根尖細(xì)胞有絲分裂制片與觀察課件

了的骨實(shí)驗(yàn)植物根尖細(xì)胞有絲分裂制片與觀察了的骨實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)植物根尖有絲分裂制片技術(shù);2、了解和辨別有絲分裂各個(gè)時(shí)期的染色體特征3、掌握染色體的觀察和計(jì)數(shù)方法。二、實(shí)驗(yàn)原理植物根尖的分生細(xì)胞的有絲分裂,每天都有分裂高峰時(shí)間,此時(shí)經(jīng)過(guò)適當(dāng)取材處理,加以固定、離析、染色、壓片等步驟,可以迅速地將細(xì)胞分散附著于載玻片和蓋玻片之間,再置于顯微鏡下觀察,可以看到大量處于有絲分裂各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞和染色體。細(xì)胞由第一次有絲分裂結(jié)束到第二次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過(guò)程為一個(gè)細(xì)胞分裂周期,包括間期、前期、中期、后期和末期。間期:一般持續(xù)時(shí)間比較長(zhǎng),是核內(nèi)染色體DNA合成的過(guò)程,能看到核的變化,如核和其內(nèi)的核仁體積增大,核內(nèi)存在染色質(zhì),一般情況看不到染色體。了的骨前期:細(xì)胞核內(nèi)染色體呈細(xì)絲狀,在核內(nèi)互相纏繞成團(tuán)核仁開(kāi)始消失,核膜隨之破裂。此時(shí)染色體已由兩條染色單體所組成,只在著絲點(diǎn)處連結(jié)。中期:各染色體的著絲點(diǎn)排列在赤道面上,兩臂伸向赤道面的兩旁。紡錘體完全形成,其一端與染色體的著絲點(diǎn)相連結(jié)端集中于細(xì)胞的極處。中期染色體高度濃縮具有各物種染色體的典型形態(tài),是染色體計(jì)數(shù)的最好時(shí)期?！ず笃?每一染色體的著絲點(diǎn)分裂,兩條染色單體彼此分開(kāi)成兩個(gè)子染色體,子染色體在紡錘絲的牽引下,分別移向兩極。末期:移向兩極的染色體,逐漸松散成染色質(zhì),紡錘絲逐漸消失,在赤道面上開(kāi)始出現(xiàn)細(xì)胞板,把一個(gè)細(xì)胞分隔成兩個(gè)子細(xì)胞,核膜重新形成,核仁出現(xiàn),逐漸進(jìn)入間期狀I(lǐng)nterphase了的骨ProphaseMetaphaseAnaphaseTelophase了的骨儀器與材料·1、材料:小麥的根尖。2、用具及藥品:顯微鏡、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、染色缸、試劑瓶、酒精燈、鑷子剪刀、紗布、吸水紙;無(wú)水乙醇、45%醋酸、卡諾固定液(無(wú)水乙醇:冰醋酸=3:1)、1N鹽酸、蒸餾水、1%醋酸洋紅、改良品紅。四、實(shí)驗(yàn)程序取材:選取小麥種子浸泡于溫水中,使種子吸脹,再置于墊有濕濾紙的培養(yǎng)皿中,于25℃條件下發(fā)芽,待根長(zhǎng)約1-2cm在大量細(xì)胞進(jìn)行分裂時(shí)剪根(2)預(yù)處理:剪取的根尖放入盛有蒸餾水的小瓶,置于冰水溶液中,0-3℃處理24小時(shí)。(3)固定:主要是殺死細(xì)胞,盡可能保持生活時(shí)的真實(shí)狀態(tài)并便于染色。將經(jīng)過(guò)預(yù)處理的根尖沖洗王凈后,用濾紙吸去沾著的水滴,以卡諾固定液固定24小時(shí)。·(4)解離:將固定好的根尖移入鹽酸酒精離析液中,在35℃下離析8分鐘,或在1N鹽酸中,60℃下離析15分鐘。了的骨(5)染色:將離解好的根尖用蒸餾水沖洗幾次,在1%醋酸洋紅中染色2-4小時(shí);或置于染色缸里,加改良品紅溶液,靜置染色10-15分鐘(6)壓片:取已染色的根尖,置于載玻片上,在分生組織處切取一小塊,加45%醋酸(或改良品紅)滴,蓋上蓋玻片,用刀片架起蓋玻片一角,用鑷子尖輕敲幾下,使材料分散,移去架起的刀片,再輕敲幾下,在酒精燈上微微加熱,吸去多余的染液,用手指垂直壓片(切勿移動(dòng)蓋玻片),