Agilent1200高效液相色譜儀驗(yàn)證

Agilent12001、概述有填充劑的色譜柱，注入的供試品被流淌相帶入柱內(nèi)進(jìn)展分別后，各成理，得到測(cè)定結(jié)果。由于應(yīng)用了各種特性的微粒填料和加壓的液體流淌相，本法具有分別性能高、分析速度快的特點(diǎn)。高效液相色譜儀由輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。2、驗(yàn)證目的檢查并確認(rèn)高效液相色譜儀運(yùn)行性能符合要求。3、驗(yàn)證明施小組成員及有關(guān)責(zé)任驗(yàn)證明施小組組長(zhǎng)???負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)及特別狀況的處理；操作員??????負(fù)責(zé)驗(yàn)證的具體操作工作；QA???負(fù)責(zé)監(jiān)視實(shí)施本方案。4、主要驗(yàn)證文件高效液相色譜法中華人民共和國(guó)國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程液相色譜儀溶液傳輸單元說(shuō)明書、2023HPLCAgilent12005、合格標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證部件 驗(yàn)證工程 合格標(biāo)準(zhǔn)輸液泵柱溫箱檢測(cè)器

流量設(shè)定值誤差SS流量穩(wěn)定性誤差SR柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔTS柱箱控溫穩(wěn)定性TC基線噪聲最小檢測(cè)濃度

0.5ml/min:＜5%；1.0ml/min:＜3%；2.0ml/min:＜2%0.5ml/min:＜3%；1.0ml/min:＜2%；2.0ml/min:＜2%＜±2℃≤1℃≤±2%≤2×10－5AU≤1×10－7g/mL(萘的甲醇溶液)整機(jī)性能

基線漂移

≤5×10－4AU/hRSD≤0.5%RSD≤1.0%6、驗(yàn)證方法和步驟驗(yàn)證方法泵、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器的性能，接著是檢測(cè)器的性能，最終是整機(jī)的性能驗(yàn)證。驗(yàn)證步驟輸液泵泵流量設(shè)定值誤差S

、流量穩(wěn)定性誤差SS

的檢定1.0mL/min101容量瓶收集流淌相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確地收集，稱重。按式(1)、式(2SS

SR1流量設(shè)定值〔mL/min〕0.51.02.0測(cè)量次數(shù)333流淌相收集時(shí)間〔min〕1055

×100%……(1)S m S SS＝(F－F)/F×100%……(2)R max minS

——流量設(shè)定值誤差(％)；S——流量穩(wěn)定性誤差(％)；R

·t，流量實(shí)測(cè)值(mL/min)；m 2 1 TW(g)；2W(g)；1F(mL/min)；Sρ——試驗(yàn)溫度下流淌相的密度(g/cm3)；Tt——收集流淌相的時(shí)間(min)；F——同一組測(cè)量中流量最大值(mL/min)；maxF——同一組測(cè)量中流量最小值(mL/min)；minF——同一組測(cè)量值的算術(shù)平均值(mL/min)。輸液泵泵流量設(shè)定值誤差S

、流量穩(wěn)定性誤差SS

的檢定記錄見附錄一柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔTS

和控溫穩(wěn)定性TC

的檢定35℃45℃進(jìn)展檢定。按儀器說(shuō)明書操作，通電升溫，待溫度穩(wěn)定后，登記溫度計(jì)讀數(shù)并開頭10min7與設(shè)定值之差為ΔT

，7TS C柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔTS二。

和控溫穩(wěn)定性TC

的檢定原始記錄見附錄自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差的檢定1.5ml1ml1050μl由重量差計(jì)算進(jìn)樣量準(zhǔn)確度。自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差的檢定原始記錄見附錄三。檢測(cè)器的檢定檢測(cè)器基線噪聲和基線漂移的測(cè)定取C1001.0ml/min，檢測(cè)器18波長(zhǎng)設(shè)定為254nm〔約60mi記錄基線60mi，30min60min檢測(cè)器最小檢測(cè)濃度的測(cè)定取C1001.0ml/min，檢測(cè)器18254nm1×10-7g/ml/甲醇溶20μl，記錄色譜圖，由色譜峰峰高和基線噪聲峰峰高計(jì)算最小檢測(cè)濃度C

。公式如下：LC=(2×NL

×C)/Hd式中C

——最小檢測(cè)濃度，g/ml；LNmm；dC——標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/ml；H——標(biāo)準(zhǔn)溶液峰峰高，mm。檢測(cè)器的檢定原始記錄見附錄四。整機(jī)性能的檢定取C1001.0ml/min，檢測(cè)器18中選用咖啡因時(shí)〕,柱溫設(shè)40℃0.1mg/ml/甲醇溶液或0.02mg/ml10μl6積和保存時(shí)間，以保存時(shí)間計(jì)算其定性測(cè)量重復(fù)性誤差，以峰面積計(jì)算其定量測(cè)定重復(fù)性誤差。整機(jī)性能的檢定原始記錄見附錄五。7、驗(yàn)證結(jié)果分析和綜合評(píng)價(jià)驗(yàn)證部件 驗(yàn)證工程 合格標(biāo)準(zhǔn) 驗(yàn)證結(jié)果 結(jié)論輸液泵

流量設(shè)定值誤差SS流量穩(wěn)定性誤差SR

0.5ml/min:＜5%1.0ml/min:＜3%2.0ml/min:＜2%0.5ml/min:＜3%；1.0ml/min:＜2%；2.0ml/min:＜2%柱溫箱

柱箱溫度設(shè)定值誤 差ΔTS器檢測(cè)器

柱箱控溫穩(wěn)定性TC基線噪聲基線漂移差差

≤1℃≤±2%≤2×10－5AU甲醇溶液)≤5×10－4AU/hRSD≤0.5%RSD≤1.0%人員人員日期部門8、最終批準(zhǔn)批準(zhǔn)人：9、驗(yàn)證周期批準(zhǔn)日期：年月日10、驗(yàn)證記錄〔1〕輸液泵泵流量設(shè)定值誤差S、流量穩(wěn)定性誤差S的檢定記錄〔2〕柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔT和控溫穩(wěn)定性TS R記錄SC自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差的檢定原始記錄檢測(cè)器的檢定原始記錄整機(jī)性能的檢定原始記錄附錄一泵流量設(shè)定值誤差S附錄一泵流量設(shè)定值誤差S、流量穩(wěn)定性誤差S的檢定原始記錄S RFS第一次0.5ml/min其次次 第三次1.0ml/min第一次 第三次2.0ml/mi第一次 W1W2tTρT2ρ·t1 T－F)/F×100%mS平均SSS+F+F〕/3m1 m2 m3FmaxFminx)/F×100%min此項(xiàng)檢定結(jié)論：附錄二柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔT和控溫穩(wěn)定性T的檢定原始記錄S C液相色譜儀型號(hào)： 柱溫箱型號(hào)： 數(shù)字溫度儀型號(hào)：T 35℃設(shè)定時(shí)間

45℃時(shí)間 讀數(shù)穩(wěn)定時(shí)7ΔT=T-TS 平均設(shè)定T=T-TC 最大 最小此項(xiàng)檢定結(jié)論：檢定人： 復(fù)核人： 檢定日期：附錄三自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差的檢定原始記錄液相色譜儀型號(hào)： 自動(dòng)進(jìn)樣器型號(hào)： ；WW

= g；1= g；2檢定溫度： ℃，水的密度ρ g/ml；進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差=[(WW)-(50×10×10-3×ρ)]/〔50×10×10-3×ρ〕×1 2100%此項(xiàng)檢定結(jié)論：檢定人： 復(fù)核人： 檢定日期：附錄四檢測(cè)器的檢定原始記錄液相色譜儀型號(hào)： 檢測(cè)器型號(hào)：流淌相： 流速： 色譜柱：萘甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度C： 配制人： 配制日期：基線噪聲:Nd基線漂移:H=最小檢測(cè)濃度的計(jì)算C

L

×C)/Hd此項(xiàng)檢定結(jié)論：檢定人： 復(fù)核人： 檢定日期：附錄五整機(jī)性能的檢定原始記錄儀器型號(hào)：流淌相：色譜柱：檢測(cè)波長(zhǎng)：標(biāo)準(zhǔn)溶液類型：濃度：配制人：配制時(shí)間：定性測(cè)定〔保存時(shí)間〕〔峰面積〕測(cè)量誤差的RSD備注：RSD承受EXCEL此項(xiàng)檢定結(jié)論：檢定人： 復(fù)核人： 檢定日期：中心化驗(yàn)室 型高效液相色譜儀驗(yàn)證報(bào)告〔SOP-YZ-4003〕方案制定人： 制定日期：方案審查人： 審查日期：方案審核人： 審核日期：方案批準(zhǔn)人： 批準(zhǔn)日期：藥業(yè)有限公司目 錄1、概述2、驗(yàn)證目的3、驗(yàn)證明施小組成員及有關(guān)責(zé)任4、驗(yàn)證文件5、合格標(biāo)準(zhǔn)6、驗(yàn)證方法和步驟7、驗(yàn)證結(jié)果分析和綜合評(píng)價(jià)8、最終評(píng)價(jià)9、驗(yàn)證周期10、驗(yàn)證記錄1、概述高效液相色譜法〔HighPerformanceLiquidChromatography，加壓的液體流淌相，本法具有分別性能高、分析速度快的特點(diǎn)。高效液相色譜儀由輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。其中LC-2023和Agilent1100LC-20AB型為雙泵型高效液相色譜儀。2、驗(yàn)證目的檢查并確認(rèn)高效液相色譜儀運(yùn)行性能符合要求。3、驗(yàn)證明施小組成員及有關(guān)責(zé)任負(fù)責(zé)驗(yàn)證的具體操作工作；QA???負(fù)責(zé)監(jiān)視實(shí)施本方案。4、主要驗(yàn)證文件高效液相色譜法〔SOP-ZL-???〕、中華人民共和國(guó)國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程JJG705-2023、UV-VISSPD-20A/SPD-20AV溶液傳輸單元LC-20AB2023LC-2023A/2023C5、合格標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證部件輸液泵柱溫箱檢測(cè)器整機(jī)性能

驗(yàn)證工程流量設(shè)定值誤差SS流量穩(wěn)定性誤差SR柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔTS柱箱控溫穩(wěn)定性TC基線噪聲基線漂移

合格標(biāo)準(zhǔn)0.5ml/min:＜5%；1.0ml/min:＜3%；2.0ml/min:＜2%0.5ml/min:＜3%；1.0ml/min:＜2%；2.0ml/min:＜2%＜±2℃≤1℃≤±2%≤2×10－5AU≤1×10－7g/mL(萘的甲醇溶液)≤5×10－4AU/hRSD≤0.5%RSD≤1.0%6、驗(yàn)證方法和步驟驗(yàn)證方法證泵、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器的性能，接著是檢測(cè)器的性能，最終是整機(jī)的性能驗(yàn)證。驗(yàn)證步驟輸液泵泵流量設(shè)定值誤差S

、流量穩(wěn)定性誤差SS

的檢定將儀器的輸液系統(tǒng)，進(jìn)樣器、色譜柱和檢測(cè)器聯(lián)接好，以甲醇為流淌相，流量設(shè)為1.0mL/min，按說(shuō)明書啟動(dòng)儀器，待壓力平穩(wěn)后保持10分鐘，按表1稱重過(guò)的容量瓶收集流淌相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確地收集，稱重。按式(1)、式(2SSS R1流量設(shè)定值〔mL/min〕測(cè)量次數(shù)

0.5310

1.035

2.035

×100%……(1)S m S SS＝(F－F)/F×100%……(2)R max minS

——流量設(shè)定值誤差(％)；S——流量穩(wěn)定性誤差(％)；RF＝(WW)/ρ·t，流量實(shí)測(cè)值(mL/min)；m 2 1 TW(g)；2W(g)；1F(mL/min)；Sρ——試驗(yàn)溫度下流淌相的密度(g/cm3)；Tt——收集流淌相的時(shí)間(min)；F——同一組測(cè)量中流量最大值(mL/min)；maxF——同一組測(cè)量中流量最小值(mL/min)；minF——同一組測(cè)量值的算術(shù)平均值(mL/min)。輸液泵泵流量設(shè)定值誤差S

SS

的檢定記錄見附錄一結(jié)果：泵流量設(shè)定值誤差SS流量穩(wěn)定性誤差SR柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔT和控溫穩(wěn)定性TS C3545℃進(jìn)展檢定。按儀器說(shuō)明書操作，通電升溫，待溫度穩(wěn)定后，登記溫度計(jì)讀數(shù)并開頭計(jì)時(shí)，以后每隔10min7均值與設(shè)定值之差為ΔT7S定性TC柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔT和控溫穩(wěn)定性TS C附錄二。結(jié)果：柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔT：控溫穩(wěn)定性TC自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差的檢定1.5ml1ml1050μl。進(jìn)樣完成后再周密稱定其重量，由重量差計(jì)算進(jìn)樣量準(zhǔn)確度。自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差的檢定原始記錄見附錄三。結(jié)果：進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差：檢測(cè)器的檢定檢測(cè)器基線噪聲和基線漂移的測(cè)定取C1001.0ml/min，檢測(cè)18254nm,開機(jī)預(yù)熱，待儀器穩(wěn)定后〔約60min〕記錄基線60min30min60min移值。檢測(cè)器最小檢測(cè)濃度的測(cè)定取C1001.0ml/min，檢測(cè)18254nm1×10-7g/ml/20μl，記錄色譜圖，由色譜峰峰高和基線噪聲峰峰高計(jì)算最小檢測(cè)濃度CC=(2×NL

L×C)/Hd式中C

——最小檢測(cè)濃度，g/ml；LNmm；dC——標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/ml；H——標(biāo)準(zhǔn)溶液峰峰高，mm。檢測(cè)器的檢定原始記錄見附錄四。結(jié)果：噪音值： 基線漂移值： 最小檢測(cè)濃度C：L整機(jī)性能的檢定取C1001.0ml/min，檢測(cè)18254nm〔中選用萘?xí)r〕272nm〔中選用咖啡因時(shí)〕,40℃0.1mg/ml/甲醇溶0.02mg/ml10μl6面積計(jì)算其定量測(cè)定重復(fù)性誤差。整機(jī)性能的檢定原始記錄見附錄五。結(jié)果：定性測(cè)量重復(fù)性誤差： 定量測(cè)定重復(fù)性誤差：7、驗(yàn)證結(jié)果分析和綜合評(píng)價(jià)輸液泵

驗(yàn)證工程流量設(shè)定值誤差SS流量穩(wěn)定性誤差SR

合格標(biāo)準(zhǔn) 驗(yàn)證結(jié)果0.5ml/min:＜5%；1.0ml/min:＜3%；2.0ml/min:＜2%0.5ml/min:＜3%；1.0ml/min:＜2%；2.0ml/min:＜2%柱溫箱

柱箱溫度設(shè)定值誤差 ＜±2℃ΔTS檢測(cè)器整機(jī)