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文檔簡介
在生命科學(xué)研究中,特別是在生物醫(yī)學(xué)的研究領(lǐng)域中,絕大部分都要用做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。所以,怎樣才能在最短的時(shí)間內(nèi),用最少的人力,物力獲得明確、重復(fù)性好的結(jié)果,首先遇到的問題是如何選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的問題。因此,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇將直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。
第七章實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇與應(yīng)用生物學(xué)特性比較人類與常見實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染色體數(shù)目
動(dòng)
物
學(xué)
名英文名
染色體數(shù)2n人黑猩猩獼猴犬貓豬兔豚鼠金黃地鼠中國地鼠大鼠小鼠長爪沙鼠
PantroglodytesMacacamulattaCanisfamiliarisFeliScatu$SusscrofaOryctolaguscuniculusCaviaporceUusMesecricetusauratusCricetulusbarabensisRuttusnorvegicusMusmusclusMerionesunguiculatus
pansatyrusmonkeysdogcatswinerabbitguineapiggoldenhamsterChinesehamterratmousemilneedwauds
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第一節(jié)人類與各種動(dòng)物的特性比較
動(dòng)物壽命(年)物種猩猩犬大鼠小鼠兔田鼠猴豚鼠豬最長37205315330727平均2010428210516犬123456789101112131415人152428343640444852566064687276犬與人的年齡對(duì)應(yīng)
子宮結(jié)構(gòu)動(dòng)物特點(diǎn)大鼠雙角子宮,雙子宮頸,無子宮體。兔雙角子宮,雙子宮頸,無子宮體。豚鼠雙角子宮,單子宮頸,單子宮體。犬雙角子宮,單子宮頸,單子宮體。靈長類無子宮角,單子宮體。生理學(xué)特性比較人與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臨床觀察指標(biāo)
動(dòng)物種類血壓(kPa)收縮壓舒張壓呼吸頻率(次/min)心率(次/min)體溫(℃)人16.710.717.57536.8猴21.1013.354015038.5犬15.997.9918.012038.5兔14.6610.6651.020539.0豚鼠11.607.5390.028038.2大鼠13.0710.1385.532838.2小鼠14.7910.8012860038.0
人與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物代謝指標(biāo)動(dòng)物種類飼料量[g/(d.只)]飲水量[ml/(d.只)]排便量(g/d)排尿量(ml/d)發(fā)熱量[J/(h.只)]人5002750100—3001.5-2.0L猴226.825—35113—34065—400312-585犬226.825—35113—34065—400312-585兔28.4--85.160—14014.2--56.740—100132.6豚鼠14.2--28.485—15021.2-85.015—7521.84大鼠9.3—18.720—457.1—14.210—1515.60小鼠2.8—7.04--71.4—2.81--32.34在生物醫(yī)學(xué)研究中:首先要從研究目的和實(shí)驗(yàn)要求來選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物;其次考慮它是否容易獲得,是否經(jīng)濟(jì),是否容易飼養(yǎng)。一切實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)具有個(gè)體間的均一性,遺傳的穩(wěn)定性和容易獲得三個(gè)基本要求第二節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的原則每項(xiàng)科學(xué)實(shí)驗(yàn)都有其最合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物掌握正確的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇方法對(duì)生命科學(xué)研究而言,是非常重要的。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,對(duì)動(dòng)物的選擇通常依據(jù)其對(duì)試驗(yàn)品的敏感程度或試驗(yàn)品在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化與人體的相似性來確定。為此,選擇時(shí)應(yīng)遵守以下基本原則:1、結(jié)構(gòu)、機(jī)能及代謝的相似性
如靈長類動(dòng)物是最類似人的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,是研究人類脊髓灰質(zhì)炎、腦炎、痢疾、肝炎、麻疹等傳染病的理想動(dòng)物。也是放射醫(yī)學(xué)、牙科學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、營養(yǎng)學(xué)的良好的動(dòng)物模型。獼猴生殖生理和人非常相似,是人類生殖課題研究的首選動(dòng)物。一、相似性原則但大型靈長類動(dòng)物數(shù)量少、價(jià)格貴、不易獲得,而且遺傳和微生物控制較困難,在生物醫(yī)學(xué)中難以普及應(yīng)用。近年來發(fā)現(xiàn)了一種小型靈長類動(dòng)物,體重僅為120~250克的樹鼩,在新陳代謝方面與人類較相似,在化學(xué)致癌的研究、黃曲霉素致肝癌的研究,在乙肝、皰疹病毒、睡眠生理等研究中有廣闊的前途。2、年齡的近似性不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命長短不一,但一般都比人的壽命短。選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)必須了解有關(guān)動(dòng)物的壽命,并安排與人的某年齡段相對(duì)應(yīng)的動(dòng)物年齡進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。如2歲的大鼠相當(dāng)于人的衰老期(約76歲)因此,2歲以上的大鼠是研究老年病學(xué)的首選動(dòng)物。3、群體結(jié)構(gòu)的相似性以群體為對(duì)象的研究課題,要選擇群體基因型、表型的分布與人類基因型、表型分布相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(封閉群動(dòng)物)。如藥物安全性評(píng)價(jià)、藥物篩選時(shí),應(yīng)考慮人類與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體在基因型、表型分布的相似性。所以通常用封閉群動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)研究的對(duì)象。4、生態(tài)或健康狀況的近似性在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳、營養(yǎng)及環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)化后,其生態(tài)和健康狀況對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果的影響就顯得至關(guān)重要。GF、SPF、CL和CV級(jí)分別代表不同的微生態(tài)模型,具有不同的特點(diǎn),適用于不同的研究目的。如:GF動(dòng)物屬超常生態(tài)的動(dòng)物模型,既能排除微生物的干擾,又能減少免疫功能對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響。SPF動(dòng)物屬健康無病的動(dòng)物模型,采用該級(jí)別動(dòng)物做試驗(yàn),能排除疾病或病原體對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的干擾;CL動(dòng)物基本上與SPF動(dòng)物相同,只差在抗體的檢查方面。CV則應(yīng)用最多,除廉價(jià)和易獲得外,對(duì)設(shè)施要求簡單,管理也相對(duì)容易。但因其攜帶有微生物,很難避免微生物對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的干擾。因此,在選擇時(shí)應(yīng)結(jié)合課題目的,研究方法,設(shè)施條件及經(jīng)費(fèi)等做綜合考慮,然后作出正確的選擇。5、疾病特點(diǎn)的相似性許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病模型能局部或全部地反映出與人類相似的疾病及臨床表現(xiàn)。其疾病特點(diǎn),有些可經(jīng)育種方法固定于動(dòng)物品系中,有些則可以用某種技術(shù)手段在動(dòng)物身上誘發(fā)復(fù)制,可根據(jù)研究目的,選擇合適的疾病模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。如吉大一博士給豬作手術(shù),來復(fù)制豬的高血壓模型…….6、操作實(shí)感的相似性為臨床操作打基礎(chǔ)的動(dòng)物試驗(yàn),應(yīng)選擇與臨床操作較接近的動(dòng)物。如模擬人類心臟移植,練習(xí)手術(shù)操作的動(dòng)物,可選擇豬作實(shí)驗(yàn)材料,因?yàn)樨i的心臟形態(tài)大小與人類很接近。各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在基因型、組織型、代謝型和易感性等特點(diǎn)上的差異也是實(shí)驗(yàn)可比性研究的內(nèi)容。當(dāng)研究過程要求以這種差異為指標(biāo)或條件時(shí),選用不同種類、不同品系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的某些特殊反應(yīng)更適合研究目的與要求。二、差異性原則如實(shí)驗(yàn)兔頸部的交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)、減壓神經(jīng)是分別獨(dú)立行走的;人、豬、犬、貓等減壓神經(jīng)并不單獨(dú)行走;要觀察減壓神經(jīng)對(duì)心臟的作用,選擇實(shí)驗(yàn)兔做試驗(yàn)最為合適。利用不同種屬動(dòng)物對(duì)病原體的易感性差異來生產(chǎn)弱毒疫苗。如:白喉、百日咳、破傷風(fēng)三聯(lián)苗的生產(chǎn),就是利用馬對(duì)這三種病原菌敏感性低的特點(diǎn),將三種病原菌給馬注射,經(jīng)過幾次傳代使三種病原菌毒性減弱,再抽取馬的血清制成弱毒疫苗,給人接種來預(yù)防疾病。在確保研究目的的前提下,應(yīng)選擇結(jié)構(gòu)機(jī)能較簡單的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。如:選擇兩棲類進(jìn)行神經(jīng)反射(?。┰囼?yàn),利用果蠅壽命短(12天),染色體數(shù)目少(2n=8)等特點(diǎn),進(jìn)行遺傳學(xué)研究,并確定了連鎖與交換定律。若用靈長類動(dòng)物來做上述實(shí)驗(yàn),其難度是非常大的。三、易化性原則在設(shè)計(jì)動(dòng)物試驗(yàn)時(shí),所選用的動(dòng)物質(zhì)量等級(jí)要與試驗(yàn)設(shè)計(jì),試驗(yàn)條件,試驗(yàn)者的技術(shù)、方法及試劑性能等相匹配。避免應(yīng)用高精儀器,先進(jìn)的技術(shù),高純度的試劑與低質(zhì)量、非標(biāo)準(zhǔn)化、反應(yīng)性能低的動(dòng)物相匹配,或利用低性能的測(cè)試手段、非標(biāo)準(zhǔn)化的設(shè)施與高質(zhì)量、高反應(yīng)性能的動(dòng)物相匹配。四、相匹配原則許多嚙齒類動(dòng)物,因其繁殖周期短、多胎、易飼養(yǎng),遺傳和微生物控制方便等特點(diǎn),在生命科學(xué)研究中,應(yīng)用最為廣泛。如小、大鼠是用量最多、用途最廣的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。而靈長類動(dòng)物,雖然在許多方面有著不可替代的優(yōu)越性,但因其繁殖周期長、飼養(yǎng)管理困難、成本高價(jià)格貴、不易獲得等而不易普及。所以在不影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的情況下,應(yīng)選用最易獲得、最經(jīng)濟(jì)、最易飼養(yǎng)管理的動(dòng)物作實(shí)驗(yàn)研究。五、易獲性原則重復(fù)性和均一性是實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定、可靠的重要保證。若實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能再現(xiàn)或不穩(wěn)定,則實(shí)驗(yàn)結(jié)果就不能被公認(rèn)。生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)應(yīng)選用標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,只有這樣才能排除因遺傳上的不均質(zhì)引起的個(gè)體反應(yīng)差異;排除因攜帶的微生物、寄生蟲和潛在的疾病對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響;排除因?qū)嶒?yàn)條件的不同而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。這樣才能獲得穩(wěn)定、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,便于在國際上與同類研究進(jìn)行比較與交流。六、重復(fù)性和均一性原則實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類多,特性各異,在選擇時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?nèi)容及要求來選擇。有些試驗(yàn)研究必須選用數(shù)種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。如評(píng)定毒物的毒性、藥物的副作用時(shí),至少要用大鼠、實(shí)驗(yàn)犬等兩種動(dòng)物。因不同種屬的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)毒物或?qū)λ幬锏姆磻?yīng)有質(zhì)與量的區(qū)別。所以選用的動(dòng)物的種屬差異越大越好。在亞急性和慢性試驗(yàn)研究時(shí),也至少要用兩種動(dòng)物,其中包括一種非嚙齒類動(dòng)物。第三節(jié)常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特點(diǎn)及選擇1.不宜做研究體溫變化方面的研究課題(其體溫調(diào)節(jié)機(jī)能不穩(wěn)定,可用實(shí)驗(yàn)兔)2.不宜做慢性支氣管炎模型及祛痰平喘藥的療效實(shí)驗(yàn)(氣管及支氣管腺不發(fā)達(dá),可用實(shí)驗(yàn)猴來做)3.不宜做嘔吐試驗(yàn)(無嘔吐反應(yīng),可用實(shí)驗(yàn)犬來做)一、小鼠應(yīng)回避的試驗(yàn)4.不宜做鉤端螺旋體病的研究(因其對(duì)鉤端螺旋體不敏感,可用金黃地鼠)5.不宜作動(dòng)脈粥樣硬化的試驗(yàn)研究(因其不易形成動(dòng)脈粥樣硬化,可用豬、猴來做)二、大鼠應(yīng)回避的試驗(yàn)除了不能做膽囊功能研究外,其余應(yīng)回避的試驗(yàn)與小鼠相同。不適于做觀察致咳嗽作用的實(shí)驗(yàn)研究
(缺乏咳嗽反射)不適于做觀察致嘔吐作用的實(shí)驗(yàn)研究
(嘔吐反應(yīng)不敏感)不適于做作放射醫(yī)學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究(因放療可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)兔休克,甚至死亡)三、實(shí)驗(yàn)兔應(yīng)回避的試驗(yàn)不適于做觀察致嘔吐作用的實(shí)驗(yàn)研究
(嘔吐反應(yīng)不敏感)不適用于作慢性支氣管炎模型及祛痰平喘藥的療效實(shí)驗(yàn)(氣管及支氣管腺不發(fā)達(dá),可用實(shí)驗(yàn)猴來做)四、豚鼠應(yīng)回避的試驗(yàn)1.不能用紅、綠色作為條件刺激物來進(jìn)行條件反射實(shí)驗(yàn)(犬是紅、綠色盲)2.不宜用做發(fā)汗實(shí)驗(yàn)(汗腺不發(fā)達(dá))3.不適宜觀察減壓神經(jīng)對(duì)心臟作用的研究(減壓神經(jīng)不單獨(dú)行走,而行走于迷走、交感干或迷走神經(jīng)中)4.不宜做動(dòng)脈粥樣硬化的試驗(yàn)研究(不形成病變)五、實(shí)驗(yàn)犬應(yīng)回避的試驗(yàn)為了減少實(shí)驗(yàn)誤差,在動(dòng)物的選擇上還應(yīng)注意動(dòng)物的年齡、體重、性別、生理狀態(tài)、健康狀況和動(dòng)物的品種、品系、等級(jí)等。第四節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇應(yīng)注意的問題實(shí)驗(yàn)動(dòng)物因種類的不同,其壽命也各不性同。在發(fā)育上,有的用日計(jì)齡、有的用月計(jì)齡、有的用年計(jì)齡。若對(duì)犬和小鼠均觀察一年,所反映的生命過程是完全不同的。即使同一種動(dòng)物(如犬),不同的年齡段所反映的生命過程也是不同的。所以在選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡時(shí),應(yīng)注意到各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之間、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人之間的年齡對(duì)應(yīng),以便進(jìn)行分析和比較。一、年齡與體重實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重的大小同樣也會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響,所以要選擇體重相近的動(dòng)物。動(dòng)物的年齡與體重有很高的相關(guān)性。如昆明小鼠6周齡時(shí),公鼠體重為32克左右、母鼠體重為28克左右;Wistar大鼠6周齡時(shí),公鼠體重為180克左右、母鼠體重為160克左右;豚鼠2月齡時(shí)的體重為400克左右。實(shí)驗(yàn)證明不同性別的動(dòng)物對(duì)毒物的敏感性不同如給大鼠皮下注射0.1~0.2ml的30%乙醇溶液雄性大鼠死亡率達(dá)84%,而雌性僅為30%有時(shí)雌性動(dòng)物的敏感性較雄性動(dòng)物高,如給大鼠麻醉時(shí)(戊巴比妥鈉、環(huán)已巴比妥鈉),雌性動(dòng)物的敏感性為雄性動(dòng)物的2.5~3.8倍。一般來講,若實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物的性別無特殊要求,則宜選用雌雄個(gè)半。二、性別動(dòng)物的生理狀態(tài)如妊娠、哺乳等對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響很大,因此,動(dòng)物試驗(yàn)不宜采用特殊生理狀態(tài)的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在試驗(yàn)過程中一旦發(fā)現(xiàn)動(dòng)物妊娠,則體重及某些生理生化指標(biāo)均會(huì)受到嚴(yán)重的影響。所以必須將妊娠的動(dòng)物剔除。三、生理狀態(tài)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康狀況對(duì)試驗(yàn)結(jié)果也會(huì)產(chǎn)生影響。通常健康的動(dòng)物表現(xiàn)為:體型豐滿、發(fā)育正常、被毛濃密有光澤、眼睛明亮活潑、行動(dòng)敏捷、反應(yīng)靈敏、食欲良好。對(duì)于慢性實(shí)驗(yàn)用的動(dòng)物,尤其是大動(dòng)物,除了上述一般觀察外,還應(yīng)對(duì)每只動(dòng)物做全身仔細(xì)的健康檢查,主要檢查項(xiàng)目(略)四、健康狀況品系(品種)和等級(jí)分別表示實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按遺傳學(xué)控制和微生物控制的標(biāo)準(zhǔn)化條件。近交系、突變系、封閉群、雜交一代CV、CL、SPF、GN和GF在做急性試驗(yàn)確信無礙試驗(yàn)結(jié)果時(shí),可選用微生物控制級(jí)別較低但又無病的動(dòng)物,而慢性試驗(yàn)則應(yīng)可選用微生物控制級(jí)別較高的動(dòng)物。移植、接種等試驗(yàn),供體與受體可選用微生物控制級(jí)別最高的動(dòng)物。五、品系、品種、等級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為對(duì)象的實(shí)驗(yàn)研究。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備是決定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述則關(guān)系到研究論文質(zhì)量的高低、或?qū)嶒?yàn)報(bào)告水平的高低。第五節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備與描述準(zhǔn)備工作應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)動(dòng)物的數(shù)量、實(shí)驗(yàn)的周期等來確定。實(shí)驗(yàn)室的面積取決于動(dòng)物種類、數(shù)量和飼養(yǎng)時(shí)間,并有利于對(duì)室內(nèi)溫度、濕度、氨濃度等環(huán)境條件的調(diào)控。應(yīng)根據(jù)所計(jì)劃使用的動(dòng)物等級(jí)并選擇相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室(GLP認(rèn)證)。還應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行徹底的清洗與消毒一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備與管理飼養(yǎng)動(dòng)物的器具、器材,應(yīng)在動(dòng)物購入前準(zhǔn)備好,籠盒及籠蓋至少準(zhǔn)備2套,以便換洗。飲水瓶至少準(zhǔn)備2套以上,以防被動(dòng)物咬破。準(zhǔn)備好籠卡、記錄本、墊料、飼料、臺(tái)秤、溫度計(jì)、濕度計(jì)等必備物品。在作好各項(xiàng)準(zhǔn)備工作后,應(yīng)按照所確定的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量,從具有相應(yīng)質(zhì)量合格證的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位訂購所需的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。購入時(shí),應(yīng)向供應(yīng)單位索取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳背景,質(zhì)量合格證,動(dòng)物的年齡、體重、健康及營養(yǎng)狀況等資料,必要時(shí)要求提供方便運(yùn)輸?shù)挠嘘P(guān)證明材料?!胀▌?dòng)物可用飼養(yǎng)籠運(yùn)輸;※清潔級(jí)動(dòng)物用帶有過濾介質(zhì)窗的瓦楞紙箱運(yùn)輸※無菌動(dòng)物則用特制的金屬罐運(yùn)輸;在一般情況下,運(yùn)輸時(shí)間在5-6小時(shí)以內(nèi),可不供料、供水;24小時(shí)內(nèi)可只供水;超過24小時(shí)則需供水、供料。普通動(dòng)物可用新鮮水果或蔬菜來代替飲水的供應(yīng),清潔級(jí)以上動(dòng)物則用2-3%的瓊脂胨代替水。瓦楞紙箱小鼠運(yùn)輸籠嚙齒類動(dòng)物運(yùn)輸箱購入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后,不能直接進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室,必須先在檢疫區(qū)驗(yàn)收和檢疫。有條件時(shí)應(yīng)進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組前,應(yīng)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行稱重(稱重一般在早晨喂料前進(jìn)行)。附:蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物價(jià)格表序號(hào)動(dòng)物品種等級(jí)價(jià)格(只/頭)1猴普通級(jí)8000-15000元2比格犬普通級(jí)1200-2000元3比格犬清潔級(jí)2000-6000元4普通實(shí)驗(yàn)用犬普通級(jí)500-600元5普通實(shí)驗(yàn)用豬普通級(jí)400-1500元6小型豬普通級(jí)800-2000元7小型豬清潔級(jí)1200-3000元8綿羊、山羊普通級(jí)300-1000元9新西蘭兔普通級(jí)45-80元10新西蘭兔清潔級(jí)120-200元11新西蘭兔SPF級(jí)250-50012日本大耳兔普通級(jí)45-80元13日本大耳兔清潔級(jí)120-200元14日本大耳兔SPF級(jí)250-500元15豚鼠普通級(jí)30-40元16豚鼠清潔級(jí)60-80元17KM(昆明小鼠)清潔級(jí)8-10元18NIH(小鼠)清潔級(jí)8-10元19ICR(小鼠)清潔級(jí)8-10元20BALB/c(小鼠)清潔級(jí)25-30元21BALB/c(小鼠)SPF級(jí)40-60元22C57BL/6N(小鼠)清潔級(jí)25-30元23C57BL/6N(小鼠)SPF級(jí)40-60元24BALB/c-nude裸小鼠清潔級(jí)60-80元25BALB/c-nude裸小鼠SPF級(jí)80-120元26WISTAR(大鼠)清潔級(jí)25-30元27WISTAR(大鼠)SPF級(jí)35-50元28SD(大鼠)清潔級(jí)25-30元29SD(大鼠)SPF級(jí)35-50元30蟾蜍普通級(jí)3-5元31綿羊血1-2元/ml32普通實(shí)驗(yàn)用貓普通級(jí)150元附:蘇州大學(xué)動(dòng)物飼料、墊料、運(yùn)輸箱價(jià)格表序號(hào)飼料品種等級(jí)價(jià)格(公斤)說明1大、小鼠飼料清潔級(jí)(二級(jí))8-9元輻照滅菌普通級(jí)(一級(jí))5-6元2兔、豚鼠、羊飼料普通級(jí)5-6元3墊料刨花3-5元4墊料玉米芯5-6元輻照滅菌5墊料(小鼠)高分子材料0.5-0.8元/張輻照滅菌6墊料(大鼠)高分子材料1.2-2.0元/張輻照滅菌7運(yùn)輸箱(小鼠)15元/個(gè)清潔級(jí)、SPF級(jí)動(dòng)物運(yùn)輸專用8運(yùn)輸箱(大鼠)20元/個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察代養(yǎng)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)(普通環(huán)境代養(yǎng))品種單位飼養(yǎng)費(fèi)(元)大鼠只/日0.50-0.80小鼠只/日0.30-0.50豚鼠只/日0.30-0.50兔只/日1.00-1.50狗條/日5.00畢格犬條/日5.00羊只/日6.00-8.00豬頭/日6.00-8.00品種單位飼養(yǎng)費(fèi)(元)大鼠只/日1.50-3.00小鼠只/日0.50-1.50實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察代養(yǎng)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)(屏障環(huán)境代養(yǎng))蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)操作收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目校內(nèi)校外項(xiàng)目校內(nèi)校外小鼠灌胃0.400.80大鼠灌胃0.400.80小鼠眼眶靜脈取血0.501.00大鼠眼眶靜脈取血0.801.50小鼠腹腔注射0.200.40大鼠腹腔注射0.200.40小鼠尾靜注射0.501.00大鼠尾靜注0.501.00小鼠尾靜脈取血0.501.00大鼠尾靜脈取血0.501.00豚鼠經(jīng)口給藥1.002.00兔灌胃1.002.00豚鼠股靜脈取血1.503.00兔耳靜脈取血1.002.00豚鼠心臟取血1.002.00兔心臟取血1.002.00豚鼠腹腔注射0.501.00兔腹腔注射0.501.00豚鼠股靜脈注射1.002.00兔耳靜脈注射1.002.00大小鼠麻醉0.501.00血清分離1.002.00兔麻醉1.002.00豬、猴麻醉10.0020.00貓、狗麻醉5.0010.00動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)告或論文中關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述,主要有以下內(nèi)容:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種名論文題目應(yīng)標(biāo)明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種名,如《大鼠正常心電圖100例分析》,文中第一次出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種名時(shí),應(yīng)注明拉丁文學(xué)名,并用斜體書寫和印刷。二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的品種(或品系)在論文中應(yīng)正確而詳細(xì)地注明使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的品種(或品系)名稱。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的來源、遺傳背景、微生物背景、是近交系還是封閉群或是雜交一代。如是近交系還要標(biāo)明其近交代數(shù)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施合格證,合格證名稱、編號(hào)、頒發(fā)單位在文中也須描述清楚。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重、性別與年齡。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境應(yīng)描述清楚:如溫度、濕度、照度、噪聲、光照周期、氨濃度、季節(jié)等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)方式:對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也會(huì)產(chǎn)生影響,也應(yīng)予以注明。如飼養(yǎng)的密度、墊料的種類、墊料更換的次數(shù)、籠盒的材料、飼料種類、飼料營養(yǎng)成分和配制方法、飼料和飲水投喂情況;飼料、飲水及物品的消毒情況等。處理因素的施加方式如:經(jīng)口灌胃、腹腔注射、手術(shù)過程、技術(shù)路線等其它要說明的內(nèi)容如:麻醉劑與麻醉方法、取材方法、材料固定液、動(dòng)物處死方法等。總之動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述應(yīng)全面、詳細(xì)、準(zhǔn)確、簡練。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)描述清楚的研究論文,不僅可避免學(xué)術(shù)交流中的爭(zhēng)論,而且可提高論文質(zhì)量,對(duì)于從事系列研究和高、精、尖的研究更為重要。一、藥效學(xué)研究1、臨床前藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究常用的有大鼠、小鼠、兔、豚鼠、狗等。首選動(dòng)物及其性別應(yīng)盡量與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究所用動(dòng)物一致。藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定,最好使用狗、猴等大動(dòng)物,可在同一動(dòng)物上多次采樣,用小動(dòng)物可能要采用多只動(dòng)物的合并樣本,應(yīng)盡量避免。附:第六節(jié)常見醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中的動(dòng)物選擇藥物分布試驗(yàn)時(shí):一般選用大鼠或較為方便藥物排泄試驗(yàn):一般也首選大鼠,其膽汁采集可在乙醚麻醉下作膽管插管引流。2.一般藥理研究常選用的包括小鼠、大鼠、貓、狗等,性別不限,但觀察循環(huán)和呼吸系統(tǒng)時(shí)一般不宜用小鼠和兔。1、動(dòng)脈粥樣硬化癥
雞和鴿能自發(fā)主動(dòng)脈粥樣硬化,研究病變與早期代謝變化具有重要價(jià)值。
兔飼料誘發(fā)可發(fā)生粥樣硬化病灶,但病變的局部解剖學(xué)與人類不同。非人靈長類,可發(fā)生廣泛的的心冠、腦、腎和股等處動(dòng)脈的粥樣硬化癥,是良好模型動(dòng)物。小型豬可自發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化,用高脂飼料可加速粥樣硬化的形成。病變特點(diǎn)及分布與人類相似。二、心血管系統(tǒng)疾病研究2、高血壓研究常用動(dòng)物是犬和大鼠。兔的血壓不夠穩(wěn)定。犬與人類的高血壓有許多相似之處。①高血壓早期血壓波動(dòng)大,以后逐漸升高,并維持在高水平;②環(huán)境和緊張刺激引起血壓明顯升高;③高血壓發(fā)展過程中出現(xiàn)高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)障礙④部分動(dòng)物血中兒茶酚胺含量增加。自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)①遺傳因素占主要地位。②在高血壓早期無明顯器質(zhì)性改變。③血壓升高隨年齡增加而加劇,6個(gè)月后,上升到最高水平。④緊張刺激和大量食鹽等環(huán)境因素加重高血壓的發(fā)展。⑤血壓上升早期或高血壓前期有高血流動(dòng)力特征⑥發(fā)生繼發(fā)性心血管損害,出現(xiàn)心腦腎合并癥實(shí)驗(yàn)性高血壓
①以刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)反射性而成。②注射加壓物質(zhì)。③分次手術(shù)結(jié)扎腎動(dòng)脈,誘發(fā)腎原性高血壓。3、心肌缺血研究冠狀動(dòng)脈阻塞實(shí)驗(yàn):犬、豬、貓、兔和大鼠。犬心臟的解剖與人類近似,占體重的比例很大,冠狀血管易操作,心臟抗心紊亂能力較強(qiáng)。豬心臟的側(cè)枝循環(huán)和傳導(dǎo)系統(tǒng)血液供應(yīng)類似于人的心臟,側(cè)枝循環(huán)不如犬豐富,易于形成心肌梗塞,室顫發(fā)生率高。大鼠心肺灌流測(cè)定心肌耐缺氧,可同時(shí)測(cè)定心臟的各種血液動(dòng)力學(xué)變化,如心輸出量、血壓、靜脈壓、心房壓等。而小鼠和兔不能。4、心律失常研究大鼠、豚鼠、兔及貓的心臟較小,心室纖顫有自發(fā)恢復(fù)的可能①大鼠對(duì)強(qiáng)心甙不敏感②豚鼠心臟對(duì)心血管藥物的感受性與人類近似犬、猴及豬等動(dòng)物的心臟較大。這些動(dòng)物的心室顫很難自然恢復(fù)。用犬、兔、豚鼠、小鼠、大鼠及雞的胚胎及新生或成年動(dòng)物的心肌細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),可形成各種有自發(fā)節(jié)律的細(xì)胞,建立心肌損傷及節(jié)律失常實(shí)驗(yàn)?zāi)P?。?dòng)物生殖周期犬是春秋二季,季節(jié)性單發(fā)情;貓是春秋二季,季節(jié)性多次發(fā)情;小鼠、大鼠及豚鼠,全年間隔一定時(shí)間有動(dòng)情周期循環(huán),是常年多發(fā)情動(dòng)物。恒河猴有月經(jīng)周期。雌性動(dòng)物的排卵狗、大鼠、小鼠、猴等屬自發(fā)性排卵,即不交配也排卵;兔、貓等屬誘發(fā)性排卵,即只有經(jīng)過交配或一定刺激后才排卵。三、生殖系統(tǒng)研究性周期的雌激素及孕激素調(diào)節(jié)第一型:性周期前半期由雌激素控制,排卵形成黃體,分泌孕激素。狗、猴等第二型:發(fā)情期排卵形成黃體,但不分泌孕激素。小鼠、大鼠、地鼠等。第三型:不交配則不排卵,不形成黃體,成熟卵泡退化。如交配,則排卵并形成黃體,分泌孕激素。兔、貓等避孕藥物作用機(jī)制研究抑制排卵藥物研究,采用雌性家兔抗著床、早孕藥物研究,采用大鼠、小鼠、倉鼠、豚鼠消化道瘺管觀察犬的消化系統(tǒng)發(fā)達(dá),與人相似適于消化系統(tǒng)的慢性實(shí)驗(yàn);對(duì)唾液腺、食道、胃、膽囊可作瘺管,觀察胃腸運(yùn)動(dòng)的變化;胰腺炎研究雌性小鼠可造成膽堿缺乏,誘發(fā)出血性胰腺炎犬胰腺小,適與摘除;大鼠胰腺分散,位于胃和十二指腸彎曲處;四、消化系統(tǒng)研究乙型肝炎研究黑猩猩是理想的模型動(dòng)物樹鼠句對(duì)人乙型肝炎感染率高,可形成一定的肝臟病理改變,但不能長期攜帶;豚鼠可作為乙型肝炎慢性化、免疫耐受、乙肝疫苗防治、抗病毒化療藥物篩選的模型材料;疫苗防癌人體需20-30年,豚鼠僅需2-4年。免疫系統(tǒng)種系發(fā)生動(dòng)物細(xì)胞淋巴器官免疫反應(yīng)
分類名稱淋巴細(xì)胞漿細(xì)胞胸腺脾臟細(xì)胞免疫體液免疫
IgMIgGIgAIgEIgD
圓口類鰻
+-+--+----
魚類油鮫
+-++-+----
鯉魚++++-+----
兩棲類蠑螈
++++-+----
青蛙+++++++---
爬行類龜、蛇
++++?++---
鳥類雞
++++++++--
哺乳類鼠、人
++++++++++無脊椎動(dòng)物僅為原始的細(xì)胞吞噬作用五、抗炎與免疫研究抗體從母體到幼體的傳遞存在兩種傳遞方式:
1、出生前在胎盤、卵黃囊或羊膜內(nèi)完成。
2、出生后從初乳獲得。動(dòng)物胎盤類型轉(zhuǎn)移途徑抗體轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移時(shí)間
出生前出生后
小鼠血性絨毛膜腸(主要)卵黃囊+++妊娠到17d
大鼠血性絨毛膜腸(主要)卵黃囊+++妊娠到20d
豚鼠血性絨毛膜卵黃囊(主要)腸++++妊娠到2d
兔血性絨毛膜卵黃囊+++-妊娠到15d
靈長類血性絨毛膜胎盤+++-妊娠到3個(gè)月犬內(nèi)皮絨毛膜腸-++出生到8dIgE和IgA在母子傳遞中不進(jìn)入體液循環(huán),IgM只在出生后傳遞。大、小鼠、豚鼠、兔、猴幼仔血清母源抗體效價(jià)比母體高。大、小鼠、犬、貓、兔、猴從妊娠期開始向胎兒移行,更多以母乳轉(zhuǎn)移??寡自囼?yàn)關(guān)節(jié)炎
1、大鼠踝關(guān)節(jié)敏感,多發(fā)性關(guān)節(jié)炎與風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎接近,但不同品系、年齡、免疫狀態(tài)影響發(fā)病率。
2、豬霉形體關(guān)節(jié)炎也可用于人關(guān)節(jié)炎研究。過敏性哮喘
1、犬與人類似,由IgE介導(dǎo)。
2、豚鼠接受致敏物質(zhì)靈敏度最高。
3、大鼠也可產(chǎn)生由IgE介導(dǎo)的超敏反應(yīng)。
4、小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)不典型H-2與小鼠疾病
疾病易感品系單倍體型非易感品系單倍體型鼠痘DBA/1H-2dC57BL/6H-2bDBA/2BALB/cA
白血病C58H-2KC57BLH-2b/乳腺癌AKRC57LC3H129/J
糖尿病db/db肥胖型糖尿病小鼠(TheDiabeticmouse)
糖尿病基因(db)于1966年JacksonLaboratory發(fā)現(xiàn)于C57BL/Ks小鼠第4染色體隱性基因突變。C57BL/KsJ-db/db是目前研究人類糖尿病最好的動(dòng)物模型。體重:純合子有過度肥胖癥傾向,3至8周齡時(shí),體重加速增重,可達(dá)約45g(正常約12-20g)。然后體重開始減輕至發(fā)病致死。六、內(nèi)分泌系統(tǒng)研究血糖濃度:4周齡為300mg/100ml。12周齡至500mg/100ml。當(dāng)血糖含量超過250mg/100ml,臨床癥狀呈顯,如糖尿(glycosuria)、多尿(polyuria)、和劇渴(polydipsia)等。正常小鼠140-180mg/100ml。胰島素含量:幼鼠血中各有差異,先升高,至8周齡左右,再漸漸下降到正常含量。12周齡之后,其含量只正常量25%,直到發(fā)病致死。壽命較短,共約4至6個(gè)月,因而病理變化較少出現(xiàn)于腎臟、肺、心臟和眼睛。只胰臟內(nèi)蘭氐小島的?細(xì)胞呈現(xiàn)退化及顆粒遞減的現(xiàn)象。
非肥胖性糖尿病小鼠(nonobesediabetic,NOD)ICR/Jc小鼠近交第6代時(shí),從白內(nèi)障易感亞系分離出非肥胖糖尿病品系(nod)和非肥胖正常品系(NOD)。近交第20代時(shí),首先發(fā)現(xiàn)NOD雌鼠有胰島素依賴性糖尿病。
1.臨床癥狀:與人類Ⅰ型糖尿病類似。90-120日齡(相當(dāng)于人類青春期)聚起發(fā)病有下列癥狀:酮尿、糖尿、高血糖、高膽固醇過多、煩渴、多尿、貪食。糖尿病發(fā)病與免疫系統(tǒng)異常有關(guān)。對(duì)自發(fā)性之自體免疫(第I型)糖尿(insulindependentdiabetesmellitus,IDDM)有易感性。用于研究糖尿病的治療。
2、特征:糖尿病形成中產(chǎn)生胰島炎(insulitis)癥狀,即胰臟小島中產(chǎn)生白血球的浸潤物。約12周齡,母鼠有明顯的胰臟島素降低;而雄鼠則于后幾周也發(fā)生此現(xiàn)象。糖尿病開始時(shí)有明顯的中度糖尿病癥,最好在10周齡時(shí)即開始監(jiān)測(cè)糖尿病癥。3、易感受性與其影響因子:NOD小鼠對(duì)IDDM之易感受性由多基因控制。主要的易感結(jié)構(gòu)是唯一MHC單型。飼養(yǎng)環(huán)境,健康及飼料均影響小鼠糖尿病的發(fā)展。30周齡時(shí)糖尿病累計(jì)發(fā)病率雌雄分別為60%-80%和10%-70%,睪丸切除可增加糖尿病發(fā)病率,而卵巢切除減少發(fā)病率。KK小鼠高血清胰島素型,I型糖尿病模型,8月齡雄鼠100%,12月齡雌鼠88%出現(xiàn)顯性病癥。飼料、飼養(yǎng)、打斗及其它緊張因素可減少發(fā)病率BBWistar大鼠低血清胰島素型,I型糖尿病模型,發(fā)病率90%,發(fā)病日齡58-123日齡。癥狀:高血糖、糖尿癥、酮尿癥、酮癥、胰島素缺乏、高血糖素亢進(jìn)、體重下降GK大鼠(Goto-Kakizakidiabetespronerat)1975年由日本TohokuUniversity培育。在遠(yuǎn)交系WISTAR大鼠中篩選高血糖個(gè)體而成。應(yīng)用于非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM)研究,II型糖尿病。在糖尿病癥發(fā)作后,快速出現(xiàn)高血糖、胰島素分泌減弱等,后期并發(fā)視網(wǎng)膜病、微血管病、神經(jīng)病、腎病。和其它嚙齒類II型糖尿病動(dòng)物模型相反,GK大鼠是非肥胖的肥胖癥(Obeseob)肥胖小鼠(Obesemice)1臨床癥狀:純合子4周齡增重加速,是正常鼠體重3倍。體重可達(dá)60g,表現(xiàn)為單純肥胖而不伴有糖尿病。幼年時(shí)血糖和免疫活性胰島素?zé)o明顯增加,5~6月齡后,肥胖趨向穩(wěn)定,胰島素和葡萄糖水平上升。不受外來胰島素的影響,但節(jié)制食物可增加對(duì)胰島素的敏感性及延長其壽命。所有的雌鼠無生殖力,必須用雜合子交配保持基因。雌鼠卵巢和子宮萎縮,若節(jié)制飲食,雄鼠偶爾能繁殖。2、生理特征:Langerhans島的增生與胰島素分泌增加有關(guān),腎小球發(fā)生腎結(jié)節(jié)狀脂肪玻璃樣病變。肥胖小鼠的皮下、后腹膜和性腺的脂肪增多,是脂肪細(xì)胞數(shù)目和體積增加的結(jié)果,被稱為肥大性-增生性肥胖癥。其肥胖癥與人類的肥胖癥很相似。成年肥胖和糖尿病(Adultobesityanddiabetes)小鼠該小鼠的肥胖癥體重相當(dāng)于正常鼠的兩倍,與ob/ob型一樣,通常不育,7~10周齡時(shí)表現(xiàn)出高血糖和糖尿病。NZO(NewZealandObese)小鼠該鼠通常具有生殖能力,所有的小鼠均發(fā)生肥胖,但脂肪沉積主要是在腹內(nèi),于2~4月齡時(shí)即可發(fā)現(xiàn)脂肪沉積,最終達(dá)到總體重的70%,高血糖不明顯,但胰島素的水平升高。在快速增重期間,食物的攝入量明顯增加。從小鼠的肥胖癥知道,肥胖癥有不同的遺傳性。這對(duì)研究人類肥胖癥的一系列問題頗有助益。侏儒癥(Dwarfdw)dw鼠或稱矮小畸形鼠這種畸形又稱垂體性侏儒癥(PituiaryDwarfism),因?yàn)槠淙狈δX下垂體前葉的生長素和促甲狀腺激素,故使生長發(fā)育障礙。純合子dw/dw小鼠在12-13日齡時(shí)即可被識(shí)別,表現(xiàn)為短尾和短鼻。成熟日齡時(shí),其體積為正常鼠的1/4,8周齡時(shí)體重為8-10g,多數(shù)能存活到成熟期,可出現(xiàn)繼發(fā)的粘液性水腫。由于該鼠兩性均不育,只能用雜合子保持基因,得到25%的矮小畸形鼠。9日鼠齡時(shí),將正常垂體全移植到這種鼠的腎臟,雄鼠可長大到近于正常小鼠體形并可繁殖(但在雌鼠收不到效果,原因不明)。甲狀腺功能低下hyt甲狀腺功能低下癥小鼠第12對(duì)染色體的隱性突變基因?qū)е掠资?6日齡出現(xiàn)甲狀腺發(fā)育不全。Hyt/hyt小鼠與人類嬰兒甲狀腺功能低下相似性80%,可用于人類嬰兒甲狀腺功能紊亂研究的動(dòng)物模型。癲癇
35日齡DBA/2N小鼠,聽源性癲癇發(fā)病率100%,是良好的模型材料。腦梗塞沙鼠腦椎底動(dòng)脈環(huán)后交通枝缺損,結(jié)扎一側(cè)頸總動(dòng)脈出現(xiàn)腦梗塞。是研究中風(fēng)、術(shù)后腦貧血、腦血流量的實(shí)驗(yàn)材料。七、神經(jīng)系統(tǒng)研究外周微循環(huán)小鼠耳廓:表皮薄,血管呈平面分布,適于慢性全身性疾病對(duì)微循環(huán)影響的長期連續(xù)觀察。金黃地鼠頰囊:囊壁薄而色淡,微血管清晰。頰囊伸縮性大,牽拉刺激對(duì)微循環(huán)影響小。了解在感染、創(chuàng)傷、移植性腫瘤等病理狀態(tài)下微循環(huán)的變化八、微循環(huán)研究內(nèi)臟微循環(huán)常選用蛙、大、小鼠、豚鼠、兔、貓
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