生化檢驗質(zhì)控及失控分析處理

關于生化檢驗質(zhì)控及失控分析處理第1頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三室內(nèi)質(zhì)控是由實驗室的工作人員采用一系列統(tǒng)計學的方法，連續(xù)地評價本實驗室測定工作的可靠程度，判斷檢驗報告是否可發(fā)出的過程。室內(nèi)質(zhì)控的目的是檢測、控制本實驗室測定工作的精密度，并檢測其準確度的改變，提高常規(guī)測定工作的批間、批內(nèi)標本檢測結(jié)果的一致性。一、室內(nèi)質(zhì)量控制目的第2頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三檢測樣本報告質(zhì)控品結(jié)果推斷第3頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三二、室內(nèi)質(zhì)量控制的主要方法（一）室內(nèi)質(zhì)控的準備工作人員培訓普及質(zhì)控知識、培養(yǎng)技術骨干。建立標準化操作規(guī)程制定一系列SOP文件儀器的檢定與校準儀器按要求進行校準及項目要求的校準頻度質(zhì)控品的準備第4頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三質(zhì)控品的準備1）質(zhì)控品的種類

根據(jù)質(zhì)控品物理性狀不同分為凍干質(zhì)控品、液體質(zhì)控品和混合血清根據(jù)有無測定值分為定值質(zhì)控品和非定值質(zhì)控品。第5頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三

2）質(zhì)控品的特性

●人血清基質(zhì)，以減少基質(zhì)效應；●

無傳染性；

●添加物的數(shù)量應少而純；

●成分分布均勻，瓶間變異小;（酶類項目瓶間CV%

應小于2%;其它分析物CV%應小1%）

●到實驗室后的有效期應在1年以上；

●凍干品復溶后成分穩(wěn)定;（2~8℃時不少于24h，-20℃時不少于20天;某些不穩(wěn)定成分(如膽紅素、ALP等)在復溶后前4h

的變異應小于2%;）

第6頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三

3）質(zhì)控品的正確使用與保存

●嚴格按說明書操作；

●確保凍干質(zhì)控品復溶所用溶劑的質(zhì)量；●復溶時所加溶劑的量要準確，輕輕振搖，內(nèi)容物完全溶解，切忌劇烈振搖；

●過期的質(zhì)控品不能使用；

●質(zhì)控品要在與患者標本同樣測定條件下進行分析測定。第7頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三1、確定質(zhì)量目標質(zhì)量目標是實驗室選用的質(zhì)控方法（包括質(zhì)控規(guī)則和質(zhì)控品測定的個數(shù)）所需達到的目標，可以用總允許誤差的形式表示。目前中國尚未確立各項目的總允許誤,可參考美國和歐洲提出的各項目可接受的允許誤差范圍。

（二）室內(nèi)質(zhì)控的實際操作第8頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三2、設定靶值和控制限

實驗室應使用自己現(xiàn)行的測定方法，測定新批號質(zhì)控品各個項目的靶值，定值質(zhì)控品的標定值只能作為確定靶值的參考。同時應確定新批號質(zhì)控品的控制限，控制限通常以標準差倍數(shù)表示。第9頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三

1.穩(wěn)定性較長的質(zhì)控品

（1）根據(jù)至少20天的20次質(zhì)控測定結(jié)果，計算出平均數(shù)和標準差，作為暫定靶值和暫定標準差。（2）以暫定靶值和標準差作為下一月室內(nèi)質(zhì)控圖的靶值和標準差進行室內(nèi)質(zhì)控。（3）一個月結(jié)束后將該月的在控結(jié)果與前20個質(zhì)控測定結(jié)果匯集在一起，計算累積平均數(shù)和累積標準差（第一個月）；作為下一個月質(zhì)控圖的靶值和標準差。第10頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三（4）重復上述操作過程，連續(xù)3至5個月，以最初20個數(shù)據(jù)和至5個月在控數(shù)據(jù)匯集的所有數(shù)據(jù)計算累積平均數(shù)和標準差，以此作為該質(zhì)控品有效期內(nèi)的常用靶值和常用標準差。（5）更換新批號質(zhì)控品時，新批號質(zhì)控品應和現(xiàn)用批號的質(zhì)控品作平行檢測，按上述（1）～（4）步驟建立靶值和標準差。第11頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三

2.穩(wěn)定性較短的質(zhì)控品

在3～4天內(nèi)，每天分析每個水平的質(zhì)控品3～4瓶，每瓶進行2～3次重復測定，計算平均數(shù)和標準差，作為該質(zhì)控品有效期內(nèi)的靶值和標準差。3.特殊情況的處理

不是每天開展的、有效期較短的試劑盒項目，采用Crubbs氏法，只需連續(xù)測定3次即可對第3次檢驗結(jié)果進行檢驗和控制。

第12頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三3、質(zhì)控圖的繪制

根據(jù)控制物的均值和控制限繪制Levy-Jennings質(zhì)控圖又稱常規(guī)質(zhì)控圖，是目前國內(nèi)外廣泛采用的一種常規(guī)室內(nèi)質(zhì)量控制方法。（13s為控制規(guī)則，對誤差識別的靈敏度不夠;12s為控制規(guī)則，對誤差識別的特異性不夠。）第13頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三－2s+2s+3s－3s

質(zhì)控圖第14頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三4、質(zhì)控規(guī)則選擇

使用多規(guī)則質(zhì)控技術可揭示一些潛在的質(zhì)量問題。其中有些規(guī)則對隨機誤差敏感，有些對系統(tǒng)誤差敏感。1）方法

Westgard用一組質(zhì)控規(guī)則來判定分析是否在控，推薦使用六個不同的規(guī)則來判斷分析的可接受性，即12S、13S、22S、R4S、41S和10規(guī)則，由此提高了系統(tǒng)誤差的檢出概率。質(zhì)控圖的制作方法同Levey－Jennings質(zhì)控圖的制作。第15頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三Westgard多規(guī)則的邏輯示意圖質(zhì)控數(shù)據(jù)否12S→→→→→→在控，接受分析批，發(fā)報告是否 否 否否 ↑否 13S→→→22S→→→R4S→→→41S→→→10x

是是是是是

失控

，拒發(fā)報告第16頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三5、質(zhì)控樣本檢測

實驗室應規(guī)定：（1）使用幾個濃度質(zhì)控品（2）每個質(zhì)控品測定頻次

批長度：分析批是一個區(qū)間（如：一段時間或測量樣本量），預期在此區(qū)間內(nèi)檢測系統(tǒng)的準確度和精密度是穩(wěn)定的。第17頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三（3）質(zhì)控品的位置，須考慮分析方法的類型，可能產(chǎn)生的誤差類型。--在用戶規(guī)定批長度（UDRL）內(nèi)，進行不連續(xù)樣品檢驗，則質(zhì)控品最好放在結(jié)束標本檢驗前，可檢出偏倚。--質(zhì)控品平均分布于整個批內(nèi)，可監(jiān)測漂移。--隨機插于患者標本中，可檢出隨機誤差。注：應在報告患者結(jié)果前評價質(zhì)量控制結(jié)果。質(zhì)控品放在校準品后面，得到的質(zhì)控結(jié)果是對分析不精密度的不真實的估計，對批量標本檢測時出現(xiàn)的偏倚或漂移無法作出估計。第18頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三1）填寫失控報告上報實驗室負責人；2）簡單迅速地回顧整個操作過程，分析查找最可能發(fā)生誤差的因素。質(zhì)控品試劑校準品分析儀器其他如環(huán)境、人員等因素6、失控原因分析及糾正措施第19頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三判斷誤差類型和失控原因的關系一般影響系統(tǒng)誤差的因素有：（1）使用不同批號的試劑或校準品（2）試劑或校準品在配制過程中發(fā)生錯誤（3）試劑或校準品被污染或變質(zhì)（4）反應溫度產(chǎn)生變化（5）加樣器部分堵塞造成加樣不足（6）相關的反應參數(shù)被修改

……第20頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三影響隨機誤差的因素（1）標本或試劑管路中存在氣泡（2）攪拌機構(gòu)被污染（3）清洗機構(gòu)存在故障（4）交叉污染引起（5）比色燈衰老造成光能量不均勻

……

第21頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三失控單項目多項目單水平雙(多)水平隨機誤差質(zhì)控品試劑問題新開質(zhì)控品校準問題質(zhì)控問題人為因素重測質(zhì)控糾正位置重新校準更換試劑監(jiān)控糾正糾正更換試劑培訓考核試劑問題(共用輔助試劑)儀器問題環(huán)境問題操作問題保養(yǎng)維護變質(zhì)污染配制錯誤放錯位置變質(zhì)污染人為因素過期漂移配錯或放錯位置變質(zhì)污染光路吸樣針交叉污染溫度水質(zhì)未按SOP操作失控分析基本線路圖新開質(zhì)控品重新溶解質(zhì)控第22頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三圖13）質(zhì)控圖形分析第23頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三圖2第24頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三圖3第25頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三圖4第26頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三圖5第27頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三圖6第28頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三圖7第29頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三圖8第30頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三圖9第31頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三4）糾正措施①

重新測定同一質(zhì)控品（圖1-2），此步主要是用以查明人為誤差，每一步都應認真仔細操作，以查明失控原因；另外，這一步還可以查出隨機誤差，如是隨機誤差則重測的結(jié)果應在允許范圍內(nèi)(在控)，若重測結(jié)果仍不在允許范圍則可以進行下一步操作。原則：從易到難第32頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三②新開一瓶質(zhì)控品（圖3），重測失控項目如果新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來那瓶質(zhì)控血清可能過期或在室溫放置時間過長而變質(zhì)，或者被污染，若結(jié)果仍不在允許范圍，則進行下一步。③新開一批質(zhì)控品（圖3），重做失控項目，若結(jié)果在控，說明前一批血清可能都有問題，檢查它們的有效期和貯存環(huán)境，以查明問題所在，如果結(jié)果仍不在允許范圍，則進行下一步。

第33頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三④重新校準（圖4-7），重測失控項目。用新的校準液校準儀器，排除校準液因素。⑤更換試劑（圖6-8），用同一批號或不同批號，重測失控項目。排除試劑因素。第34頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三

⑦儀器因素（圖8），檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否需要更換，比色杯（電極）是否需要清洗或更換，對儀器進行清洗等維護，另外還要檢查試劑此時可更換試劑以查明原因，如果結(jié)果仍不在允許范圍，則進行下一步。

第35頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三

⑧請專家?guī)椭?，如果前六步都未能得到在控結(jié)果，那可能是儀器或試劑的原因，只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術支援了。第36頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三質(zhì)控結(jié)果落在±2S線上就認為失控質(zhì)控結(jié)果超出±2S就馬上重做，并抹去原結(jié)果，點上在控結(jié)果以VIS≤80為目標，用CCV去計算控制范圍直接用廠商的定值及允許范圍作為控制圖上的靶值和標準差5）幾種不恰當?shù)淖龇ǖ?7頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三7、室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的管理

1）每月室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理每個測定項目原始質(zhì)控數(shù)據(jù)的平均數(shù)、標準差和變異系數(shù)。每個測定項目在控數(shù)據(jù)的平均數(shù)、標準差和變異系數(shù)。測定項目所有在控數(shù)據(jù)的累積平均數(shù)、s和CV。第38頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三第39頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三2）每月室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的保存所有項目原始質(zhì)控數(shù)據(jù)及質(zhì)控圖。當月的失控報告單(包括違背哪項失控規(guī)則，失控原因，采取的糾正措施)。第40頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三每個月末將當月的所有質(zhì)控數(shù)據(jù)匯總整理后，應將以下匯總表上報實驗室負責人①當月所有測定項目質(zhì)控數(shù)據(jù)匯總表；②所有測定項目該月的失控情況匯總表。

3）每月上報的質(zhì)控數(shù)據(jù)圖表第41頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三第42頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三第43頁，講稿共47頁，2023年5月2日，星期三4.室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)的周期性評價