現(xiàn)代五分類血細(xì)胞分析儀的原理和使用

關(guān)于現(xiàn)代五分類血細(xì)胞分析儀的原理和使用第1頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

血液分析儀,臨床血液一般檢查最常用儀器。50年代，美國庫爾特（W.H.Coulter）發(fā)明電子血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀并申請專利。

1982年，Technicon公司生產(chǎn)了H6000型血液細(xì)胞，分析儀器，應(yīng)該是首款具有白細(xì)胞五分類能力的儀器。同時(shí)代日本日立公司推出圖像分析法的白細(xì)胞分析儀HITACHI8200型，僅僅是用于完成白細(xì)胞血片分類的儀器，沒有其他血細(xì)胞計(jì)數(shù)分析能力。血液分析儀優(yōu)勢檢測項(xiàng)目多速度快精度高易操作第2頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

血液細(xì)胞分析儀是醫(yī)院檢驗(yàn)科、化驗(yàn)室的常規(guī)設(shè)備之一，也是發(fā)展最快、應(yīng)用最普及的檢驗(yàn)儀器，當(dāng)前血液細(xì)胞分析儀分為三分群和五分類兩種。國際市場上五分類血液細(xì)胞分析儀已經(jīng)成為發(fā)達(dá)國家醫(yī)院血液臨床檢驗(yàn)的主流產(chǎn)品，但由于五分類血液細(xì)胞分析儀需集光學(xué)、電子、氣路、液路、計(jì)算機(jī)等技術(shù)于一體，技術(shù)含量非常高，縱觀全球，也僅有美國、法國、日本等國家的6個(gè)廠家能夠生產(chǎn)真正意義上的五分類血液細(xì)胞分析儀。2006年4月深圳邁瑞B(yǎng)C-5500推出之前，由于國內(nèi)沒有掌握該類產(chǎn)品生產(chǎn)制造的核心技術(shù)，因而在中國市場銷售的該類產(chǎn)品由國外品牌所壟斷，價(jià)格都比較昂貴，導(dǎo)致該類產(chǎn)品不能在中國醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中大范圍推廣應(yīng)用，BC-5500的推出推動(dòng)了五分類血液細(xì)胞分析儀在國內(nèi)的臨床應(yīng)用，提高整個(gè)國內(nèi)血液細(xì)胞檢測的臨床應(yīng)用水平。第3頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三一、常見血細(xì)胞分析儀品牌1、庫爾特2、希思美康3、邁瑞4、雅培5、光電6、拜耳7、……第4頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三二、五分類血細(xì)胞分析儀的檢測原理（一）、儀器基本結(jié)構(gòu)1、機(jī)械系統(tǒng)2、電學(xué)系統(tǒng)3、光學(xué)系統(tǒng)

第5頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（二）、分類計(jì)數(shù)的基本原理1、電阻抗的利用2、激光技術(shù)、射頻技術(shù)、組織化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用第6頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞五分類技術(shù)是一種綜合應(yīng)用光學(xué)、機(jī)械學(xué)、流體力學(xué)、電子計(jì)算機(jī)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等學(xué)科技術(shù)，讓被測溶液流經(jīng)測量區(qū)域并逐一檢測其中每一個(gè)細(xì)胞的物理和化學(xué)特性從而對高速流動(dòng)的細(xì)胞或亞細(xì)胞進(jìn)行快速定量測定和分析的方法。它一秒鐘能分析幾千個(gè)細(xì)胞，并同時(shí)測定細(xì)胞的多個(gè)參數(shù)。阻抗法也在五分類血細(xì)胞儀中被采用，即所謂的鞘流阻抗法。第7頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三1、電阻抗原理，又稱庫爾特原理

孔電流真空內(nèi)電極外電極

-+

血細(xì)胞懸液標(biāo)本杯第8頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三鞘流技術(shù)聯(lián)合電阻抗的應(yīng)用第9頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三2、激光技術(shù)、射頻技術(shù)、組織化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用

五分類儀器與三分類儀器的主要區(qū)別在于：白細(xì)胞不再粗略地以大小來進(jìn)行分群，而是采用激光技術(shù)、組織化學(xué)技術(shù)、射頻技術(shù)等等來對白細(xì)胞進(jìn)行分類。根據(jù)儀器廠家的不同，不同品牌的儀器采用了不同的分類計(jì)數(shù)。第10頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三在激光技術(shù)中目前有半導(dǎo)體激光和氣體激光。半導(dǎo)體激光功率弱,但作為細(xì)胞分類自己足夠;氣體激光功率強(qiáng)。二者比較半導(dǎo)體激光具有壽命長(7~10年)體積小,啟動(dòng)快,耗電小,對穩(wěn)壓要求低,更為經(jīng)濟(jì)適用等特點(diǎn)。第11頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（1）電阻抗、高頻電導(dǎo)及激光散射聯(lián)合檢測法即庫爾特公司的VCS技術(shù)。V:代表體積容量。電阻法微孔技術(shù)應(yīng)用于計(jì)數(shù)血細(xì)胞和測定其體積的大小。C:代表傳導(dǎo)性即電導(dǎo)(conductivity),指一束電磁波或稱射頻,穿透細(xì)胞的傳導(dǎo)性,它取決于細(xì)胞的大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu);經(jīng)校正后的傳導(dǎo)性叫opacity即“不透明性”,這時(shí)不再反映細(xì)胞大小,而是反映細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu),像核的大小,核漿比例和密度等。S:代表散射(scatter),指在不同角度測得的散射光強(qiáng)度。由于各類細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)不同和顆粒大小不同而對光的散射各異,進(jìn)而區(qū)分各類細(xì)胞。第12頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三容量、電導(dǎo)、光散射（volume，conductivity，scatter,VCS）法原理細(xì)胞體積技術(shù)（測量細(xì)胞大?。╇妼?dǎo)性技術(shù)（測量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)）光散射技術(shù)（測量細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞核和細(xì)胞顆粒）。第13頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

體積電導(dǎo)光散射第14頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三VCS可顯示3種細(xì)胞散點(diǎn)圖DF1（體積值和散射光值）DF2（體積值和電導(dǎo)值）DF3（體積值和電導(dǎo)值）第15頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三儀器在單一通道上同時(shí)用這三種方法對同一白細(xì)胞進(jìn)行測量,避免了有些血液分析儀要設(shè)計(jì)好幾個(gè)通道或加染色試劑的麻煩。采用VCS技術(shù)的儀器主要是Coulter公司的STKS型、MAXM型以及Gen.s型五分類血液分析儀。MAXM型和Gen.s型可計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞,Gen.s型可選配自動(dòng)制血片機(jī)。以上幾種型號(hào)還可直接計(jì)數(shù)CD4和CD8淋巴細(xì)胞,并算出其比率。第16頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（2）光散射和細(xì)胞化學(xué)染色聯(lián)合應(yīng)用

Bayer公司的的DVIA120型和2120型血細(xì)胞分析儀、Sysmex公司的SF-3000型、邁瑞的BC-5500血細(xì)胞分析儀均采用了該原理進(jìn)行工作。利用激光散射和過氧化物酶染色技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分類。利用光散射的原理計(jì)數(shù)血細(xì)胞,因細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)不同,在不同角度上散射光有差別,有助于對白細(xì)胞的區(qū)分。第17頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三白細(xì)胞化學(xué)染色在稀釋液中加入過氧化酶(MPO)的底物及顯色劑,根據(jù)白細(xì)胞對MPO的反應(yīng)分類。中性細(xì)胞MPO為強(qiáng)陽性,嗜酸性細(xì)胞陽性更強(qiáng),單核細(xì)胞為弱陽性,淋巴細(xì)胞陰性,嗜堿性細(xì)胞亦為陰性,故綜合光散射和細(xì)胞化學(xué)染色的特點(diǎn),可得到二維或三維圖像-----不同顏色的散點(diǎn)圖。由于嗜堿性細(xì)胞不含此酶,不能被檢測,因此一些儀器專門設(shè)置了嗜堿性細(xì)胞檢測系統(tǒng),它的測量通道采用時(shí)間差的方法,與RBC、PLT的測量系統(tǒng)共用一個(gè)通道。第18頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（3）電阻抗和射頻電導(dǎo)聯(lián)合檢測法

這種方法是分別采用四個(gè)檢測系統(tǒng)來檢測不同類型的細(xì)胞①淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞檢測系統(tǒng):在細(xì)胞懸浮液中加入溶血?jiǎng)┦辜t細(xì)胞溶解,而使白細(xì)胞保持完整細(xì)胞漿及核形態(tài)近似于生理狀態(tài),當(dāng)這些細(xì)胞通過檢測系統(tǒng)時(shí),對白細(xì)胞進(jìn)行電阻抗法(測量細(xì)胞體積)和射頻電導(dǎo)法(檢測細(xì)胞核和顆粒密度)的聯(lián)合檢測,結(jié)果將細(xì)胞分成淋巴細(xì)胞、單核細(xì)和中性粒細(xì)胞三個(gè)群體。第19頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三②嗜酸性細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞兩種檢測系統(tǒng):在細(xì)胞懸浮液中加入特殊的溶血?jiǎng)?除嗜酸性細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞外,其他細(xì)胞均被溶解或萎縮再對保持完整的嗜酸性細(xì)胞或嗜堿性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。③幼稚細(xì)胞檢測系統(tǒng):在細(xì)胞懸浮液中加入硫化氨基酸,由于占位不同,結(jié)合在幼稚細(xì)胞的氨基酸比成熟細(xì)胞多,且對溶血?jiǎng)┯械挚棺饔?當(dāng)加入溶血?jiǎng)r(shí),成熟細(xì)胞被溶解,只保留著可能存在的幼稚細(xì)胞用來計(jì)數(shù)。Sysmex公司的SE-9000血細(xì)胞分析儀就是采用這種方法進(jìn)行五分類的。第20頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三電阻抗與射頻法能透入細(xì)胞內(nèi)，測量核的大小及顆粒的多少。RF:射頻電流細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)信息DC:直流電細(xì)胞大小的信息第21頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（4）多角度激光偏振光散射檢測法

儀器使用鞘流液將標(biāo)本血稀釋,稀釋后白細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài),只有嗜堿性細(xì)胞由于其吸濕的特性而使細(xì)胞結(jié)構(gòu)有輕微改變。紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白在高滲透壓的作用下,從細(xì)胞中分離出來。而鞘流的水分則進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi),使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)仍然完整,它與鞘流的折光系數(shù)相同,不影響白細(xì)胞的檢測。儀器同時(shí)從四個(gè)角度來檢測通過激光束的細(xì)胞所產(chǎn)生的散射光,因?yàn)榧?xì)胞大小、折射指數(shù)、核形、核漿比率以及顆粒性質(zhì)等,均可影響在不同角度測得的散射光量。第22頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三0°：前角光散射（1°～3°），可粗略測定細(xì)胞大小。

10°：狹角光散射（7°～11°），可測定細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)相對特征。

90°：垂直光散射（70°～110°），測定細(xì)胞核分葉情況。

90°：消偏振光散射（70°～110°），區(qū)分嗜酸性粒細(xì)胞與其他細(xì)胞。

第23頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第24頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三值得一提的是市面上偶見假五分類血球儀。假五分類血球儀則不用上述原理分析血細(xì)胞成分,更多的使用電腦軟件的分析而得出五分類結(jié)果。分辨是否真五分類技術(shù)的血球儀，如果是試劑法,試劑不應(yīng)該少于四種,如果是激光法,試劑不少于三種。第25頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三三、五分類血細(xì)胞分析儀的使用1、自動(dòng)進(jìn)樣2、手工進(jìn)樣3、末梢血、靜脈血的可選性4、結(jié)果的判斷5、質(zhì)量控制6、儀器的校準(zhǔn)準(zhǔn)品的來源、什么情況下需要校準(zhǔn)？如何校準(zhǔn)？7、儀器的維護(hù)第26頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三標(biāo)本的重要性1、高檔的儀器并不意味著結(jié)果一定可靠。2、標(biāo)本的采集直接關(guān)系到結(jié)果的準(zhǔn)確性。壓脈帶的使用時(shí)間、抗凝劑的影響、真空管的使用、血量的控制、標(biāo)本放置的溫度和時(shí)間、標(biāo)本的混勻等等。第27頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三檢驗(yàn)報(bào)告的審核1、當(dāng)日質(zhì)控是否在控。2、比較報(bào)告各參數(shù)之間是否有矛盾。3、注意觀察多個(gè)測定標(biāo)本相關(guān)參數(shù)是否有一致的系統(tǒng)誤差。4、報(bào)告與臨床是否符合，不符合時(shí)可能存在的原因。如PLT過低、過高。5、什么樣的結(jié)果必須手工復(fù)查？如何復(fù)查？復(fù)查完畢后的報(bào)告簽發(fā)模式。6、直方圖、散點(diǎn)圖的利用。第28頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞自動(dòng)分析異常結(jié)果人工顯微鏡復(fù)檢1、鏡檢復(fù)核的現(xiàn)狀血細(xì)胞分析儀仍只能作為CBC分析的一種過篩手段，當(dāng)遇到可疑情況，尤其是在病理?xiàng)l件下，其測定結(jié)果并不可靠，需要人工以顯微鏡復(fù)查

，這已是不爭的事實(shí)。但是，國內(nèi)目前各醫(yī)院檢驗(yàn)科對CBC異常結(jié)果基不或很少進(jìn)行人工顯微鏡復(fù)查，這種現(xiàn)象在經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)的沿海地區(qū)更是普遍。有資料顯示，國內(nèi)各醫(yī)院

CBC實(shí)際鏡檢率在0%～15%，大部分醫(yī)院鏡檢率<5%或者不鏡檢。這種現(xiàn)象引發(fā)了不少的醫(yī)療投訴、糾紛或事故。分析這類題出現(xiàn)的原因可能有:(1)認(rèn)識(shí)不夠，認(rèn)為血細(xì)胞分析儀尤其是五分群的血細(xì)胞分析儀的檢測結(jié)果可靠，不需要復(fù)查；(2)工作量大；(3)怕麻煩，圖省事；(4)目前沒有一個(gè)可參照的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，即對CBC結(jié)果的人工復(fù)查的標(biāo)準(zhǔn)、內(nèi)容、方法及程序尚無明確的規(guī)定。第29頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

需要鏡檢的標(biāo)準(zhǔn)目前即使是最先進(jìn)的血細(xì)胞分析儀也不能完全取代人工鏡下白細(xì)胞分類。因此，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)所使用的儀器型號(hào)、性能和實(shí)驗(yàn)室條件，制定出手工復(fù)檢方案，建立涂片復(fù)檢制度。只有在WBC、Hb、Plt均在正常范圍內(nèi)，細(xì)胞散點(diǎn)圖和直方圖均正常，儀器無報(bào)警顯示情況下，儀器分類結(jié)果才可作為篩選數(shù)據(jù)報(bào)告。通過鏡檢達(dá)到的目的通過顯微鏡檢查，核實(shí)儀器出現(xiàn)的各類報(bào)警是否真實(shí)存在，有無原始及幼稚細(xì)胞，有無血細(xì)胞形態(tài)異常，有無小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、微小血凝塊、巨大血小板、血小板聚集等，并估計(jì)白細(xì)胞、血小板數(shù)量，必要時(shí)對結(jié)果進(jìn)行校正后才能發(fā)出報(bào)告（如有核紅細(xì)胞存在時(shí)對白細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行校正）。

第30頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞自動(dòng)分析與臨床的緊密結(jié)合

CBC檢測結(jié)果最終是用于臨床患者的診斷、治療、預(yù)后監(jiān)測或用于受檢者的健康狀況的評估。因此，當(dāng)遇檢測結(jié)果異常時(shí)，一方面可咨詢受檢者當(dāng)事人/親屬或通過實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)(LIS)查受檢者檢測記錄外；另一方面與臨床聯(lián)系非常重要，因?yàn)榕R床醫(yī)生更加了解受檢者/患者的病情與實(shí)際情況，通過與臨床的聯(lián)系，可了解并證實(shí)異常CBC結(jié)果與患者病情的符合程度或因其他原因如輸液或患者標(biāo)本張冠李戴引起的CBC結(jié)果異常?？傊?，與臨床聯(lián)系可起到事半功倍的效果。

第31頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三1、血細(xì)胞直方圖

橫坐標(biāo)為血細(xì)胞體積大小縱坐標(biāo)為不同體積細(xì)胞的相對頻率。

第32頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三結(jié)果的判斷第33頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三白細(xì)胞直方圖

%3590160300400450(fl)第34頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三紅細(xì)胞直方圖

100200300400(fl)%第35頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血小板直方圖直方圖在2～28fl（不同儀器不一）。

102030(fl)%第36頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三散點(diǎn)圖第37頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三1、白細(xì)胞直方圖正常白細(xì)胞直方圖異常白細(xì)胞直方圖第38頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三2、紅細(xì)胞直方圖（1）正常紅細(xì)胞分布：50～200fl（2）異常紅細(xì)胞直方圖第39頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三3、血小板直方圖正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布：2～30fl分布，主要在2～15fl。

異常血小板直方圖第40頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血液分析儀江蘇大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院朱偉第41頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞分析儀教學(xué)要求掌握血細(xì)胞分析儀的概念、庫爾特原理、儀器的基本結(jié)構(gòu)。熟悉聯(lián)合檢測型血細(xì)胞分析儀器的檢測原理，網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測原理，血紅蛋白檢測原理、儀器性能評價(jià)和維護(hù)。了解血細(xì)胞分析儀的分類、性能指標(biāo)、常見故障和排除及進(jìn)展。第42頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三一、血細(xì)胞分析儀概述血細(xì)胞分析儀(Bloodcellanalyzer,BCA)是指對一定體積全血內(nèi)血細(xì)胞異質(zhì)性進(jìn)行自動(dòng)分析的臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器。又稱血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀(ABCC)、血液學(xué)自動(dòng)分析儀(AHA)。ABCC代表早期的低檔次BCA，AHA外延過大。第43頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三發(fā)展史

手工計(jì)數(shù)儀器簡單計(jì)數(shù)兩分群三分群五分群五分群＋網(wǎng)織紅第44頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三20世紀(jì)40年代末，電阻抗法微粒子計(jì)數(shù)專利50年代，CoulterModelA型用于臨床60年代，測定參數(shù)達(dá)7項(xiàng)70年代，全血細(xì)胞計(jì)數(shù)（CBC）80年代，雙通道、白細(xì)胞2~3分群、五分群90年代以來，多功能、多參數(shù)、流水線第45頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

（Bloodcellcounter)Coulterprinciple：微小粒子通過特殊的小孔時(shí)可產(chǎn)生電阻變化，并根據(jù)這種電阻變化特點(diǎn)將其應(yīng)用于微小粒子的粒度測量和計(jì)數(shù)上。1953年獲得美國發(fā)明專利WallanceH.Coulter

昨天第46頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀1958年，庫爾特電子（CoulterElectronics）公司成立電阻式血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理。單參數(shù)測定儀器，只能對血液中的紅細(xì)胞和白細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且需人工切換。昨天第47頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三日本東亞公司（SYSMEX）CC-1001日本TOY公司1962年生產(chǎn)的CC-1001型血球計(jì)數(shù)儀昨天第48頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血紅蛋白檢測功能的增加具有單獨(dú)的血紅蛋白比色計(jì)，將加入專用的溶血?jiǎng)┖蟮臉颖具M(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)后再將其倒入血紅蛋白比色計(jì)，即可得到比色法測定的血紅蛋白結(jié)果。當(dāng)時(shí)國內(nèi)使用最多的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是CoulterZF型和血紅蛋白計(jì)。此時(shí)就能檢測MCV、HCT、MCH、MCHC。昨天第49頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三1975年日本東亞公司（TOA，Sysmex的前身）推出了包含以上7個(gè)參數(shù)的全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器CC－710和CC－720型。昨天第50頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血小板自動(dòng)計(jì)數(shù)儀器使用特殊離心速度將紅細(xì)胞和白細(xì)胞進(jìn)行沉淀，使上層血漿中盡量保存最為豐富的血小板，然后應(yīng)用這種PRP血漿進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)。如SysmexPA-701型和CONTRAVE1000型，此類儀器多配有專用PRP離心機(jī)。右圖為TOAPLT-100型血小板計(jì)數(shù)儀和離心機(jī)。昨天第51頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

血小板計(jì)數(shù)功能的增加血細(xì)胞分析儀將血小板計(jì)數(shù)這一重要功能合并到全血細(xì)胞計(jì)數(shù)（CBC）范圍內(nèi)。將血小板按體積大小劃分到64個(gè)通道，分別累加體積大小不同的血小板數(shù)量。除了給出血小板數(shù)量外，還提供了兩個(gè)新的參數(shù)，平均血小板體積(MPV)和血小板體積分布寬度（PDW）。昨天SysmexCC-800

第52頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三白細(xì)胞分類功能的增加

二分類1970年起Coulter公司首先推出了兩分類的S-PLUS系列儀器。1980年又推出了T系列，都是可進(jìn)行白細(xì)胞兩分類的儀器。SysmexF800和F820型也是根據(jù)白細(xì)胞體積分布直方圖進(jìn)行粗略兩分群的儀器。昨天SysmexF820第53頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三三分群時(shí)代經(jīng)過特殊溶血?jiǎng)┨幚淼陌准?xì)胞，在白細(xì)胞分布直方圖上出現(xiàn)兩個(gè)明顯的細(xì)胞分布峰。體積較小的一群細(xì)胞稱為淋巴細(xì)胞群（LYM）。右側(cè)體積較大的稱為粒細(xì)胞群（GRAN）。位于兩者之間的稱為中間細(xì)胞群（MID），中間細(xì)胞群一般指含有嗜酸粒細(xì)胞，嗜堿粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的細(xì)胞群。今天第54頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三五分類血液分析儀BECKMENCOULTE：VCSABBOTT：MAPSS(多角度偏振光散射)

ADVIA：POXSYSMEX：核酸熒光染色今天第55頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

血液細(xì)胞分析儀是醫(yī)院檢驗(yàn)科、化驗(yàn)室的常規(guī)設(shè)備之一，也是發(fā)展最快、應(yīng)用最普及的檢驗(yàn)儀器，當(dāng)前血液細(xì)胞分析儀分為三分群和五分類兩種。國際市場上五分類血液細(xì)胞分析儀已經(jīng)成為發(fā)達(dá)國家醫(yī)院血液臨床檢驗(yàn)的主流產(chǎn)品，但由于五分類血液細(xì)胞分析儀需集光學(xué)、電子、氣路、液路、計(jì)算機(jī)等技術(shù)于一體，技術(shù)含量非常高，縱觀全球，也僅有美國、法國、日本等國家的6個(gè)廠家能夠生產(chǎn)真正意義上的五分類血液細(xì)胞分析儀。

2006年4月深圳邁瑞B(yǎng)C-5500推出之前，由于國內(nèi)沒有掌握該類產(chǎn)品生產(chǎn)制造的核心技術(shù)，因而在中國市場銷售的該類產(chǎn)品由國外品牌所壟斷，價(jià)格都比較昂貴，導(dǎo)致該類產(chǎn)品不能在中國醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中大范圍推廣應(yīng)用，BC-5500的推出推動(dòng)了五分類血液細(xì)胞分析儀在國內(nèi)的臨床應(yīng)用，提高整個(gè)國內(nèi)血液細(xì)胞檢測的臨床應(yīng)用水平。第56頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三一、常見血細(xì)胞分析儀品牌1、庫爾特2、希思美康3、邁瑞4、雅培5、光電6、拜耳7、……第57頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三庫爾特COULTERGEN.SSystem第58頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三庫爾特5-diff系統(tǒng)第59頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三COULTERHmX血液分析儀第60頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三SYSMEXXE-5000型五分類血細(xì)胞分析儀第61頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三XT-1800i五分類血液細(xì)胞分析儀第62頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三ABBOTTCELL-DYN3200五分類血液分析第63頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三光電8222k血細(xì)胞分析儀第64頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三DIANA-5儀器第65頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三BC-5500五分類血液細(xì)胞分析儀第66頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三二、儀器分型檢測原理（一）血細(xì)胞分析儀分型按自動(dòng)化程度按檢測原理按對白細(xì)胞的分類水平嗜酸性細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞血小板嗜堿性細(xì)胞第67頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

請記住哦！電阻抗法血細(xì)胞檢測原理二、儀器分型檢測原理第68頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三聯(lián)合檢測型原理主要體現(xiàn)在白細(xì)胞分類，實(shí)質(zhì)是選用較特異的方法將血中含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細(xì)胞檢出，發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞。共有特點(diǎn)是：均使用了鞘流技術(shù)。

前鞘流后鞘流檢測窗第69頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三容量、電導(dǎo)、光散射檢測技術(shù)光散射電導(dǎo)性電阻抗每個(gè)細(xì)胞接受三維分析定義到三維散點(diǎn)圖的相應(yīng)位置

電導(dǎo)性(conductivity，C)

高頻電磁探針，測量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)核漿比例。體積(volume，V)

電阻抗原理測定細(xì)胞體積和數(shù)量。光散射(scatter，S)細(xì)胞內(nèi)粗顆粒的光散射強(qiáng)度要比細(xì)顆粒更強(qiáng)。第70頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三光散射與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測技術(shù)

這類儀器是應(yīng)用激光散射與細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對白細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。

返回本節(jié)目錄第71頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三白細(xì)胞分類散射圖

聯(lián)合使用多項(xiàng)技術(shù)(流式、激光、射頻、電導(dǎo)、電阻抗、細(xì)胞化學(xué)染色)同時(shí)分析一個(gè)細(xì)胞，綜合分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，從而得出較為準(zhǔn)確的白細(xì)胞“五分群”結(jié)果。返回本節(jié)目錄第72頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測原理網(wǎng)織紅細(xì)胞中嗜堿性物質(zhì)RNA，在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結(jié)合熒光強(qiáng)度與RNA含量成正比用流式細(xì)胞術(shù)檢測網(wǎng)織紅細(xì)胞大小和

RNA含量及血紅蛋白的含量二、儀器分型檢測原理第73頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（五）血紅蛋白測定原理

除干式、無創(chuàng)型外，各型BCA對血紅蛋白測定都采用光電比色原理。血細(xì)胞懸液中加入溶血?jiǎng)┖螅t細(xì)胞溶解釋放出血紅蛋白，后者與溶血?jiǎng)┲杏嘘P(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進(jìn)入血紅蛋白測試系統(tǒng)。特定波長(530～550nm)下進(jìn)行光電比色。二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu)第74頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三溶血素的作用原理細(xì)胞膜表面脂質(zhì)成分的差異紅細(xì)胞膜表面含有較多的脂質(zhì)磷脂膽固醇成熟白細(xì)胞膜磷脂類成分相對較少幼稚粒細(xì)胞膜磷脂類成分更少溶血素的主要成分表面活性劑主要攻擊細(xì)胞膜的磷脂類成分第75頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三儀器基本結(jié)構(gòu)機(jī)械系統(tǒng)電學(xué)系統(tǒng)血細(xì)胞檢測系統(tǒng)血紅蛋白測定系統(tǒng)計(jì)算機(jī)鍵盤控制系統(tǒng)第76頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三三、儀器的性能指標(biāo)、評價(jià)與調(diào)校（一）血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)

1.測試參數(shù)

2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析

3.測試速度

4.樣本量

5.精密度與示值范圍

6.打印

第77頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞分析儀的評價(jià)

ICSH公布了電子血細(xì)胞分析儀的評價(jià)方案：在細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測定方面，要評價(jià)儀器測試樣本的總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準(zhǔn)確性等三、儀器的性能指標(biāo)、評價(jià)與調(diào)校第78頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三四、儀器的維護(hù)與常見故障

（一）儀器的維護(hù)

1.安裝：

潔凈的環(huán)境、穩(wěn)定的電源、可靠的接地、適宜的溫度和濕度是保證BCA正常工作的前提。第79頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

2.維護(hù)：良好的工作環(huán)境是儀器正常工作的前提，精心細(xì)致的維護(hù)是儀器處于良好工作狀態(tài)的保證。做好儀器的維護(hù)保養(yǎng)，有助于提高儀器測量的準(zhǔn)確性，減少故障的發(fā)生，延長儀器的使用壽命。四、儀器的維護(hù)與常見故障第80頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三檢測器的維護(hù)

①采血順利

②防止纖維絲堵孔

③關(guān)機(jī)前對檢測器的微孔進(jìn)行清理沖洗

④計(jì)數(shù)期間，及時(shí)按“反沖”鍵，沖掉沉積變性的蛋白質(zhì)

⑤定期卸下檢測器，用5%次氯酸鈉浸泡清洗

儀器的維護(hù)與常見故障第81頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三三、五分類血細(xì)胞分析儀的使用1、自動(dòng)進(jìn)樣2、手工進(jìn)樣3、末梢血、靜脈血的可選性4、結(jié)果的判斷5、質(zhì)量控制6、儀器的校準(zhǔn)準(zhǔn)品的來源、什么情況下需要校準(zhǔn)？如何校準(zhǔn)？7、儀器的維護(hù)第82頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三標(biāo)本的重要性1、高檔的儀器并不意味著結(jié)果一定可靠。2、標(biāo)本的采集直接關(guān)系到結(jié)果的準(zhǔn)確性。壓脈帶的使用時(shí)間、抗凝劑的影響、真空管的使用、血量的控制、標(biāo)本放置的溫度和時(shí)間、標(biāo)本的混勻等等。第83頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三檢驗(yàn)報(bào)告的審核1、當(dāng)日質(zhì)控是否在控。2、比較報(bào)告各參數(shù)之間是否有矛盾。3、注意觀察多個(gè)測定標(biāo)本相關(guān)參數(shù)是否有一致的系統(tǒng)誤差。4、報(bào)告與臨床是否符合，不符合時(shí)可能存在的原因。如PLT過低、過高。5、什么樣的結(jié)果必須手工復(fù)查？如何復(fù)查？復(fù)查完畢后的報(bào)告簽發(fā)模式。6、直方圖、散點(diǎn)圖的利用。第84頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞自動(dòng)分析異常結(jié)果人工顯微鏡復(fù)檢1、鏡檢復(fù)核的現(xiàn)狀血細(xì)胞分析儀仍只能作為CBC分析的一種過篩手段，當(dāng)遇到可疑情況，尤其是在病理?xiàng)l件下，其測定結(jié)果并不可靠，需要人工以顯微鏡復(fù)查

，這已是不爭的事實(shí)。但是，國內(nèi)目前各醫(yī)院檢驗(yàn)科對CBC異常結(jié)果基不或很少進(jìn)行人工顯微鏡復(fù)查，這種現(xiàn)象在經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)的沿海地區(qū)更是普遍。有資料顯示，國內(nèi)各醫(yī)院CBC實(shí)際鏡檢率在0%～15%，大部分醫(yī)院鏡檢率<5%或者不鏡檢。這種現(xiàn)象引發(fā)了不少的醫(yī)療投訴、糾紛或事故。分析這類題出現(xiàn)的原因可能有:(1)認(rèn)識(shí)不夠，認(rèn)為血細(xì)胞分析儀尤其是五分群的血細(xì)胞分析儀的檢測結(jié)果可靠，不需要復(fù)查；(2)工作量大；(3)怕麻煩，圖省事；(4)目前沒有一個(gè)可參照的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，即對CBC結(jié)果的人工復(fù)查的標(biāo)準(zhǔn)、內(nèi)容、方法及程序尚無明確的規(guī)定。第85頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

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