血脂及血漿脂蛋白檢驗

血脂及血漿脂蛋白檢驗第1頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月脂類：是生物體內不溶于水或微溶于水而溶于非極性有機溶劑的一大類物質的總稱，包括脂肪和類脂。脂肪(fat)：

三脂酰甘油(triacylglycerols,TAG)也稱為甘油三酯(triglyceride,TG)類脂(lipoid)：膽固醇TC

膽固醇酯CE

磷脂PL

糖脂第一節(jié)概述第2頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月脂肪的消化與吸收1、脂肪：占體重10%--20%，分布在皮下、大網膜、腸系膜、腎周圍----脂庫；易受營養(yǎng)狀況和活動量等因素等影響而變動，稱可變脂2、類脂：占體重5%，分布在各組織和器官中，含量恒定，稱恒定脂或基本脂第3頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月

分類占體重

分布

生理功能脂肪（儲存脂，可變脂）甘油三酯

10~20﹪脂肪組織（皮下，腹腔大網膜，腸系膜，內臟周圍組織）、血漿1.儲脂供能2.促脂溶性維生素吸收3.保持體溫,保護內臟4.構成血漿脂蛋白類脂（基本脂，固定脂）糖酯、磷脂、膽固醇及其酯5﹪生物膜、神經、血漿1.維持生物膜的結構和功能2.膽固醇可轉變成類固醇激素、維生素D、膽汁酸等3.構成血漿脂蛋白第4頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月血脂：血漿中所含脂類的總稱，主要包括甘油三酯、磷脂、膽固醇、膽固醇酯及游離脂肪酸等。

體內合成的脂類血脂來源和去路：食物脂類的消化吸收脂庫動員釋放一、血脂及血漿脂蛋白血脂氧化供能進入脂庫儲存構成生物膜轉化成其他物質第5頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月血漿脂蛋白：脂類與載脂蛋白組成的顆粒，是脂類在血漿中的存在和轉運形式；（一）.血漿脂蛋白的分類和命名：+CMβ前βα血漿脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳圖譜（1）電泳分類法：可分離出α脂蛋白、前β脂蛋白、β脂蛋白和乳糜微粒.第6頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月按密度大小依次為：

乳糜微粒（CM）極低密度脂蛋白（VLDL)低密度脂蛋白(LDL)高密度脂蛋白(HDL)密度血漿脂蛋白的分類顆粒（2）超速離心分類法電泳法和超速離心法分離的脂蛋白對應關系為：α脂蛋白相當于HDL、前β脂蛋白相當于VLDL、β脂蛋相當于LDL第7頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）脂類：甘油三酯、磷脂、膽固醇和膽固醇酯，其含量和比例在各類脂蛋白中差別極大。（二）、血漿脂蛋白的組成

脂類和載脂蛋白組成（2）載脂蛋白（apo）：是指血漿脂蛋白中蛋白質成分，分為apoA、apoB、apoC、apoD、apoE，其主要功能是結合和轉運脂類，此外不同載脂蛋白還有其特殊功能。第8頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月脂蛋白的結構第9頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月§9.1脂類的概述血漿脂蛋白的結構第10頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月CMVLDLLDLHDL密度＜0.960.96~1.0061.006~1.0631.063~1.210組成脂類含TG最多，80~95%含TG50~70%含膽固醇及其酯最多45~50%含脂類50%蛋白質最少,2%10%20%最多，約50%功能從小腸轉運外源性甘油三酯至肝臟及肝外組織從肝臟轉運內源性甘油三酯至各組織從肝臟轉運膽固醇至各組織逆向轉運膽固醇血漿脂蛋白的組成特點第11頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月在結合和轉運脂質及穩(wěn)定脂蛋白的結構上發(fā)揮主要作用調節(jié)脂蛋白代謝關鍵酶(如LPL、LCAT、HL)活性

LCAT：卵磷脂膽固醇脂酰轉移酶（血漿中）

參與脂蛋白受體的識別

如HDL受體、LDLR或稱為ApoB/E受體、清道夫受體、ApoE受體（即LRP：LDL受體相關蛋白

）載脂蛋白的功能第12頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月二、脂蛋白代謝紊亂

空腹血漿中的脂類水平高于參考值上限者稱為高脂血癥。臨床常見的有高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥等。

又稱高脂蛋白血癥，臨床上通常將空腹血漿中一種或幾種LP含量明顯升高稱高脂蛋白血癥。返回第13頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月繼發(fā)性高脂蛋白血癥：指某些原發(fā)病在病理演變過程中造成脂蛋白代謝紊亂，而繼發(fā)出現高脂蛋白血癥。如糖尿病、腎病綜合征、甲狀腺功能減退癥等。原發(fā)性高脂蛋白血癥：指在排除了繼發(fā)性高脂血癥后，即可診斷為原發(fā)性高脂血癥。已知部分原發(fā)性高脂血癥是由于先天性基因缺陷所致。高脂蛋白血癥的分型按病因分型第14頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月分類血漿4℃過夜外觀TCTG發(fā)生頻率相當于WHO表型I類透明↑↑→常見ⅡaⅡ類混濁或伴奶油上層→↑↑↑↑常見Ⅱb、Ⅲ、Ⅳ、ⅤⅢ類奶油上層，下層透明→↑↑↑罕見Ⅰ15高脂蛋白血癥的Lewis分型法（1976年）第15頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月表型血漿4℃過夜外觀TCTGCMVLDLLDL備注Ⅰ奶油上層,下層清↑→↑↑↑↑↑↑↓→易發(fā)胰腺炎Ⅱa透明↑↑→→→↑↑易發(fā)冠心病Ⅱb透明↑↑↑↑→↑↑易發(fā)冠心?、竽逃蜕蠈?下層混濁↑↑↑↑↑↑↓易發(fā)冠心病Ⅳ混濁↑→↑↑→↑↑→易發(fā)冠心?、跄逃蜕蠈?下層混濁↑↑↑↑↑↑↓→易發(fā)胰腺炎高脂蛋白血癥的WHO分類第16頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月型別*增加的脂蛋白血漿脂質血漿載脂蛋白血漿外觀電泳原因Ⅰ型CMTC正?；颉黅G↑↑↑B48↑A↑C↓↑奶油上層下層透明原點深染LPL活性降低ApoCⅡ缺乏Ⅱa型LDLTC↑TG正常B100↑透明或輕度混濁深β帶LDL受體缺陷或活性降低；LDL異化障礙Ⅱb型LDLVLDLTC↑↑TG↑B↑CⅡ↑CⅢ↑少有混濁深β帶深前β帶VLDL合成旺盛VLDL→LDL轉換亢進Ⅲ型IDLTC↑↑TG↑↑CⅡ↑CⅢ↑E↑↑奶油上層下層混濁寬β帶LDL異化速度降低Ⅳ型VLDLTC正?；颉黅G↑↑CⅡ↑CⅢ↑混濁深前β帶VLDL合成亢進VLDL處理速率變慢Ⅴ型CMVLDLTC↑TG↑↑CⅡ↑↑CⅢ↑↑E↑↑奶油上層下層混濁原點及前β帶深染LPL活性低下VLDL,CM處理速率低下脂蛋白血癥的分型及特征第17頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月Ⅰ型高脂蛋白血癥表現：TG升高，TC正常，CM、VLDL含量增高，LDL和HDL降低，又稱高CM血癥原因：LPL活性降低，使CM中的TG不能水解為CM殘粒，無法被LDL受體識別進行代謝第18頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月Ⅱa型高脂蛋白血癥表現：血清TG、B、LDL和TC含量明顯增高，電泳可發(fā)現濃染的β－脂蛋白帶，又稱高β－脂蛋白血癥原因：LDL受體缺陷或活性降低，使LDL無法被識別和降解，導致血中LDL升高。第19頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月Ⅱb型高脂蛋白血癥表現：Tc和TG增高，LDL和VLDl增高電泳時除有高β－脂蛋白帶外，還有前β－脂蛋白帶，但二者不融合，稱混合型高脂血癥原因：LDL受體正常，但VLDL合成旺盛，B合成旺盛，但VLDL代謝未加強。造成VLDL在血中儲積。第20頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月Ⅲ型高脂蛋白血癥表現：TC和TG增高，電泳可發(fā)現闊β－脂蛋白帶，（β－脂蛋白帶和前β－脂蛋白帶融合），也稱高β－VLDL血癥原因：罕見的遺傳病，患者早年即可發(fā)生冠心病第21頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月Ⅳ型高脂蛋白血癥表現：高TG，LDL正常，HDL降低，又稱高TG血癥原因：病因尚不完全清楚，為顯性遺傳疾病，VLDL合成亢進，VLDL代謝速度減慢第22頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月Ⅴ型高脂蛋白血癥表現：TG增高，CM和VLDL增高，電泳表現為高CM和高前β－脂蛋白血癥共存的混合性高脂血癥，4℃放置血清可呈“奶油樣”。原因：LPL活性低下，導致TG不能降解和VLDL生成過多，引起血中淤積。第23頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月表型血漿4℃過夜外觀TCTGCMVLDLLDL備注Ⅰ奶油上層,下層清↑→↑↑↑↑↑↑↓→易發(fā)胰腺炎Ⅱa透明↑↑→→→↑↑易發(fā)冠心?、騜透明↑↑↑↑→↑↑易發(fā)冠心病Ⅲ奶油上層,下層混濁↑↑↑↑↑↑↓易發(fā)冠心?、艋鞚帷装l(fā)冠心?、跄逃蜕蠈?下層混濁↑↑↑↑↑↑↓→易發(fā)胰腺炎高脂蛋白血癥的WHO分類第24頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月動脈粥樣硬化（AS）概述AS是動脈內膜的脂質、血液成分的淤積和纖維蛋白的增生并伴有鈣化和壞死及炎癥病變的一類慢性進行性病理過程。目前是人類第一發(fā)病率高的疾病，但對其發(fā)病機理尚不完全清楚，共同的觀點認為：血脂的改變、纖溶系統(tǒng)亢進、高血壓和血管內膜炎癥是AS的重要病因第25頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月脂蛋白代謝與AS的關系血脂與AS的關系（1）血脂的異常增高是產生AS的重要因素（2）血管內皮炎癥、氧化型LDL在血管內膜中淤積和產生泡沫細胞是形成As的主要原因（3）高脂血癥引起的血粘度的改變，進而改變凝血系統(tǒng)和纖溶系統(tǒng)的各種因子的表達和功能，可促進血栓的形成，加速As的形成和發(fā)展第26頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月目前對AS研究的新觀點（1）脂蛋白的氧化

oxLDL的形成是炎癥分子強有力的誘導物（2）血栓素和前列腺素平衡失常血小板的聚集可釋放血栓素導致血栓發(fā)生（3）內皮細胞損傷和鈣化內皮細胞損傷激活纖維蛋白激活劑如組織因子，血小板激活因子，IL－1等促血凝物質，導致血管鈣化，加劇血栓形成。

第27頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月

高脂血癥的防治

合理飲食加強鍛煉控制體重食療和藥物治療相結合第28頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月國外血脂標準化工作的回顧和現狀※70年代中期，血脂與冠心病關系確立后，血脂測定工作和質量控制日益受到重視，美國西北臨床脂質研究中心（LRC）進行了實驗室間的血脂評價，發(fā)現CV值差距相當大。※1985年，美國CDC提出TC和TG測定的標準化計劃，并與WHO合作，當時有800多實驗室參加，由CDC提供標準血清，目的摸清實驗室間TC和TG測定的準確度和精密性，提高血脂測定水平。第29頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月※1985年，美國衛(wèi)生研究院（NIH）提出膽固醇教育計劃（NCEP），成立NCEP委員會，并投入大量資金，動員所有相關組織，成立了四個專家組（LSP），領導TC標準化工作。

※1990年，NCEP提出了膽固醇測定的方法學建議，并在1995年又提出了LDL、HDL和TG測定的建議，并對幾項脂類測定的現狀、變異來源、分析目標、醫(yī)學決定水平及方法學、制造商和機構提出了具體的建議，被稱為美國脂類測定的綱領性文件第30頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月※※※※※※※※※※※※※※1981年，國際免疫學會聯(lián)盟的脂類載脂蛋白委員會和美國CDC提供了有ApoAⅠ和B的質控血清，分別在83年和87年進行了室間質量控制?！?989年，國際臨床化學聯(lián)合會（IFCC）召開了《載脂蛋白免疫化學測定的標準化會議》，整理了一個統(tǒng)一的標準化計劃，并提出了一個草案，于1989年7月討論實施。第31頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月目前國際脂類標準化體系和組成（美國）

美國心肺血液研究所國家協(xié)作委員會實驗室標準化專家（LSP）國家臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）國家臨床實驗室參考系統(tǒng)（NRSL）國家膽固醇參考系統(tǒng)NRS／CHO學術團體政府機構

企業(yè)第32頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月美國脂類測定的標準化體系◆1.對各項脂類測定提出分析目標

脂類測定分析目標(NCEP1994)組別總誤差%不準確性(偏差%)不精確度(CV)TC≤8.9≤±3≤3LDL≤12≤±4≤4HDL≤13≤±5≤4TG≤15≤±5≤5第33頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月美國脂類測定的標準化體系◆建立了脂質研究的實驗室網絡和國家膽固醇參考方法實驗室網絡◆有專門的機構提供標準化血清和標準化指導服務,(包括優(yōu)秀方法的研究和推薦,參考材料和質控材料的研究和提供),并定期做質量調查第34頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月

我國脂類測定的標準化現狀至今，我國尚無全國性的脂類標準化體系，但有區(qū)域性的調查和行業(yè)標準化，已做了大量的基礎性工作。（1）調查摸底

1987年江浙和1992年京津滬醫(yī)院實驗室Tc測定調查（2）參考物的研制老年所研制了膽固醇純度標準物質（GBW092030）和血清膽固醇標準物（GBW09138），1994年國家技術監(jiān)督局批準作為國家一級標準，達到了美國標準物同等水平，純度99.8％，最近又制備了APOA和B的定值血清，得到WHO的認可第35頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月我國脂類測定的標準化現狀（3）參考方法的研究老年所提出了HLPC法為TC的參考方法其各項技術指標達到了美國ALBK法的要求（4）推薦常規(guī)測定方法

1994年全國脂類測定研討會提出了TC、TG、HDL和LDL的推薦方法，2003年又發(fā)表了《臨床血脂測定建議》第36頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月血清脂質的測定血漿中的脂質隨年齡增長而變化，并與多種因素有關系，因此，研究分析前的變異是血脂標準化測定的基礎，也是必要的考慮因素。第37頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)血清總膽固醇測定（1）化學法（ALBK法）皂化、提取、顯色、比色。美國參考方法（2）高效液相法