第九章 色譜分析法

第九章色譜分析法第一頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四起源1903年，俄國植物學(xué)家次維特（MikhailTswett）最先發(fā)明。他采用填充有固體CaCO3細(xì)顆粒的玻璃柱，將植物色素的提取物加于柱頂端，然后以溶劑淋洗，被分離的組份在柱中顯示了不同的色帶，他稱之為色譜。第二頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四原理各組分和固定相存在一定的化學(xué)親和力，且各組分和固定相的親和力大小不同化學(xué)親和力定向力誘導(dǎo)力色散力氫鍵超分子作用第三頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四色譜法的流出曲線及有關(guān)術(shù)語基線峰高死時間tMMRRttt-='保留時間tR調(diào)整保留時間t‘R峰高h(yuǎn)峰面積A峰寬W半峰寬W1/2第四頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四氣相色譜氣相色譜法（GC）是英國生物化學(xué)家MartinATP等人在研究液液分配色譜的基礎(chǔ)上，于1952年創(chuàng)立的一種極有效的分離方法，它可分析和分離復(fù)雜的多組分混合物。第五頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四組成第六頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四1.載氣瓶，2減壓閥，3穩(wěn)流閥，4流量計，5分流閥，6注射器，7進(jìn)樣器，8色譜柱，9色譜爐(箱)，10皂膜流量計，11檢測器，12記錄儀，13靜電計或電橋，14模數(shù)轉(zhuǎn)換器，15數(shù)據(jù)系統(tǒng)。第七頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四色譜峰： 1苯酚； 2氯酚； 32-硝基酚 42.4-二甲酚 52.4-二氯酚 64-氯-3-甲酚 72，4，6-三氯酚 82，4-二硝基酚 94-硝基酚 103-甲基-4，6-二硝基甲酚 11五氯酚色譜柱：SPB-5,15m×0.53mm載氣：He柱溫：環(huán)境中有機(jī)污染物的分析——廢水中酚的分離第八頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四

1、歸一化法：若樣品中所有的組分均能流出色譜柱且有較好的、可分辨的色譜峰時可用此法定量。定量計算方法第九頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四

當(dāng)試樣中所有組分不能全部出峰，或只要測定試樣中某幾個組分時，可采用此法。將一定量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到準(zhǔn)確稱取的待測樣中，根據(jù)待測組分和內(nèi)標(biāo)物的峰面積來計算被測組分的含量。內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是待測試樣中不存在的純物質(zhì)，加入的量應(yīng)接近待測組分的量，同時要求內(nèi)標(biāo)物的色譜峰應(yīng)位于待測組分色譜峰附近或幾個待測組分色譜峰的中間。

內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法：因內(nèi)標(biāo)法每次分析時，都要準(zhǔn)確稱取試樣和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，較費(fèi)事，不適用于快速控制分析。采用內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量測定可避免這些麻煩。內(nèi)標(biāo)法的要求：內(nèi)標(biāo)物必須是待測試樣中不存在的，但其結(jié)構(gòu)或官能團(tuán)與組分要相似，內(nèi)標(biāo)物與樣品互溶，內(nèi)標(biāo)峰應(yīng)與試樣中的各組分的峰分開，并盡量接近欲分析的組分，二者的加入量即濃度相近，在分析條件下內(nèi)標(biāo)物不與樣品發(fā)生反應(yīng)。

內(nèi)標(biāo)物法的缺點(diǎn)：在試樣中增加了一個內(nèi)標(biāo)物，常常給分離造成一定的困難。內(nèi)標(biāo)法第十頁，共十一頁，編輯于2023年，星期四外標(biāo)法

方法步驟：取純物質(zhì)配成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后分別取一定體積，注入色譜儀，測出峰面積，作峰面積（或峰高）和濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后在相同條件下注入等量（固定量進(jìn)樣）待測樣，測出該試樣的峰面積（或峰高），由上述標(biāo)準(zhǔn)曲線查出待測組分的含量。當(dāng)待測樣品組分濃度變化不大時，可不作標(biāo)準(zhǔn)曲線，用單點(diǎn)校正法，即配制一個和被測組分含量十分接近的標(biāo)準(zhǔn)樣CS，取相同量的標(biāo)準(zhǔn)液和待測液分別注入色譜儀，測得相應(yīng)的AS和Ai。由待測組分和標(biāo)準(zhǔn)樣的峰面積（或峰高）比，可求得待測組分的含量。

外標(biāo)法的優(yōu)缺點(diǎn)：此法方便簡單，勿需校正因