第三章色譜法在精細(xì)化學(xué)品分析中的應(yīng)用課件

第三章色譜法在精細(xì)化學(xué)品

分析中的應(yīng)用.第三章色譜法在精細(xì)化學(xué)品

分析中的應(yīng)用.13.1概述在紙色譜基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，高效薄層色譜法的產(chǎn)生與應(yīng)用，使薄層色譜的分離效率顯著提高。TLC適用于多種不同性質(zhì)化合物的分離，反應(yīng)監(jiān)控，定性分析GC用于可揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性好的精細(xì)化學(xué)品HPLC用于不易氣化、熱敏性化合物.3.1概述.23.2薄層色譜在精細(xì)化學(xué)品中的應(yīng)用3.2.1TCL制備、分析過程載板：涂布薄層用的有玻璃板、鋁箔及塑料板薄層制備：1g硅膠HF254+1%CMC水溶液4mL，用涂布器涂布在載體上點(diǎn)樣：用毛細(xì)管點(diǎn)樣，0.3mm和0.5mm展開：選擇合適展開劑展開顯色：UV、物理法和化學(xué)法.3.2薄層色譜在精細(xì)化學(xué)品中的應(yīng)用3.2.1TCL制備、33.2.2TLC在合成反應(yīng)控制及中間體中的應(yīng)用1、硝基苯還原制備苯胺的TLC分析（P124）.3.2.2TLC在合成反應(yīng)控制及中間體中的應(yīng)用1、硝基苯還4..5展開劑，環(huán)己烷：乙酸乙酯=9：2（V：V）顯色方法：UV，N,N-二甲氨基苯甲醛（Ehrlich試劑）Rf值，為什么苯胺比硝基苯的Rf值?。?展開劑，環(huán)己烷：乙酸乙酯=9：2（V：V）.62、反式-α-苯基鄰硝基肉桂酸展開劑，乙醚：乙酸乙酯：甲醇：苯=4.55:2.73:0.91:1.82,含0.12mL36%乙酸碘熏法顯色為什么加入乙酸？Perkin反應(yīng)P124.2、反式-α-苯基鄰硝基肉桂酸展開劑，乙醚：乙酸乙酯：甲醇：7..83、間苯氧基苯甲醛（P125）展開劑，氯仿：石油醚=3：7（V：V）Rf值大小區(qū)分確定？.3、間苯氧基苯甲醛（P125）展開劑，氯仿：石油醚=3：79通過薄層色譜圖可以看出間苯氧基甲苯逐漸氧化成間苯氧基苯甲醛，隨著時間的加長，間苯氧基苯甲酸開始產(chǎn)生。.通過薄層色譜圖可以看出間苯氧基甲苯逐漸氧化成間苯氧基苯甲醛，104、二甲基喹啉展開劑：乙醚P125原料苯胺4-氯-2-丁酮.4、二甲基喹啉展開劑：乙醚P125.115、TLC作用監(jiān)控原料消失，主產(chǎn)物、副產(chǎn)物生成狀況有效地控制反應(yīng)終點(diǎn)及選擇適宜的反應(yīng)條件TLC特點(diǎn)，簡便易行，快速、微量靈敏.5、TLC作用監(jiān)控原料消失，主產(chǎn)物、副產(chǎn)物生成狀況.123.2.3TLC在表面活性劑中的應(yīng)用1、單一類型表面活性劑的TLC分析1）陰離子表面活性劑展開劑，二氯甲烷：甲醇=8：1碘蒸氣顯色P125.3.2.3TLC在表面活性劑中的應(yīng)用1、單一類型表面活性劑132）陽離子表面活性劑P126展開劑，二氯甲烷：甲醇：乙酸=8：1：0.75碘熏顯色.2）陽離子表面活性劑P126.143）非離子表面活性劑的TLC分析反相硅膠板，硅烷化處理？？展開劑，乙醇：2%四苯基硼酸鈉=8：2碘熏顯色.3）非離子表面活性劑的TLC分析反相硅膠板，硅烷化處理？？.15TLC分析在中藥中的應(yīng)用薄層色譜指紋圖譜在丹參藥材質(zhì)量評價中的應(yīng)用樣品制備隨機(jī)取10株丹參根部藥材洗凈，自然風(fēng)干10d后60℃烘干，粉碎過60目篩水溶性供試液：取待測藥材粉末1.0g，2%氨水超聲提取60min，提取液于沸水浴中加熱45min(冰醋酸調(diào)pH至3～4)后過濾．以乙酸乙酯萃取濾液，萃取液用氮?dú)鈸]干，所得水溶性成分以1.0mL甲醇溶解．脂溶性供試液：取待測藥材粉末0.5g，加甲醇／二氯甲烷(8／2，體積比)混合溶液10mL，置具塞試管中超聲提取30min后過濾.TLC分析在中藥中的應(yīng)用薄層色譜指紋圖譜在丹參藥材質(zhì)量評價中16..173.2.5TLC法在助劑中的應(yīng)用P130顯色劑：0.2%2，6-二氯醌氯亞胺的乙醇溶液.3.2.5TLC法在助劑中的應(yīng)用P130顯色劑：0.183.2.6TLC法在藥物及其它產(chǎn)品中的應(yīng)用布洛芬中應(yīng)用復(fù)方乙酰水楊酸藥片中阿司匹林、非那西丁和咖啡因的含量，可采用薄層掃描法測定.3.2.6TLC法在藥物及其它產(chǎn)品中的應(yīng)用布洛芬中應(yīng)用.193.3HPLC在精細(xì)化學(xué)品中的應(yīng)用柱子：全多孔硅膠柱流動相，二氯甲烷：正己烷=1：9檢測波長，UV254nm正相？反相色譜？固定相、流動相保留時間相對大??？.3.3HPLC在精細(xì)化學(xué)品中的應(yīng)用柱子：全多孔硅膠柱.20..213.3.1HPLC在助劑中的應(yīng)用1、HPLC在化妝品中防曬劑中應(yīng)用P108標(biāo)準(zhǔn)溶液配制，防曬劑標(biāo)準(zhǔn)品用流動相（甲醇：THF：水：高氯酸=200：200：160：0.1）標(biāo)樣預(yù)處理：超聲、過濾、過柱子和萃取等HPLC分析條件選擇：柱子型號、流動相、流速、檢測器（UV選擇波長）線性關(guān)系實驗回收率測定和重現(xiàn)性考察未知樣品測定.3.3.1HPLC在助劑中的應(yīng)用1、HPLC在化妝品中防曬22P109..23..242、HPLC在化妝品中防腐劑分析中的應(yīng)用柱子：C18柱流動相：甲醇：乙酸銨（0.02mol/L）=70:30檢測器：UV254nm正相？反相體系？保留時間相對大小原因？固定相、流動相特點(diǎn)？P110.2、HPLC在化妝品中防腐劑分析中的應(yīng)用柱子：C18柱P11253、離子對反相HPLC法的應(yīng)用分離苯甲酸鈉、山梨酸鉀等防腐劑離子對試劑：檸檬酸三銨反相柱：C18為什么添加離子對試劑？苯甲酸鈉、山梨酸鉀等可發(fā)生解離，在柱子上保留時間較小，不利于組分的分離。加入離子對試劑后，檸檬酸三銨與樣品中的組分分別結(jié)合成離子對，增加了各組分的保留時間而獲得較好的分離。.3、離子對反相HPLC法的應(yīng)用分離苯甲酸鈉、山梨酸鉀等防腐劑264、離子抑制色譜法應(yīng)用離子型化合物在反相色譜柱上不保留改變流動相的pH值，抑制樣品離子的電離主要適用于弱酸性化合物的分離降低流動相的pH值，使樣品降低離子化使用硅膠基質(zhì)C18填料使用條件應(yīng)在填料基質(zhì)的范圍內(nèi)硅膠柱的pH在2-8（較保險值3-7）內(nèi).4、離子抑制色譜法應(yīng)用離子型化合物在反相色譜柱上不保留.27下列情況下不能使用離子抑制方法，如果：一些酸在pH低于2時還保持離子化一些堿在pH高于7時還保持離子化可以有以下的選擇離子交換色譜使用聚合物或其他耐堿性流動相的反相柱，在pH高于7時用離子抑制法使用“離子對色譜法”.下列情況下不能使用離子抑制方法，如果：.28離子抑制色譜實例而在乙腈/水并且pH=7時，多數(shù)組份保留時間很短，無法完全分離。.離子抑制色譜實例而在乙腈/水并且pH=7時，多數(shù)組份保留時間295、HPLC在聚合物助劑中的應(yīng)用P112.5、HPLC在聚合物助劑中的應(yīng)用P112.303.3.2HPLC在表面活性劑中的應(yīng)用固定相為烷基硅烷化流動相,甲醇：NaH2PO4（0.015mol/L水溶液）=35：65，pH=3～4分析烷基磺酸用電導(dǎo)檢測器分析烷基苯磺酸用UV檢測器不同碳數(shù)出峰順序？檢測方式？正相？反相？為什么加入NaH2PO4水溶液.3.3.2HPLC在表面活性劑中的應(yīng)用固定相為烷基硅烷化.313.3.3HPLC在藥物中的應(yīng)用P117固定相，LiChrosorbC18流動相，0.01mol/L醋酸緩沖液（pH4.75）：乙腈=85：15乙酸作用，離子抑制正相？反相？為何用UV檢測？.3.3.3HPLC在藥物中的應(yīng)用P117固定相，Li32P118

.P118.333.3.4HPLC在其它精細(xì)化學(xué)品中的應(yīng)用間羥基苯甲酸的HPLC分析P123柱子，LiChrosorbC18檢測方式，UV正相，反相？保留時間相對大小固定相，流動相流動相，甲醇：水=35：65，高氯酸調(diào)pH=2.5？.3.3.4HPLC在其它精細(xì)化學(xué)品中的應(yīng)用間羥基苯甲酸的H34在食品研究中的分析應(yīng)用食品中的天然成分碳水化合物類脂化合物、甘油三酸酯、膽固醇脂肪酸和有機(jī)酸蛋白、肽、氨基酸食品添加劑酸味劑、甜味劑、香精、乳化劑抗氧化劑、防腐劑顏料和染料（色素〕維生素污染物霉菌（黃曲霉毒素〕農(nóng)藥和獸藥殘留多環(huán)芳烴（PAHS〕和亞硝酸.在食品研究中的分析應(yīng)用.35在獸藥研究中分析應(yīng)用在醫(yī)藥研究中分析應(yīng)用藥物分析有USP、BP、CP等標(biāo)準(zhǔn)常用藥物研究中的應(yīng)用：解熱鎮(zhèn)痛藥、鎮(zhèn)靜藥、安定藥、心血管藥、磺胺類消炎藥等。甾體藥物研究中的應(yīng)用：腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等?？咕仡愃幬镅芯恐械膽?yīng)用：青霉素、頭孢菌素、慶大毒素、四環(huán)素、氯霉素、諾氟沙星等。中草藥研究中的應(yīng)用：生物堿、甙類(皂甙、強(qiáng)心甙、黃酮甙等)、萜類手性藥物研究中的應(yīng)用：光學(xué)異構(gòu)體的拆分(如解毒劑D-青霉胺毒性小，L-異構(gòu)體毒性很強(qiáng))醫(yī)療藥物的檢測、新藥研究、藥物代謝、藥代動力學(xué)研究。.在獸藥研究中分析應(yīng)用.36在生物化學(xué)和生物工程中的應(yīng)用氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)的分析研究核堿、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究（兒茶酚胺類)在精細(xì)化工分析中的應(yīng)用醇、醛和酮、醚的分離分析酸和酯的分離分析表面活性劑的分析聚合物的分析研究藥物、農(nóng)藥、染料、炸藥等工業(yè)產(chǎn)品在無機(jī)離子分析中應(yīng)用飲用水、酸雨、土壤中陰離子和陽離子分析.在生物化學(xué)和生物工程中的應(yīng)用.37在公安、刑警破案工作需要毒品分析等在環(huán)境污染分析中的應(yīng)用廢氣、廢水、廢渣中多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯、農(nóng)藥殘留、酚類和胺類的檢測.在公安、刑警破案工作需要.383.3.5柱前衍生法在HPLC中的應(yīng)用為什么要柱前衍生？一是由于待測物質(zhì)在HPLC條件下不能分離，比如用RP-HPLC分離氨基酸，由于氨基酸在極性流動相中解離，不能保留，所以用柱前衍生使其成為弱極性的衍生物，就可以分離了。二是由于待測物質(zhì)在常用的檢測器（比如：UV-VIS）上響應(yīng)比較弱，用柱前衍生加上發(fā)色團(tuán)，使其產(chǎn)生紫外吸收。.3.3.5柱前衍生法在HPLC中的應(yīng)用為什么要柱前衍生？.391、用于紫外檢測的柱前衍生試劑標(biāo)記試劑樣品類型衍生物檢測波長/nm羧酸類260羧酸類265醇、胺和酚類254.1、用于紫外檢測的柱前衍生試劑標(biāo)記試劑樣品類型衍生物檢測波長40標(biāo)記試劑樣品類型衍生物檢測波長/nm苯酰氯醇類230對硝基苯甲酰氯醇類254對甲氧基苯甲酰氯胺類254O-對硝基芐基羥胺鹽酸鹽醛、酮類265.標(biāo)記試劑樣品類型衍生物檢測波長/nm苯酰氯醇類230對硝基苯412、柱前衍生物HPLC在藥分中應(yīng)用胺類（氨基酸、多胺和肽等）抗生素類（新霉素、氨基糖苷、苯巴比妥）羧酸類（膽汁酸）羥基化合物（膽酸）甾族化合物甘氨膽酸?；悄懰崦撗跄懰狴Z脫氧膽酸.2、柱前衍生物HPLC在藥分中應(yīng)用胺類（氨基酸、多胺和肽等）423.3.6HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用特點(diǎn)廣泛性檢測器，MS幾乎可以檢測所有的化合物分離能力強(qiáng)，即使色譜沒分開，通過MS特征離子峰也能定量定性分析檢測限低，MS靈敏度高，10-12g，特別是沒有UV吸收的樣品，MS可以檢測準(zhǔn)確的化合物分子量信息未知化合物碎片結(jié)構(gòu)信息一套完整的圖譜和多種掃描方式充分提供定性、定量和峰純度信息可用于無共價鍵、無官能團(tuán)的化合物.3.3.6HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用特點(diǎn).43應(yīng)用藥物代謝研究在天然藥物中的應(yīng)用生物大分子分析（肽譜）興奮劑/毒品檢測藥物降解產(chǎn)物和不純物的結(jié)構(gòu)鑒定.應(yīng)用.443.4GC在精細(xì)化學(xué)品分析中的應(yīng)用3.4.1GC在中間體及有機(jī)化工原料中的應(yīng)用1、GC在1，1，2，3-四氯丙烯合成中的應(yīng)用SE-30玻璃毛細(xì)管柱子

P90.3.4GC在精細(xì)化學(xué)品分析中的應(yīng)用3.4.1GC在中間體45..462、GC在芳香族中間體中的應(yīng)用3，5-二叔丁基甲苯粗產(chǎn)品GC圖P95固定液15%FFAP（改性聚乙二醇）SE-30固定液，拖尾嚴(yán)重OV-17固定液分離也不好.2、GC在芳香族中間體中的應(yīng)用3，5-二叔丁基甲苯粗產(chǎn)品GC47..483.4.2GC在表面活性劑中的應(yīng)用表面活性劑疏水基分布的氣相色譜分析P98固定液，丁二酸二乙二醇酯DEGS.3.4.2GC在表面活性劑中的應(yīng)用表面活性劑疏水基分布的氣49油酸：順十八碳-9-烯酸亞油酸：順，順-9，12-十八碳二烯酸.油酸：順十八碳-9-烯酸.502、表面活性劑的主要成分GC分析SE-3