免疫球蛋白IgG測定

免疫球蛋白IgG測定1檢驗?zāi)康闹笇?dǎo)本室工作人員規(guī)范操作本檢測項目，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確。2原理免疫透射比濁法抗免疫球蛋白G抗體和樣本中的抗原形成抗原抗體復(fù)合物，出現(xiàn)凝集，進行透射比濁檢測。通過加入PEG可促使反應(yīng)迅速達到終點，可增加靈敏度，降低樣本中抗原過剩導(dǎo)致假陰性的風(fēng)險。3標(biāo)本要求3.1使用新鮮血清,不使用血漿.3.2在采集血液后2h分離血清.3.38h內(nèi)不能及時測定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后測定的血清置-150C―-200C冰凍保存,但冰凍血清只能復(fù)融一次.3.4嚴(yán)重溶血或脂血的標(biāo)本不能作測定.4試劑4.1試劑：上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司IgG試劑盒,國械注進20142405056YZB/GER5724-2014）4.1.1試劑組成R1:TRIS緩沖液：20mmol/l，pH8.0；氯化鈉：200mmol/L；PEG：3.6%；防腐劑和穩(wěn)定劑。R2:抗人免疫球蛋白G抗體（羊）：取決于滴度；TRIS緩沖液：20mmol/l；氯化鈉：150mmol/L；防腐劑。4.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。4.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：2-8°C下保存期限：見試劑標(biāo)簽上的有效期。機上穩(wěn)定期：4周。4.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時，表明有細菌污染則試劑不能使用。4.2校準(zhǔn)品：使用羅氏多項生化校準(zhǔn)品提供的IgG校準(zhǔn)品對自動分析儀進行校準(zhǔn)。4.3質(zhì)控品：使用正常值、病理值復(fù)合控制品。5儀器AU2700生化分析儀，羅氏P800生化分析儀,西門子ADVIA-2400生化分析儀，東芝TBA-120生化分析儀6操作步驟6.1樣品的準(zhǔn)備：將標(biāo)好號的樣品離心后放到儀器規(guī)定的位置。6.2試劑的檢測：儀器開機后，檢查各種試劑的位置，體積等確認無誤后方可進行測定。6.3項目基本參數(shù)：參見生化檢驗AU2700生化分析儀，羅氏P800生化分析儀,西門子ADVIA-2400生化分析儀，東芝TBA-120生化分析儀項目測定參數(shù)。6.4儀器操作步驟：參見生化檢驗AU2700生化分析儀，羅氏P800生化分析儀,西門子ADVIA-2400生化分析儀，東芝TBA-120生化分析儀操作規(guī)程。7質(zhì)量控制在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。8計算方法以IgG復(fù)合校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果，以g/l報告。9參考值成人7-16g/L(700-1600mg/dL；46.7-107umol/L)兒童及青少年0-1歲2.32-14.11g/L(232-1411mg/dL；15.5-94.1umol/L)1-3歲4.53-9.16g/L(453-916mg/dL；30.2-61.1umol/L)4-6歲5.04-14.64g/L(504-1464mg/dL；33.6-97.6umol/L)7-9歲0.34-3.05g/L(34-305mg/dL；2.13-19.06umol/L)10-11歲6.98-15.60g/L(698-1560mg/dL；46.5-104umol/L)12-13歲7.59-15.49g/L(759-1549mg/dL；50.6-103umol/L)14-15歲7.16-17.11g/L(716-1711mg/dL；47.7-114umol/L)16-19歲5.49-15.84g/L(549-1584mg/dL；36.6-106umol/L)我室的參考范圍:7.0-16.9g/l10臨床意義:缺乏IgG易患化膿性感染，IgG＜5g/L，引起的原因較多，如有大量蛋白丟失的疾?。▌兠撔云ぱ住⒛c淋巴管擴張癥、腎病綜合癥）淋巴網(wǎng)狀系統(tǒng)腫瘤（林疤肉瘤、何杰金?。卸拘怨撬杓膊〉?、慢性活動性肝炎和SLE時IgG升高明顯。11操作性能11.1線性范圍：3.0-35g/l11.2精密度采用內(nèi)部協(xié)議重復(fù)檢測人樣本和質(zhì)控品（n=21），結(jié)果如下：標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用（IGG-2）樣本批內(nèi)精密度批間精密度均值變異系數(shù)%均值變異系數(shù)%g/Lumol/Lg/Lumol/L低值質(zhì)控9.0060.00.5610.3268.81.44高值質(zhì)控15.64104.30.4725.45169.71.72人血清2.6717.80.882.0513.76.10敏感應(yīng)用（IGGC2）樣本批內(nèi)精密度批間精密度均值變異系數(shù)%均值變異系數(shù)%mg/Lnmol/Lmg/Lnmol/L高值質(zhì)控167.811190.65166.611111.27低值質(zhì)控320.721391.38327.721852.07人血清11.778.05.7413.2188.16.5212超出范圍結(jié)果處理本法線性上限為35g/l。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1：4稀釋，重新測定，結(jié)果乘以5。13病危報警值的處理無警告/危急值14方法局限性14.1準(zhǔn)則：回收率在初始值±10%的范圍內(nèi)。14.2標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用（IGG-2）14.2.1黃疸：I指數(shù)達到60（近似結(jié)合和非結(jié)合膽紅素的濃度為60mg/dL或1026μmol/L）時,未出現(xiàn)明顯干擾。14.2.3溶血：H指數(shù)達到1000（近似血紅蛋白濃度為：621umol/L（1000mg/dL））時未出現(xiàn)明顯干擾。14.2.4脂血（脂肪乳劑Intralipid）：L指數(shù)達到3000時未出現(xiàn)明顯干擾。L指數(shù)（相當(dāng)于濁度）和甘油三酯濃度之間的相關(guān)性較差。14.2.5類風(fēng)濕因子＜1200IU/mL沒有干擾。多克隆樣本中由于抗原過剩可能造成錯誤的低值在濃度達到440g/L（44000mg/dL；2935umol/L）時。14.2.6免疫球蛋白A,G,M之間沒有交叉反應(yīng)。14.3敏感應(yīng)用（IGGC2）：14.3.1黃疸：I指數(shù)達到60（近似結(jié)合和非結(jié)合膽紅素的濃度為60mg/dL或1026μmol/L）時,未出現(xiàn)明顯干擾。14.3.2溶血：H指數(shù)達到800（近似血紅蛋白濃度為：497umol/L（800mg/dL））時未出現(xiàn)明顯干擾。14.3.3多克隆樣本中由于抗原過?？赡茉斐慑e誤的低值在濃度達到1400mg/dL（9334nmol/L）時。14.3.4免疫球蛋白A,G,M之間沒有交叉反應(yīng)。聯(lián)合其他比濁方法測定時，由于個體樣本特性的差異（可使用電泳評估），本測試尚不能為單克隆γ-球蛋白病病人提供準(zhǔn)確結(jié)果。15補救措施當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。16參考