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微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一輪演示文稿本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第1頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一輪本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第2頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分1、形態(tài):球形、桿形、螺旋形。螺旋菌球菌桿菌一、細(xì)菌本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第3頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分2、繁殖——二分裂20分鐘——30分鐘,分裂一次本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第4頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分
無(wú)鞭毛的球菌:菌落較小較厚、邊緣整齊.
有鞭毛的細(xì)菌:菌落大而扁平、邊緣波狀或鋸齒狀.問(wèn):菌落在生態(tài)學(xué)上屬于什么單位?二、菌落菌落可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。單個(gè)或者少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí),會(huì)形成一個(gè)肉眼可見(jiàn)的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第5頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分幾種菌落本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第6頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)(一)培養(yǎng)基人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)一般的培養(yǎng)基均需要碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水等。1、培養(yǎng)基的基本成分*不同培養(yǎng)基要滿足不同微生物對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及氧氣的需求。本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第7頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分2、培養(yǎng)基的種類(lèi)(1)按物理狀態(tài)來(lái)分:分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基(還有半固體)。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。(2)按功能來(lái)分:分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。(3)按成分來(lái)分:分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第8頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分(二)無(wú)菌技術(shù)消毒滅菌使用較為溫和的方法來(lái)殺死部分對(duì)人體有害的微生物。對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行
;將培養(yǎng)皿、接種用具進(jìn)行
;接種的過(guò)程要在
附近進(jìn)行。使用較為強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外的所有微生物(包括芽孢和孢子)。清潔消毒滅菌酒精燈本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第9頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化學(xué)藥劑消毒法:用75%酒精、新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒;氯氣消毒水源4、紫外線消毒……(1)消毒的方法:本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第10頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分1.灼燒滅菌:接種用具和接種過(guò)程中的試管口或瓶口放在酒精燈火焰的充分燃燒層中進(jìn)行灼燒滅菌。(2)常用的滅菌方法2.干熱滅菌:將玻璃器皿、金屬用具等能耐高溫并需要保持干燥的物品放到干熱滅菌箱內(nèi),在160~170OC中加熱1~2h即可。3.高壓蒸汽滅菌:將需滅菌的物品放到盛有水的高壓滅菌鍋內(nèi)(見(jiàn)教材16頁(yè)圖2-4)煮沸,待冷空氣排盡后,密閉繼續(xù)加熱至鍋內(nèi)壓力到100kPa,溫度到121OC后,維持15~30min即可。本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第11頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第12頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分二、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計(jì)算2.稱(chēng)量3.溶化4.滅菌5.倒平板:待培養(yǎng)基冷卻到50OC左右(P17)平板冷凝后,為什么要將平板倒置?
平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第13頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分(二)純化大腸桿菌1.平板劃線法
在數(shù)次劃線后可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體稱(chēng)菌落。
1、為什么在操作的第一步以及劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)?殺滅殘留在接種環(huán)的微生物。本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第14頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分
2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?
3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線?以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。
劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開(kāi)始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第15頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分2.稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法操作過(guò)程分兩個(gè)步驟,即系列稀釋操作和涂布平板操作。系列稀釋操作101102103104105106(1)將分別盛有9mL水的試管滅菌并編號(hào)。(2)用移液管吸取1mL培養(yǎng)的菌液,注入第二支試管中,輕壓橡皮頭,吹吸三次使之充分混勻。(3)從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液,注入第三支試管中,重復(fù)步驟2,直至到第六支試管。本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第16頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分涂布平板操作(P19)(1)將涂布器浸在盛有70%的酒精的燒杯中。(2)取少量菌液(不超0.1mL),滴加到培養(yǎng)基表面。(3)將沾有酒精的涂布器在火焰上引燃,火熄后冷卻8~10s。(4)用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作后,37度恒溫培養(yǎng),如果在培養(yǎng)基上觀察到不同形態(tài)的菌落,請(qǐng)分析其可能的原因。
無(wú)菌操作未達(dá)到要求:可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底;可能是接種時(shí)發(fā)生了污染;也可能是在培養(yǎng)的過(guò)程中受到了污染。本文檔共18頁(yè);當(dāng)前第17頁(yè);編輯于星期二\1點(diǎn)44分兩種
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