漿膜腔積液粘蛋白定性檢查

漿膜腔積液粘蛋白定性檢查（Rivalta法）1.實驗原理滲出液中可含多量漿膜粘蛋白，在酸性條件下可產(chǎn)生白色霧狀沉淀。2.標本采集：2.1標本種類：漿膜腔積液標本由臨床醫(yī)師行胸腔穿刺術(shù)，腹腔穿刺術(shù)或心包穿刺術(shù)分別采集。2.2標本要求：送驗標本最好留取中段液體于消毒容器試管或消毒瓶內(nèi)，常規(guī)及細胞學檢查約留取2毫升。2.3為防止出現(xiàn)凝塊，細胞變性、細菌破壞自溶等，除應(yīng)即時送驗及檢查外，常規(guī)及細胞學檢查宜用EDTA·K2抗凝。3.標本儲存：立即送檢。4.標本運輸：室溫運輸。5.標本拒收標準：污染，久置標本。6實驗材料：量筒，乙酸。7.操作步驟：取100ml量筒，加蒸餾水100ml，滴入乙酸0.1ml（pH3～5），充分混勻，靜止數(shù)分鐘，將穿刺液靠近量筒液面逐滴輕輕滴下，在黑色背景下，觀察白色霧狀沉淀的發(fā)生及其下降速度等。結(jié)果判斷與分析陰性：清晰不顯霧狀；±：漸呈白霧狀；＋：甲后呈白霧狀；2+：白薄云狀；3+：白濃云狀。在滴下穿刺液后，如見濃厚的白色云霧狀沉淀很快地下沉，而且形成較長的沉淀物，即Rivalta反應(yīng)陽性。如產(chǎn)生白色渾濁不明顯，下沉緩慢，并較快消失者為陰性反應(yīng)。9.質(zhì)量控制：進行室內(nèi)工作人員比對分析，要求差異在10％以內(nèi)。臨床意義：10.1漏出液（transusate）為非炎癥性積液，其形成常見原因為：①血管內(nèi)膠體滲透壓下降；當血漿白蛋白濃度明顯減少時，如腎病伴有蛋白大量丟失、重度營養(yǎng)不良、晚期肝硬化、重癥貧血，一般血漿白蛋白低于25g/L，就有出現(xiàn)漿膜腔積液的可能；②毛細血管流體靜脈壓升高；如靜脈回流受阻靜脈栓塞、腫瘤壓迫、充血性心功能不全和晚期肝硬化等；③淋巴回流受阻止如淋巴管被血絲蟲阻塞或者淋巴管被腫瘤所壓迫等，這些胸、腹腔積液有或能是乳糜樣的；④水、鈉潴留可引起細胞外液增多，常見于晚期肝硬化、充血性心力衰竭和腎病等。10.2滲出液（exudate）多為炎癥性積液。炎癥時由于病原微生物的毒素、缺氧以及炎癥介質(zhì)作用使用血管內(nèi)皮細胞受損，血管通透性增加，以致血管內(nèi)大分子物質(zhì)如白蛋白甚至球蛋白和纖維蛋白原都能通過血管壁而滲出，在滲出過程中，還有各種細胞成分的滲出。當血管嚴重受損，紅細胞也外溢，因此炎性滲出液中含有紅細胞也是炎癥反應(yīng)的特征。滲出液產(chǎn)生多為細菌感染所致少數(shù)見于非感染病因，如外傷、血液、膽汁、胰液、胃液等刺激后。此外惡性腫瘤也可引起類似滲出液的積液。滲透出液與漏出液鑒別見下表。漏出液與滲出液的鑒別漏出液滲出液原因非炎癥炎癥、腫瘤或物理、化學刺激所致外觀淡黃不定可為黃色、血色、膿樣、乳糜樣透明度透明，偶見微混多為混濁比密<1.015>1.018凝固不凝常自凝粘蛋白試驗陰性陽性PH>7.4<6.8蛋白質(zhì)定量<25g/L<30g/L積液總蛋白/血清總蛋白<0.5≥0.5葡萄糖>3.3mmol/L，與血糖相近可變化，常<3.3mmol/L，低于血糖LD<200U/L>200U/L積液LD/血清LD<0.6≥0.6細胞總數(shù)常<100×106/L常>500×106/L白細胞分類以淋巴細胞及間皮細胞為主因病因不同而異，一般急性感染以中性粒細胞為主，慢性以淋巴細胞為主癌細胞未找到可找到癌細胞或異常色體細菌未找到可找到病原菌常見疾病充血性心力衰竭、肝硬化和腎炎伴低蛋白血癥細菌感染、原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性腫瘤、急性胰腺炎等。11.方法學評價：參見漿膜腔積液化學檢查作業(yè)指導書。12.操作注意事項：漿膜腔