第八章對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類藥物的分析課件

第八章對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的分析

局麻藥物：一類能在用藥部位局部可逆性地阻斷感覺神經(jīng)沖動發(fā)生與傳導的藥物親酯性芳香環(huán)

結構組成中間連接功能基

親水性胺基酯鍵對氨基苯甲酸酯類酰胺鍵酰苯胺類

一、對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結構與典型藥物具有對氨基苯甲酸酯的母體結構中芳伯氨基未被取代，而在芳環(huán)對位有取代第一節(jié)

結構與性質(zhì)典型藥物的結構

苯佐卡因H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2HCl鹽酸氯普魯卡因Cl鹽酸丁卡因鹽酸普魯卡因胺（抗心律失常藥）酰胺鍵酯鍵COOCH2CH2N(CH3)2CH3(CH2)3NHHCl鹽酸丁卡因二、酰苯胺類藥物的基本結構與典型藥物☆

芳伯氨基被酰化，并且在芳環(huán)對位有取代，

☆

共性為具有芳酰氨基典型藥物的結構：鹽酸利多卡因鹽酸布比卡因鹽酸羅哌卡因三、主要化學性質(zhì)1、芳伯氨基特性

對氨基苯甲酸酯類：具有芳伯氨基（鹽酸丁卡因除外）可顯重氮化-偶合反應與芳醛縮合易氧化變色酰苯胺類：具芳酰氨基，酸性條件下水解產(chǎn)物具芳伯氨基鹽酸利多卡因鹽酸布比卡因鹽酸羅哌卡因鹽的水溶液較穩(wěn)定原因：酰胺基鄰位存在兩個甲基，受空間位阻影響，較難水解2、酯鍵易水解特性：水解速度受光、熱或堿性條件的影響3、弱堿性：

脂烴胺側鏈為叔胺氮原子（苯佐卡因除外），具有弱堿性

要采用非水溶液滴定法或亞硝酸鈉滴定法測定含量與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應4、溶解性：

具芳伯氨基，或同時具脂烴胺側鏈，游離堿多為堿性油狀物或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑

鹽酸鹽均為白色結晶或結晶性粉末，具有一定的熔點。在水和乙醇中易溶，難溶于乙醚、氯仿等有機溶劑

普魯卡因鹽酸鹽水溶液加氫氧化鈉或碳酸鈉溶液，有油狀的普魯卡因析出5、與重金屬離子反應特性酰苯胺類藥物

鹽酸利多卡因鹽酸羅哌卡因鹽酸布比卡因酰胺基上的氮在水溶液中與銅離子或鈷離子絡合有色的配位化合物沉淀可溶于氯仿6、吸收光譜特性第二節(jié)鑒別試驗一、重氮化-偶合反應注意：在鑒別時，首先要使溶液成酸性，然后才能滴加亞硝酸鈉試液及堿性β一萘酚試劑。直接：鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸氯普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺鹽酸普魯卡因的鑒別（直接）鹽酸普魯卡因ChP[鑒別]（1）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應（附錄Ⅲ）取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。特例：鹽酸丁卡因COOCH2CH2N(CH3)2CH3(CH2)3NHHCl分子結構中不具芳伯氨基芳香仲胺芳香仲胺酸性亞硝酸鈉試液乳白色N-亞硝基化合物沉淀與具有芳伯氨基的同類藥物區(qū)別二、與重金屬離子反應1、鹽酸利多卡因的鑒別A、與重金屬CU2＋的反應鹽酸利多卡因

碳酸鈉試液Cu2+藍紫色配位化合物三氯甲烷提取提取液顯黃色藥典收載方法之一，相同反應條件下芳胺類藥物（苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普魯卡因、鹽酸丁卡因等）無此反應B、與鈷鹽反應鹽酸利多卡因酸性氯化鈷試液亮綠色細小鈷鹽沉淀C、與汞鹽反應鹽酸利多卡因硝酸酸化Hg+，Δ黃色區(qū)別于對氨基苯甲酸酯類（顯紅色或橙黃色）2、鹽酸普魯卡因胺的鑒別酰胺鍵鹽酸普魯卡因胺H2O2，氧化羥肟酸FeCl3試液羥肟酸鐵緩緩加熱至沸，溶液先顯紫紅色，隨即呈暗棕色至棕黑色藥典收載三、水解產(chǎn)物的反應1、鹽酸普魯卡因ChP[鑒別]（2）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。

2、苯佐卡因苯佐卡因NaOH試液Δ乙醇Δ碘試液黃色沉淀碘仿臭氣四、制備衍生物測定熔點通常的衍生物為：三硝基苯酚衍生物硫氰酸鹽衍生物五、吸收光譜特征1、紫外特征吸收光譜

☆具有的苯環(huán)結構，具有紫外吸收光譜☆針對不同的藥物、不同的溶劑、不同的濃度、它們的吸收波長不同，吸收系數(shù)也不同

鹽酸布比卡因ChP[鑒別]（2）取本品，精密稱定，按干燥品計算，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在263nm與271nm的波長處有最大吸收；其吸收度分別為0.53～0.58與0.43～0.48。2、紅外吸收光譜

當該類藥物采用其他方法難以進行區(qū)別時，用紅外吸收光譜就比較容易區(qū)別。

第四節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查一、鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查

雜質(zhì)：滅菌溫度、時間、pH、貯藏時間、光、金屬離子等影響

ChP規(guī)定：鹽酸普魯卡因及其注射液、注射用鹽酸普魯卡因檢查對氨基苯甲酸雜質(zhì)

限量：原料、注射用滅菌粉0.5%注射液1.2%

檢查方法2010版：HPLC法固定相：C18流動相：磷酸緩沖（含庚烷磺酸鈉）--甲醇檢測波長：279nm外標法計算限量

2005年版原理：☆TLC雜質(zhì)對照品法☆對氨基苯甲酸最低檢出量為0.01μg☆苯胺最低檢出量0.01μg

二、鹽酸氯普卡因注射液中有關物質(zhì)和光解產(chǎn)物的檢查由于鹽酸氯普卡因注射液在生產(chǎn)和貯藏過程中會產(chǎn)生4-氨基-2-氯苯甲酸，影響療效和成品的顏色，故此需要對降解產(chǎn)物進行檢查1、高效液相色譜法（HPLC）2、液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）MSLCLC-MSLC-MS/MSLC-ESI-MS/MSLC-APCI-MS/MSLC-ESI-TOF-MS/MSLC-MALDI-TOF-MS/MSLC-MS分析：1、色譜條件ZobaxSB-C18(150mm×4.6mm,i.d.,5μm)Columntemperature:25℃Mobilephase:0.5%HAc-CH3CN(0.5%HAc)=87:13flowrate:1.0ml/minDetectionwavelength:254nm2、質(zhì)譜條件PositiveScanmode80~600mau噴霧電壓：4000V裂解電壓：70V干燥氣（N2）：9.5L/min干燥氣壓力：40psi干燥氣溫度：350℃4－氨基－2－氯苯甲酸三、鹽酸利多卡因注射液中2,6—二甲基苯胺及其他雜質(zhì)的檢查采用高效液相色譜法不加校正因子的主成分自身稀釋對照法限量：2,6—二甲基苯胺0.04%其他單個雜質(zhì)0.5%其他雜質(zhì)總限量1.0%

（四）鹽酸羅哌卡因?qū)τ丑w的純度檢查長效酰胺類局麻藥，R-鹽酸羅哌卡因心臟毒性大臨床使用S－鹽酸羅哌卡因高效毛細管電泳第四節(jié)含量的測定一、亞硝酸鈉滴定法1、原理終點指示：永停法（外指示劑法）例：中國藥典收載有☆具有芳伯氨基的藥物——鹽酸普魯卡因及其注射劑、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺及其片劑與注射劑、注射用鹽酸普魯卡因☆具有潛在芳伯氨基的藥物－醋氨苯砜及其注射液具酰胺,經(jīng)水解2、主要測定條件（1）加入適量KBr加速反應:KBr為催化劑不同的酸影響反應速度：HBr>HCl>HNO3、H2SO4NaNO2+HCl→HNO2+NaClK1K2K1≈300K2加入KBr，可增大被測溶液中NO+的濃度在鹽酸存在下重氮化反應與芳伯氨基的游離程度有關★若芳伯氨基的堿性較弱，則成鹽的比例較小，即游離芳伯氨基較多，反應速度就快★若芳伯氨基堿性較強，則成鹽比例較大，游離芳伯氨基較少，則反應速度就慢（2）加過量鹽酸的作用：胺類藥物的鹽酸鹽比硫酸鹽的溶解度大可以加快重氮化反應速度

增加重氮鹽在酸性溶液中的穩(wěn)定性

防止偶氮氨基化合物的生成結論：加速反應注意事項：酸度不能過大

會阻礙芳伯氨基的游離，影響反應速度可使亞硝酸分解

芳胺類藥物:酸的摩爾比=1:2.5～6（3）控制溫度：在10～30℃條件下滴定溫度每升高lO℃，重氮化反應則加快2.5倍，但重氮鹽分解速度亦相應地加速2倍

若溫度過低，反應又太慢（4）滴定管尖端插入液面下滴定

滴定速度：先快后慢

滴定時將滴定管尖端插入液面下約2/3處，一次把大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌下迅速加入，使其盡快反應

將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再緩緩滴定

在近終點時，剩余的芳伯氨基的濃度極稀，需在最后一滴加入后，攪拌1～5min，再確定終點是否真正到達3、終點指示方法永停滴定法電位法外指示劑法內(nèi)指示劑法（1）永停滴定法——中國藥典收載終點：電極起氧化-還原反應，電流計指針偏轉(zhuǎn)終點前：電極不起氧化-還原反應，電流計的指針指零（2）外指示劑法：KI—淀粉糊劑或試紙2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O碘化鉀被氧化遇淀粉，顯藍色操作要點：①顯色要立即原因：指示劑在酸性條件下置于空氣中一段時間后，空氣將指示劑中KI氧化為I2而使淀粉變藍色②樣品易損失彌補方法：

通過滴定度計算，得大概的用量

預先做一份求得大概用量，然后再準確測定，

蘸取試驗時取量一定要少二、非水溶液滴定法鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因等結構中含有弱堿性氮原子，藥典收載方法采用非水溶液滴定法測定含量滴定方法：大多以冰醋酸為溶劑，高氯酸為滴定液，針對不同藥物采用不同的指示劑指示終點三、紫外分光光度法－－分子結構中都有苯環(huán)對照品比較法四、高效液相色譜法（HPLC）同時測定鹽酸普魯卡因注射液中的鹽酸普魯卡因和它的降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸，色譜條件：反相C18柱內(nèi)標：苯甲酸流動相：甲醇:1%醋酸=40

:

60，pH=4.7流速：1.1ml/min檢測波長：250nm1、每一個成功者都有一個開始。勇于開始，才能找到成功的路。7月-237月-23Monday,July17,20232、成功源于不懈的努力，人生最大的敵人是自己怯懦。05:52:4005:52:4005:527/17/20235:52:40AM3、每天只看目標，別老想障礙。7月-2305:52:4005:52Jul-2317-Jul-234、寧愿辛苦一陣子，不要辛苦一輩子。05:52:4005:52:4005:52Monday,July17,20235、積極向上的心態(tài)，是成功者的最基本要素。7月-237月-2305:52:4005:52:40July17,20236、生活總會給你另一個機會，這個機會叫明天。17七月20235:52:40上午05:52:407月-237、人生就像騎單車，想保持平衡就得往前走。七月235:52上午7月-2305:52July17,2023