土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)（教案）

土壤中分解尿素的細菌的分別與計數(shù)〔二〕主講：黃岡中學(xué)優(yōu)秀生物教師一、爭論思路〔一〕篩選菌株；〔二〕統(tǒng)計菌落數(shù)目；〔三〕設(shè)置比照。〔一〕土壤取樣從肥沃、潮濕的土壤中取樣。先鏟去表層土3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先預(yù)備好的信封中。取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌?！捕持苽渑嘤苽湟阅蛩貫槲ㄒ坏吹倪x擇培育基?！踩硺悠返南♂?10g。2、在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁進展。3、分別不同的微生物承受不同的稀釋度?！矄挝唬褐?kg〕是不同的。例如在干旱土壤中218547723.1當有針對性地供給選擇培育的條件?！菜摹橙油坎荚囼灂r要對培育皿作好標記。注明培育基類型、培育時間、稀釋度、培育物等。30——300成功，并能夠進展菌落的計數(shù)，假設(shè)同一稀釋倍數(shù)的三個重復(fù)的菌落數(shù)相差較大，說明試驗不準確，需要重試驗?！参濉澄⑸锏呐嘤c觀看細菌：30～37℃1～2d放線菌：25～28℃培育5～7d霉菌：25～28℃的溫度下培育3～4d。24h落的數(shù)目。微生物的培育與觀看三、結(jié)果分析與評價些菌落。樣，菌落數(shù)偏高，難以選擇出分解尿素的微生物。2、是否獲得了某一稀釋度下，菌落數(shù)目在30—300的平板。在這稀釋度下，是否至少有兩個平板的菌落數(shù)相近？結(jié)果接近嗎？假設(shè)差異很大，可能是什么緣由引起的？四、操作提示◆無菌操作1、取土樣的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌。2、應(yīng)在火焰旁稱取土壤。在火焰四周將稱好的土樣倒入燒瓶中，塞好棉塞。3、在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作?！糇龊脴擞洷驹囼炇褂玫钠桨搴驮嚬鼙容^多。為避開混淆，最好在使用前就做好標記。稀釋度?！粢?guī)劃時間作時更加有條不紊。五、課外延長本課題對能分解尿素的細菌進展了初步的篩選，這只是純化菌種的第一步。對分別菌種作進一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在以尿素為唯一氮源的培育基中參加酚紅指示劑。培育某種細菌后，假設(shè)PH上升，指示劑將變紅，說明該細菌能夠分解尿素。選做課題：〔一〕空氣中微生物總數(shù)的檢測〔二〕水中細菌總數(shù)的檢測〔三〕牛奶中細菌的分別與計數(shù)〔四〕土壤中真菌〔或放線菌〕的分別與計數(shù)例如：測定飲水中大腸桿菌數(shù)量的方法是將肯定體積的水用細菌過濾器過濾〕上培育，大腸桿菌菌落呈現(xiàn)黑色，通過記述得出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。本課題學(xué)問小結(jié)：-返回-同步測試一、選擇題1、使用選擇培育基的目的是〔〕A．培育細菌B．培育真菌2、以下說法不正確的選項是〔〕科學(xué)家從70－80度熱泉中分別到耐高溫的TaqDNA聚合酶5M1、M2、M3、M4、M5，M3樣品菌落數(shù)的估量值結(jié)果的可信度D．同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多。3、為培育和分別出酵母菌并淘汰雜菌，常在培育基中參加〔〕A．B．較多的碳源物質(zhì)C．青霉素類藥物 D．高濃度食鹽10615050A〔〕①由于土樣不同 ②由于培育基污染③由于操作失誤 置比照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④5、關(guān)于土壤取樣的表達錯誤的選項是〔〕B．先鏟去表層土3cm左右，再取樣D．應(yīng)在火焰旁稱取土壤6、以下關(guān)于從土壤中分別細菌的操作步驟中，正確的選項是〔〕①土壤取樣10g90mL0.1mL、104、105、106、107A．①→②→③→④B．①→③→②→④C．①→②→④→③D．①→④→②→③7、以下關(guān)于測定土壤中細菌數(shù)量的表達，正確的選項是〔〕A．一般選用103～107倍的稀液分別涂布B．103、104105C．103、104105101～107培育8、以下關(guān)于微生物的培育表達錯誤的選項是〔〕A．30～37℃1～2dB．放線菌一般在25～28℃的溫度下培育5～7dC．霉菌一般在25～28℃的溫度下培育3～4d9、以下操作需要在火焰旁進展的一組是〔〕①土壤取樣 ②稱取土壤③稀釋土壤溶液④涂布平板 ⑤微生物的培育A．①②③④⑤ C．③④⑤ D．②③④10、以下可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是〔〕A．以尿素為唯一氮源的培育基中加人酚紅指示劑11、土壤取樣時最好選擇哪種環(huán)境中的土壤做分別細菌的試驗〔〕A．B．花盆中C．D．菜園里CBCACCBDDAD二、非選擇題計菌落數(shù)目一般用稀釋涂布平板法，當樣品的稀釋度足夠高時，培育基外表生長的一個 ，來源于樣品稀釋液中的一個 般選擇菌落數(shù)在 的平板計數(shù)。1310633163為統(tǒng)計結(jié)果。你認為這一結(jié)果是否接近真實值?假設(shè)需要改進，如何改進?14、在進展操作本課題試驗時應(yīng)特別留意： 、 、 。15、在105稀釋度下求出3個平板上菌落數(shù)的平均值是63，那么每克樣品中的菌落數(shù)是多少?顯示答案12、菌落 活菌 30～30013、不接近真實值，需要重試驗。14、無菌操作 作好標記 規(guī)劃時間15、6.3×107-END-課外拓展VosScienceMichielVos5Stenotrophomas菌體對細菌進展感染，增殖，并導(dǎo)致細菌細胞裂開，然后噬菌體從一個細菌連續(xù)感1/3感，很簡潔被噬菌體感染。因而，噬菌體能夠很快掌握土壤細菌的種類。性〔locallyadapted〕”。Vos要的意義。-END-高考解析5100倍，再抽樣鏡檢，視野下如乙圖所示。依據(jù)試驗結(jié)果推斷，以下表達正確的選項是〔〕A．5200小時內(nèi)，酵母菌經(jīng)受了約6個細胞周期C．在這段培育時間里，酵母菌的一個細胞周期需要時間平均為1.3小時D．5K解析：21002001200，依據(jù)菌體生殖2n=200可知，酵母菌經(jīng)受了約7～8個細胞周期，一個細胞周期需要時間平均2、以下圖表示利用谷氨酸棒狀桿菌進展發(fā)酵生產(chǎn)的某個階段的兩項測量指標，據(jù)圖推斷以下說法不正確的選項是〔〕A．圖中所測量的產(chǎn)物主要是在穩(wěn)定期產(chǎn)生的C．假設(shè)僅阻斷圖中產(chǎn)物合成，對菌體生長生殖無明顯影響C．假設(shè)僅阻斷圖中產(chǎn)物合成，對菌體生長生殖無明顯影響