLP規(guī)定97年引入中國(guó)，在農(nóng)業(yè)部環(huán)境監(jiān)測(cè)總站（天津），Agilent實(shí)驗(yàn)室，北京錦繡大地農(nóng)業(yè)股份有限公司檢測(cè)中心驗(yàn)證和應(yīng)用，即將批準(zhǔn)為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法。當(dāng)前第48頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)

二CDFA-MRSM在中國(guó)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證技術(shù)指標(biāo)表

項(xiàng)目

類別添加濃度范圍（ppm）平均回收率（%）變異系數(shù)MDL（ppm）Agilent實(shí)驗(yàn)室CH:0.01-1.00OP:0.05-3.00CARB:0.05-0.5070-120%<20%CH:0.0001-0.0480(μECD)OP:0.0250-0.6000(FPD)CARB:0.0010-0.0030(FLD)

農(nóng)業(yè)部環(huán)境監(jiān)測(cè)總站（天津）CH:0.01-4.25OP:0.05-2.00CARB:0.10-0.5570-120%<20%CH:0.0011-0.1154(ECD)OP:0.0065-0.1725(FPD)0.0104-0.8625(NPD)CARB:0.0051-0.0106(FLD)北京錦繡大地檢測(cè)中心CH:0.01-1.00OP:0.05-3.00CARB:0.05-0.5070-120%<20%CH:0.0001-0.0170(μECD)OP:0.0100-0.2000(FPD)CARB:0.0010-0.0020(FLD)CDFACH:0.2–1.6OP:0.25CARB:0.2570-120%<20%0.005-0.2當(dāng)前第49頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三方法評(píng)價(jià)

CDFA-MRSR與傳統(tǒng)方法比較MRSM（CDFA)傳統(tǒng)方法(國(guó)標(biāo)方法)萃

取方式固相萃取液-液萃取溶劑用量15ml士/樣100ml士/樣時(shí)間10-15分/樣（不需脫水）60-120分/樣（脫水）濃

縮儀器氮吹儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀或K-D濃縮器時(shí)間3-5分/樣15-20分/樣損失率<3%10-20%或<10%凈化時(shí)間不需凈化柱層析（有機(jī)氯），30-60分/樣溶劑用量0ml/樣50-100ml/樣前處理總消耗時(shí)間0.5-1小時(shí)/樣2-3小時(shí)/樣（有機(jī)磷）8-12小時(shí)/樣（有機(jī)氯）檢測(cè)農(nóng)藥類型一次處理可同時(shí)檢測(cè)有機(jī)磷、有機(jī)氯、菊酯、氨基甲酸酯類不同農(nóng)藥采用不同方法分別處理檢測(cè)農(nóng)藥數(shù)量200種（一次處理）其中：有機(jī)磷80種、有機(jī)氯、菊酯100種氨基甲酸酯20種34種（分類處理）其中：有機(jī)磷20種有機(jī)氯11種菊酯3種檢測(cè)準(zhǔn)確度、靈敏度步驟簡(jiǎn)單、損失小；毛細(xì)管柱，雙柱、雙檢定器同時(shí)定性、定量。檢測(cè)準(zhǔn)確度、靈敏度高。步驟多、易損失；一般用填充柱、單檢定器定性、定量檢測(cè)時(shí)間未知掃描200種（一次處理）1-1.5小時(shí)/樣<20種/類(一次處理)4-13小時(shí)/樣方法特點(diǎn)省溶劑、省時(shí)、省工；前處理設(shè)備簡(jiǎn)單，一次處理檢出農(nóng)藥多，適合于未知農(nóng)藥多殘留快速掃描。用于果蔬批發(fā)市場(chǎng)和生產(chǎn)基地，進(jìn)出口基地執(zhí)法檢測(cè)。溶劑、時(shí)間、人工消耗較多，前處理設(shè)備復(fù)雜（索氏提取器、K-D濃縮器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器）；一次處理檢出農(nóng)藥少，適于已知單殘留檢測(cè)。難以滿足市場(chǎng)檢測(cè)需要。方法項(xiàng)目當(dāng)前第50頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)

CDFA-MRSM與酶法比較檢測(cè)方法酶法MRSM法（CDFA)檢測(cè)農(nóng)藥類型1.有機(jī)磷2.氨基甲酸酯1.有機(jī)磷2.氨基甲酸酯3.有機(jī)氯4.擬除蟲(chóng)菊酯檢測(cè)農(nóng)藥數(shù)量約20多種（僅1，2類）約200多種（其中1類80多種，2類20多種，3、4類100多種）檢測(cè)蔬菜品種葉菜類；不適于果菜及根菜類適用于各類蔬菜（葉菜、果菜、根菜、莖菜等）檢測(cè)靈敏度有的農(nóng)藥?kù)`敏度很低，如：甲胺磷感度為65.62ppm對(duì)各類農(nóng)藥?kù)`敏度均較高，如：甲胺磷可檢出0.01-0.05ppm檢測(cè)方式可在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)（便攜式）在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)準(zhǔn)確度對(duì)殘毒愈高的樣品誤差愈小用雙色譜柱雙檢定器同時(shí)定性定量，準(zhǔn)確度均較高檢測(cè)數(shù)據(jù)的可靠性通常檢測(cè)數(shù)據(jù)不能直接作為執(zhí)法依據(jù)，還需用化學(xué)法驗(yàn)證后方可生效檢測(cè)數(shù)據(jù)可直接作為執(zhí)法依據(jù)檢測(cè)時(shí)間與成本快速、簡(jiǎn)單、易操作、成本低較酶法慢，一個(gè)樣品掃描200種農(nóng)藥需1.0-1.5小時(shí)。成本高。當(dāng)前第51頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)

FDA、CDFA、Canada方法比較方法提取溶劑SPE柱農(nóng)藥數(shù)量回收率綜合比較FDA（GC、HPLC、GC/MS)丙酮C18,SAX100以上80-110%甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂(lè)果、氯硝銨、異菌脲R>80%成本高，步驟多（LLE，CH2CL2)靈敏度、準(zhǔn)確度高CDFA（GC、HPLC、GC/MS)乙腈FL,NH2-Propyl20070-120%成本較低快速簡(jiǎn)便（無(wú)LLE，少量CH2CL2)Canada(GC/MS)乙腈C18,

EnvirocarbNH2-Propyl;Chorcoal-celite20170-110%DDVP、甲胺磷、乙酰甲胺磷、百菌清、氯硝銨R<70%成本較高簡(jiǎn)便快速（無(wú)LLE，CH2CL2)當(dāng)前第52頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（五）CDFA—MRSM要求的儀器配置

農(nóng)藥類別儀器進(jìn)樣器色譜柱檢定器數(shù)據(jù)處理有機(jī)氯、菊酯類GCAgilent6890自動(dòng)進(jìn)樣器HP-1或DB-130m×0.25mm×0.25μmHP-50+或DB-1730m×0.25mm×0.25μmECDECD一臺(tái)化學(xué)工作站控制二臺(tái)氣譜有機(jī)磷類GCAgilent6890自動(dòng)進(jìn)樣器HP-1或DB-130m×0.53mm×1.5μmHP-17或DB-1730m×0.53mm×1.0μmFPDFPD氨基甲酸酯類HPLC(帶柱后衍生系統(tǒng))Agilent1100Pickering5200自動(dòng)進(jìn)樣器或手動(dòng)進(jìn)樣C84.6mm×250mm，5μC184.6mm×250mm，5μFLD積分儀或化學(xué)工作站確證GC-MSAgilent5973自動(dòng)進(jìn)樣器HP-5MS30m×0.25mm×0.25μmMSD化學(xué)工作站當(dāng)前第53頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（六）保留時(shí)間鎖定功能

保留時(shí)間鎖定軟件（RetentionTimeLocking）介紹氣相色譜是現(xiàn)代分析儀器當(dāng)中分析復(fù)雜有機(jī)樣品的有力工具。氣相色譜依據(jù)樣品當(dāng)中不同化合物在同一根色譜柱上保留時(shí)間的差異對(duì)其進(jìn)行定性分析。在不同的操作條件下，不同的儀器上同一化合物的保留時(shí)間會(huì)發(fā)生漂移。即使在同一臺(tái)儀器上，相同的操作件下，由于載氣壓力的變化或者由于色譜柱的長(zhǎng)度發(fā)生變化同樣會(huì)導(dǎo)致化合物的保留時(shí)間發(fā)生變化。所有這些都給化合物的定性帶來(lái)困難。Agilent公司獨(dú)有的保留時(shí)間鎖定軟件利用6890N氣相色譜精確的EPC控制技術(shù)，通過(guò)繪制保留時(shí)間與載氣壓力的關(guān)系曲線，可將目標(biāo)化合物的保留時(shí)間牢牢鎖定。而分析方法一旦被鎖定，在其被移植到其它儀器上時(shí)，也能確保目標(biāo)化合物的保留時(shí)間保持恒定。當(dāng)前第54頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)第三部分CDFA-MRSM標(biāo)準(zhǔn)

操作程序(SOP)當(dāng)前第55頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（一）流程示意圖技術(shù)關(guān)鍵:1.前處理采用固相萃取2.氣相色譜配置雙柱雙檢定器液相色譜配置熒光檢定器和柱后衍生系統(tǒng)3.用氣質(zhì)確證稱樣溶劑提取靜止分層，取3份蒸發(fā)濃縮溶解（己烷）固相萃取柱（FL，1g）定容GC-ECD（100種）溶解（丙酮）定容確證GC-MS溶解（甲醇/二氯甲烷）固相萃取柱（NH2，0.5g）微孔濾膜LC-FLD（20種）定容微孔濾膜GC-FPD（80種）當(dāng)前第56頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）操作程序一目的為了保證新鮮水果和蔬菜中的農(nóng)藥殘留在法定的最大殘留允許限量（MRLs）以下，達(dá)到安全農(nóng)產(chǎn)品的要求，提供CDFA—MRSM方法的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序，以便對(duì)有機(jī)磷（OP），有機(jī)氯（包括擬除蟲(chóng)菊酯）（CH）和N—甲基氨基甲酸酯（CARB）類農(nóng)藥準(zhǔn)確定性、定量。當(dāng)前第57頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）操作程序二內(nèi)容提綱1．儀器設(shè)備2．試劑和實(shí)驗(yàn)材料3．樣品制備方法4．分析方法5．定性6．定量7．確證8．報(bào)告9．每日儀器狀態(tài)測(cè)試10．農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的管理及標(biāo)樣配制操作規(guī)程11．儀器常規(guī)維護(hù)

當(dāng)前第58頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)

三正文1儀器設(shè)備食品加工器HobartChoppermodel8181或博郎食品加工機(jī)（1L,德國(guó)）恒溫水浴鍋（六孔或八孔)旋渦混合器勻漿機(jī)OMNIMIXERHOMOGENIZER17106氮吹儀N—EVAPNitrogenEvaporationSystemModels112氣譜配有雙電子捕獲檢測(cè)器（ECD）氣譜配有雙火焰光度檢測(cè)器（FPD）液譜（梯度淋洗）配有柱后反應(yīng)裝置和熒光檢測(cè)器（FLD）（二）操作程序當(dāng)前第59頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文

2試劑和材料乙腈（農(nóng)藥殘留級(jí)）丙酮（農(nóng)藥殘留級(jí)）已烷（農(nóng)藥殘留級(jí)）甲醇（農(nóng)藥殘留級(jí)、色譜純級(jí)）氯化鈉（ACS級(jí)）檢驗(yàn)不含有機(jī)干擾物，在120℃下烘過(guò)夜試劑1：NaOH溶液（0.5N）pickering?(cat.NOCB130)試劑2：OPAdiluentpickering?(cat.NOCB910O-Phthaladehyde(OPA)pickering?(cat.NO0120)Thiofluorpickering?(cat.No3700-2000)（二）操作程序當(dāng)前第60頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文2試劑和材料具塞量筒（100ml）玻璃注射器（5.0ml，1.0ml）玻璃漏斗（60°,φ9公分，短頸3-4吋）刻度離心試管（15ml）聚乙烯塑料并（300ml，可在-18℃冷凍柜中放置）定量濾紙檢驗(yàn)無(wú)干擾物（φ15公分）燒杯（100ml）移液器10.0mlFlorisil?固相萃取柱（1g，Agilent，AccuBONDII，PartNo.188-2460或Supelco，SupelcleanEnvi-Florislil，ReorderNo.57053)Aminopropyl?固相萃取柱（500mg，Agilent，AccuBONDII，PartNo.188-1050或Supelco，SupelcleanLC-NH2，ReorderNo.57014）（二）操作程序當(dāng)前第61頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文

2試劑和材料微孔濾膜（0.2μmφ25mm，0.45μmφ13）樣品瓶（棕色或無(wú)色，2ml，AgilentPartNo.5182-0554或5018-0864）標(biāo)樣儲(chǔ)備瓶AgilentPartNo.5183-4529（16ml），5183-4530（40ml）GC預(yù)柱1.0m（Agilent脫活石英柱0.25mmPartNo.19091-60610；0.53mmPartNo.19095-60610）HPLC預(yù)柱C-18預(yù)柱（Pickering，4.6mm×4.5cmPartNo.18ECG002）

分析柱：

ECD100%聚二甲基硅氧烷（DB-1或HP-1）30m×0.25mm×0.25μm，HP-1PartNo.19091Z-433或J&W，DB-17PartNo.122-1732（二）操作程序當(dāng)前第62頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文2試劑和材料FPD100%聚二甲基硅氧烷(DB-1或HP-1)30m×0.53mm×1.50μm，HP-1PartNo.19095Z-323；或J&W，DB-1PartNo.125-103250%聚二苯基甲基硅氧烷(DB-17或HP-50+)30m×0.53mm×1.0μm，HP-50+PartNo.19095L-023；或J&W，DB-17PartNo.125-1732MSDHP-5MS30m×0.25mm×0.25μm，HP-5MSPartNo.190191S-433HPLCC84.6mm×25cm，5μmPickering，PartNo.1846250C184.6mm×25cm，5μmPickering，PartNo.1846150（二）操作程序當(dāng)前第63頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法3.1樣品處理a.每日從市場(chǎng)抽測(cè)蔬菜水果樣品進(jìn)行OP、CH、CARB類農(nóng)藥快速掃描，樣品數(shù)量不少于5個(gè)，重量不少于454克。樣品按照聯(lián)邦法規(guī)40#(40-CodeofFederalRequlations)第180.1條規(guī)定的方法處理。不進(jìn)行洗滌。

（二）操作程序當(dāng)前第64頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)下面列舉某些樣品的處理方法

種類處理杏仁和所有堅(jiān)果去殼取果肉鱷梨去籽香蕉、芭焦去冠、去干、去皮豆類、利馬豆、豆角全部甜菜、日本蘿卜、小紅蘿卜根莖和葉子分別取樣，檢測(cè)胡蘿卜去頂櫻桃去籽柑橘類(桔子、檸檬、酸橙、柚子)剝皮椰子取果肉、果汁玉米去種皮日本蘿卜同甜菜大蒜、洋蔥去莖、去皮(剝凈)葡萄去莖韭蔥去根芒果去核當(dāng)前第65頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)下面列舉某些樣品的處理方法瓜去莖油桃去核蔥去根番木瓜果去核豌豆全部桃去核花生只要花生仁青椒全部菠蘿去皮李子去核小紅蘿卜同甜菜草莓去帽小南瓜帶莖西紅柿全部種類處理當(dāng)前第66頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法3.1樣品處理b.對(duì)于較大樣品如西瓜、土豆、茄子等先切成塊，以適于在食品加工器中加工，切樣品時(shí)，菜板上要墊牛皮紙，每個(gè)樣品換一張，菜刀每個(gè)樣品要沖洗一次。要保證樣品均勻有代表性，不要切的太碎或成為液體。c.在食品加工器中加工樣品，將加工好的樣品裝入聚乙烯瓶中（圖4）。（二）操作程序圖4.樣品處理-切塊、食品加工器加工當(dāng)前第67頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文

3樣品制備方法

在勻漿機(jī)的玻璃瓶中準(zhǔn)確稱取50.0g或25.0g在食品加工器中加工好的樣品（圖5）。聚乙烯瓶中剩余的樣品放入冷凍柜中保存。

在樣品中加入農(nóng)藥標(biāo)樣，測(cè)定添加回收率(圖6)。

（二）操作程序圖5.樣品萃取-勻漿機(jī)瓶中稱取樣品圖6.在樣品中加入農(nóng)藥標(biāo)樣，測(cè)定添加回收率當(dāng)前第68頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文

3樣品制備方法3.2.2.加入100ml或50ml乙腈(圖7）（二）操作程序圖7.加入乙腈提取液當(dāng)前第69頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文

3樣品制備方法3.2.3在勻漿機(jī)中高速勻漿2分鐘（圖8）。（二）操作程序圖8.在OMNI勻漿機(jī)中高速勻漿當(dāng)前第70頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法

在100ml具塞量筒內(nèi)放10-15g或5-7.5gNaCl(圖9)，放一鋪有濾紙的玻璃漏斗，過(guò)濾勻漿好的樣品(圖10)。（二）操作程序圖9.具塞量筒內(nèi)加入NaCl圖10.過(guò)濾樣品當(dāng)前第71頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法3.2.5收集約80ml-100ml或40ml-50ml濾液。3.2.6蓋上塞子，劇烈震蕩1分鐘。3.2.7在室溫下靜置約10分鐘，讓乙腈相和水相分層(圖11）。（二）操作程序圖11.靜置分層當(dāng)前第72頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）操作程序三正文3樣品制備方法3.3樣品凈化3.3.1蒸發(fā)a.準(zhǔn)確吸取10ml×3乙腈相溶液（上層）分別放入3個(gè)100ml燒杯中。b.將燒杯放在水浴鍋（80℃）上用蒸汽加熱，杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饣蚩諝饬鞔祫?dòng)（注意：氣管距液面有一定距離），蒸發(fā)近干（圖12）。分別加入2ml丙酮、2ml已烷和2ml1%甲醇/二氯甲烷溶液（v/v），蓋上鋁箔以免蒸發(fā)，用于OP、CH和CARB檢測(cè)。圖12.恒溫水浴鍋上蒸發(fā)趕走乙腈溶劑當(dāng)前第73頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法3.3樣品凈化3.3.2用于有機(jī)磷檢測(cè)a．將燒杯中用2ml丙酮溶解的樣品溶液，完全轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，再用約3.0ml丙酮分二次洗燒杯，并轉(zhuǎn)移至離心試管，最后準(zhǔn)確定容至5.0m。b．在旋渦混合器上混勻試管中的溶液。c．分別倒入二個(gè)氣相色譜樣品瓶中，用GC-FPD分析。d．混勻后，如樣品過(guò)于混濁，可用0.2μm濾膜，放在5ml注射器頂端，將丙酮溶液過(guò)濾,再用GC分析。（二）操作程序當(dāng)前第74頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法3.3樣品凈化3.3.3用于有機(jī)氯檢測(cè)a．Florisil?固相萃取柱（1g），用5ml10%丙酮/已烷（v/v）,條件化，再加5ml已烷。b．當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即將燒杯中用2ml已烷溶解的樣品溶液加到已條件化的Florisil柱上，并用15ml離心管接受洗脫液?？恐亓^(guò)柱，逐滴流下。如果流速過(guò)慢適當(dāng)加點(diǎn)正壓，使溶液成滴連續(xù)流下（圖13）。（二）操作程序圖13.有機(jī)氯樣品用FlorisilSPE柱凈化

當(dāng)前第75頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法3.3樣品凈化3.3.3用于有機(jī)氯檢測(cè)c．用5ml10%丙酮/已烷（v/v）洗燒杯，當(dāng)液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，加到柱上洗脫。e．將15ml離心管收集的洗脫液放在氮吹儀（水浴溫度55℃）上，通氮?dú)饣蚩諝?，緩緩蒸發(fā)至5.0ml。f．用已烷準(zhǔn)確定容至5.0ml。g．在旋渦混合器上混勻試管中的溶液。h．分別倒入二個(gè)氣相色譜樣品瓶中，用GC-ECD分析。（二）操作程序當(dāng)前第76頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法3.3樣品凈化3.3.4用于N-甲基氨基甲酸酯檢測(cè)a．a(chǎn)minopropyl固相萃取柱，用4ml1%甲醇/二氯甲烷（v/v）條件化。b．當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即加入用2ml1%甲醇/二氯甲烷（V/V）溶解的樣品溶液，用15ml離心管收集洗脫液，靠重力過(guò)柱，逐滴流下（圖14）。（二）操作程序圖14.氨基甲酸酯樣品用NH2SPE柱凈化當(dāng)前第77頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法3.3樣品凈化3.3.4用于N-甲基氨基甲酸酯檢測(cè)c．用2ml1%甲醇/二氯甲烷（V/V）洗燒杯，過(guò)柱。e．將15ml離心管收集的洗脫液放在氮吹儀（55℃）上，在緩緩的氮?dú)饣蚩諝饬飨抡舭l(fā)至近干（<0.1ml）（圖15）。（二）操作程序圖15.樣品在氮吹儀上濃縮當(dāng)前第78頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文3樣品制備方法3.3樣品凈化3.3.4用于N-甲基氨基甲酸酯檢測(cè)f．用甲醇準(zhǔn)確定容至2.5ml。g．在混合器上混勻試管中的溶液（圖16）。h．用0.2μm濾膜放在5ml注射器頂端，將甲醇溶液過(guò)濾，用HPLC分析。（二）操作程序圖16.漩渦混合器上混勻樣品當(dāng)前第79頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）操作程序三正文

4分析方法

4.1進(jìn)樣程序遵循下列程序：溶劑、低濃度混標(biāo)、高濃度混標(biāo)、溶劑、樣品（≯13個(gè)），低濃度混標(biāo)。4.2有機(jī)磷掃描4.2.1儀器配置：氣譜裝有雙柱（DB-1、DB-17）、雙FPD（P型）、自動(dòng)進(jìn)樣器，恒壓控制、化學(xué)工作站或數(shù)據(jù)處理機(jī)。（Agilent6890）4.2.2進(jìn)樣量：1μl4.2.3操作條件：進(jìn)樣口220℃，檢測(cè)器250℃，柱溫150℃，保持2min，以8℃/min升溫至250℃，保持12min；載氣為氮?dú)饣蚝猓魉俜謩e為10ml/min或氦氣DB-1，12ml/min；DB-1712ml/min，保持13min，以2ml/min速度增加至15ml/min，保持5min，氫氣75ml/min，空氣100ml/min。當(dāng)前第80頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文

4分析方法

4.3有機(jī)氯掃描

4.3.1儀器配置：氣譜裝有雙柱（DB-1，DB-17）、雙ECD、自動(dòng)進(jìn)樣器、恒壓控制、化學(xué)工作站或數(shù)據(jù)處理機(jī)。（Agilent6890）4.3.2進(jìn)樣量：1μl4.3.3操作條件：進(jìn)樣口溫度200℃，檢測(cè)器320℃，柱溫150℃，保持2min，以6℃/min升溫至270℃，保持8min（溴氰菊酯保持23min）載氣為氮?dú)饣蚝?，流速分別為1ml/min或2.3ml/min,尾吹氣為氮?dú)?0ml/min。4.3.4對(duì)于本底干擾大的樣品，如綠菜花、洋蔥、蒜，用4.3.1氣譜上裝有雙ELCD（電解電導(dǎo)檢測(cè)器）進(jìn)2μl樣品，進(jìn)樣口200℃，檢測(cè)器250℃，柱溫160℃，保持1min，以10℃/min升溫至250℃，保持15min，氦氣流速20ml/min，尾吹氣氮?dú)?5ml/min。注：雙柱為：DB-510m×0.53mm×2.65μm；DB-1730m×0.53mm×0.25μm.（二）操作程序當(dāng)前第81頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文

4分析方法

4.4N-甲基氨基甲酸酯掃描4.4.1儀器配置：HPLC裝有四元泵溶劑梯度淋洗系統(tǒng)，自動(dòng)進(jìn)樣器，化學(xué)工作站或數(shù)據(jù)處理機(jī)（Agilent1100）；柱后衍生和雙試劑系統(tǒng)（Pickering?PostColumnSystem），熒光檢測(cè)器。4.4.2進(jìn)樣量：20μl（二）操作程序當(dāng)前第82頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)溶劑梯度

時(shí)間（min）乙腈（%）水（%）020802208016901018901018.12080三正文

4分析方法4.4N-甲基氨基甲酸酯掃描

4.4.3操作條件

a.CDFA：柱溫42℃，流速1ml/min，熒光檢測(cè)器（入ex330nm，入

em465nm）

（二）操作程序當(dāng)前第83頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）操作程序時(shí)間（min）甲醇流速ml/min，甲醇（%）0.00

0.5ml/min0.00B15%2.00B25%8.00B25%9.00

0.8ml/min9.00B40%10.00B45%19.00B80%25.00

0.8ml/min25.00B80%26.00

0.5ml/min26.00B15%b．天津：溶劑梯度與流速當(dāng)前第84頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文

4分析方法4.4N-甲基氨基甲酸酯掃描4.4.4柱后衍生：試劑1-0.5NNaoH，流速0.3ml/min；試劑2-OPA試劑，流速0.3ml/min；反應(yīng)器溫度—水解100℃；衍生：室溫。

5定性雙柱測(cè)得目的物的保留時(shí)間（RT）要與農(nóng)藥掃描表雙柱標(biāo)樣的保留時(shí)間（RT）相符，對(duì)于GC，先出峰的RT誤差≯0.005分鐘，后出峰RT誤差≯0.01分鐘；對(duì)于HPLC，RT誤差≯0.15分鐘。（二）操作程序當(dāng)前第85頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）操作程序三正文6定量6.1農(nóng)藥量計(jì)算6.1.1單點(diǎn)校正：

公式：×標(biāo)樣量（ng）=農(nóng)藥量（ng）注：a．測(cè)得的農(nóng)藥包括在每日檢查儀器的混標(biāo)中，用混標(biāo)中相應(yīng)標(biāo)樣的響應(yīng)值和含量計(jì)算，b．測(cè)得的農(nóng)藥不包括在每日檢測(cè)的混標(biāo)中或者混標(biāo)中峰面積變化>125%或<75%的目的物，要用相近濃度的單個(gè)標(biāo)樣校正，計(jì)算用校正標(biāo)樣的響應(yīng)值和含量。c．標(biāo)樣量：氣譜指1μl標(biāo)樣含標(biāo)樣量,液譜指20μl標(biāo)樣含標(biāo)樣量。當(dāng)前第86頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文6定量6.1農(nóng)藥量計(jì)算6.1.2多點(diǎn)校正

公式：=農(nóng)藥量(ng)

注：配制至少三個(gè)濃度的單個(gè)標(biāo)樣，作標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算斜率。

（二）操作程序當(dāng)前第87頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文6定量6.2樣品量計(jì)算6.2.1氣譜分析或（二）操作程序當(dāng)前第88頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文6定量6.2樣品量計(jì)算6.2.2液譜分析或（二）操作程序當(dāng)前第89頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文6定量6.3樣品中農(nóng)藥殘留量計(jì)算（以ng/mg或ppm表示）x(ppm)=6.3.1氣譜分析單點(diǎn)校正：（二）操作程序當(dāng)前第90頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文6定量6.3樣品中農(nóng)藥殘留量計(jì)算（以ng/mg或ppm表示）6.3.1氣譜分析多點(diǎn)校正：6.3.2液譜分析

（二）操作程序當(dāng)前第91頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文6定量

6.4添加回收率測(cè)定為了保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確，每日在分析市場(chǎng)樣品時(shí)，要添加一組包含六種農(nóng)藥標(biāo)樣（三類農(nóng)藥）的混標(biāo)到任意一個(gè)測(cè)試樣品中，計(jì)算添加回收率。添加回收率應(yīng)在70-120%范圍之內(nèi)。

（二）操作程序組別中文名稱通用名添加水平(ppm)(50g樣品添加1.0ml標(biāo)樣)1氨基丙氟靈Profenofos1.27甲噻硫磷Methidathion1.09氟樂(lè)靈Trifluralin0.25乙氧氟甲草醚Oxyflurofen0.11殘殺威Propoxur1.05草肟威Oxamyl0.93下面列舉三組作添加回收率的混標(biāo)（丙酮）當(dāng)前第92頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)2毒死蜱Chlorpyrifos0.05甲噻硫磷Methidathion0.05乙烯菌核利Vinclozolin0.10七氯Heptachlor0.10草肟威Oxamyl0.25殘殺威Propoxur0.253伏殺磷Phosalone2.18甲基對(duì)硫磷MethylParathion0.30氯硝銨Dicloran0.20呋喃丹Carbofuran0.54涕滅威亞砜AldicarbSulfoxide0.59涕滅威砜AldicarbSulfone0.73組別中文名稱通用名添加水平(ppm)(50g樣品添加1.0ml標(biāo)樣)（二）操作程序當(dāng)前第93頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)（二）操作程序三正文

7確證

發(fā)現(xiàn)樣品中有超過(guò)最大殘留允許限量的農(nóng)藥殘留（簡(jiǎn)稱超標(biāo)），需要進(jìn)一步確證，給出準(zhǔn)確和精確的定性、定量結(jié)果。7.1在檢測(cè)的當(dāng)天，由另一位分析人員重新稱取該樣品，按照SOP程序重復(fù)分析，并將樣品保存于冷凍室內(nèi)，貼好標(biāo)簽（注明樣品號(hào)、日期、超標(biāo)農(nóng)藥、超標(biāo)殘留量）。

7.1.1有機(jī)磷確證在DB-1/DB-17雙柱，雙FPD測(cè)定基礎(chǔ)上，再用不同的柱子如HP-5和不同的檢測(cè)器如NPD和FPD（S型）進(jìn)一步確證。

7.1.2有機(jī)氯確證在DB-1/DB-17雙柱，雙ECD測(cè)定基礎(chǔ)上，再用不同的柱子如HP-5和不同的檢測(cè)器如ELCD（如果可能）確證。當(dāng)前第94頁(yè)\共有111頁(yè)\編于星期二\8點(diǎn)三正文

7確證7.1.3氨基甲酸酯確證最初分析如在C18柱上進(jìn)行，要用C8確證，如果可能用NPD確證。7.1.4對(duì)于重新萃取樣品進(jìn)行儀器分析，按下列程序進(jìn)樣：溶劑，適當(dāng)濃度的樣品/稀釋至線性范圍內(nèi)，樣品濃度加倍，溶劑，線性范圍內(nèi)的一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)準(zhǔn)品濃度加倍，另一濃度的標(biāo)準(zhǔn)品以建立線性關(guān)系，溶劑。參考標(biāo)