淋巴細(xì)胞課件

第九章淋巴細(xì)胞來源：是由哺乳動(dòng)物骨髓或鳥類法氏囊中淋巴樣干細(xì)胞分化成熟而來。分布：骨髓中的淋巴細(xì)胞主要是B細(xì)胞脾中的淋巴細(xì)胞，50%淋巴結(jié)中的淋巴細(xì)胞，25%外周血淋巴細(xì)胞，5%-25%第一節(jié)B細(xì)胞的分化發(fā)育BCR是表達(dá)于B細(xì)胞表面的免疫球蛋白，即膜型免疫球蛋白（membraneimmunoglobulin,mIg）。B細(xì)胞通過BCR識(shí)別抗原，接受抗原刺激，啟動(dòng)體液免疫應(yīng)答。

編碼BCR重鏈或輕鏈的基因是以數(shù)個(gè)分隔開的基因片段的形式成簇存在的。在B細(xì)胞的分化過程中，只有經(jīng)過基因重排，才能形成有功能的BCR。（一）BCR的基因結(jié)構(gòu)、重排及其多樣性免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)443022q11.215402p111296254014q32.3HBCRCJDV染色體定位肽鏈

人BCR染色體定位和功能性基因片段編碼可變區(qū)編碼恒定區(qū)IL1、IL1、IL4(B細(xì)胞系)參與補(bǔ)體的溶細(xì)胞或溶菌作用B細(xì)胞雙重抗原識(shí)別模式圖V：人V基因片段為40個(gè)，根據(jù)同源性可分7個(gè)家族，編碼1-（一）重組信號(hào)序列(recombinationsignalsequence,RSS)多分子活化共受體，增強(qiáng)B細(xì)胞對(duì)抗原刺激的敏感性。diversity）分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層力與多種不同抗原表位結(jié)合的現(xiàn)象。VCVCTNF、LT(B細(xì)胞系)失敗另一條染色體H基因重排BCR多樣性產(chǎn)生的機(jī)制diversity）RAG-1/RAG-2復(fù)合物（重組激活酶復(fù)合物）抑制另一條染色體H基因重排(m:5/VpreB)表達(dá)preBCR表達(dá)輕鏈表達(dá)輕鏈先表達(dá)鏈基因，如鏈基因重排V：人V基因片段為40個(gè)，根據(jù)同源性可分7個(gè)家族，編碼1-VH（variable）:

人VH基因片段為40個(gè)，根據(jù)同源性分為7個(gè)家族，編碼H鏈的信號(hào)序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2

D（diversity）：

人D基因片段為25個(gè)，編碼V區(qū)中大部分CDR3

JH（joining）：

人JH基因片段為6個(gè)，編碼CDR3其余部分和第4個(gè)骨架，15-17aa重鏈重鏈基因CDR1CDR2CDR3VCVDJCBCR的基因結(jié)構(gòu)（一）重鏈V區(qū)基因CH：人CH基因片段含多個(gè)外顯子，在大多數(shù)情況下C區(qū)中每個(gè)結(jié)構(gòu)域和鉸鏈區(qū)是由單獨(dú)外顯子編碼。重鏈重鏈基因CDR1CDR2CDR3VCVDJC（二）重鏈C區(qū)基因V：人V基因片段為40個(gè)，根據(jù)同源性可分7個(gè)家族，編碼1-95aa，包括CDR1、CDR2和部分CDR3

J：人J基因片段為5個(gè)，編碼96-108aa,包括部分CDR3和第4個(gè)骨架區(qū)

C：人C基因片段為1個(gè)，編碼109-214aa輕鏈輕輕基因CDR1CDR2CDR3VCVJC（三）輕鏈的結(jié)構(gòu)

人Vλ約有30個(gè)，根據(jù)同源性可分10個(gè)家族；Jλ和Cλ各4個(gè)，并成對(duì)排列輕鏈輕輕基因CDR1CDR2CDR3VCVJC（四）λ輕鏈的結(jié)構(gòu)（一）重組信號(hào)序列(recombinationsignalsequence,RSS)

重排過程主要由一組重組酶來識(shí)別V、（D）、J基因片段兩側(cè)的重組信號(hào)序列，通過切斷、修復(fù)DNA而實(shí)現(xiàn)的

RSS

結(jié)構(gòu)：回文結(jié)構(gòu)七聚體富含A/T的九聚體分布：V片段3、J片段

5和D片段的兩側(cè)

RSS與重鏈VDJ基因重排：D+JDJV+DJVDJRSS與輕鏈VJ基因重排：V+JVJBCR的基因重排（二）V(D)J重組酶(recombinase)

RAG-1/RAG-2復(fù)合物（重組激活酶復(fù)合物）

性質(zhì)：內(nèi)切酶

表達(dá)：T/B淋巴細(xì)胞發(fā)育早期階段

作用：識(shí)別RSS，切斷七聚體一側(cè)末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）

表達(dá)：B細(xì)胞前體

作用：通過非模板的方式將數(shù)個(gè)核苷酸加到DNA斷端

其它：內(nèi)切酶、DNA外切酶、DNA合成酶等（三）BCR重排順序

H重鏈可變區(qū)基因重排示意圖

BCR胚系基因重排發(fā)生具有明顯的程序化形式，首先是重鏈進(jìn)行基因重排，隨后才是輕鏈重排。

經(jīng)過胚系基因的重排，B細(xì)胞的DNA序列與其他體細(xì)胞有很大不同，這是存在于B細(xì)胞和T細(xì)胞中非常獨(dú)特的現(xiàn)象。（四）等位排斥和同型排斥

等位排斥(allelicexclusion)：

在B細(xì)胞中的一對(duì)同源染色體上，只有一條染色體上的H或L基因可得到有效表達(dá)。抑制另一條染色體H基因重排14號(hào)染色體有效H基因重排啟動(dòng)2號(hào)染色體鏈基因重排失敗另一條染色體H基因重排

同型排斥(isotypeexclusion)：

Ig和兩型中擇一表達(dá)；先表達(dá)鏈基因，如鏈基因重排失敗，才開始鏈基因表達(dá)。

小鼠：=95:5，人：=65:35BCR多樣性產(chǎn)生的機(jī)制

胚系中眾多V、D、J基因片段（組合多樣性，combinatorialdiversity）人重鏈：VH(40)D(25)JH(6)=6000人輕鏈：V(40)J(5)=200人輕鏈：V(30)J(4)=120

輕、重鏈不同配對(duì)6103

2.0102+6103

1.2102=1.92106

V（D）J連接的多樣性（junctionaldiversity）

體細(xì)胞高頻突變（somatichypermutation）（二）B細(xì)胞的發(fā)育和分化（二）V(D)J重組酶(recombinase)D-J重排V-DJ重排表達(dá)preBCR輕鏈V-J重排重鏈可變區(qū)基因重排示意圖分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層（二）B細(xì)胞的發(fā)育和分化末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）Ig(CD79b)第三節(jié)B細(xì)胞的亞群重鏈基因重鏈基因表達(dá)m鏈(胞漿和胞膜)表達(dá)m鏈表達(dá)m、d鏈RAG-1/RAG-2復(fù)合物（重組激活酶復(fù)合物）JH（joining）：末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）BCR是表達(dá)于B細(xì)胞表面的免疫球蛋白，即膜型免疫球蛋白（membraneimmunoglobulin,mIg）。mIgM對(duì)自身抗原的識(shí)別導(dǎo)致RAG基因重新活化，發(fā)生輕鏈VJ的再次重排，合成新的輕鏈。等位排斥(allelicexclusion)：作用：識(shí)別RSS，切斷七聚體一側(cè)RAG-1/RAG-2復(fù)合物（重組激活酶復(fù)合物）（一）重組信號(hào)序列(recombinationsignalsequence,RSS)BCR胚系基因重排發(fā)生具有明顯的程序化形式，首先是重鏈進(jìn)行基因重排，隨后才是輕鏈重排。胚系中眾多V、D、J基因片段（組合多樣性，combinatorialB細(xì)胞可捕獲可溶性抗原如重鏈或輕鏈基因重排失敗

結(jié)合抗原輸向外周B細(xì)胞庫細(xì)胞丟失克隆刪除自身免疫耐受mIgMmIgDmIgM骨髓早期祖B細(xì)胞晚期祖B細(xì)胞大前B細(xì)胞小前B細(xì)胞未成熟B細(xì)胞成熟B細(xì)胞

表達(dá)m鏈

重鏈基因重鏈基因表達(dá)m鏈(胞漿和胞膜)表達(dá)m鏈表達(dá)m、d鏈D-J重排V-DJ重排表達(dá)preBCR輕鏈V-J重排

(m:5/VpreB)表達(dá)preBCR表達(dá)輕鏈

表達(dá)輕鏈B細(xì)胞在中樞免疫器官的發(fā)育和分化B細(xì)胞的發(fā)育階段B細(xì)胞中樞免疫耐受的形成

克隆清除：

未成熟B細(xì)胞表面表達(dá)的mIgM與骨髓中的自身抗原結(jié)合，會(huì)導(dǎo)致該細(xì)胞的凋亡。

受體編輯：

mIgM對(duì)自身抗原的識(shí)別導(dǎo)致RAG基因重新活化，發(fā)生輕鏈VJ的再次重排，合成新的輕鏈。

失能：

mIgM與自身抗原的結(jié)合引起mIgM表達(dá)下調(diào)，進(jìn)入外周淋巴器官后對(duì)抗原刺激不應(yīng)答。第二節(jié)B淋巴細(xì)胞的表面分子及其作用B細(xì)胞的膜表面分子

B細(xì)胞抗原受體復(fù)合物

B細(xì)胞共受體協(xié)同刺激分子

其他表面分子一.B細(xì)胞抗原受體(BCR)復(fù)合物

mIgIg(CD79a)Ig(CD79b)BCR復(fù)合物結(jié)構(gòu)模式圖BCR復(fù)合體介導(dǎo)的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)模式圖二、B細(xì)胞共受體（coreceptor）

CD19/CD21/CD81

多分子活化共受體，增強(qiáng)B細(xì)胞對(duì)抗原刺激的敏感性。

CD19：胞質(zhì)區(qū)可傳遞活化信號(hào)；CD21(CR2)：可結(jié)合補(bǔ)體C3d；CD81：連接CD19和CD21，穩(wěn)定復(fù)合物結(jié)構(gòu)。B細(xì)胞雙重抗原識(shí)別模式圖V（D）J連接的多樣性（junctionaldiversity）IL5(EBV轉(zhuǎn)化B細(xì)胞)、IL6信號(hào)序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層B細(xì)胞雙重抗原識(shí)別模式圖C：人C基因片段為1個(gè)，編碼109-214aaB細(xì)胞所分泌的細(xì)胞因子CD40：組成性表達(dá)，與活化T細(xì)胞CD40L結(jié)合，傳遞B細(xì)胞活化第二信號(hào)；表達(dá)：B細(xì)胞前體等位排斥(allelicexclusion)：（一）BCR的基因結(jié)構(gòu)、重排及其多樣性D（diversity）：CD20：調(diào)節(jié)B細(xì)胞增殖與分化，B細(xì)胞特異性標(biāo)志力與多種不同抗原表位結(jié)合的現(xiàn)象。BCR復(fù)合物結(jié)構(gòu)模式圖自發(fā)分泌針對(duì)微生物脂多糖的天然抗體重鏈基因重鏈基因表達(dá)m鏈(胞漿和胞膜)表達(dá)m鏈表達(dá)m、d鏈B細(xì)胞抗原受體(BCR)復(fù)合物VCH成對(duì)排列重排過程主要由一組重組酶來識(shí)別V、（D）、J基因片段兩側(cè)的H信號(hào)序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2VCBCR復(fù)合體介導(dǎo)的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)模式圖VCVDJCB細(xì)胞可捕獲可溶性抗原參與補(bǔ)體的溶細(xì)胞或溶菌作用CD32：負(fù)反饋調(diào)節(jié)B細(xì)胞活化及抗體的分泌分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層在B細(xì)胞中的一對(duì)同源染色體上，只有一條染色體上的H或L多分子活化共受體，增強(qiáng)B細(xì)胞對(duì)抗原刺激的敏感性。CD81：連接CD19和CD21，穩(wěn)定復(fù)合物結(jié)構(gòu)。一、產(chǎn)生抗體參與體液免疫VDJCVH（variable）:(m:5/VpreB)表達(dá)preBCR表達(dá)輕鏈表達(dá)輕鏈B淋巴細(xì)胞重要的表面分子示意圖（一）BCR的基因結(jié)構(gòu)、重排及其多樣性VC三、協(xié)同刺激分子（co-stimulatorymolecules）

CD40：組成性表達(dá)，與活化T細(xì)胞CD40L結(jié)合，傳遞B細(xì)胞活化第二信號(hào)；

CD80/CD86：活化B細(xì)胞表達(dá)，與T細(xì)胞上CD28和CTLA-4結(jié)合，提供T細(xì)胞活化的第二信號(hào)；

其他黏附分子：ICAM-1（CD54），LFA-1等。ICAM-1LFA-1協(xié)同刺激分子B淋巴細(xì)胞重要的表面分子示意圖四、其他表面分子

CD20：調(diào)節(jié)B細(xì)胞增殖與分化，B細(xì)胞特異性標(biāo)志CD22：胞漿含ITIM基序，負(fù)調(diào)節(jié)CD19/CD20/CD81CD32：負(fù)反饋調(diào)節(jié)B細(xì)胞活化及抗體的分泌一、B-1細(xì)胞

表面標(biāo)記：CD5＋

分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層

功能：參與固有免疫第三節(jié)B細(xì)胞的亞群免疫應(yīng)答特點(diǎn)：

多反應(yīng)性（polyreactivity）—指B細(xì)胞抗原受體或其所產(chǎn)生的抗體，以相對(duì)較低的親和力與多種不同抗原表位結(jié)合的現(xiàn)象。產(chǎn)生IgM為主的低親和力抗體自發(fā)分泌針對(duì)微生物脂多糖的天然抗體無免疫記憶二、B-2細(xì)胞

產(chǎn)生各類（亞類）特異性Ig作為抗原提呈細(xì)胞對(duì)抗原進(jìn)行加工處理及呈遞分泌細(xì)胞因子調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答B(yǎng)-1細(xì)胞與B-2細(xì)胞的異同B-1細(xì)胞B-2細(xì)胞表面標(biāo)記CD5，mIgMCD19，mIgM和mIgD抗原識(shí)別譜多糖抗原蛋白質(zhì)抗原作用特點(diǎn)快，IgM為主，不發(fā)生類別轉(zhuǎn)換沒有免疫記憶慢，IgG為主，有類別轉(zhuǎn)換有免疫記憶分布體腔和腸壁固有層淋巴結(jié)、脾臟參與應(yīng)答非特異性免疫應(yīng)答特異性免疫應(yīng)答第四節(jié)B淋巴細(xì)胞的功能一、產(chǎn)生抗體參與體液免疫二、加工處理及提呈抗原三、分泌細(xì)胞因子調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答一、產(chǎn)生抗體參與體液免疫1.中和作用：中和毒素中和病毒2.調(diào)理吞噬作用3.參與補(bǔ)體的溶細(xì)胞或溶菌作用大量水份涌入細(xì)胞內(nèi)內(nèi)容物向外滲漏細(xì)菌細(xì)胞4.NK細(xì)胞介導(dǎo)的ADCC作用B淋巴細(xì)胞重要的表面分子示意圖脾中的淋巴細(xì)胞，50%VC輕、重鏈不同配對(duì)失敗另一條染色體H基因重排信號(hào)序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層B細(xì)胞在中樞免疫器官的發(fā)育和分化個(gè)骨架區(qū)（二）V(D)J重組酶(recombinase)人VH基因片段為40個(gè)，根據(jù)同源性分為7個(gè)家族，編碼H鏈的BCR多樣性產(chǎn)生的機(jī)制早期祖B細(xì)胞晚期祖B細(xì)胞大前B細(xì)胞小前B細(xì)胞未成熟B細(xì)胞成熟B細(xì)胞（一）BCR的基因結(jié)構(gòu)、重排及其多樣性B-1細(xì)胞與B-2細(xì)胞的異同CD19/CD21/CD81CD20：調(diào)節(jié)B細(xì)胞增殖與分化，B細(xì)胞特異性標(biāo)志61032.RSS與重鏈VDJ基因重排：D+JDJV+DJVDJ分布：V片段3、J