風(fēng)濕骨康膠囊

風(fēng)濕骨康膠囊

風(fēng)濕骨康膠囊是由麻黃、馬錢子、防風(fēng)、牛膝等16味中藥組成的復(fù)方制劑，是由風(fēng)濕骨康片［1］通過改變劑型而得的膠囊劑，具有追風(fēng)散寒、除濕止痛的功效。馬錢子中的主要成分為士的寧和馬錢子堿，其毒性大，具有使中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮等多種作用，安全范圍窄，過量使用常會導(dǎo)致驚厥、抽搐、昏迷等嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)［2，3］。已報(bào)道的測定方法有薄層色譜法、紫外光譜法、高效液相色譜法等［4，5］。為了更有效地控制含量，提高產(chǎn)品質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法測定兩者含量。

1試劑和藥品

天美高效液相色譜儀；千譜工作站。士的寧對照品購自中國藥品生物制品檢定所、馬錢子堿對照品購于上海順勃生物制品有限公司；風(fēng)濕骨康膠囊為市售，貴州的確神藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；缺馬錢子陰性樣品，乙腈為色譜純，三乙胺、磷酸為分析純，水為超純水。

2方法與結(jié)果

對照品溶液的制備精密稱取士的寧對照品、馬錢子堿對照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每毫升含士的寧馬錢子堿的對照儲備液。各取1ml置10ml量瓶中，制成含量分別為，μg的混合對照溶液，即得。

供試品溶液的制備取樣品膠囊20粒，傾出內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，精密稱取于150ml具塞錐形瓶中，加1ml濃氨水潤濕樣品后，準(zhǔn)確加入50ml氯仿，稱重，超聲提取30min，靜置，冷卻，稱重，加氯仿補(bǔ)足失去的重量，搖勻，過濾，取其濾液25ml，揮干，用甲醇溶解殘?jiān)?，定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶內(nèi)，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

陰性對照溶液的制備按處方比例及制備工藝，配制不含馬錢子的陰性對照品，并照“”項(xiàng)下方法制得陰性對照溶液。

色譜條件和系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)色譜柱：HypersilBODC18；流動相：乙腈-%三乙胺；流速/mim；檢測波長254nm；柱溫35℃；進(jìn)樣量10μl。記錄色譜圖。如圖1～3。

圖1陰性樣品色譜圖

圖2對照品色譜圖

圖3樣品色譜圖

線性關(guān)系考察分別精密量取士的寧和馬錢子堿的混合對照品溶液，，1，2，4，8ml于10ml容量瓶中，用甲醇至刻度，搖勻，作為系列對照品混合溶液。在上述色譜條件下分別進(jìn)樣20μl，記錄色譜圖。以對照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，對色譜峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，士的寧在～μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為：Y=；馬錢子堿在～μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為：Y=。

精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄各峰面積，計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果RSD分別為%，%。

重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批號6份，按“”項(xiàng)下制成供試品溶液，依法測定，記錄峰面積，RSD分別為%，%。

加樣回收率實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確稱取樣品5份，按照“”項(xiàng)下方法制備。各進(jìn)樣10μl，計(jì)算回收率。得到士的寧、馬錢子堿回收率分別為：%，%；RSD為%，%。結(jié)果見表1～2。

表1士的寧回收率測定結(jié)果

表2馬錢子堿回收率測定結(jié)果

穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取供試品溶液，分別在0，1，2，4，6，8h依法測定。結(jié)果表明，士的寧、馬錢子堿在8h內(nèi)穩(wěn)定性良好，RSD分別為%，%。

樣品測定取本品，按“”項(xiàng)下操作，按擬定方法測定，分別計(jì)算士的寧和馬錢子堿含量。結(jié)果見表3。

表3樣品測定結(jié)果

3討論

1g士的寧能溶于6400ml水、150ml乙醇、5ml氯仿、260ml甲醇，極微溶于乙醚和石油醚［6］，故選擇氯仿和甲醇作為提取溶劑進(jìn)行考察。結(jié)果顯示以氯仿提取效果更好