生物化學(xué)第二章酶化學(xué)zjg

酶化學(xué)張金國歡迎大家學(xué)習第二章7/1/20231ZhangJG-Biochemistry第二章酶化學(xué)(6學(xué)時)第一節(jié)

酶的基本特征第二節(jié)

酶的命名和分類構(gòu)第三節(jié)酶的催化作用機制第四節(jié)

酶促反應(yīng)動力學(xué)和影響因素第五節(jié)酶活性的調(diào)節(jié)機制7/1/20232ZhangJG-Biochemistry酶(enzyme)是一類具有高效率、高度專一性、活性可調(diào)節(jié)的生物催化劑。新陳代謝是維持生物體生長、繁殖、運動等生命活動過程的化學(xué)變化的總稱。生物體同周圍環(huán)境不斷地進行著物質(zhì)和能量的交換，它把吸收的養(yǎng)分轉(zhuǎn)化成自身的組成部分，稱為同化過程；生物體也在不斷地將自身的組成物質(zhì)分解，這是異化過程。新陳代謝失調(diào)會引發(fā)疾病，新陳代謝停止則意味著生命終結(jié)。體內(nèi)所有代謝反應(yīng)都是酶催化的，酶是研究生命活動的關(guān)鍵。酶學(xué)概述7/1/20233ZhangJG-Biochemistry酶學(xué)研究簡史早在8000多年前（禹時代），我國已有利用“酶”釀酒的記載。一百余年前，Pasteur認為發(fā)酵是酵母細胞生命活動的結(jié)果。1877年，威廉.屈內(nèi)（Kuhne）首次提出enzyme一詞。1897年，布赫納（Buchner）兄弟用不含細胞的酵母提取液進行發(fā)酵，說明了發(fā)酵與細胞無關(guān)，而是由細胞外的物質(zhì)引起的。1913年Michaelis和Menten提出酶促動力學(xué)原理——米氏方程1926年，Sumner首次從刀豆中提純出脲酶結(jié)晶。7/1/20234ZhangJG-Biochemistry一、酶的化學(xué)本質(zhì)和組成（一）酶的化學(xué)本質(zhì)1、酶是蛋白質(zhì)1926年Sumner第一次從刀豆種子中提取了脲酶結(jié)晶，證明其具有蛋白質(zhì)性質(zhì)。30年代，Northrop又分離出結(jié)晶的胃蛋白酶、胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶，證明酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。第一節(jié)

酶的基本特征7/1/20235ZhangJG-Biochemistry2、酶是蛋白質(zhì)的證據(jù)：

（1）酶經(jīng)酸堿水解后的最終產(chǎn)物是氨基酸；元素分析，與蛋白質(zhì)的元素含量相似，可以用氨基酸人工合成，1969年人工合成了牛胰核糖核酸酶。（2）與蛋白質(zhì)的分子量相似，結(jié)構(gòu)相似，具有一、二、三、四級結(jié)構(gòu)。（3）凡使蛋白質(zhì)變性的因素也可使酶變性失活；酶能被蛋白酶水解而失活。（4）酶具有蛋白質(zhì)的特性，如：兩性解離、膠體性質(zhì)、加熱使酶變性、顏色反應(yīng)等；不能通過半透膜。7/1/20236ZhangJG-Biochemistry但也發(fā)現(xiàn)：1982年，Cech首次發(fā)現(xiàn)RNA也具有酶的催化活性，提出核酶(ribozyme)的概念。1995年，JackW.Szostak（紹斯塔克）研究室首先報道了具有DNA連接酶活性DNA片段，稱為脫氧核酶(deoxyribozyme)。大多數(shù)酶的化學(xué)本質(zhì)是由蛋白質(zhì)組成的。Ribozyme的化學(xué)本質(zhì)是RNA7/1/20237ZhangJG-Biochemistry核酶的發(fā)現(xiàn)，改變了有關(guān)酶是蛋白質(zhì)的概念，即：“酶是具有催化功能的生物大分子（蛋白質(zhì)或RNA）”。酶分兩大類：

主要由蛋白質(zhì)組成——蛋白類酶（P酶）

少數(shù)由核糖核酸組成——核酸類酶（R酶）7/1/20238ZhangJG-Biochemistry（二）酶的組成單純酶類(simpleenzyme)：僅由蛋白質(zhì)組成脲酶、溶菌酶、淀粉酶、脂肪酶、核糖核酸酶等結(jié)合酶類（conjugatedenzyme):全酶=酶蛋白+輔助因子（輔酶、輔基）超氧化物歧化酶Cu2+、Zn2+）、乳酸脫氫酶（NAD+）酶蛋白決定酶專一性，輔助因子決定酶促反應(yīng)的類型。7/1/20239ZhangJG-Biochemistry酶的賄輔助扒因子主要班有金拌屬離禮子和副有機米化合擋物有機邊化合爛物：嘴NA環(huán)D，揮NA囑DP碌，F(xiàn)肌AD誓，生忍物素望，卟灶啉等金屬膨離子茫：F最e2+、F和e3+、篩Zn2+、可Cu+、C轟u2+凍、Mn2+講、、M侵n3+、M依g2+、K+、岸Na+、M啄o6+、C憐o2+等。輔酶(c思oe殺nz罪ym夫e)略：與井酶蛋異白以此非共艷價鍵暢結(jié)合粘，較木松，偷可透賤析除呼去。輔基(p巖ro香st躁he醋ti呈c盒g(shù)r答ou歉p)結(jié)：與管酶蛋語白以睬共價武鍵結(jié)部合，杰較緊語，透扛析不允能除塑去。6/所26仁/2活02亡310Zh金an油gJ巷G-鋸Bi敏oc臟he愧mi賞st斷ry6/暴26都/2秩02醬311Zh巷an套gJ鴉G-傅Bi壘oc余he示mi鋤st鋸ry6/深26歇/2錘02耳312Zh遺an尋gJ絲式G-誤Bi寶oc租he革mi份st規(guī)ry（三咱）余同工礙酶在同看一個卻生物律體內(nèi)批，能泉催化死相同就的化綁學(xué)反蒸應(yīng)，加但在捐酶的紐奉分子論結(jié)構(gòu)酬、理率化性宏質(zhì)和鍋生化犯特性怎（如毅Km新值、薦電泳壩行為丸等）類存在醋明顯備差異疾的一上組酶怠稱為犁同工厲酶（化is福oe墊nz克ym抱e）前。例如嘩：哺武乳動鑄物的乳酸竹脫氫盛酶（LD柴H，催活化乳券酸脫蔑氫生宅成丙鴉酮酸才），飛有5究種形成式：分子樣形式防：L牲DHl，LD券H2，L真DH3，L醉DH4，L答DH5；亞基解組成近：H4，H3M，造H2M2，H棚M3，M4。乳酸筒脫氫悟酶同展工酶典分子勾都是釘四聚獅體，干但其輔亞基敲組成遺不同朱。不豆同組突織含貨量不惰同，錘用于廟疾病懸診斷檔。6/歷26組/2阻02熊313Zh柴an屆gJ聯(lián)G-呆Bi音oc嗚he浮mi穩(wěn)st全ry[臨際床意暴義]謊1危．L繩DH僑1和竟LD隆H2勻升高挪：見孝于急資性心榆肌梗宏塞(船LD構(gòu)H1攝／L宣DH逮2>遞1)青、病疊毒性偵心肌配炎、浮風濕辜性心膽肌炎校和克都山病泊。鐵2．衡LD騰H5杏和L碎DH民4升庭高：高(吊1)鳴急性垂肝炎愁：L爪DH企5明距顯升改高，欺LD辨H4遮輕度犧增高糟；盆(2設(shè))急躬性肝伐萎縮變：L檔DH會5和亮LD燃H4碑都明朱顯升污高；競(愉3)堅慢性梁肝炎留、肝屈硬化秩：L焦DH孝5輕夜度升廢高；燦(駕4)賴骨骼巡壽肌急罩性損味傷、萬皮肌首炎：浙LD躺H5話和L閃DH棉4都腸升高平；星(5逆)前虜列腺扛癌：似LD香H5壩升高盛，L券DH取5／臨LD險H1嚇>1怠。頂3．暫LD搜H的加五種暑同工或酶都豬升高總：見征于胃汽癌、伙結(jié)腸籃癌和刺胰腺泉癌。6/疏26紅/2疊02密314Zh銀an擦gJ碰G-兆Bi主oc歉he叫mi趨st愛ry（四戚）核男酶核酶五的發(fā)袍現(xiàn)，白19活82忌年，瘡R.設(shè)Ce稻ch然（切饞赫河植）等鬼人發(fā)約現(xiàn)四品膜蟲延細胞塊的2單6s臣r額RN謊A前尚體具肢有自聞我剪熟接功感能，餅將這贏種具有惑催化爛活性雀的天滾然RN蘿A稱牢為核恩酶—夠Ri蝕bo匯zy仗me。19勻83烤年，宏A潤lt企ma常n等惡人發(fā)測現(xiàn)核牢糖核撈酸酶芒P的僅RN見A組楚分具貼有加工涂tR誓NA麥前體滿的催蔬化功動能。而快RN注as攏e皺P中限的蛋貞白組盤分沒倦有催痕化功宣能，備只是劃起穩(wěn)繞定構(gòu)制象的很作用酒。核酶庫的發(fā)抓現(xiàn)，恥改變蒸了有全關(guān)酶是蛋供白質(zhì)的概汪念，Ce橋ch穗和A哭lt效ma丟n獲涌得1君98要9年島諾貝撒爾獎李。6/散26蝴/2托02與315Zh賢an帥gJ咸G-梢Bi知oc誤he骨mi佩st柄ry核酶在阻勁斷基見因表舍達和夢抗病呢毒方監(jiān)面的奴應(yīng)用圖前景Ri刑bo茂zy描me隨能特礙異性猴地切凳割靶鳴RN稅A序油列，核酶旋藥物選擇駛性地鉗裂解架癌細偵胞或妻病毒浪的R墳NA蝦，從丹而阻愁斷它頓們合稠成蛋寫白質(zhì)跨。例如枯針對雷HI彈V病仔毒R下NA口序列栗和結(jié)贏構(gòu)，魚設(shè)計習出專漠門裂藥解H刷IV吐病毒濾的R稅NA春的核誕酶，鑄而這抱種核島酶對街正常叛細胞龍RK曲A則涌沒有蟲影響辮。核酶副藥物兇使用但劑量扒較少邪，毒松性也做較小埋，并池且病頌毒較糖難產(chǎn)涌生耐假受性兔。具有廣照闊的藏應(yīng)用逝前景此和極梅大的蒜臨床園實用警價值扎。6/客26趟/2厲02始316Zh奮an舅gJ挖G-倡Bi膚oc抽he布mi畢st襲ry（五休）嗽模擬分酶模擬理酶（霜mo音de飼l恰en詢zy高me井）鉗用化遣學(xué)的甚方法卸合成弓具有絡(luò)催化識功能拜的非溜蛋白耳質(zhì)分字子或慕蛋白折質(zhì)分浴子，革來模訴擬酶訊的結(jié)轉(zhuǎn)構(gòu)、當特性捉、作的用原讓理以謹及酶全在生慶物體蝦內(nèi)的頭化學(xué)賊反應(yīng)型過程拌。酶是耐一類姨有催蟻化活副性的且蛋白古質(zhì)，找具有仆許多潔優(yōu)點珍。但柱酶容伸易受熔到多液種物舞理、非化學(xué)科因素民的影迎響而鵲失活妨，所氣以不灰能用附酶廣鴉泛取智代工鋒業(yè)催邪化劑游。研究宵模擬殲酶是奸為了獎解決浴酶的豬以上浩缺點叉，是趨一個后新的令研究牧領(lǐng)域治，是洗仿生猾高分贊子的商一個文重要來的內(nèi)扛容。有以處下幾殃方面喚：模便擬酶愁的金劍屬輔忌基、傳模擬躲酶的搬活性公功能值基、窮模擬帳酶的幫高分趣子作棉用方貫式、型模擬榴酶與號底物尸的作喬用、錦模擬很酶的毒性狀霞等。6/群26大/2作02步317Zh樣an盈gJ醬G-懲Bi曬oc蔬he扭mi利st殺ry（六監(jiān)）抗闊體酶ab持zy朱me抗體聞酶是暖一種秋人工穗酶，轟本質(zhì)銀上是拾一種屑具有瘦催化扮能力孫的抗只體。艙而單陜純的堂抗體她沒有億催化她能力麗。通過稀改變左抗體待中與躲抗原駁結(jié)合棍的微塵環(huán)境壞，并籃在適欄當?shù)难a部位哥引入貿(mào)相應(yīng)們的催滅化基適團，鄙所產(chǎn)執(zhí)生的稀具有召催化佩活性絲式的抗邊體。獲得梢抗體踏酶的杯途徑婆：①趙采用拿過渡熄態(tài)的怖底物瘦類似雕物誘控導(dǎo)；考②在紹現(xiàn)有應(yīng)的抗揉體基筑礎(chǔ)上虛，通析過化貢學(xué)修判飾或柜通過惠蛋白懶質(zhì)工駝程向禁其配氏體結(jié)危合部船位導(dǎo)蔬入催怕化基袖團。裝③拷料貝法副?？贵w普酶的乳研究常，為宴人們砌提供鄉(xiāng)豐了一榴條合貼理途興徑去伴設(shè)計永適合澇于市遠場需垂要的擋蛋白恰質(zhì)，櫻即人哀為地繡設(shè)計全制作愚酶，愉設(shè)計軍針對掠性強酒、藥祝效高免的藥統(tǒng)物。6/顆26易/2坑02差318Zh講an媽gJ姑G-漲Bi炒oc揪he役mi謠st禮ry二、著酶催本化作柴用的尋特點問題狼一：化學(xué)皆催化冶劑具惕有哪漠些特和點？6/穗26宰/2葬02閱319Zh桂an榜gJ構(gòu)G-紋Bi槳oc廣he飾mi這st傻ry酶與孟非生絹物催路化劑升相比湊的幾寫點共困性：①參既與反鄰應(yīng)，儉反應(yīng)蔑前后扁自身蠢組成床不變睬；②能扛提高序化學(xué)濕反應(yīng)限速率送，但絲式不改拿變化杰學(xué)反湯應(yīng)平取衡點博；③通材過降余低反濃應(yīng)活妹化能悠，加拴快反挪應(yīng)速描度；④只穗能催訂化熱態(tài)力學(xué)貴允許捧的反純應(yīng)。6/氧26美/2咐02啦320Zh秘an說gJ跨G-竟Bi干oc塘he咸mi結(jié)st爬ry酶催斑化作仿用的箭特點鎖：（1）分極高柿的催妄化效否率；（2）極高艱的催墾化專允一性漸；（3）清可調(diào)襲節(jié)性酶活倦性、纖酶量采；（4）反應(yīng)辟條件躍溫和常溫堂、常守壓，懇中性pH環(huán)境卵。6/珠26電/2碗02尾321Zh賺an藝gJ積G-授Bi食oc旁he慎mi憤st史ry（一尋）酶份催化旗作用齡的高效性1、切催化引效率酶催協(xié)化反周應(yīng)速派度與蝴加普槳通催習化劑仗相比幣可提派高1答06～1辟012倍，促是相吳應(yīng)的逼無催恰化反評應(yīng)的掃108～嫁1020倍。例如立:店1m哀ol菠馬肝暑過氧特化氫洲酶在揚一定沈條件緊下可暴催化釋5×著106摩爾劫過氧攤化氫告分解劑，在謹同樣負條件仙下1承mo羅l鐵鋪只能忌催化滲6×扭10－4摩爾懲過氧筐化氫現(xiàn)分解要。因臥此，化這個杯酶的砍催化串效率麗是鐵莊的1騾010倍。闖也就夸是說推，用禍過氧茄化氫像酶在貼1秒稿內(nèi)催魔化的忽反應(yīng)稿，同漏樣數(shù)迅量的扛鐵需棍要3熔00而年才兔能反信應(yīng)完眾。6/霜26臥/2湖02拒322Zh辨an黑gJ宰G-粗Bi饞oc截he廳mi宅st院ry酶促簽反應(yīng)睛的本雞質(zhì)降低霧反應(yīng)硬活化好能例如宴：H2O2的分甘解，破當沒椅有催急化劑蕉時活悼化能紋為75信.2鄰4kJ冒/m果ol捕；用鈀餅作催亦化劑只時活安化能續(xù)為48琴.9kJ蜘/m跡ol嫁；而用期過氧古化氫農(nóng)酶作短催化沉劑時妙，活陽化能爛下降拌為8.禾36kJ域/m喜ol初以下包。2、概活化娃能與臭過渡愿態(tài)6/毒26纏/2怪02繩323Zh嫩an棒gJ拼G-陶Bi聾oc囑he駐mi敞st氏ry酶催巡壽化的慶反應(yīng)霧稱為酶促覺反應(yīng)泰。酶首先牲與底物（反烏應(yīng)物依）結(jié)潮合，疑生成歲不穩(wěn)規(guī)定的所中間痰產(chǎn)物圓ES裙（及A）香；然劇后分魂解為磚反應(yīng)產(chǎn)物而釋樂放出天酶。6/撕26梅/2燃02餓324Zh族an業(yè)gJ完G-年Bi枯oc績he款mi昌st段ry（二映）酶催舌化作廟用的鼻專一談性1、聯(lián)概念脆及特精點酶只暢催化拘某一傭類底姥物發(fā)專生特暈定的泄反應(yīng)首，產(chǎn)逃生一武定的很產(chǎn)物督，這飾種特愚性稱宅為酶丙的專工一性京。酶都園有極源高的諒專一賀性，棄幾乎翻沒有帽副反止應(yīng)發(fā)休生。1）猶絕對赤專一識性：有些沉酶只鵲作用忠于一謹種底暑物，立催化等一個滲反應(yīng)驚，宅而不盜作用阻于任惹何其吐它物散質(zhì)。如：端脲酶螞只能好催化映尿素虜?shù)姆譂?，嘉對甲庭基尿嚴素無徑作用燭。再如志：琥秀珀酸戲脫氫籮酶底煤物：泡琥珀真酸6/講26悠/2狀02療325Zh線an紡gJ軟G-惜Bi牛oc烈he亂mi掉st夕ry2）至相對兔專一眠性：這類鬼酶對章結(jié)構(gòu)繞相近民的一觀類底鴨物都療有作慎用。包括飛鍵專癢一性憐和基士團專旗一性汗。（1蒙）鍵陡專一浪性如酯樓酶能粱水解昏不同啞脂肪頭酸形定成的狂酯鍵6/辟26敏/2康02疤326Zh槽an夾gJ務(wù)G-磚Bi匹oc掉he必mi逗st響ry（2缸）族支專一憤性不但炎要求猶底物盛具有杠一定只化學(xué)舌鍵，快而且強對此遮化學(xué)渾鍵兩睬端連說接的律兩個票原子稱基團元亦有洽一定砍的要尖求如：揭a浸-葡尊萄糖就苷酶嫁，要暑求底猶物必駛須是隱a-終糖苷紫鍵形風成的缺糖苷匠。麥莫芽糖體、蔗仰糖6/儲26檔/2烤02愚327Zh前an信gJ孝G-漲Bi旋oc央he顯mi屠st竊ry3）宿立厲體異疏構(gòu)專遼一性概念喝：酶循除了穿對底火物分桐子的云化學(xué)吧結(jié)構(gòu)茂有要么求外糕，對勇其立塔體異算構(gòu)也徹有一曉定的遼要求類別朝：旋鴨光異蒼構(gòu)專等一性坡和幾復(fù)何異低構(gòu)專咱一性（1蛋）旋胃光異邊構(gòu)專敗一性酶只偵作用方于旋港光異掉構(gòu)體醋的一悶種。算如L玩-精屑氨酸謠酶只脂對L順-精繁氨酸竹起分距解作團用，詢而對撈D叉-精吸氨酸絲式則無附作用詳。6/本26留/2抹02竄328Zh磨an鏡gJ鴿G-戲Bi喬oc耐he況mi沾st污ry（2汁）幾鏡何異動構(gòu)專已一性當?shù)捉┪锞哂斡袔酌购萎愓?gòu)體相時，業(yè)酶只負作用菠其中玩的一移種。狀例如墓，琥哲珀酸句脫氫夕酶只討能催婚化琥色珀酸練生成去延胡設(shè)索酸壩（反象丁烯悔二酸鴨），遺而不浴促成淺順丁她烯二皮酸。酶催涌化作及用專嘴一性炸具有剃非常執(zhí)重要雹的意銹義6/蟻26劉/2蠻02進329Zh寫an桶gJ絡(luò)G-怨Bi性oc拒he盆mi恰st文ry2、陸酶作大用專省一性茶假說慕--躍-酶鉗與底魄物的社結(jié)合（1鞠）鎖鑰約模型濟(l框oc秋k-朽ke觸y蛾hy懲po酬th準es陸is斤)Fi仗sh艱er按1赴89滴4認為吊：底瘡物分經(jīng)子或豈其一建部分體像鑰掛匙一見樣，廈專一舉地插盤入酶漢活性罷中心哪，通塑過多絞個結(jié)職合位講點的繡結(jié)合速，形價成酶澤—底墨物復(fù)崖合物笑。酶活登性中岡心的份催化馬基團唱正好預(yù)對準作底物不的有棋關(guān)敏迷感鍵跨，進辟行催泥化反自應(yīng)。6/叼26品/2舅02知330Zh眼an陳gJ怪G-器Bi讀oc瞧he壟mi清st嘴ry6/刷26吵/2善02堪331Zh刮an壇gJ攏G-逐B(yǎng)i臺oc繼he處mi服st顆ry鎖鑰獎模型欺將酶稱分子籌結(jié)構(gòu)嚼看成徑是互赴補的廳、剛坐性的復(fù)，較秋好地賭解釋萌了立縫體異名構(gòu)專定一性峽；但未茶能解畫釋可勺逆反巖應(yīng)，即許漠多酶癥可以述同時扮催化紋正、絕負反蠟應(yīng)，徐鎖鑰摸模型寒無法范解釋忽當酶擇與底絕物結(jié)訓(xùn)合后愚，再承與產(chǎn)陽物結(jié)鋪合的牢事實開。6/蔬26招/2貸02斥332Zh畢an蒙gJ薦G-撿Bi輛oc膽he虎mi攝st姨ry（2鉆）誘導(dǎo)蒸楔合精模型輪（i且nd騙uc全ed鏟-f殘it棋h嘴yp獻ot罵he租si堪s）Ko所sh銀la杜nd渠，謝19憲58認為肚：酶俯活性駕部位疑的形王狀與蹤蝶底物辱的形換狀并售非完板全互弱補，索當酶廊分子監(jiān)與底威物分亞子接賄近時鬧，酶漲蛋白佛質(zhì)受游底物滲分子誘導(dǎo)，構(gòu)僻象發(fā)音生有鼓利于制與底畜物結(jié)美合的貝變化筒，酶葵與底騰物在級此基汁礎(chǔ)上換互補停楔合鉤，進牧行反垃應(yīng)。認為肉酶具丹有一柴定的鳥柔性唐。6/奔26摸/2汗02應(yīng)333Zh顛an諒gJ攪G-韻Bi珍oc邪he靜mi年st館ry6/塑26繪/2鎖02殃334Zh旗an駁gJ熄G-法Bi餃oc已he觀mi健st亡ry三、坊酶活痛力測侄定（一尚）酶活休力的結(jié)概念1、紫酶活效力（e物nz殺ym明e震ac齒ti疲vi繪ty饞）錄：酶呆催化冶底物劣發(fā)生屑化學(xué)等反應(yīng)牽的能蜻力，巡壽也稱酶活妨性。測定油酶活育力，膛實際掠上就床是測穩(wěn)定酶液促反瓦應(yīng)進香行的隔速度出。酶促惱反應(yīng)揭速度啦越快棍，酶烈活力焰就越催大；濕反之彼，速宵度越特慢，斜酶活惕力就珍越小些。6/災(zāi)26清/2偶02肅335Zh草an撤gJ疑G-槐Bi逢oc枯he物mi肉st逃ry酶促移反應(yīng)亮的初速貼度:底物螞開始退反應(yīng)霸之后胡，很輔短一澡段時布間內(nèi)購的反紗應(yīng)速其度。魔反應(yīng)辣時間網(wǎng)一般涉采用槳5-賺10腳mi錫n。引起獄酶促璃反應(yīng)案速度倆增加旅或下趕降的吳原因箭很多偶，如電：底殿物濃抖度下曾降、偏產(chǎn)物題對酶演的抑丹制、隔由于僻產(chǎn)物疏濃度姐增加藏而加在速了宜逆反袍應(yīng)、奮酶變本性等版。因杏此，魂為了彼排除銳上述朵干擾俯，酶抖活力渴應(yīng)該彼用酶首促反睬應(yīng)的摟初速步度來鉛表示杠。6/委26路/2羅02還336Zh安an崖gJ鑄G-打Bi組oc臘he卷mi蔑st連ry2、雷酶活福力單抽位（1）國馬際單漠位國際名生物女化學(xué)躍協(xié)會甜酶學(xué)杏委員甘會對酶活扭力單麗位作了慚下列攪規(guī)定啦：在25嘴℃、最衡適pH、飽凝和底嗚物濃辰度的榴反應(yīng)擔條件旱下，1m留in內(nèi)將1微摩席爾(μm戴ol)的底畝物轉(zhuǎn)慈化為劫產(chǎn)物營所需紫要的薪酶量吉，定跟為一足個國臺際單格位，崖（1U＝1μ放mo曾l／mi旱n）。如果傘底物梯分子浸有一精個以蠶上可閣被作光用的恭化學(xué)示鍵，懂則一坦個酶椅活力廈單位吉，便雨是1m竊in使1μ督mo硬l有關(guān)抗基團芹轉(zhuǎn)化首所需尤要的繞酶量噸。6/乎26愚/2貨02爆337Zh燥an收gJ片G-川Bi粗oc埋he油mi柏st樸ry（2稿）K杯at為了粘使酶帖活力收單位塑與國重際單灣位制如中的露反應(yīng)編速度概（m慕ol灣/旱s超）相書一致哀，1潑97梁2絮年國訪際酶內(nèi)學(xué)委擠員會擴正式汽推薦千用Ka識t（K辯at準al擴，催侄量）竟作為波酶活梳力單始位。規(guī)定副為：在最討適條株件下怠，每星秒鐘頃內(nèi)能姥使揪1m頁ol撤底祝物轉(zhuǎn)敗化成玩產(chǎn)物周所需衫要的絨酶量糟，定稻為一校個K眉at飽單位忌（1圍Ka純t絕＝體1m償o1搜／s仁）。Ka秋t惑與國永際單壤位遲(I風U市)庫的互淹算關(guān)讀系如造下：1航Ka爆t育＝絡(luò)6×這107U1穴U相＝慮16償.6剝7×鞠10-9Ka傾t＝1聞6.好67傭n腐Ka旺t6/風26跡/2攻02益338Zh槳an仁gJ兔G-松Bi洪oc獄he讀mi姜st燙ry（3蠻）習劉慣酶陵活力已單位在實杏際使悔用中睜，比窄較方血便、聰直觀驢，規(guī)堅定的聲酶活羽力單躲位。哭不同意酶有乓各自鈴的規(guī)動定，談如：①α炸-淀墊粉酶哭活力飄單位篇：每款小時劍分解晚1g拘可溶頌性淀茶粉的防酶量磁為一渡個酶值單位煮。②糖嘉化酶求活力么單位團：在爛規(guī)定田條件李下，仔每小油時轉(zhuǎn)絲式化可酷溶性蓋淀粉冰產(chǎn)生傘1m鋸g還盡原糖柴（以椅葡萄銳糖計蒼）所印需的扮酶量豈為一胖個酶就單位謊。③蛋勒白酶母：規(guī)弊定條兩件下完，每父分鐘患分解蝦底物哄酪蛋暴白產(chǎn)康生1嚇μg盜酪氨酸酸所握需的而酶量甩。④D秋NA暴限制盜性內(nèi)而切酶葬：推役薦反絞應(yīng)條糟件下孫，一供小時沙內(nèi)可掀完全柔消化原1μ權(quán)g純楊化的炸DN乏A所燦需的咱酶量曲。6/輩26刪/2泥02輝339Zh刃an救gJ屑G-呀Bi稻oc熄he掠mi衛(wèi)st規(guī)ry酶的俯比活咱力每毫牙克酶葵蛋白撞（酶菜制劑粥）所稼含的遺酶活扮力單傷位數(shù)爪稱為酶的腎比活學(xué)力，用U／mg蛋白要表示德。酶的衛(wèi)比活套力是酶罷制劑外的一皆個純度境指標。對湯同一倍種酶席來說輪，比竹活力抹愈高恭，表師明酶壇純度誼愈高秋。6/森26恥/2冒02翁340Zh織an糟gJ平G-真Bi換oc塌he呀mi炕st累ry酶活副力的晨測定孩方法周：分光向光度易法、帳熒光歪分光盯光度袋法圍、同詳位素車標記濫法、策電化者學(xué)法逃、紫誘外可票見分優(yōu)光光飾度法濕、蒙酶偶晃聯(lián)法仿等主要釘是測碑反應(yīng)叉初速之度反應(yīng)門時間虎一般蒜采用耐5-禾10紅mi揀n。只要欄測定析方法姨足夠規(guī)靈敏塘準確懷，原除則上丟，反辨應(yīng)時搬間愈帖短愈監(jiān)好。（二云）酶育活力臣的測活定方毀法6/權(quán)26虹/2通02卵341Zh隙an治gJ捧G-霉Bi批oc揀he外mi年st父ry四、夠酶的陵分離殖和純賞化酶在廳生物察細胞都中的稍分布頌，分沙兩類（1尼）胞敗內(nèi)酶：在天細胞今內(nèi)產(chǎn)悟生，摔并在狀細胞斜內(nèi)起豈催化聲作用蘭。疾病暫診斷搞指標（2或）胞隊外酶：在灰細胞洋內(nèi)產(chǎn)菜生后乎分泌乞到細息胞外出發(fā)揮簽作用趁。大辮都是呢水解同酶，咐如胃垂蛋白層酶、殲胰蛋悼白酶裙、溶煩菌酶敗。6/攝26蝴/2庭02秘342Zh榜an稅gJ岡G-黨Bi側(cè)oc德he儲mi桑st折ry酶分氏離純端化的龍原則撇：在整彼個分諒離純孔化過洞程中艦要始存終保屑持酶畜的活伴性。防止國變性胃失活仰！低溫麻、快僚速酶活取性的危測定源應(yīng)始嘩終貫竿穿于匪整個揀分離眾純化閃過程趙中，隔以便暑于監(jiān)出測酶壤活性如的變些化、障掌握軟酶的精純化斷程度父，選拔擇和趕確定誰酶的萬分離井純化勇方法會。6/厲26竿/2香02瓣343Zh緞an努gJ藥G-花Bi裹oc稀he斑mi梅st起ry酶的流提取武、分法離純撇化技錯術(shù)路口線細胞擔破碎酶提踩取酶分惠離純腐化酶濃速縮酶貯額存動物抵、植講物或倍微生釘物細翠胞發(fā)酵慌液離心兆分離罩，過句濾分燒離，然沉淀如分離嶄，層斥析分享離，跪電泳所分離粱，萃韻取分頓離，敞結(jié)晶牛分離拒等。6/謹26樹/2歌02拘344Zh保an鳴gJ扔G-叫Bi掛oc己he系mi惱st襯ry（一成）材妥料選背擇和嶺預(yù)處太理酶的釀分離眉純化到在材諒料選闖擇、萄細胞板破碎劇、粗供制品嬸的獲僑得以藥及分債離純寄化方咬面與劃蛋白角質(zhì)十聰分相真似。6/基26踏/2任02贊345Zh撇an嘩gJ帽G-佛B(yǎng)i蠟oc引he袖mi通st卵ry（二搶）細備胞破襲碎許多柳酶存孔在于揉細胞泄內(nèi)?；闉榱舜蛱崛∫赃@些晝胞內(nèi)齡酶，盯首先藝需要培對細爐胞進薄行破川碎處晴理。1）竄機械就破碎2）正物理矮破碎3）秒化學(xué)怎破碎4）寇酶解濃破碎JY市92乳-I測I澇D超菌聲波細胞擋粉碎病機細胞竊破碎踩珠高壓嗎細胞悉破碎細機DY急89柿-I路型蹈電動煌玻璃祝勻漿間機6/慣26隸/2春02畫346Zh揀an黎gJ累G-拜Bi購oc喬he衛(wèi)mi鋤st共ry機械肥破碎搗碎鞭法研磨態(tài)法勻漿年法物理遙破碎溫度沈差破賴碎法壓力燃差破堆碎法超聲攜波破其碎法化學(xué)督破碎有機掏溶劑趁：甲苯乘、丙碌酮丁醇皇、氯蘭仿表面部活性沫劑：Tr羞it染on歐、T嫁we押en酶促解破碎自溶折法外加帥酶制愧劑法通過追機械軟運動猾產(chǎn)生遮的剪柄切力付，使清組織敲、細掀胞破遵碎。通過猾各種乏物理填因素叢的作賄用，集使組恭織、電細胞豈的外使層結(jié)漆構(gòu)破毛壞，潮而使飼細胞輸破碎散。通過洗各種扶化學(xué)絹試劑綁對細癥胞膜元的作糕用，索而使撞細胞糧破碎通過降細胞晌本身騾的酶嫩系或嘆外加批酶制待劑的示催化雞作用巖，使嗎細胞因外層阿結(jié)構(gòu)年受到皆破壞役，而牢達到棍細胞斃破碎細胞童破碎拖方法汽及其剛原理本章目錄6/頭26富/2毅02夸347Zh浪an黎gJ斧G-佩Bi慨oc糠he恰mi端st衡ry酶的鵲提取差是指霉在一技定的謝條件恒下，秒用適士當?shù)膽B(tài)溶劑甲或溶遲液處閥理含甲酶原賴料，辮使酶除充分抄溶解猶到溶在劑或壟溶液蜓中的羅過程止。也酒稱為酶的界抽提。酶提挽取時炸首先茂應(yīng)根痰據(jù)酶的棉結(jié)構(gòu)干和溶兇解性畝質(zhì)，斷選擇憲適當術(shù)的溶羊劑。1、疏水提尿取法飼：酶都丈能溶涂解于銹水，抹通常階可用惱水或棟稀酸袍、稀敬堿、斷稀鹽扒溶液忍等進勤行提漂取，2、弄有機脾溶劑欺提取孤法：有些遣酶與味脂質(zhì)疲結(jié)合張或含遼有較薯多的療非極竭性基晌團，騰則可檢用有劃機溶閣劑提透取。提高敬溫度峰，降裹低溶電液粘泛度、乘增加禍擴散潤面積什、增贏大濃船度差雕等都舟有利唯于提驕高酶蠅分子贏的擴打散速器度，綱從而晚增大謝提取遣效果鞏。為了毯提高加酶的謹提取婚率并姑防止混酶的燃變性蹈失活騙，在陷提取岸過程脫中還強要注妹意控詳制好溫度柳、p今H值等提材取條李件。（三糾）酶雷的提禽取6/裳26健/2得02閘348Zh米an輩gJ孩G-王Bi豈oc青he謀mi饞st防ry（四此）分硬離純?；}析耍法、巖等電貼點沉芬淀法冊、色箏譜法侍均可授用于盈酶的恥分離歌純化吐，特梨別是霉親和米層析揉法在撈酶的凱分離蔑純化筆過程升中占饅有重碰要地嶼位。6/杰26倦/2榆02車349Zh擱an傭gJ萌G-灘Bi抵oc珍he極mi窯st醉ry（五紛）酶燒的保穿存（1潔）干竟燥：干燥黃器（伏加干躺燥劑耗）（2做）低遞溫：0～引4℃陪冰箱鹿、低侍溫冰軍箱-癥25達～-察50蛋℃、肺液氮弟-1賠96置℃（3竿）防烤腐劑鍛和穩(wěn)拳定劑防腐禽劑：腫甲苯奸、氯趴仿、奴苯甲禿酸、恢苯甲儉酸鈉筆、山鞋梨酸間、山顆梨酸央鉀、決丙酸晨鈣穩(wěn)定飼劑：硫酸筋銨、愧甘油青、蔗匪糖或?qū)っ傅奈榈孜飳逸o基動等6/儀26題/2羨02刃350Zh墓an婚gJ便G-槐Bi涉oc演he攔mi啄st頭ry第二院節(jié)嚷酶的某命名井與分村類目前適已發(fā)扮現(xiàn)4員00斯0種允酶。一、椒酶的液命名1、均習慣拉命名驅(qū)法（1雨）底貫物名淺稱，零脲塌酶、回淀粉凳酶、頃蛋白晶酶（2糖）反湖應(yīng)性悅質(zhì)，扶脫耗氫酶虛、加喪氧酶打、轉(zhuǎn)認氨酶（3凍）兩暑者結(jié)家合，歉琥采珀酸索脫氫浩酶、躺谷丙饒轉(zhuǎn)氨軌酶（4現(xiàn)）酶螺的來艦源，灘胃笑蛋白示酶、肚木瓜府蛋白瞇酶混亂6/透26磁/2枕02需351Zh哈an坦gJ功G-蒙Bi球oc威he希mi把st旨ry2.澇國際金系統(tǒng)終命名溝法基本互原則箱：明費確標癥明酶猾的底胃物及癥催化份反應(yīng)納的性峽質(zhì)（怖底物炸為水魚時可墻略去黨不寫租）。底物亞1：挺底物須2陵反應(yīng)界類型如：仍琥珀機酸：鑄FA抽D氧茶化還宿原酶6/鐘26平/2緩02擠352Zh漲an閃gJ站G-屆Bi芒oc遺he夸mi產(chǎn)st怒ry3、國際曉系統(tǒng)陽分類念法及往編號晶（EC編號循）（1籍）按灶反應(yīng)芹性質(zhì)謹分六顛大類淺，用宣1、漂2、懶3、超4、被5、龍6表崖示。（2撒）根羞據(jù)底羊物中馬被作趟用的蔬基團約或鍵李的特稀點，喬將每西一大懼類分庸為若輩干個遠亞類曲，編廉號用惱1、統(tǒng)2、鑼3翻等。（3醋）每快個亞雙類又?？煞指诪槿艄P干個陶亞一朝亞類怕，用鉗編號猴1、騾2、鞏3等凝表示纏。每一趁個酶絲式的編洽號由志4個飼數(shù)字店組成饞，中腥間以刊“·昂”隔士開。第一凍個數(shù)救字表享示大引類，辰第二兇個數(shù)掩字表危示亞妥類，享第三院個表舞示亞辭-亞釘類，予第四錦個數(shù)段字表室示在粱亞-各亞中巡壽的編驅(qū)號?？梢詷蛏暇W(wǎng)裁（/潛en塊zy哪me暮/）費查到長酶的啞系統(tǒng)按名稱娘和E攪C編畝號。6/賊26敢/2詢02衣353Zh治an妨gJ搶G-盆Bi狗oc循h(huán)e嶄mi源st源ry例如如：乙醇扒脫氫狼酶EC模1.宣1.碌1.莫1，乳酸敵脫氫李酶EC興1.攝1.并1.撤27，蘋果致酸脫駛氫酶第一屑個數(shù)話字表鐘示大籠類：鳳氧化是還原第二甩個數(shù)仁字表抬示反哥應(yīng)基睬團：諷醇基第三帶個數(shù)膝字表揚示電殘子受冬體：NA件D+或NA弓DP+第四戀個數(shù)饑字表叼示此沿酶底鼠物：熄乙醇偏，乳盟酸，松蘋果汁酸。6/淋26孔/2銷02釀354Zh苦an嚇gJ歸G-上Bi董oc掛he堤mi駁st原ry（一趣）根后據(jù)酶柄蛋白縣結(jié)構(gòu)磚特點屑分類可分燥為：單體續(xù)酶、快寡聚抱酶、筐多酶朱復(fù)合蘆體（1隸）單體漫酶由一澤條多貪肽鏈規(guī)組成勺的酶秀分子哥，通逐常為悔水解割酶。相對伍分子敞量1禽.3×1穿04～3.梨5×1賴04如：懇溶菌遭酶、挖羧肽錘酶等牛胰緊RN頂as陪e須12暮4a艷a褲單阿鏈雞卵讓清溶授菌酶韻12茂9a索a跨單累鏈二、鬧酶的解分類具與常愧見酶撒實例6/把26貓/2六02欣355Zh騾an趴gJ涂G-錢Bi訂oc候he例mi佛st敞ry6/角26暖/2睬02些356Zh多an擠gJ把G-榨Bi觀oc術(shù)he哭mi溜st市ry（2斜）寡聚捧酶含多沿條肽彎鏈、估多個襲亞基殃。相歲對分御子量＞3幅.5炭×1集04。①含趨相同蹦亞基敏的寡星聚酶刃：蘋果羊脫胱仙氫酶座（鼠斑肝）淘，2辱個相訓(xùn)同的斥亞基②含價不同輸亞基姥的寡四聚酶頂：琥珀嗚酸脫快氫酶酷（牛拒心）厲，α予、β爽2個斧亞基寡聚當酶中央亞基聯(lián)的聚找合，雀有的艦與酶急的專鬧一性允有關(guān)晌，有浸的與時酶活悅性中哈心形不成有健關(guān)，孤有的蜓與酶繩的調(diào)坡節(jié)性超能有訪關(guān)。大多跳數(shù)寡虎聚酶鞋是胞族內(nèi)酶和，而猴胞外渾酶一妥般是豬單體唐酶。6/喉26隔/2窩02妖357Zh嘩an劇gJ煉G-耽Bi地oc棉he練mi糕st算ry6/透26趨/2睛02高358Zh坡an現(xiàn)gJ汪G-挺Bi亞oc所he西mi珠st篩ry（3據(jù)）多酶璃復(fù)合閣體（滅多酶愛體系拉）由兩些個或縮慧兩個宗以上幟的酶巖，相碗互組溫織而殼成，括其中咽每一賴個酶服催化陸一個哥反應(yīng)撕，所搜有反校應(yīng)依釘次進西行，蛙構(gòu)成雷一個房誠代謝岸途徑醬或代妖謝途瞇徑的滅一部柿分。例如臘：大命腸桿親菌丙稈酮酸繞脫氫狀酶復(fù)陜合體宣由三使種酶紋組成①丙僻酮酸皮脫氫座酶（謹E1）惹，廣以碎二聚皺體存鑄在技2平×9哪60繪0②硫菜辛酸眼轉(zhuǎn)乙搞?；e酶（周E2）億7概00灑00③二惹氫硫匙辛酸出脫氫荒酶（壯E3）然，色以二搞聚體援存在腸2×忙56碎00渴012版?zhèn)€E1二聚述體問2穗4×魯96龜00戴024遷個E2單體赤24長×7嗽00詞006個用E3二聚遲體快12蠅×5冒60坊00總分抖子量肌：5蝦60續(xù)萬6/儲26巴/2曬02慘359Zh創(chuàng)an避gJ奪G-齡Bi敞oc夾he塞mi倆st林ry第二仍節(jié)浸酶沖的分動類和任命名（二尺）按位照催惜化反臺應(yīng)的組類型芹分類國際趙酶學(xué)吃委員澇會制陰定的鄉(xiāng)豐“國掠際系華統(tǒng)分榨類法壟”將酶榴分為六大筆類:1.即氧化性還原培酶:催化園氧化憲還原劉反應(yīng)左的酶得。如，捕乳酸荷脫氫嚇酶催鏈化乳雷酸的芳脫氫霞反應(yīng)6/枕26依/2通02目360Zh透an抱gJ路G-經(jīng)Bi顆oc嶺he荷mi利st鋪ry2.刷轉(zhuǎn)移極酶：催化藝基團頁轉(zhuǎn)移俊反應(yīng)雅，即運將一除個底評物分妖子上圣的基夢團轉(zhuǎn)叫移到忍另一氏個底械物的洞分子綁上。例如怖，谷召丙轉(zhuǎn)礦氨酶刻催化肚的氨佩基轉(zhuǎn)恢移反峰應(yīng)：6/塵26蒼/2抽02嚷361Zh桐an小gJ返G-秧Bi猴oc賊he嚼m(xù)i普st過ry3.葬水解松酶：催化暫底物杜的加乖水分饅解反引應(yīng)。包括外淀粉竟酶、抖蛋白勾酶、鏈核酸尊酶及抗脂酶段等。例如澇，脂敞肪酶毛催化范的脂汗的水諸解反則應(yīng)：6/碑26栽/2酬02阿362Zh逼an外gJ吉G-燭Bi定oc尺he撲mi支st肌ry4.輔裂解霸酶（運裂合虛酶）命：催化么從底鄭物上疊移去艦?zāi)承┯芑鶊F欲而形營成雙披鍵的誤（非章水解別性）絕反應(yīng)粒或其有逆反祝應(yīng)的佳酶。主要陵包括窄醛縮艘酶、西水化援酶及敏脫氨鹽酶等末。例如圍：醛縮披酶裂昂解尚1,尾6匆-二銹磷酸利果糖崖，生勢成磷疫酸二勻羥丙攜酮和罩3-棉磷酸逐甘油示醛6/鴿26獅/2逐02移363Zh籠an險gJ芽G-參Bi遍oc栽he啄mi紹st根ry5.耽異構(gòu)債酶：催化姑同分戲異構(gòu)烏體的已相互醋轉(zhuǎn)變節(jié)，即底情物分縱子內(nèi)譯基團胃或原拖子的步重排倘過程的酶邁。例如搭，6-磷酸臘葡萄財糖異積構(gòu)酶訊催化慮的反晚應(yīng)。6/車26勻/2暑02肌364Zh獎an水gJ常G-盡Bi染oc悄he吧mi朽st晴ry6.適合成乒酶：又稱冊為連帳接酶鋒，能挽夠催查化C也-C梁、C侮-O闊、C測-N師以危及C栗-S晴鍵宰的形紙成反蛛應(yīng)。頭這類售反應(yīng)預(yù)必須舍與A玩TP趁分解召反應(yīng)桃相互隆偶聯(lián)劈燕。A包+爪B該+末AT瘋P昌+羊H-樣O-塊H驚==愚=A糞B掩+搬AD特P笛+P嗎i例如竄，丙珍酮酸議羧化尊酶催喂化的此反應(yīng)林。丙酮管酸慌+CO2草酰冬乙酸6/翻26卵/2芹02留365Zh汪an曠gJ衡G-筐B(yǎng)i梳oc誕he摘mi辨st果ry6/句26舍/2橡02直366Zh新an海gJ飛G-應(yīng)Bi撕oc降he絕mi做st集ry一、酶的快活性透部位（一消）酶脫的活令性中禮心酶分系子量功很大背，直可接與斯底物曬接觸泉和起貨催化遺作用忠的只豎是很腦小部燃分，訪占酶除總體股積的揉1%～2協(xié)%。酶活尼性中法心：盯酶分補子中望結(jié)合昆底物糊并起連催化友作用莫的部接位。包括單底物結(jié)合接部位窯、催依化部堆位?；钚詳D中心千出現(xiàn)甘頻率喊最高倆的氨沙基酸象殘基繩：S輔er縱、H呈is班、C霧ys茂、T焰yr辜（酪邁）、乒As魂p、儲Gl寇u、顧Ly題s。第三騙節(jié)六酶的悠催化鼻機理6/昆26營/2塌02志367Zh兵an狐gJ板G-鵝Bi占oc算he編mi新st赴ry6/鄰26認/2聞02屢368Zh徒an襪gJ騰G-傳Bi開oc糠he貿(mào)mi葡st桂ry酶的邀必需徐基團抱與非湖必需筋基團表現(xiàn)罷酶催孫化活瞞力所麻必需季的部寫分稱特為必需頭基團。必育需基戶團包喪括活慣性中檔心和讓維持己酶分展子高劇級結(jié)沉構(gòu)所專需的愈基團醉。酶分嬌子分薦為4晃類殘車基：（1磨）接減觸殘乘基：（2漆）輔無助殘澇基：（3移）結(jié)炎構(gòu)殘恒基：（4懷）非竭貢獻股殘基始：6/眉26余/2探02肢369Zh透an脂gJ脅G-夠Bi禍oc就he潔mi碧st打ry（1品）接膠觸殘戶基：結(jié)合霜基團雁，催量化基環(huán)團，貍負責肚底物魔的結(jié)汪合與趕催化捆。（2婆）輔評助殘喚基：不與跟底物哄接觸廁，輔針助酶喉與底憲物結(jié)飽合，腳協(xié)助貨接觸奶殘基懸。上述惱兩類勇殘基么構(gòu)成皺酶活皇性中皇心。（3也）結(jié)礎(chǔ)構(gòu)殘剪基：維持佳酶分絲式子三殺維構(gòu)興象，罪與酶戴活性莖相關(guān)競，但午不在促酶活識性中小心范頂圍內(nèi)梢，屬襪于酶敬活性夠中心帖以外師的必趙需殘饑基上述乖三類印殘基表統(tǒng)稱早酶的房誠必需突基團（4洪）非墨貢獻莫殘基易（非熔必需浪基團蜓）：與酶材活性塵無關(guān)坑，可奶能對虹酶的申免疫謎、活滴性調(diào)鼻節(jié)、赴運輸覽、壽屈命、易防止游降解路等方滋面起達作用庸。6/戰(zhàn)26睜/2卷02浴370Zh沒an皺gJ獨G-訴Bi創(chuàng)oc慰he滾mi貧st嶄ry6/外26癥/2毅02悶371Zh彩an劇gJ使G-掏Bi傻oc光he耕mi涼st鋪ry接觸弓殘基糧：R反1、燈R2許、R丘6、呼R8凍、R圣9、秘R1秒63輔助島殘基滿：R騾3、退R4漸、R騎5、統(tǒng)R1姥64串、R姐16暑5結(jié)構(gòu)葉殘基卻：R漆10拋、R師16箏2、姐R1互69非貢謎獻殘逢基：底其它6/汽26允/2永02菊372Zh汽an刺gJ側(cè)G-摸Bi坑oc錄he斃m(xù)i悄st勉ry（二賞）研丑究酶利活性關(guān)中心赴的方炊法酶活具性中攪心的竊測定1）亂切除難法2）罷化學(xué)電修飾蒼法：此方岔法是葉研究栽最早萍，應(yīng)例用最喘廣泛巷的方并法。遭原則龍上講專，酶腿分子靠側(cè)鏈唱上的騙各種音基團懸，如抄羧基司、羥旋基、綢巰基救和咪遲唑基跑等均特可由吼特定戚的化國學(xué)試間劑進岸行共坦價修穿飾。亡當它認被某丙一化兔學(xué)試皂劑修震飾后宅，若腦酶活范性顯慨著下跡降或吳喪失框，則守可初坐步推窗斷該愿基團睛為酶廊的必本需基哭團。6/串26寬/2怎02疑373Zh筒an載gJ好G-司Bi微oc嫩he扶mi貌st序ry6/退26將/2轎02掏374Zh宣an吉gJ涼G-志Bi孝oc漂he粗mi脈st家ry3）怠X射蜂線衍鞋射法采用抵X射斥線衍坑射法紋在研廣究酶稱活性鞠中心虛空間敬構(gòu)象藥時，截通常偷是將雞酶與蔑底物壘類似袋物或嘉專一出性抑刊制劑邪形成戰(zhàn)復(fù)合博物，箱而后米作X脂－射患線衍滿射分描析，埋從而丈得到臂有關(guān)修酶活懼性中宋心構(gòu)績象、演酶與始底物售的接誕觸狀拾況以庭及催方化機祥理的閣信息閱。6/蘇26軍/2爹02拾375Zh漠a(chǎn)n朱gJ撿G-愈Bi河oc秋he擾mi舍st縱ry二、影響順酶催專化效波率的倆有關(guān)侍因素（一探）底健物和興酶的鄰近織效應(yīng)動與定亂向效平應(yīng)變分蛋子間咽反應(yīng)役為分忙子內(nèi)噸反應(yīng)鄰近驗效應(yīng)售：酶與鉛底物袍形成暗中間層復(fù)合織物后峰使底傲物之辜間、殘酶的淋催化池基團禾與底蔑物之抬間相鳳互靠乏近，謙提高編了反鳴應(yīng)基李團的意有效動濃度扯。定向怎效應(yīng)南：由于脂酶的鉆構(gòu)象撤作用唱，底論物的泡反應(yīng)校基團望之間奴、酶溝與底弓物的刃反應(yīng)職基團烘之間步正確浪取向胡的效餐應(yīng)酶把搶底物蜓分子鑄從溶睜液中萬富集騎出來徹，使憤它們俯固定濕在活盜性中松心附削近，望反應(yīng)語基團墳相互世鄰近啟，同速時使榮反應(yīng)鳳基團銜的分距子軌鏟道以竹正確息方位單相互揪交疊球，反環(huán)應(yīng)易蕉于發(fā)植生。6/猴26鑼/2鍬02勿376Zh郵an讀gJ鍬G-取Bi囑oc掉he坡mi跡st梅ry6/警26輝/2陜02賠377Zh雄an蝴gJ姨G-佛B(yǎng)i首oc啊he廣mi劃st茄ry鄰近領(lǐng)效應(yīng)曾與定遣向效計應(yīng)對訴反應(yīng)禮速度糟的影愈響：①使借底物映濃度革在活倡性中做心附始近很蓬高②酶組對底朵物分俊子的繼電子逢軌道宮具有狂導(dǎo)向躬作用③酶誘使分暗子間判反應(yīng)合轉(zhuǎn)變訴成分劣子內(nèi)決反應(yīng)④鄰京近效逆應(yīng)和誕定向盯效應(yīng)迎對底慚物起銷固定黃作用6/托26幣/2橋02叨378Zh暖an對gJ等G-亞Bi饅oc坑he勾mi滅st丟ry（二禮）底物開的形匹變和斥誘導(dǎo)亞契合酶中桶某些碑基團棗可使擋底物艇分子劑的敏挪感鍵串中某淘些基府團的騾電子舒云密開度變毯化，乖產(chǎn)生山電子獎張力含，降要低了武底物敬的活缸化能①酶陰從低陳活性運形式孟轉(zhuǎn)變井為高懂活性差形式艇，利頂于催念化。②底利物形搞變，德利于輔形成夫ES客復(fù)合淘物。③底沒物構(gòu)勤象變骨化，炸過度單態(tài)結(jié)鮮構(gòu)，上大大惡降低盾活化踏能。6/客26鑄/2彎02繩379Zh虛an耐gJ臨G-關(guān)Bi顫oc玻he褲mi性st鎮(zhèn)ry（三懂）酸堿贈催化酶分震子的仇一些洪功能潮基團航起瞬蒙時質(zhì)流子供姨體或襯質(zhì)子催受體印的作廚用。如：As禁p、Gl慨u、Hi艙s、Ly鄰s、Se憑r、Ar菌g等影響仁酸堿抄催化股反應(yīng)末速度傘的兩凝個因厭素（1）酸大堿強污度(pK值）掙。組楊氨酸測咪唑葬基的止解離弟常數(shù)兵為6，在pH俱6附近嘗給出油質(zhì)子錯和結(jié)集合質(zhì)殿子能階力相插同，欺是最承活潑撕的催屢化基液團。（2）給廉出質(zhì)亞子或繭結(jié)合違質(zhì)子暑的速攝度。棟咪唑怕基最浪快，細半壽貪期小繳于10-1斤0秒6/過26肥/2咬02塑380Zh林an甘gJ予G-勵Bi宣oc混he爛mi膨st幣ry（四睬）共價惜催化酶作汁為親市核基戰(zhàn)團或滋親電陽基團占，與蟲底物褲形成細一個僵反應(yīng)雨活性遭很高避的共劉價中資間物ES。下頁講表列辨出能膚形成咸共價ES復(fù)合喬物的護某些富酶酶親姻核基岸團：Se徒r-織OH、Cy鳴s-S枯H、Hi奧s-騰N：底物拴親電帆中心酬：磷賽?；姡?P幕=O）、柄?；罚?C立=O）、船糖基犬（Gl政u-C昂-O不H）6/巴26嚇/2次02謊381Zh羊an逃gJ譯G-擠Bi趕oc才he耕mi禮st疏ry6/槍26道/2兩02報382Zh買an僚gJ槍G-乞Bi盈oc苗he恐mi袋st蒼ry（五叉）活性睬中心恰的微栽環(huán)境材效應(yīng)（1）疏壘水環(huán)庸境介電雕常數(shù)粥低，記加強底極性?；鶊F勝間的揮作用泊。（2）電鞠荷環(huán)宗境在酶衫活性阿中心嶺附近退，往醋往有暗一電言荷離世子，比可穩(wěn)軟定過享渡態(tài)蜂的離卻子6/衰26況/2榜02受383Zh拍an豆gJ盞G-復(fù)Bi頌oc悲he板mi盆st渣ry第四納節(jié)酶促核反應(yīng)慨動力漏學(xué)和甲影響健因素酶促恨反應(yīng)磨動力殺學(xué)：稅研究犬酶促膏反應(yīng)頑的速停度以盈及影岡響酶眨促反儉應(yīng)速衣度的簽各種訴因素權(quán)。影響櫻酶促罪反應(yīng)刑速度乳的因者素：底物凍濃度跌、酶暈濃度歲、p扇H、壩溫度炸、激絲式活劑氣與抑虛制劑蛇等。6/勤26依/2秋02雹384Zh卡an沖gJ捐G-薯Bi俘oc插he劃mi盒st編ry一、宴酶反鉗應(yīng)速音率反應(yīng)岡速率宰是以桐單位款時間晝內(nèi)反揚應(yīng)物傭或生挨成物悶濃度綿的改悔變來億表示多。隨著草反應(yīng)魯?shù)倪M元行，帖反應(yīng)思物逐卷漸消車耗，來分子蛙碰撞保的機攻會也屢逐漸遍漸小復(fù)，因犁此反己應(yīng)速匙率也殃隨著的減慢寬因為晨每一友瞬間效的反局應(yīng)速才率都敬不相慌同，朗所以姑用瞬千時速透率表聲示反微應(yīng)速腔率。6/迅26丹/2改02療385Zh舒an螺gJ換G-喉Bi司oc文he牢mi芳st覆ry反應(yīng)茅分子遷數(shù)和臟反應(yīng)暫級數(shù)1.銳反應(yīng)埋分子蓄數(shù)2.擁反應(yīng)歡級數(shù)反應(yīng)星分子貴數(shù)是背在反夠應(yīng)中幻玉真正煙相互遺作用擾的分舞子數(shù)犬目。辛有一橡個反誓應(yīng)的崖分子侵參加泳的反蝕應(yīng)為單分弊子反全應(yīng)。有工兩個折